钙激活中性蛋白酶在脓毒症小鼠心肌半胱氨酸蛋白酶-3活化中的作用及其机制

目的 探讨钙激活中性蛋白酶(calpain)在脓毒症小鼠心肌半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活化中的作用及其机制.方法 (1)体内实验:腹腔注射脂多糖(LPS,4 mg/kg)建立脓毒症小鼠模型.Western blot检测心肌组织中calpain、caspase-3活性和calpain-1、calpain-2、calpain特异性抑制蛋白calpastatin水平以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bid水平及剪切片段,TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,Langendorff灌注装置评价小鼠心脏的收缩和舒张功能.(2)体外实验:成年大鼠心肌细胞给予LPS(1μg/ml)处理4 h,或同时予以calpain抑制剂calpain inhibitor-Ⅲ(10 μmol/L)干预后,检测心肌细胞calpain和caspase-3活性,Bcl-2、Bid蛋白水平以及心肌细胞凋亡情况.结果 (1)体内实验:在脓毒症小鼠心肌组织中,calpain活性增高2.7倍,caspase-3活性增高1.8倍,给予calpain-inhibitor-Ⅲ或PD150606,均可抑制caspase-3活性的增高.脓毒症小鼠心肌组织calpain-1、calpain-2、calpastatin以及Bcl-2、Bid蛋白水平未见改变,亦未检测到Bcl-2、Bid剪切片段.Calpain inhibitor-Ⅲ则可使脓毒症小鼠心室最快压力上升速率和心室最快压力下降速率分别增加34.5%和34.6%,从而改善脓毒症小鼠心功能障碍.(2)体外实验:LPS可诱导成年大鼠心肌细胞calpain和caspase-3活性增高,给予calpain inhibitor-Ⅲ则可抑制caspase-3活性的增高,心肌细胞Bcl-2、Bid蛋白水平未见改变.体内外实验均未发现LPS可诱导心肌细胞凋亡的增加.结论 脓毒症小鼠心肌calpain活性增高,可活化心肌caspase-3,但未导致心肌细胞凋亡,其机制与凋亡蛋白Bcl-2和Bid无关.     

Toll样受体4在内毒素血症小鼠心肌TNF-α表达中的作用初探

目的内毒素引起的心肌功能损害与内毒素诱导心肌局部肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的产生密切相关,然而其信号转导机制尚未完全阐明.Toll样受体4(Toil-like receptor4,TLR4)是新近发现的内毒素受体.本实验旨在探讨TLR4受体在心肌的表达情况及其在内毒素血症小鼠心肌TNF-α表达中的作用.方法以Toll样受体4基因突变型小鼠C3H/HeJ及野生型小鼠BALB/C为实验对象,给以腹腔内注射内毒素(1mg/kg)或生理盐水.注射生理盐水的小鼠作为对照.用RT-PCR方法,对两组小鼠心肌TLR4及注射内毒素前后小鼠心肌TNF-α mRNA表达进行检测.结果心肌表面存在TLR4表达.内毒素刺激后,野生型小鼠心肌TNF-α mRNA表达明显增加,而突变型小鼠心肌未检测到TNF-α的表达.结论TLR4介导了内毒素血症时小鼠心肌局部TNF-α的表达.     

参附注射液对老年脓毒症大鼠心肌保护作用的研究

目的研究参附注射液对老年脓毒症大鼠心肌的保护作用及其可能机制。方法将20月龄SD老年大鼠随机分为空白对照组、单纯脓毒症组和参附治疗组,其中,空白对照组采用腹腔注射生理盐水5mg／kg,脓毒症组采用腹腔注射LPS5mg／kg,参附治疗组在腹腔注射LPS5mg／kg后立即尾静脉注射参附注射液7．5mL／kg。用ELISA方法榆测0h、2h和4h大鼠血清中炎症细胞因子TNF-α和IL-6的变化,及用RT—PCR检测各个时间点大鼠心脏TLR4-m RNA表达,并用透射电镜观察大鼠心肌细胞超微结构变化。结果脓毒症时TNF-α和IL-6的表达明显增高,各个时间点均显著高丁对照组（P〈0．05）,而参附治疗组与单纯脓毒症组相比,TNF-α和IL-6水平则明湿降低;参附治疗组心肌组织损伤较单纯脓毒症组明显减轻;脓毒症时心肌TLR4-m RNA表达明显上调,而参附则能抑制TLR4-m RNA的表达。结论参附可能通过降低心肌组织TLR—mRNA的表达,对脓毒症诱导的老年大鼠心肌损伤具有保护作用。     

Ghrelin对脓毒症小鼠肺脏炎症及JAK/STAT通路的影响

目的 通过观察生长素释放肽(ghrelin)对脓毒症小鼠肺组织炎症反应、肺组织janus激酶/信号转导通路和转录激活因子mRNA、STAT3蛋白及肺组织炎细胞因子肿瘤细胞α(TNF-α)、IL-6的表达水平的影响,探讨ghrelin在脓毒症炎症反应中的调节作用及可能的分子机制.方法 选用腹腔注射脂多糖的方法制作小鼠脓毒性模型:选取雌性小鼠54只,随机分为对照组、模型组及ghrelin干预组,对照组经腹腔注射等量生理盐水;模型组经腹腔内注射脂多糖(6 mg/kg);干预组先经腹腔注射ghrelin(200 μg/kg),30 min后再经腹腔注射脂多糖(6 mg/kg);各组分别于3、9、18h随机处死小鼠各6只,光镜下观察肺组织炎症改变;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检查肺组织STAT3mRNA的基因转录水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织STAT3、TNF-α、IL-6的表达量.结果 Ghrelin可抑制肺组织STAT3mRNA基因转录活性,从而降低STAT3蛋白表达、减少炎症因子TNF-α、IL-6的分泌(P值均＜0.05);改善脓毒症小鼠肺组织病理结构损伤(充血、水肿、炎症细胞浸润).结论 ghrelin可减轻脓毒症小鼠肺脏炎症反应,其作用机制可能与抑制了janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT通路)、下调TNF-α和IL-6的表达有关.     

脓毒症大鼠心肌组织Toll样受体4和肿瘤坏死因子-α表达及细胞凋亡研究

目的:检测脂多糖(LPS)诱导的脓毒症大鼠心肌组织中Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达和心肌细胞凋亡情况。方法:取72只大鼠随机分为3组,每组24只。实验1组、实验2组分别按10、12 mg/kg腹腔注射LPS建立脓毒症大鼠模型,对照组按10 mL/kg腹腔注射生理盐水。3组分别在注射后1、6、24 h,各取8只大鼠处死,处死前眼眶静脉丛采血,检测血清TNF-α水平,处死后取心脏组织,检测心肌组织中TNF-α阳性细胞率,TLR4、TNF-αmRNA表达水平及心肌细胞凋亡指数(AI)。结果:2个实验组血清TNF-α水平、心肌组织TNF-α阳性细胞率及TLR4、TNF-αmRNA相对表达量随时间均呈显著上升趋势(P 0. 05),2个实验组上述指标均高于对照组,且实验2组显著高于实验1组(P 0. 05); 2个实验组心肌细胞AI随时间呈显著上升趋势(P 0. 05),且心肌细胞各时间段AI均显著高于对照组(P 0. 05),实验2组AI水平显著高于实验1组(P 0. 05)。结论:LPS诱导的脓毒症大鼠心肌细胞凋亡水平随病情发展显著增加,心肌损害随病情程度逐渐加重,推测与TLR4、TNF-α在血清及心肌组织内的异常高表达有关。     

小檗碱通过Toll样受体4/核因子κB信号通路对小鼠病毒性心肌炎发挥保护作用

目的探讨小檗碱对病毒性心肌炎小鼠的保护作用,并研究其对Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法将40只BALB/c小鼠按数字随机法均分为正常组、模型组、小檗碱低剂量组与高剂量组。除正常组外,其余组小鼠腹腔注射嗜心性柯萨奇病毒B3,建立病毒性心肌炎模型。小檗碱低剂量组与高剂量组分别腹腔注射小檗碱50 mg/kg与100 mg/kg。苏木素-伊红染色观察心肌组织病理学变化;用酶联免疫吸附测定试剂盒检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTnT)和TNF-α水平;免疫印迹法和实时荧光定量PCR分别检测心肌组织中TLR4与NF-κB的蛋白表达和mRNA表达。结果与模型组相比,小檗碱治疗组心肌组织的炎性细胞浸润与心肌细胞坏死程度显著减轻,血清CK-MB、cTnT和TNF-α水平明显降低,心肌组织TLR4与NF-κB的蛋白表达和mRNA表达显著下调。结论小檗碱可通过调控TLR4/NF-κB信号通路,从而对病毒性心肌炎小鼠的心肌组织具有保护作用。     

脂联素对脓毒症小鼠急性肾损伤的治疗作用及机制

目的 探究脂联素（APN）对脓毒症小鼠急性肾损伤的治疗作用及相关机制。方法 选取雄性C57BL/6小鼠24只,采用随机数字表法将小鼠分为空白对照组（CON组）、模型组（LPS组）、实验组（LPS+APN组）。按10 mg/kg腹腔注射脂多糖（LPS）制备脓毒症模型,CON组腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液,实验组在造模前8 h按0.1 mg/kg尾静脉注射APN进行干预。造模后24 h处死小鼠,取静脉血检测肾损伤指标肌酐、尿素氮;HE染色观察和评估小鼠肾组织病理变化;超氧化物阴离子荧光探针（DHE）检测活性氧含量;实时定量PCR法检测肾组织中NLRP3、IL-1β和TNF-α的mRNA表达,Western blotting法检测NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达。结果 与模型组比较,经APN预处理后,小鼠肾功能及组织病理学损伤减轻,肾组织活性氧含量明显减少,NLRP3、IL-1β和TNF-α的mRNA表达降低,NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达下降（P均<0.05）。结论 APN对小鼠脓毒症急性肾损伤具有治疗作用,其机制可能与NLRP3炎症小体及细...     

IL-37腹腔注射对脓毒血症小鼠心肌损伤的影响及机制

目的 探讨腹腔注射IL-37对脓毒症小鼠心肌损伤的影响。方法 将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组、IL-37组,每组10只。LPS组小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)20 mg/kg,构建脓毒症模型;IL-37组小鼠腹腔注射LPS 20 mg/kg及IL-37 1 mg/kg;对照组小鼠行腹腔注射等体积无菌生理盐水。通过心脏超声评估各组小鼠心功能,通过HE染色评估各组小鼠心肌组织病理损伤程度;应用免疫组化法检测心肌组织中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达;通过免疫组化及蛋白免疫印迹法分析NLRP3炎症小体及相关信号通路的蛋白表达。结果 与对照组相比,LPS组小鼠左心室射血分数(LVEF)、缩短分数(FS)均降低(P均<0.05),与LPS组相比,IL-37组小鼠LVEF、FS均升高(P均<0.05)。与对照组相比,LPS组中小鼠心肌组织结构排列紊乱,肌膜破裂,伴有间质充血和水肿;与LPS组相比,IL-37组小鼠心功能及心肌组织病理损伤明显得到改善。LPS组、对照组、IL-37组小鼠心肌组织中炎性因子IL-1β表达分别为20.12±1.89、1.00...     

4-辛基衣康酸减轻脂多糖诱导的心肌损伤

目的 探讨4-辛基衣康酸(4-OI)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠心肌损伤的影响。方法 采用6～8周雄性C57BL/6J小鼠，经腹腔注射4-OI(25 mg/kg)或等量生理盐水连续预处理3 d后，腹腔注射LPS(10 mg/kg)或等量生理盐水，12 h后行心脏超声检查。取心脏，行苏木精-伊红(HE)染色观察心肌病理变化；Western blot检测心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、p65、pp65、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)、前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)和核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)的蛋白表达水平。结果 心脏超声结果显示，LPS腹腔注射后，小鼠左心室明显扩张，收缩功能减低；与LPS组相比，4-OI组小鼠左心室收缩功能改善。HE染色示LPS腹腔注射后，小鼠心脏炎症细胞浸润明显，心肌细胞排列疏松，表现出类似于脓毒症诱导的心肌损伤的病理特点。4-OI组小鼠心脏的炎症细胞浸润程度和病理改变较LPS组低。Western blot示LPS腹腔注射后，小鼠心肌组织中Nrf2和GPx4的表达明显降低，IL-1β、TNF-α、PTGS2以...     

依达拉奉通过SIRT1抑制小鼠阿霉素心肌损伤的作用研究

目的:探讨依达拉奉(EDA)对阿霉素致小鼠心肌损伤的保护作用。方法:以阿霉素3mg/kg腹腔注射,隔日1次,共7次致小鼠心肌损伤,造模同时开始以EDA低、高剂量(5、10mg/kg)连续2周腹腔注射。光镜下观察小鼠心室肌组织形态学变化;测定血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;ELISA法测定反映心肌组织的炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的水平;比色法检测心肌组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的变化;Western blot检测心肌组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和沉默信息调节因子2的哺乳动物同源体1(SIRT1)蛋白的表达。结果:EDA干预后能减轻阿霉素致心肌损伤小鼠的心肌形态学损伤,降低心肌酶活性。EDA可减少心肌组织中炎性因子TNF-α和IL-6蛋白的表达,改善小鼠抗氧化应激能力。EDA还能明显增加阿霉素小鼠心脏SIRT1蛋白表达,并抑制TGF-β1蛋白表达。结论:EDA对阿霉素心肌损伤具有保护作用,其作用机制可能通过调节SIRT1活性,抑制心脏TGF-β1蛋白表达,并提高机体抗氧化应激能力,从而减少阿霉素对心肌的损害。     

二甲基亚硝胺诱导小鼠肝损伤模型的建立及其机制研究

目的:建立二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)诱导的小鼠肝损伤模型,探讨其发生机理。方法:分别以DMN30mg·kg-1、20mg·kg-1、15mg·kg-1腹腔注射小鼠,筛选出最佳的DMN剂量,以DMN15mg·kg-1腹腔注射小鼠,对照组小鼠腹腔注射生理盐水,观察各时间点小鼠肝组织病理学变化和血清ALT、AST、白蛋白指标,定量PCR法检测肝组织TNF-α、Fas、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA的动态表达。结果:腹腔注射DMN15mg·kg-1可使大部分小鼠存活到120小时以上,且伴有显著的肝损害。DMN造模后的各时间点TNF-αmRNA表达明显升高,MMP-2mRNA表达先升高后降低,而MMP-9mRNA表达则持续升高。结论:DMN诱导的小鼠肝损伤模型,其机理与TNF-α表达升高密切相关。该模型肝损害后MMP显著升高,破坏了正常的细胞外基质,促进了肝组织炎症的扩散,这可能是肝损害的发生机理之一。     

在二甲基亚硝胺诱导小鼠肝损伤模型中肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-1β的动态表达

[目的]探讨在二甲基亚硝胺(DMN)诱导小鼠肝损伤模型中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的动态表达。[方法]以DMN15 mg/kg腹腔注射小鼠,对照组小鼠腹腔注射0.85%氯化钠溶液,酶联免疫吸附法检测各时间点血清TNF-α、IL-1β水平;定量PCR法检测各时间点肝组织TNF-α、IL-1βmRNA的表达;免疫组化法检测各时间点肝组织TNF-α、IL-1β的蛋白表达。[结果]DMN造模后,TNF-α及IL-1β基因和蛋白表达在各个时间点都有一定程度的上升,而且均在造模后48h时达到高峰。[结论]在DMN诱导的小鼠肝损伤模型中TNF-α及IL-1β显著升高,提示炎症坏死可能是DMN诱导小鼠肝损伤的主要机制。     

麝香酮对脓毒血症小鼠心肌损伤的作用机制研究

目的:探讨麝香酮在脓毒血症小鼠心肌损伤中的作用及可能机制。方法:将36只雄性8～10周龄C57BL/6小鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组及LPS+麝香酮组,每组12只。LPS组和LPS+麝香酮组小鼠腹腔注射LPS 5 mg/kg以构建脓毒血症心肌损伤模型,LPS+麝香酮组小鼠于LPS注射前7 d开始,每日09:00给予2 mg/kg的麝香酮灌胃处理。对比分析各组小鼠心脏左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)及心率;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应法(qRT-PCR)测定心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的mRNA表达;免疫组织化学染色标记心肌组织中CD₄₅阳性细胞浸润水平;同时检测小鼠肌酸激酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量以评估心肌损伤状况;采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心肌组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和白细胞介素-18(IL-18)蛋白表达情况。结果:与...     

益气养阴活血方对病毒性扩张型心肌病小鼠TNF-α mRNA表达的影响

目的观察益气养阴、活血化瘀方对病毒性扩张型心肌病小鼠心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的影响,并从分子生物学水平探讨其作用机制。方法采用Balb/c小鼠多次腹腔注射柯萨奇B3m病毒方式,建立重复感染早期病毒性扩张型心肌病动物模型。210只Balb/c小鼠,随机分为4组,空白组30只,模型组、中药高剂量组、中药低剂量组,各60只。运用病理学及RT-PCR法,观察益气养阴、活血化瘀方对病毒性扩张型心肌病小鼠心脏质量指数、病理形态学、超微结构以及心肌组织TNF-αmRNA表达的影响。结果益气养阴、活血化瘀方能下调病毒性扩张型心肌病小鼠心肌组织TNF-αmRNA的表达,以高剂量组效果为佳。结论益气养阴、活血化瘀方可下调病毒性扩张型小鼠心肌组织TNF-α的表达,抑制小鼠自身免疫反应,从而对病毒性扩张型心肌病起到一定的防治作用。     

芍药苷干预对脓毒症大鼠心肌损伤的影响

目的研究芍药苷干预对脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法采用随机数字表法将SD大鼠分为4组, 每组10只。(1)对照组:大鼠腹腔注射1.4 ml生理盐水;(2)二甲基亚砜组:大鼠腹腔注射5%二甲基亚砜溶液1.4 ml;(3)脓毒症模型组:大鼠腹腔注射1.4 ml生理盐水, 1 h后腹腔注射0.1 ml(5 mg/kg)脂糖造模;(4)芍药苷干预组:大鼠腹腔注射1.4 ml芍药苷(70 mg/kg), 1 h后腹腔注射0.1 ml(5 mg/kg)脂多糖造模。24 h后处死4组大鼠。酶联免疫吸附测定(ELISA)法测4组大鼠血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)及心肌组织中肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、趋化因子C-X-C基序配体1(CXCL1)、趋化因子C-X-C基序配体2(CXCL2)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平, 伊文思蓝法测4组大鼠心肌组织中伊文思蓝含量;实时荧光定量聚合酶链式反应法测4组大鼠心肌组织中TNFα、IL-6、IL-1β、CXCL1、CXCL2、VCAM-1mRNA表达;Western-Blot法测血管内皮钙黏蛋白、丝裂原活化蛋白激酶p...     

急性坏死性胰腺炎大鼠心肌核因子-κB激活及重组葡激酶的干预作用

目的 研究重症急性胰腺炎(SAP)心肌功能损害时心肌核因子-κB (NF-κB)的活化及葡激酶的干预作用.方法 63只SD大鼠随机分为假手术组(n = 9)、ANP组(n = 27)、葡激酶干预组(n = 27),ANP模型采用5%的牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射方法建立.干预自造模前2 d腹腔注射葡激酶1.5 mg/kg体重,一天2次,共4次.ELISA法测定制模后6 h、12 h、24 h各时点血TNF-α、IL-6含量;RT-PCR检测心肌NF-κB mRNA的表达;免疫组化法检测心肌NF-κB蛋白的表达,常规观察胰腺及心肌组织的病理变化.结果 ANP组术后6 h大鼠心肌NF-κB mRNA及NF-κB蛋白表达异常增高,TNF-α、IL-6呈进行性升高,干预组胰腺及心肌组织的病理变化减轻.心肌NF-κB mRNA及蛋白表达下调,血TNF-α、IL-6明显下降,与ANP组比较,差异均显著(P＜0.05).结论 ANP大鼠的心肌损伤可能与循环中TNF-α、IL-6水平升高导致的心肌NF-κB活化有关.葡激酶对SAP并发的心肌损伤具有防治作用.     

白藜芦醇联合姜黄素腹腔预注射小鼠脓毒症诱发过程中的肺损伤情况观察

目的 观察白藜芦醇联合姜黄素腹腔预注射小鼠脓毒症诱发过程中的肺损伤情况，并探讨其作用机制。方法 90只雄性C57BL/6小鼠随机分为1～5组，每组18只。1～3组小鼠分别腹腔注射100 mg/kg姜黄素、40 mg/kg白藜芦醇、100 mg/kg姜黄素+40 mg/kg白藜芦醇，然后用盲肠结扎穿刺法（CLP）诱发脓毒症，4组小鼠腹腔注射等量0.9%生理盐水后CLP建立脓毒症模型，5组仅腹腔注射等量0.9%生理盐水。记录各组小鼠存活情况。第5天处死各组小鼠取肺组织，计算肺组织湿/干重（W/D），观察肺组织损伤情况，采用ELISA法检测各组肺组织中促炎因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）与抗炎因子（IL-10）的表达情况，采用WESTERN Blotting法检测各组各组肺组织中促凋亡蛋白（Bax、cleaved caspase-3、cleaved PARP）和抗凋亡蛋白（Bcl-2）的表达情况，采用双荧光素酶报告基因测算各组肺组织中NF-κB通路的激活情况。结果 第5天时1、2、3、4、5组小鼠分别存活4、5、13、1、18只。(1)与5组比较，第5天时4组小鼠存活率低，肺组织W/...     

羌活醇对葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎小鼠作用的研究

背景:免疫功能失调在炎症性肠病(IBD)的发病机制中起着关键作用。羌活醇是中药羌活的主要活性成分,具有抗炎的作用。目的:探究羌活醇对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为正常组、阴性对照组、模型组、羌活醇组。模型组、羌活醇组小鼠自由饮用2%DSS溶液诱导结肠炎模型。阴性对照组、羌活醇组小鼠给予腹腔注射羌活醇溶液40 mg/kg,正常组、模型组小鼠给予腹腔注射等体积0.9%NaCl溶液。10 d后处死小鼠,行疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度和组织病理学评分,ELISA法检测结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A水平,定量PCR法检测结肠和脾脏组织中IL-17A、RORγt mRNA表达。结果:与正常组相比,模型组DAI评分、组织病理学评分、结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A水平、结肠和脾脏组织中IL-17A、RORγt mRNA表达均显著增高(P<0.01),结肠长度明显缩短(P<0.01)。与模型组相比,羌活醇能明显降低小鼠DAI评分、组织病理学评分(P<0.01),下调TNF-α、...     

TLR4/NF-κB信号通路在黄芪甲苷抑制异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚中的作用

目的 探讨TLR4/NF-κB信号通路在黄芪甲苷抑制异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚中的作用.方法 以异丙肾上腺素5 mg/(kg·d)腹腔注射制备大鼠心肌肥厚模型.60只SD大鼠随机分为6组,每组10只:正常对照组、异丙肾上腺素组、异丙肾上腺素+黄芪甲苷20 mg/(kg·d)、异丙肾上腺素+黄芪甲苷40 mg/(kg·d)、异丙肾上腺素+黄芪甲苷80 mg/(kg·d)及异丙肾上腺素+普萘洛尔40 mg/(kg·d).给药组连续灌胃3周,并于灌胃1天后腹腔注射异丙肾上腺素2周.给药3周后,分别检测各组大鼠全心质量指数(HMI)、左心质量指数(LVMI);取左心室组织进行HE染色,测量左心室心肌细胞横径;RT-PCR检测心肌组织ANP和TLR4的mRNA表达;Western blot检测心肌组织TLR4、p65和IκBα的蛋白表达;ELISA检测血清中TNF-α、IL-6含量.结果 同正常对照组相比,异丙肾上腺素组大鼠表现为HMI和LVMI显著增加,左心室心肌细胞横径增加,ANP和TLR4 mRNA表达增加,TLR4和p65蛋白含量增加以及IκBα蛋白含量减少,血清中TNF-α、IL-6含量明显增加.与异丙肾上腺素组相比,黄芪甲苷不同剂量组表现为HMI和LVMI降低,左心室心肌细胞横径缩小,ANP和TLR4 mRNA表达减少,TLR4和p65蛋白含量减少以及IκBα蛋白含量增加,血清中TNF-α、IL-6含量减少,且呈一定的剂量依赖性.结论 黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚有保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关.     

阿霉素对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的研究阿霉素(ADM)对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响。方法将雄性wistar大鼠24只,随机分为ADM组和对照组,每组12只,ADM组按每次给ADM 2 mg/kg腹腔注射,隔日一次共6次;对照组给等体积的生理盐水腹腔注射。于实验第30 天,应用生化方法测定心肌组织中的一氧化氮(NO)水平及iNOS的活性;用TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数;用RT—PCR方法检测心肌组织iNOS mRNA的表达。结果与对照组比较ADM组大鼠心肌组织NO、iNOS活性增加(P< 0.01),心肌细胞凋亡指数及iNOS mRNA的表达均显著增高(P< 0.01)。结论ADM能诱导大鼠心肌细胞iNOS mRNA表达增加,使NO合成增多,引起细胞凋亡而参与对心肌的损害。