嗜血杆菌培养及耐药性初步研究

目的：选择合适的嗜血杆菌分离培养基提高分离率及对抗生素的敏感性。方法：比较3种培养基上嗜血杆菌的平均生长指数（GI）和分离率。结果：兔血巧克力培养基较羊血巧克力培养基的GI值为高（P＜0．001）；兔血巧克力培养基－V分离出嗜血杆菌59株，分离率为28．23％。兔血巧克力培养基分离出18株，分离率为8．61％。共检测出5株β－内酰胺酶阳性，氨苄西林耐药率最高为33．9％，其次为红霉素及复方新诺明的耐药率分别为30．51和20．34％。结论：培养基中加入新鲜牛肉浸液可促进嗜血杆菌的生长，制培养基所用血源以兔血最佳，其次为羊血。     

肝浸液在流感嗜血杆菌分离培养中的应用评价

目的：评价肝浸液在流感嗜血杆菌分离培养中的应用效果。方法用肝浸液对巧克力琼脂进行改良,配制改良培养基（LSBCh）,并与标准巧克力琼脂（Choc）比较,统计分析2种培养基嗜血杆菌生长指数（GI 值）和分离率。结果 LSBCh 的 GI 值明显高于 Choc（P ＜0.01）;对216例呼吸道标本检测,LSBCh 分离率（43.5％）较 Choc（8.3％）明显提高（P ＜0.01）。结论肝浸液能够很好促进嗜血杆菌生长发育,不仅菌落大,而且更易于识别,对提高流感嗜血杆菌分离率具有应用价值。     

一种新型嗜血杆菌分离培养基的评价与应用

本研究对一种新型的嗜血杆菌分离培养基与其他 4种常用嗜血杆菌培养基进行了对照 ,并统计了临床标本分离率 ,报告如下。1.标本来源 :痰、咽拭子、分泌物共 42 8份 ,来自我院。2 .试剂 :脑心浸液来自生物梅里埃公司及BBL公司 ,哥伦比亚琼脂来自DIFCO公司 ,酵母浸液、牛肉浸液为本室自制 ,脱纤维羊血、兔血来自我院动物室。3 .标准菌株 :流感嗜血杆菌ATCC492 47来自卫生部临床检验中心。4.培养基 :( 1)Schoc :营养琼脂 + 6%羊血 ;85℃水浴 10min ,凉后倾制平皿 ;( 2 )BBrchoc :BBL脑心浸液 +琼脂 + 6%兔血 ;方法同上 ;( 3 )MBrchoc :…     

嗜血杆菌在儿童及老年人上呼吸道中的分布调查

Haemophilus(嗜血杆菌)是苛养性细菌,与许多严重感染性疾病有关[1],其生长不仅需要X、V因子,而且受革兰阳性细菌生长的抑制,分离培养极为困难.我们用含50 mg/ L万古霉素的兔血巧克力琼脂培养基对121名60～97岁老年人及165名3～6岁儿童的咽部分泌物进行了嗜血杆菌分离和鉴定,并对所分离的嗜血杆菌进行了β-内酰胺酶测试,结果报告如下.     

血平板纸片法分离嗜血杆菌的方法学研究

目的 建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法。方法 利用万古霉素－杆菌肽－氯林可霉素巧克力法（ＶＢＣ法）、血平板纸片法和传统巧克力法，对含下沉菌群的标本进行嗜血杆菌的分离。结果 巧克力平板上流感嗜血杆菌生长佳，但正常菌群影响嗜血杆菌分离，对１００份模拟痰标本分离情况进行比较，结果ＶＢＣ法、纸片法及巧克力法的分离率分别为７６％、８４％和６４％，进行配对卡方检验，巧克力法与ＶＢＣ法和纸片法的Ｐ值均小于     

血平板纸片法分离嗜血杆菌的疗效观察

目的：建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法。方法：利用万古霉一杆菌肽一氯林可霉素巧克力法（VBC法）、血平板纸片法和传统巧克力法，对含正常菌群的标本进行嗜血杆菌的分离。结果：巧克力平板上流感嗜血杆菌生长佳，但正常菌群影响嗜血杆菌分离，对100份模拟痰标本分离情况进行比较，结果VBC法、纸片法及巧克力法的分离率分别为76％、84％和64％，进行配对卡方检验，巧克力法与VBC法和纸片法的P值均小于0．01，其结果差异有显著性；对241份临床痰标本进行VBC法和纸片法分离，流感嗜血杆菌分离率分别为4．3%和4．98％，进行卡片检验，P〉0．05，两法结果无差异。结论：血平板上纸片分离嗜血杆菌的方法简便、实用、效果较了，初次分离时可观察卫星现象和溶血情况，有应用推广价值。     

血平板纸片法分离嗜血杆菌的方法学研究

目的建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法。方法利用万古霉素杆菌肽氯林可霉素巧克力法（ＶＢＣ法）、血平板纸片法和传统巧克力法，对含正常菌群的标本进行嗜血杆菌的分离。结果巧克力平板上流感嗜血杆菌生长佳，但正常菌群影响嗜血杆菌分离，对１００份模拟痰标本分离情况进行比较，结果ＶＢＣ法、纸片法及巧克力法的分离率分别为７６％、８４％和６４％，进行配对卡方检验，巧克力法与ＶＢＣ法和纸片法的Ｐ值均小于０．０１，其结果差异有显著性；对２４１份临床痰标本进行ＶＢＣ法和纸片法分离，流感嗜血杆菌分离率分别为４．３％和４．９８％，进行卡方检验，Ｐ＞０．０５，两法结果无差异。结论血平板上纸片分离嗜血杆菌的方法简便、实用、效果较好，初次分离时可观察卫星现象和溶血情况，有应用推广价值     

流感嗜血杆菌对三种培养基的试验与评价

目的建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法.方法利用万古霉素巧克力法、血平板点种金黄色葡萄球菌法和传统巧克力法,对合正常菌群的痰标本进行嗜血杆菌的分离.对120份痰标本用以上三种方法进行分离,结果加万古霉素巧克力平板上流感嗜血杆菌阳性率高,为16%,传统巧克力法为4.1%,而血平板点种金黄葡萄球菌法仅为2.5%.结论利用万古霉素巧克力平板分离嗜血杆菌方法简便、实用、效果好.     

幽门螺杆菌改良无血培养基的研制

在无血脑心浸液卵黄琼脂培养基（ＨＢＩ－ＥＡ）的基础上进行改良，建立一新型快速、简便的幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）无血脑心浸液卵黄琼脂培养基（ＨＢＩ－ＥＡ）。应用此改良培养基和含血脑心浸液培养基（ＢＨＩＡ）分别对８２例胃粘膜标本进行分离培养，对两者在Ｈｐ阳性培养率、分离时间及Ｈｐ纯培养速度方面进行比较。改良培养基分离Ｈｐ阳性率为７０％（５７／８２），脑心浸液血培养基阳性     

卡他莫拉菌快速鉴定的方法学及耐药性研究

目的　建立快速鉴定卡他莫拉菌 (MC)的方法 ,对不同血源、营养配方的琼脂培养基进行了MC的生长指数 (GI)的测定 ,了解MC的耐药状况。方法　使用含 5 0 μg/ml万古霉素的兔血巧克力琼脂培养基分离MC ,以 3 乙酰吲哚纸片法检测MC产生的乙酰酯酶 ,与DNA酶试验为对照 ;将MC接种于 9种培养基上 ,计算和比较MC在 9种培养基上的平均GI;同时用Nitrocefin纸片检测MC的 β内酰胺酶发生率 ,以琼脂平皿二倍稀释法测定最低抑菌浓度 (MIC)。结果　检测 2 2 8株MC的乙酰酯酶结果 ,其敏感性为 10 0 % ,与 2 0 3株近缘菌比较特异性为 10 0 % ,与DNA酶试验有很高的相关性 ;MC在巧克力琼脂培养基上生长较血琼脂培养基好 ,但与GI值比较 ,差异无明显意义 (P >0 0 5 ) ;MC产 β内酰胺酶的阳性率为 93 0 % ;哌拉西林 /舒巴坦和哌拉西林 /他唑巴坦的MIC50 和MIC90 分别较单哌拉西林 ,降低了 8倍 ;氨苄西林 /舒巴坦的MIC50 和MIC90 较单氨苄西林降低了 32倍和 4倍。结论　用 3 乙酰吲哚纸片法检测MC产生的乙酰酯酶 ,是临床实验室快速鉴定MC的良好方法。MC产 β内酰胺酶阳性率之高 ,应引起临床医生的重视。哌拉西林 /舒巴坦、氨苄西林 /舒巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦、哌拉西林 /他唑巴坦及亚胺培南 /西司他丁对 β内酰胺酶阳性MC有很     

改良流感嗜血杆菌培养基的实验研究与评价

目的评价自制改良哥伦比亚巧克力培养基（ＩＣＣＡ）对流感嗜血杆菌（Ｈｉｎ）的分离培养效果。方法将ＨｉｎＡＴＣＣ４２９４７接种于ＩＣＣＡ和其他４种培养基上，计算和比较５种培养基Ｈｉｎ的平均生长指数；用ＩＣＣＡ对４４８份痰标本进行检测，比较其与血琼脂加金葡菌划线（ＢＡＳＳ）方法的Ｈｉｎ检出率。结果与其他４种培养基比较，ＩＣＣＡ的Ｈｉｎ平均生长指数为１７．７９，痰标本中的Ｈｉｎ的检出率为２０．１％，ＩＣＣＡ明显高于ＢＡＳＳ（检出率１２％），经χ２检验Ｐ＜００１。结论ＩＣＣＡ是一种较好的Ｈｉｎ选择性培养基，值得推广应用     

阿奇霉素非敏感嗜血杆菌的分离及其药敏试验观察

目的 了解2008～2011年阿奇霉素非敏感嗜血杆菌的分离情况及药敏试验特点,为临床治疗提供依据.方法 统计分析2008～2011年本院临床送检呼吸道标本阿奇霉素非敏感嗜血杆菌分离情况,分析其对常用抗菌药物的药敏试验结果,并与阿奇霉素敏感菌株进行对比观察.结果 22 986份呼吸道标本,分离嗜血杆菌1 900株,其中阿奇霉素非敏感菌株共计389株,分离率为21.48%,4年间呈逐年上升趋势;阿奇霉素非敏感嗜血杆菌菌株构成以副流感嗜血杆菌为主,占79.18%,而流感嗜血杆菌只占20.82%.阿奇霉素非敏感流感嗜血杆菌对阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛3种抗菌药物的耐药率高于副流感嗜血杆菌,且两种嗜血杆菌对头孢曲松、头孢泊肟、氨曲南、美罗培南和左氧氟沙星均表现敏感性降低.2008～2011年间阿奇霉素非敏感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率逐年增高;与敏感菌株相比,流感嗜血杆菌非敏感株对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、氨曲南、左氧氟沙星耐药率或非敏感率显著增高;而对于副流感嗜血杆菌,非敏感菌株对试验药物耐药率或非敏感率均显著增高.结论 嗜血杆菌阿奇霉素非敏感菌株逐年增加,其对常用抗菌药物的耐药率或非敏感率均高于阿奇霉素敏感株.     

45株副流感嗜血杆菌感染及耐药性调查

目的了解本地区呼吸道感染中副流感嗜血杆菌的感染情况及耐药性,以便有效地指导临床合理用药。方法对760例呼吸道感染患者的呼吸道分泌物进行副流感嗜血杆菌的培养及鉴定,以K-B法进行药物敏感性试验。β-内酰胺酶试验采用Nitrocefin纸片法。结果共分离出副流感嗜血杆菌45株,分离率为5.92%(45/760)。药敏结果显示阿莫西林/克拉维酸、阿奇霉素、亚胺培南、头孢他啶、头孢呋辛的耐药性较低,均小于5%,是治疗的首选药物。β-内酰胺酶阳性率为37.78%(17/45)。结论本地区呼吸道感染副流感嗜血杆菌耐药形势严峻,β-内酰胺酶阳性率较高,应引起重视。     

用于嗜血杆菌鉴定的卫星试验影响因素研究

目的　了解嗜血杆菌鉴定中X、V因子测定的各种影响因素及可用于嗜血杆菌鉴定的卫星试验的细菌种类。方法　用 4种不同的琼脂平板 ,比较不同培养时间和CO2 环境对嗜血杆菌X、V因子需求试验结果的影响 ,同时比较不同菌种在各种琼脂培养基上对嗜血杆菌琼脂卫星试验结果的影响。结果　X、V因子需求试验结果表明 ,脑心琼脂效果最好 ,其次为营养琼脂 ,M H琼脂结果与脑心琼脂相比差异有显著性 (P <0 .0 1) ;CO2对试验结果有影响 ;培养 4 8h较 2 4h的菌落大 ,易于辨认 ;不同菌种在不同琼脂培养基上对嗜血杆菌琼脂卫星试验的结果有所不同。结论　卫星试验应在CO2 环境中进行 ,用脑心琼脂平板测试嗜血杆菌对X、V因子的需求结果较好 ,多数葡萄球菌及部分革兰阴性杆菌对嗜血杆菌的琼脂卫星试验结果较好     

儿童呼吸道感染患者金黄色葡萄球菌的分离与耐药性分析

目的 探讨和分析金黄色葡萄球菌在儿科呼吸道感染患者中的分离与耐药性变化,为指导临床用药控制感染提供依据。方法 采集2013年1月～2014年12月两年儿科(包括新生儿科)呼吸道感染患者痰液标本共5 413例,应用MicroScan-As4微生物自动鉴定分析仪对分离后的菌株进行鉴定和药物敏感试验,用Whonet5.6软件进行统计分析。结果 从儿科呼吸道感染患者标本中共分离出各种病原菌29种1 540株。其中金黄色葡萄球菌(S.aureus,SAU)336株(21.82%,336/1 540),超过总病原菌的1/5,在儿科呼吸道感染分离率占6.21%,显著高于其它病原菌分离率(除流感嗜血杆菌5%外,其余均<5%)。在所有检出SAU中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)59株(17.56%,59/336),可以看出SAU在儿科呼吸道感染患者中占据首要位置。SAU对万古霉素、利奈唑胺、达托霉素、奎奴普丁这4种抗菌药物耐药率为0,对其它抗菌药物呈现不同程度耐药性; MRSA对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢唑林、头孢曲松耐药率为100%,对红霉素、克林霉素耐药率超过50%,对其它抗菌药物耐药性呈低耐药性。结论 儿童呼吸道感染SAU较多,尤其MRSA多重耐药现象严重。应加强对金黄色葡萄球菌耐药性监测,根据药敏试验结果进行个体化、合理化选用抗菌药物,有效控制和减少耐药菌株产生。     

呼吸道及非呼吸道流感嗜血杆菌感染特征及耐药性分析

目的分析该院呼吸道和非呼吸道流感嗜血杆菌的感染特征及耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法对2016-2019年该院呼吸道和非呼吸道标本检出的流感嗜血杆菌进行分析,采用Kirby-Bauer法检测抗菌药物的敏感性,采用头孢硝噻吩纸片法检测β-内酰胺酶的活性。结果共检出流感嗜血杆菌284株,包括呼吸道来源270株(95.07%)和非呼吸道来源14株(4.93%)。婴幼儿(0~3岁)对流感嗜血杆菌的易感性明显高于其他年龄段人群(P<0.05),老年人(>59岁)较青少年(>14~18岁)和成年人(>18~59岁)易感(P<0.05)。流感嗜血杆菌感染呈春、冬季高发性,其感染高峰在2-5月。270株呼吸道来源的流感嗜血杆菌包括β-内酰胺酶阳性且对氨苄西林耐药147株(54.44%)、β-内酰胺酶阴性且对氨苄西林耐药34株(12.60%)和β-内酰胺酶阴性且对氨苄西林敏感89株(32.96%)。14株非呼吸道来源流感嗜血杆菌包括β-内酰胺酶阳性且对氨苄西林耐药2株,β-内酰胺酶阴性且对氨苄西林耐药2株,β-内酰胺酶阴性且对氨苄西林敏感10株。呼吸道来源的流感嗜血杆菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦和头孢呋辛钠的耐药率明显高于非呼吸道菌株(P<0.05)。结论该院呼吸道来源的流感嗜血杆菌耐药率高于非呼吸道菌株,临床医师应根据病原菌分布及耐药特征选用抗菌药物,确保合理用药。     

2015-2019 年儿童呼吸道感染嗜血杆菌分离检出及耐药性变迁分析

目的　探讨儿童呼吸道嗜血杆菌的感染情况及耐药性变迁，为临床合理用药提供参考。方法　对2015 年1 月 ~2019 年12 月儿科门诊就诊及住院患儿痰标本中分离的233 株嗜血杆菌属细菌的临床感染特征及药敏试验结果进行回 顾性分析。结果　嗜血杆菌的总检出率为5.1%（233/4575），其中副流感嗜血杆菌51.1%（119/233），流感嗜血杆菌 36.9%（86/233），溶血嗜血杆菌6.4%（15/233）、惰性嗜血杆菌3.0%（7/233）和嗜沫嗜血杆菌2.6%；流感嗜血杆菌 和副流感嗜血杆菌对氨苄西林和复方新诺明耐药率均超过60%，耐药率呈逐年上升趋势；对头孢哌酮/ 舒巴坦及第三、 四代头孢菌素、左氧氟沙星、亚胺培南和阿奇霉素敏感率均大于70%；总β- 内酰胺酶阳性率为44.9%，产酶株全部对 氨苄西林耐药，产酶阴性株中氨苄西林耐药率为22%。结论　嗜血杆菌在儿童呼吸道标本中的检出率较高，对临床常 用抗菌药物耐药率呈逐年上升趋势，临床应根据药敏试验数据合理应用抗生素才能减缓耐药菌株产生。     

呼吸道感染病原菌分布及耐药分析

目的了解呼吸道感染致病茵茵谱及耐药性。方法对诊断为下呼吸道感染的住院患者合格211份痰标本进行细菌学检查，阳性茵采用法国梅里埃生物公司细菌鉴定条鉴定。采用K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果211份痰标本分离出致病菌216株，以G^-茵为主，占43．5％，G^ 茵占27．3％；表皮葡萄球菌、铜绿假单胞茵、其他假单胞茵、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯杆菌。占分离茵前5位，分别为13．8％、8．3％、8．8％、5．1％、5．1％。药敏结果提示D群链球菌、肠球菌、其他假单胞茵、肺炎克雷伯和鲍曼不动杆茵对多种抗生素呈现高比例耐药。铜绿假单胞茵对三代头胞、喹诺酮及氨基甙类仍敏感。万古霉素对G^ 茵高度敏感。结论呼吸道感染以G^-茵为主，其比例较以往报道下降，耐药率较高，且多重耐药。临床宜根据药敏结果选择抗生素并合理使用。     

Nutrient agar with sodium chloride supplementation for presumptive detection of Moraxella catarrhalis in clinical specimens

We previously reported that Nissui nutrient agar (N medium) promoted the growth of Moraxella catarrhalis but not commensal Neisseria spp. In the present study, we examined which constituent of N medium was responsible for the selective growth of M. catarrhalis using 209 M. catarrhalis and 100 commensal Neisseria spp. clinical strains. We found that peptone, but not meat extract or agar of N medium, had growth-promoting or growth-inhibiting ability with respect to M. catarrhalis and commensal Neisseria spp. Thus, we investigated the amino acid content of N peptone and found it had higher concentrations of amino acids than other commercial peptone products. On varying the sodium chloride concentration of reconstituted N medium, we noted that the concentration was an important factor in bacterial growth differences. Varying the sodium chloride concentration of other commercial nutrient agars achieved similar results to those for N medium. This is, to our knowledge, the first study observing that sodium chloride concentration is responsible for difference in growth between the two organisms. We also successfully isolated colonies of M. catarrhalis from respiratory specimens on N medium, whereas the growth of commensal Neisseria spp. was inhibited, and by adding bovine hematin and β-NAD we were able to isolate Haemophilus influenzae colonies as efficiently as with a chocolate agar. In conclusion, nutrient agar can be used as a medium for the preferential isolation of M. catarrhalis from upper respiratory tract specimens.     

嗜血杆菌的分离及耐药性分析

目的了解衡阳市中心医院2010年10月至2011年11月嗜血杆菌的分离率、产酶率,并对其耐药性进行分析,指导临床合理用药,控制嗜血杆菌的流行。方法用嗜血杆菌选择性培养基对来自不同科室的607份临床标本（痰、咽拭子、支气管分泌物）进行分离培养,用卫星现象鉴定流感嗜血杆菌（haemophilus influenzae,Hi）与副流感嗜血杆菌（H.parainfluenzae,Hp）、头孢硝基噻吩纸片进行β-内酰胺酶测定,采用琼脂纸片扩散（K-B）法检测Hi和Hp对10种抗菌药物的耐药性。结果共分离培养出嗜血杆菌136株,检出率为22.4%（136/607）,其中流感嗜血杆菌31株,检出率为5.1%（31/607）,副流感嗜血杆菌105株,检出率为17.3%（105/607）;各科室中以呼吸内科检出率最高,检出率为9.7%（59/607）,其次为儿科和心内科,分别为2.6%、2.8%。136株嗜血杆菌对青霉素普遍耐药,耐药率高达90.4%,对洛美沙星和氧氟沙星的耐药率较高,分别是68.4%、48.5%,对头孢噻肟、头孢他啶、头孢呋肟的耐药率分别是9.6%、11.8%、22.1%,对四环素类如：四环素、强力霉素的耐药率分别为38.2%、8.8%,对壮观霉素、头孢曲松全部敏感,共检出产β-内酰胺酶菌株32株,产酶率为23.5%（32/136）。结论该院呼吸道嗜血杆菌感染以副流感嗜血杆菌为主,以呼吸内科感染最为严重,其次为儿科和心内科,临床上治疗嗜血杆菌感染的有效药物是头孢曲松、壮观霉素。