白藜芦醇对化疗所致大鼠卵巢损伤的保护作用

目的 评估白藜芦醇(Res)在预防顺铂(CP)对大鼠卵巢损伤的作用。方法 40只雌性Wistar大鼠采用数字表法随机分为4组。在21天的实验期间,A组(对照组)不予以任何处理,B组(CP模型组)给予生理盐水,C组(低Res组)给予白藜芦醇25mg/(kg·d),D组(高Res组)给予白藜芦醇75mg/(kg·d)。在用药的第15天,除对照组,其余组均腹腔给予单次剂量的顺铂(5mg/kg)。顺铂注射后1周,用酶联免疫吸附(ELISA)法比较各组大鼠血清中雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)及抗苗勒管激素(AMH)浓度变化;行卵巢切除术,称量各组卵巢的湿质量;石蜡包埋卵巢,切片后苏木精-伊红(HE)染色观察卵泡发育和各级卵泡计数。结果 各组间血清E₂、FSH比较差异无统计学意义(P＞0.05)。与对照组比较,CP模型组大鼠血清AMH下降(P＜0.05);原始、初级、次级及成熟卵泡数量均减少(P＜0.05)。白藜芦醇低剂量、高剂量组与CP模型组比较,各级卵泡数目均增多,血清AMH升高(P＜0.05)。而白藜芦醇的低剂量和高剂量组比较,两者的AMH及各级卵泡数差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 白藜芦醇可以通过维持各级卵泡的数量来预防顺铂化疗引起的卵巢损伤。     

黄芪甲苷调节PI3K/Akt/mTOR信号对慢性间歇性低氧大鼠颏舌肌损伤及自噬反应的影响

目的 探究黄芪甲苷(astragalosideⅣ, ASⅣ)对磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin, PI₃K/Akt/mTOR)信号通路的调控作用以及对慢性间歇性低氧(chronic intermittent hypoxia, CIH)大鼠颏舌肌损伤及自噬反应的影响。方法 96只SD大鼠按照随机数字表法分为正常组,模型组,ASⅣ低、中、高剂量组,ASⅣ+PI₃K抑制剂(LY294002)组,每组各16只。除正常组外,其余5组建立CIH大鼠模型。实验结束后检测大鼠动脉血气指标[动脉血氧分压(arterial partial pressure of oxygen, PaO₂)、二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide, PaCO₂)、血氧饱和度(saturation of blood ox...     

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨排石冲剂对草酸钙肾结石大鼠的作用机制

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路在草酸钙结石形成中的作用机制及其在排石冲剂防治草酸钙肾结石中的影响.方法 将40只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、排石冲剂组和枸橼酸钾组,每组各10只.除正常组外,其他各组建立草酸钙结石模型.排石冲剂组...     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在肝细胞癌中的作用机制研究进展

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的异质性强、恶性程度高,患者的治疗效果差、预后生存期短。磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路是细胞内重要的调控信号通路之一,参与脂代谢、细胞自噬等过程。研究表明,HCC中的PI3K/Akt/mTOR信号通路高度活化,是新药研发的焦点之一。本文综述PI3K/Akt/mTOR信号通路在HCC中的作用机制研究进展,以期为HCC的药物研发提供理论依据。     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在骨关节炎中的研究进展

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是中老年人最常见的肌肉骨骼疾病之一,其导致的关节畸形严重影响患者生活质量.目前OA的发病机制仍不明确,多数学者认为与炎症环境中的化学信号分子有关.经典信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)参与多种疾病的增殖、凋亡及血管生...     

淫羊藿苷调控PI3K/Akt/mTOR通路对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢结构及功能的保护作用及机制

目的 探讨淫羊藿苷(ICA)对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢结构、功能的影响及可能作用机制。方法 从55只SPF级雌性SD大鼠中随机选取10只动情周期正常的大鼠作为对照组,剩余大鼠经腹腔注射环磷酰胺制备POI模型,成模大鼠随机分为模型组、ICA低(15 mg·kg^-1)、中(30 mg·kg^-1)、高(60 mg·kg^-1)剂量组,对照组及模型组大鼠每日灌胃等量生理盐水,连续28 d。计算各组大鼠卵巢湿重和卵巢指数;HE染色观察卵巢组织结构;TUNEL染色检测颗粒细胞凋亡率;ELISA法检测血清促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;RT-qPCR技术检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体S6蛋白激酶1(S6k1)mRNA相对表达量;Western blot法检测PI3K、Akt、mTOR和S6k1蛋白活性水平及B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)和C...     

Akt/mTOR信号通路蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的检测Akt/mTOR信号通路中Akt、mTOR蛋白的活性形式(p-Akt、p-mTOR)在胃癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测p-Akt、p-mTOR在93例胃癌组织及40例癌旁组织中的表达情况,结合患者临床病理资料进行分析。结果胃癌组织中,p-Akt、p-mTOR阳性表达者分别为51例(54.8%)和53例(57.0%),均显著高于癌旁组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。不同分化程度、侵犯深度、淋巴结转移、TNM分期的胃癌组织中,这两种蛋白的阳性表达率间差异均有统计学意义(P<0.05),而不同年龄、性别的胃癌组织中的这两种蛋白的表达间差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌组织中p-Akt蛋白表达与p-mTOR蛋白表达呈正相关(r=0.327,P<0.01)。结论 Akt/mTOR信号通路蛋白在胃癌组织中的阳性表达与肿瘤进展相关,可能成为预测胃癌转移的新分子标志物和治疗靶点。     

基于p53/mTOR信号通路探究电针干预缺血性脑卒中大鼠血管新生的机制

目的 探讨电针干预对缺血性脑卒中大鼠血管新生的影响及其相关机制.方法 实验设置假手术组(仅切颈、分离血管)、缺血性脑卒中组(造模)和电针组(造模+电针治疗,每日治疗1次,治疗7d结束),每组20只.测定大鼠电针治疗前、治疗结束后24 h内神经行为学评分;HE染色观察脑组织病变;测定微血管密度;Western blot法...     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在常见妇科疾病中的研究进展

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K-Akt）信号通路是细胞内重要信号转导通路,也是机体内一条重要的信号通路,在细胞生长、增殖、分化和蛋白合成等过程中起重要作用。子宫内膜癌、子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征、卵巢癌等属于常见的女性生殖系统疾病,与机体内磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路和雌激素水平异常存在一定的相关性。本文就PI3K/Akt/mTOR信号通路在常见妇科疾病中的作用作一综述,以期为常见妇科疾病靶向治疗提供新思路。

     

PI3K/AKT/mTOR信号通路在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌的发生过程中存在磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/m TOR)信号通路的激活,该通路的异常激活可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进肿瘤侵袭和转移。PI3K/AKT/m TOR通路靶向抑制剂对卵巢癌显示出一定的疗效,目前该靶向药物的临床试验已开展,并显示出良好的安全性和有效性。针对PI3K/AKT/m TOR的靶向药物将为卵巢癌的治疗指明新方向。     

柚皮素通过激活mTOR/p70S6K信号通路减轻胰岛素抵抗 并改善H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤

目的：观察柚皮素（naringenin,NAR）对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的影响,并探索其机制。方法：通过CCK-8检测细胞存活率,筛选出H2O2的半数致死浓度,用该浓度H2O2同时加入20、40、80 μmol/L柚皮素处理SH-SY5Y细胞4 h,通过CCK-8检测细胞存活率,选择适宜柚皮素浓度。按所选H2O2和柚皮素浓度进行后续实验。将实验分为3组。control组：细胞不进行任何干预处理;H2O2组：只加入600 μmol/L H2O2;H2O2+NAR组：同时加入600 μmol/L H2O2与40 μmol/L柚皮素。4 h后,通过ANNEXIN V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxy－gen species,ROS）,Western blot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、核糖体蛋白S6激酶（p70 ribosomal S6 kinase,p70S6K）,以及各自磷酸化形式蛋白[p-mTOR（Ser2448）、p-p70S6K（Thr389）],用胰岛素受体底物-1（insulin receptor substrate 1,IRS1）及其丝氨酸636+639位点磷酸化[p-IRS1（Ser636+Ser639）]蛋白的表达来观察胰岛素抵抗（insulin re－sistance,IR）。结果：H2O2降低SH-SY5Y细胞的存活率,呈剂量依赖性,600 μmol/L浓度为半数致死剂量。柚皮素明显降低了H2O2诱导的SH-SY5Y细胞死亡,最适剂量为40 μmol/L。与control组比,H2O2明显增加了细胞凋亡率、胞内ROS的产生,降低了p-mTOR（Ser2448）、p-p70S6K（Thr389）的表达,增加了p-IRS1（Ser636+Ser639）蛋白的表达（P<0.05）;加入柚皮素后,相对于H2O2组,上述作用明显减弱（P<0.05）。结论：在体外氧化应激模型中,柚皮素能明显降低细胞内ROS的积累,提高细胞的存活率。其机制可能与激活mTOR/p70S6K信号通路、改善IR有关。     

PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂在转移性结直肠癌中的研究进展

转移性结直肠癌(m CRC)一直是临床治疗的难点,而分子靶向药物的出现,有效改善了m CRC患者的生存期,但是已在临床推广应用的分子靶向药物耐药性的产生却阻碍了基因靶向治疗的进一步发展。磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路抑制剂作为近年来新出现的靶向药物,为各种常见肿瘤提供了新的治疗方案。目前PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂的抗肿瘤特性已得到临床认可,但由于信号通路相互交联的特点,特别是针对信号通路中的突变或过表达的情况,联合多细胞毒性药物或多通路抑制方案有可能解决m CRC耐药的局面。     

党参远志散微乳调节PI3K/Akt/mTOR通路对皮质性痴呆小鼠神经元凋亡的影响

目的 基于PI3K/AKT/mTOR信号通路,研究党参远志散微乳对D-半乳糖联合亚硝酸钠所致皮质性痴呆小鼠海马神经元凋亡的影响及作用机制。方法 将60只小鼠随机分为6组,空白组、模型组、空白微乳组、脑复康组、党参远志散微乳低剂量组、党参远志散微乳高剂量组,每组10只。除空白组外,其余组均 ip D-半乳糖和NaNO₂制备皮质性痴呆小鼠模型,分别 ig 蒸馏水、空白微乳、脑复康、党参远志散微乳低剂量和党参远志散微乳高剂量6周。Morris水迷宫实验进行行为学考察;HE染色观察海马皮质病理形态学改变;Nissl染色观察海马皮质神经元尼氏小体变化;免疫组织化学染色观察海马皮质PI3K、AKT、mTOR蛋白表达情况;利用DCX抗体特异性标记新生神经元胞质及突起,免疫荧光观察海马皮质DCX表达情况。结果 与模型组比较党参远志散微乳低、高剂量可以显著改善皮质性痴呆小鼠学习记忆能力,海马皮质病理形态明显改善,神经元胞体圆整密集,神经元尼氏小体含量丰富,海马皮质PI3K、AKT、mTOR蛋白表达明显降低,DCX蛋白表达明显增高,新生神经元显著增加,分布密集,胞体伸出突触增多,细胞多形性增加。结论 党参远志散微乳低、高剂量可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,诱导自噬,减轻神经元损伤,诱导神经元新生,改善D-半乳糖和亚硝酸钠所致的皮质性痴呆模型小鼠的学习记忆能力。权衡效毒,选择使用党参远志散微乳低剂量,即临床等效剂量。     

细胞自噬与PI3K/Akt/mTOR信号通路在黑色素瘤耐药性中的研究进展

黑色素瘤是一种恶性皮肤肿瘤,对手术、放疗、化疗等治疗的反应差,虽然基因靶向药物对黑色素瘤有明显的治疗效果,但多数患者很快产生耐药,限制了靶向药物在黑色素瘤临床治疗中的应用.因此,深入研究黑色素瘤细胞产生耐药的分子机制非常必要.细胞自噬的异常是肿瘤发生耐药的一种重要机制,磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素...     

食源性肥胖大鼠下丘脑Tsc1启动子区甲基化率、mTOR表达变化

目的 观察食源性肥胖大鼠下丘脑结节性硬化症基因1(tuberous sclerosis complex 1,Tsc1)启动子区甲基化率及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的表达.方法 16只雄性SD大鼠分为高脂喂养组和基础饲料喂养组(对照组),每组8只,共喂养12周.测定两组大鼠体质量、腹腔脂肪量、腹腔脂肪/体质量比值,采用重亚硫酸盐的测序法检测Tsc1启动子甲基化,RT-PCR、Western blot分别检测mTORmRNA和蛋白表达.结果 高脂组大鼠体质量、腹腔脂肪量、腹腔脂肪/体质量比均高于对照组(P＜0.05).两组大鼠下丘脑Tsc1启动子区均有11个位点可被甲基化,食源性肥胖组甲基化率(94.50％±4.66％)高于对照组(86.60％±3.49％,P＜0.002),mTOR mRNA和蛋白表达均高于对照组(P＜0.05).结论 食源性肥胖大鼠下丘脑Tsc1基因启动子甲基化率增加,其下游基因mTOR表达上调,可能参与了肥胖的发生.     

附萸汤改善心力衰竭大鼠的心室重构：基于抑制AMPK/mTOR通路介导的细胞自噬

目的 探究附萸汤对心力衰竭大鼠心室重构的影响及其与AMPK/mTOR通路介导细胞自噬的关系。方法 采用冠状动脉左前降支结扎法建立心力衰竭大鼠模型,将30只建模成功大鼠分成模型组（Model）、附萸汤治疗组（Fuyu Soup）、附萸汤治疗+AMPK激动剂组（Fuyu Soup+EX229）,以Wistar大鼠为假手术组（Sham）,10只/组。药物干预8周后,测定心室功能及心室重构指标变化。TTC染色检测心肌梗死面积,HE和Masson观察心肌组织病理学变化,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,Western blot检测心肌组织p-AMPK、p-mTOR、LC3-Ⅱ、Beclin1和p62蛋白表达。结果 与Sham组相比,Model组大鼠舒张末期左心室容积（LVEDV）、收缩末期左心室容积（LVESV）、左心室指数（LVMI）增加（P<0.01）,左心室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、球形指数（SI）降低（P<0.01）,心肌梗死面积增加,心肌组织病理损伤及纤维化程度加重,心肌细胞凋亡率,p-AMPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1表达升高（P<...     

SH2B1对肝癌细胞增殖、凋亡及Akt/mTOR通路的影响

目的观察Src同源性2b衔接蛋白1(SH2B1)在肝癌细胞中表达情况,以及对肝癌细胞增殖、凋亡及蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Akt/m TOR)信号通路的影响。方法通过荧光实时定量聚合酶链反应法检测人正常肝细胞株QSG-7701及肝癌细胞株Hep G2中SH2B1 mRNA的表达情况,采用免疫印迹法(Western blot法)检测SH2B1蛋白表达,采用短发夹RNA(shRNA)慢病毒干扰技术构建沉默SH2B1基因的人肝癌细胞Hep G2稳定转染细胞株,通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测Hep G2细胞增殖能力,采用磷脂酰丝氨酸蛋白抗体/碘化丙啶(Annexin V/PI)双染流式细胞术检测Hep G2细胞凋亡,采用Western blot法测定凋亡细胞相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3以及Akt/m TOR通路蛋白表达变化。结果与正常细胞相比,肝癌细胞中SH2B1 mRNA、SH2B1蛋白相对表达量显著升高(P <0. 05);与空白组、NC shRNA组相比,SH2B1 shRNA组SH2B1 mRNA、SH2B1蛋白表达显著降低(P <0. 05); CCK-8试验显示,与NC shRNA组和空白组相比,SH2B1 shRNA组转染48 h后OD值显著降低(P <0. 05);与空白组、NC shRNA组相比,SH2B1 shRNA组细胞凋亡率显著升高(P <0. 05);与空白组、NC shRNA组相比,SH2B1 shRNA组细胞中Bax、caspase-3蛋白水平显著上升(P <0. 05),Bcl-2蛋白水平下降(P <0. 05);与空白组和NC shRNA组相比,SH2B1 shRNA组p-AKT、m TOR蛋白水平明显降低(P <0. 05)。结论 SH2B1在肝癌细胞株Hep G2中高表达,沉默SH2B1表达可能通过抑制Akt/m TOR信号通路活化,抑制肝癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

沉默CENP－N基因表达对胃癌细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的 探究着丝粒蛋白-N(CENP-N)对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能机制。方法 利用基因表达谱交互式分析网站(GEPIA)中的癌症基因组图谱(TCGA)数据分析CENP-N基因在503例胃癌组织和125例癌旁组织中的表达水平;以收集的143例胃癌患者癌组织、癌旁组织以及人胃癌细胞株SNU-1、HS-746T、AGS、MGC-803及人胃黏膜细胞GES1为研究对象,qRT-PCR法检测CENP-N mRNA水平,Western blot检测CENP-N蛋白表达;体外培养胃癌SNU-1细胞株,分为空白对照组、siRNA-NC组(阴性对照组)、CENP-N-siRNA组(沉默CENP-N表达组)、通路激活剂组(CENP-N-siRNA+740Y-P组)。qRT-PCR法检测CENP-N mRNA水平;CCK-8法、流式细胞仪分别检测细胞增殖、凋亡情况;免疫印迹法检测细胞增殖相关核抗原(PCNA)、凋亡蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]及磷脂肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路相关蛋白表达情况。结果 ...     

基于PI3K/AKT/mTOR通路探讨白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠的保护作用及机制

目的 基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路关键因子探讨白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠的保护作用及机制。方法 将40只雄性SD大鼠按照体质量随机区组分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍总苷组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠连续6周腹腔注射20%四氯化碳橄榄油溶液,并灌胃甲状腺片(30 mg/kg)以制备化学性肝损伤肝阴虚证病证结合大鼠模型。造模期间,空白组、模型组大鼠每天灌胃蒸馏水,一贯煎组及白芍总苷组大鼠分别灌胃一贯煎水煎液(635 mg/kg)及白芍总苷混悬液(50 mg/kg),连续6周。给药期间每2周检测大鼠体质量、肛温;给药结束后观察大鼠24 h摄食量和摄水量、舌面湿度;采用酶联免疫吸附测定法检测血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)含量,并计算cAMP/cGMP;采用比色法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶...     

益气活血方对心肌缺血大鼠Akt/mTOR信号通路的影响

目的依托大鼠心肌缺血模型,探讨蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(Akt/m TOR)信号通路在心肌中的表达及益气活血方对其的作用机制。方法 SPF级雄性SD大鼠随机分为模型组、培哚普利组、芪参益气滴丸组、益气活血方组和假手术组,结扎左冠状动脉前降支构建心肌梗死模型,术后第2天灌胃给药。以第7、28天为观测时间点。超声检测各组大鼠心脏功能和结构的变化,HE染色观察心肌病理形态改变,Western blot、RT-PCR法和免疫组化法检测大鼠心肌梗死区边缘Akt、m TOR及磷酸化表达水平。结果第7、28天,与假手术组相比,模型组大鼠心脏左室射血分数(LVEF)、左室短轴率(LVFS)显著降低(P0.01),第7天模型组大鼠左室收缩末期容积(LVESV)显著升高(P0.01),第28天模型组大鼠LVESV和左室舒张末期容积(LVEDV)显著增大(P0.01);与模型组相比,各给药组第28天LVEF、LVFS升高,LVEDV和LVESV显著降低(P0.01)。模型组梗死区边缘室壁变薄,心肌细胞数量减少,心肌细胞排列紊乱,炎性细胞浸润;各给药组梗死区边缘心肌细胞排列紊乱,心肌细胞数量减少。模型组磷酸化Akt(p-Akt)/Akt、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)/m TOR值增高(P0.05),Akt、m TOR mRNA表达显著增高(P0.01),p-Akt、p-m TOR阳性细胞率明显增高(P0.01);各给药组p-Akt/Akt、p-m TOR/m TOR比值增高(P0.05),Akt、m TOR m-RNA表达增强(P0.05或P0.01),各给药组均可明显提高pAkt、p-m TOR阳性细胞率水平(P0.05)。结论益气活血方能够改善心肌缺血大鼠心脏功能,可能通过激活心脏自我保护机制Akt/m TOR信号通路产生保护心肌细胞的作用。