损伤性嗅觉诱发电位的实验研究

目的　建立损伤性嗅觉功能障碍动物模型 ,了解电刺激嗅觉诱发电位的特性及变化规律。方法　通过立体定位和电解损毁技术 ,对动物一侧或双侧嗅球造成损伤 ,动态观察损伤后不同时间点 (2 4h、4 8h和 1周 )嗅觉诱发电位的变化 ,并观察嗅球与嗅黏膜病理和超微结构改变。结果一侧嗅球损伤后 ,诱发电位N2波消失 ,N1和P1波潜伏期延长 ,波幅减小 ;双侧嗅球损伤后 ,表现为N1、N2波消失 ,仅记录到P1波 ,其潜伏期明显延长 ,波幅变化较大 ,以上改变均以 2 4～ 4 8h变化最显著。组织病理学和超微结构显示 ,2 4～ 4 8h嗅球周围大量炎性细胞浸润 ,神经元变性样改变。结论嗅球损伤程度不同 ,对嗅觉诱发电位的影响也不相同 ,这种改变是以其组织病理和超微结构变化为基础的。     

化学性嗅觉障碍模型中嗅觉诱发电位的研究

目的　建立化学性嗅觉功能障碍的大鼠动物模型,观察电刺激嗅觉诱发电位（olfactory evoked potentials,OEPs）的特点及变化规律。方法　腹腔注射 300 mg/kg 3-甲基吲哚对SD大鼠造成嗅上皮的损伤,动态观察给药后不同时间点（1 h、3～6 h和24 h）的OEPs变化。结果　电刺激嗅黏膜时在嗅球附近可记录到“负-正-负（N1-P1-N2）”的三相波,当刺激电流为3 mA时,潜伏期和振幅分别为N1波12.9 ms/19.1 μV,P1波23.6 ms/27.0 μV,N2波41.7 ms/15.1 μV。给药后1 h OEPs变化无显著性;3～6h后OEPs出现变化,表现为N1波或N1、N2波消失,其潜伏期明显延长及振幅变小;以上改变在给药后24h更加显著。结论　腹腔注射3-甲基吲哚可建立SD大鼠急性嗅觉障碍的模型,该模型操作简单且重复性好。     

嗅觉诱发电位的实验研究

目的：观察电刺激家兔嗅区黏膜记录的诱发电位的波形及其稳定性，探讨一种可以客观评价嗅觉功能的方法。方法：将双极刺激电极经家兔前鼻孔置于嗅区黏膜，给予电刺激，在颅顶记录嗅觉诱发电位(OEPs)；改变刺激参数和部位，观察对电位潜伏期、阈值和波形的影响。结果：在颅顶前方近嗅球处记录到一组波形稳定的N1-P1-N23相复合波。潜伏期为：N1波20．6ms，P1波33．5ms，N2波58．3ms；改变刺激强度对各波无明显影响；改变刺激频率对各波影响较大，频率过高．波形分化较差。结论：正常OEPs是一组波形稳定的负-正-负3相复合波，波形稳定、重复性好，各参量可作为评价嗅觉功能变化的有用指标。     

缺血对大鼠嗅球影响的实验研究

目的：观察成年大鼠嗅球缺血性损伤后的病理改变,探讨缺血对嗅觉的影响。方法：选取40只成年SD大鼠（体重250-300g）,分成对照组、实验组（1周组、1月组、2月组）,每组10只。将实验组大鼠双侧颈总动脉结扎造成缺血,分别在1周、1个月、2个月时处死,光镜下观察嗅球病理改变,透射电镜下观察嗅球内细胞超微结构的变化。结果：光镜下可见实验组大鼠嗅球僧帽细胞胞核深染、颗粒细胞数目减少。透射电镜下1周组大鼠嗅球内僧帽细胞线粒体破坏,细胞变性、坏死;1月组僧帽细胞退行性变,神经纤维髓鞘断裂、板层脱落。结论：缺血可损伤神经细胞和神经纤维,可能造成或加重嗅觉障碍。     

缺血后大鼠电刺激嗅觉诱发电位研究

目的　观察大鼠缺血损伤后不同时间电刺激嗅觉诱发电位（olfactory evoked potentials,OEP）的变化。方法 对照组A组21只,双侧颈总动脉结扎并按照术后1h、2 h、4 h和1天分为B组17只、C组10只、D组6只、E组6只的SD大鼠进行电刺激OEP检测。结果　①A组中有18只（85.7%）大鼠可记录到一组由“负-正-负”三相波组成的诱电位波形图,3只（14.3%）为“负-正”两相波组成。N1、P1、N2潜伏期分别为（13.91±1.40）、（24.09±3.19）、（45.32±5.35）ms;N1、P1、N2振幅分别为（17.42±7.71）、（28.57±11.70）、（13.07±5.82）μV。②B组电刺激OEP 的N1、P1潜伏期显著延长,E组N2潜伏期显著延长;E组N1振幅显著增大。结论　双侧颈总动脉结扎可以导致电刺激OEP的变化,可能造成或加重嗅觉障碍。     

外伤后失嗅患者的嗅觉事件相关电位和MRI评估

目的 探讨嗅觉事件相关电位(olfactory event related potentials,OERP)和嗅觉通路MRI对外伤后失嗅的评估价值.方法 回顾性分析24例外伤后失嗅患者的临床资料.所有患者均行详细的病史采集、全面体检、T&T嗅觉检查、鼻内镜检查、OERP测试、颅脑CT和嗅觉通路MRI检查.结果 主观嗅觉测试:双侧完全失嗅20例;单侧完全失嗅,对侧嗅觉减退2例;单侧完全失嗅,对侧嗅觉正常2例.OERP测试:双侧最大嗅刺激均不能引出OERP者20例,单侧最大嗅刺激不能引出OERP者4例;单侧能引出OERP者4例,其中2例能正常引出,另2例OERP幅值下降且潜伏期延长.氨气刺激均能引出鼻内三叉神经化学感受事件相关电位.嗅路MRI检查:嗅球损伤24例次(100%),额叶直回损伤22例次(91.7%),额叶眶回损伤16例次(67%),远端嗅束和颞叶损伤各2例次(8%).结论 OERP能对外伤后嗅觉进行定性和定量的客观整体评估;嗅路MRI能对外伤后失嗅的损伤部位、程度进行客观、精确的评估.两者结合能对嗅觉功能进行全面、客观评价.     

上呼吸道感染后嗅觉障碍患者嗅上皮超微结构观察

目的通过对上呼吸道感染后嗅觉障碍的患者鼻腔大体及嗅上皮超微结构的研究，从形态学上观察嗅觉减退或丧失的超微结构改变。方法选择上呼吸道感染后嗅觉减退或丧失患者10例，用T＆T嗅觉测试法测试患者的嗅觉功能。常规前鼻镜、鼻内镜下对鼻腔大体结构进行观察，鼻内镜下钳取嗅区黏膜行透射电镜超微结构观察。结果上呼吸道感染后嗅觉障碍患者嗅黏膜超微结构有以下变化：①嗅上皮结构层次仍能保持，但细胞间隙增宽；②上皮表面嗅泡明显减少，即使嗅泡存在，其末端的纤毛也明显减少，部分嗅泡呈空泡状改变；③微绒毛细胞和支持细胞表面的微绒毛减少或缺失；④支持细胞的细胞核变形或固缩，嗅细胞的树突水肿变形，细胞器减少。结论上呼吸道感染后嗅觉功能障碍与嗅黏膜上皮超微结构的改变密切相关。患者嗅泡及嗅泡内纤毛缺失，微绒毛细胞及支持细胞的微绒毛减少是引起嗅觉减退的主要原因，支持细胞胞核的变形及嗅细胞树突的形态学改变与嗅觉改变相关。     

嗅球摘除后嗅觉神经元凋亡的实验研究

目的研究凋亡是否参与嗅上皮正常生理更替和嗅球摘除后嗅觉神经元死亡而后再生的过程,探讨凋亡与神经元再生的关系。方法应用原位末端标记法和透射电镜观察正常成年大鼠以及摘除嗅球后大鼠嗅上皮16、32、48 h和3、7、30 d时凋亡的出现和改变情况。结果正常成年大鼠嗅上皮中有末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(TUNEL)的阳性细胞(1.93±0.31)个/200μm。摘除嗅球后TUNEL阳性细胞数增加,32 h达峰值(90.9±18.03)个/200μm,以后迅速下降,维持于低水平。透射电镜下见嗅球摘除术后嗅觉神经元出现胞质浓缩、胞核染色质边聚等细胞凋亡的特征性超微结构改变。尚可见少量胞质内出现自噬泡以及除线粒体以外的细胞器扩张,但胞核正常的嗅觉神经元。结论凋亡参与成年大鼠嗅觉神经元生理性更替以及实验性嗅觉神经元死亡和再生的过程。此外,尚存在自噬型和胞质型神经元死亡。     

慢性鼻窦炎嗅觉障碍患者嗅上皮超微结构观察

目的 观察慢性鼻窦炎嗅觉障碍患者 嗅上皮的超微结构变化。方法 对35例住院行鼻内窥镜手术治疗伴有嗅觉缺失鼻窦炎患者的嗅上皮取活体组织,光镜下将嗅上皮按病变分为正常、萎缩和呼吸上皮化生组,透射电镜分别观察各组超微结构变化。结果 ①光镜下正常的嗅上皮细胞表面超微结构出现支持细胞微绒毛消失、嗅泡内微管结构消失或空泡化 致泡变形、嗅纤毛变形或减少、少量纤毛化生等改变;②萎缩的嗅上皮超微结构改变的特点：轻、中度萎缩主要为支持细胞上部的细胞器和膜限制性的电子致密囊泡明显减少或消失、空泡化,基底细胞退行性变;重度萎缩为细胞结构不清,多为双层细胞结构,细胞核染色质呈斑块状凝聚、核空泡化或核固缩;细胞质内均出现内质网扩张,线粒体肿胀、嵴排列紊乱 、 减少或空泡状改变;③呼吸上皮化生区域,丛状纤毛细胞与支持细胞、嗅泡样结构间隔分布,即嗅上皮细胞呈岛状分布。结论 炎症导致嗅上皮细胞由表层及里层各种超微结构异常程度与嗅上皮萎缩程度呈正相关;慢性鼻窦炎嗅觉障碍患者嗅上皮超微结构变化与分型分期无关。     

外伤性嗅觉障碍大鼠嗅黏膜的组织学变化

目的 构建大鼠外伤性嗅觉障碍模型,观察不同时间点嗅黏膜组织学变化.方法 神经切断组(40只)和对照组(20只)大鼠均在显微镜下暴露左侧嗅球,沿筛板切断神经组切断大鼠左侧嗅神经.采用嗅觉诱发电位(olfactory evoked potentials,OEPs)和神经示踪验证造模效果.术后1天、5天、2周、3周、6周处理大鼠,处理前1天每组各取2只大鼠经鼻腔滴注辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP).嗅黏膜及嗅球冰冻切片后观察嗅上皮的厚度、细胞数量的变化以及嗅神经的连续性,并且行免疫组化观察嗅上皮中的新生嗅感觉神经元(olfactory receptor neurons,ORNs).结果OEPs及神经示踪证实手术方法可以完全切断嗅神经.术后1天,切断侧黏膜中ORNs出现凋亡,两组大鼠双侧嗅上皮厚度和细胞数量比值无明显变化.5天时切断侧嗅上皮中细胞数量减少,上皮厚度变薄,嗅球中无HRP标记纤维.术后2、3周大鼠嗅球中出现蓝色标记,嗅上皮厚度和细胞数量逐渐增加,但仍然与对照组有差异,此时嗅上皮中出现大量的新生ORNs.经过6周的恢复,嗅上皮厚度及细胞数量基本恢复至对照组水平,嗅上皮中有较多的新生ORNs,其轴突与嗅球重新建立神经联系,但是上皮中仍然有一定数量的凋亡细胞.结论 嗅神经切断术可以作为制作外伤性嗅觉障碍的可靠方法;由于ORNs具有再生能力,大鼠嗅神经切断后嗅黏膜在一定时间内基本恢复至正常水平.     

脑动脉粥样硬化对嗅球和嗅束血供影响的形态学研究及临床意义

目的：研究嗅球、嗅束动脉的来源分布及相关动脉的病理变化，为嗅球、嗅束因缺血所致嗅觉障碍提供形态学依据。方法：在体视显微镜下观察80例脑标本嗅束、嗅球动脉的来源、数目、分支和分布；对其中60岁以上的50例脑标本嗅束、嗅球和相关动脉作病理解剖研究。结果：嗅束、嗅球动脉主要来自眶前动脉、眶后动脉和返动脉，分单支、双支、三支和多支4种类型。病理观察发现，大脑前动脉、前交通动脉有粥样硬化改变者占86．3％。营养嗅束、嗅球的小动脉有狭窄或阻塞者15例，与被阻塞的小动脉相对应的嗅束病理切片可见神经纤维变性和萎缩现象。结论：60岁以上脑动脉硬化患者可使嗅球、嗅束小动脉阻塞，引起神经纤维变性，可能与嗅觉障碍有关。     

大鼠嗅球神经干细胞培养

目的建立大鼠嗅球神经干细胞(neural stem cells，NSC)体外培养方法，研究其增殖和分化特性。方法采用添加丝裂原的无血清培养基分离、培养新生第1天和成年大鼠嗅球NSC，应用免疫细胞化学方法鉴定培养的NSC及自然分化为特异性神经细胞的类型，四甲基偶氮唑盐(MTY)法测定嗅球NSC的生长曲线。结果从生后第1天和成年大鼠嗅球分离、培养出表达巢蛋白(nestin)，并能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的NSC。生后第1天和成年大鼠嗅球的神经球形成率分别为20％～30％和0．1％。嗅球NSC的增殖依赖表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor—basic，bFGF)，其中EGF的促分裂增殖作用明显优于bFGF。结论从生后第1天和成年大鼠嗅球可以培养出具有自我增殖和多向分化潜能的NSC。     

电刺激嗅神经诱发电位实验研究

目的 探索一种不受主观因素影响,能客观反映嗅觉功能的实验方法。方法 采用２０只家兔,刺激电极分别置于筛板和鼻甲溴区粘膜及呼吸区粘膜;记录电极置于头皮表面近嗅球部,给予０．２～４．０ｍＡ电刺激,记录产生的诱发电位。结果 电极置于筛板和鼻甲嗅区粘膜可记录到一组“负－正－负”三相的诱发电位波,依次命名为Ｎ１、Ｐ１、Ｎ２,当刺激强度为２．０ｍＡ时,筛板粘膜诱发电位的潜伏期分别为１６．２７、２５．３６、４９     

Study of behavioral and histological change in mice following olfactory bulbectomy]

Behavioral and histological changes in mice following bilateral olfactory bulbectomy were studied. Mice were trained to discriminate between a 0.01% Cycloheximide solution and distilled water. After olfactory bulbs were removed, discrimination was lost, and had not returned 300 days after bulbectomy. The histological changes observed by light microscope were as follow. Degeneration of olfactory epithelium was observed immediately after the bulbectomy, followed by decrement of the epithelial thickness and the number of olfactory cells. An increase in both epithelial thickness and the number of olfactory cells was observed 14 days after the bulbectomy, and epithelial thickness 300 days after the bulbectomy was similar to that of the sham-operation group. At 300 days after the bulbectomy, axons of olfactory cells migrated through the lamina cribrosa, but didn't contact the forebrain. In this study, the olfactory bulb was considered to have played a role in functional recovery of olfactory behavior, and that olfactory cells were continuously renewed under conditions of target organ, i.e. olfactory bulb, loss.     

Prevention of nausea and vomiting after middle ear surgery: granisetron versus ramosetron

OBJECTIVE/HYPOTHESIS: Middle ear surgery is associated with a relatively high incidence of postoperative nausea and vomiting. This study was undertaken to compare the efficacy of ramosetron with granisetron for preventing nausea and vomiting after middle ear surgery. STUDY DESIGN: Prospective, randomized, double-blind study. METHODS: In a randomized, double-blind manner, 100 ASA I patients (69 women), aged 23 to 65 years, received either ramosetron 0.3 mg or granisetron 3 mg intravenously (n = 50 of each) immediately before the induction of anesthesia. A standard general anesthetic technique and postoperative analgesia were used. Postoperative nausea and vomiting and safety assessments were performed continuously during the first 24 hours (0-24 h) and the next 24 hours (24-48 h) after anesthesia. RESULTS: A complete response, defined as no nausea and vomiting and no need for another rescue medication, during the first 24 hours after anesthesia (0-24 h) occurred in 90% of patients receiving ramosetron and in 86% of patients receiving granisetron, respectively (P = .379); the corresponding incidence rates in the second 24 hours after anesthesia (24-48 h) were 90% and 66% (P = .003). No clinically important adverse events were observed in either group. CONCLUSION: Prophylactic use of ramosetron is more effective than granisetron for long-term prevention of nausea and vomiting after middle ear surgery.     

大鼠嗅球中凋亡相关基因蛋白和成纤维细胞因子表达的相 …

OBJECTIVE: To study the expression and distribution of apoptotic gene Bcl-2 and Bax on olfactory of rat, and its relation with the FGF and to investigate the mechanism of senile dysosmia. METHODS: Ten young (3 months) and ten senile rats (24 months) were used in this study. After the removal of the heads of these rats, olfactory bulb were immediately fixed with neutralized formalin, followed with paraffin-embedding, serial sectioning, immunohistochemiscal staining and microscopic observing. RESULTS: The positive expression rate of Bcl-2 and FGF on olfactory bulb in young rats was significantly stronger than that in senile rats (P < 0.01). The positive expression rate of Bax in senile rats was a little stronger than that in young rats, but the differences were not statistically significant. (P > 0.05) CONCLUSION: The expression of FGF and anti-apoptotic gene Bcl-2 on olfactory bulb decrease with the increase of age. This suggests neuron apoptosis on olfactory bulb are regulated by neurotrophic factor, and directly related with senile dysosmia. The mitral cell apoptosis as a result of FGF decreased on olfactory bulb may play a key role in the senile dysosmia.