Per1基因对口腔鳞癌细胞增殖侵袭和迁移的影响

目的:探讨Per1基因通过Wnt/β-catenin信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法:培养人口腔鳞癌细胞SCC-15,将si-Per1和si-NC转染至SCC-15细胞,作为si-Per1组和si-NC组.RT-qPCR检测细胞Per1基因表达水平,MTT检测细胞增殖能力,Transwell小...     

干扰素调节因子1对舌鳞癌细胞增殖侵袭和迁移的影响

目的 研究干扰素调节因子对舌鳞癌细胞的侵袭和迁移的影响.方法 采用实时定量PCR和免疫组化检测IRF1在舌鳞癌组织中的表达水平,通过构建IRF1的过表达和IRF1沉默的质粒,在舌鳞癌细胞Tca8113中过表达IRF1或降低IRF1的表达水平后,检测其对Tca8113细胞增殖,侵袭和迁移的影响.结果 IRF1在舌鳞癌组织...     

miR⁃448通过下调SPACRL1促进口腔鳞癌增殖及迁移能力的研究

目的：探讨微小RNA?448（miR?448）对口腔鳞癌细胞增殖调控作用,筛选并验证相关靶基因。方法：RT?qPCR检测miR?448在人口腔鳞癌临床标本中表达;miR?448抑制物转染口腔鳞癌细胞系Cal?27细胞,MTT实验研究miR?448抑制物对细胞增殖能力的影响;细胞划痕实验检测miR?448抑制物对细胞迁移能力的影响。3种基因预测软件筛选出miR?448的可能下游靶基因,实验验证miR?448对靶基因的调控作用。结果：RT?qPCR分析发现miR?448在15对OSCC组织内表达显著升高。与对照组相比,转染miR?448抑制物后,Cal?27细胞增殖及迁移能力明显下降;Western blot、RT?qPCR结果显示SPARCL1基因的表达量升高;荧光素酶报告基因实验确定miR?448与SPARCL1基因在3′ UTR区存在位点结合。结论：miR?448在人口腔鳞癌临床标本中呈高表达。miR?448与SPARCL1?3′ UTR的结合,下调 SPARCL1的表达,在口腔鳞癌细胞中发挥癌基因的作用,促进肿瘤细胞的增殖与迁移。     

基质金属蛋白酶1在云南汉族口腔鳞癌发病风险中的相关性

目的 探讨基质金属蛋白酶 (MMP) 1基因多态性与云南汉族口腔鳞癌发病风险的相关性, 为临床上口腔鳞癌易感基因的发现与筛选提供实验参考.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 (PCR-RFLP) 方法, 检测口腔鳞癌患者与健康对照组个体的MMP1启动子-1607 1G/2G单核苷酸多态性 (SNP) , 获得口腔鳞癌患者的基因型, 与健康对照组进行比较.结果 MMP1基因型在口腔鳞癌病例组和健康对照组的分布:健康对照组和病例组在MMP1启动子-1607 1G/2G中1G/1G、2G/2G、1G/2G的基因型频率分别为11.11%、37.04%、51.85%和5.66%、43.40%、50.94%.MMP1SNP与口腔鳞癌发病风险比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 分别与高、中、低分化口腔鳞癌发病风险比较差异无统计学意义 (P>0.05) .结论 MMP1启动子-1607 1G/2G SNP可能与云南汉族口腔鳞癌发病风险无相关性.     

口腔鳞癌组织中LINC01605的表达及对细胞侵袭、迁移的影响

目的：探究LINC01605在口腔鳞癌组织中的表达及对细胞侵袭、迁移的影响。方法：收集口腔鳞癌病人的口腔鳞癌组织及相对应的癌旁组织标本各40例,分析口腔鳞癌组织中LINC01605的表达与临床病理特征的关系。将处于对数期的口腔鳞癌细胞CAL-27随机分为：CK组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01605组(转染si-LINC01605)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01605组(转染pcDNA-LINC01605);qRT-PCR检测组织和细胞中LINC01605表达;CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;Western blotting检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、神经型钙黏素(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达;体内移植瘤实验检测肿瘤生长情况。结果：口腔鳞癌组织中LINC01605表达高于癌旁组织(P<0.01);LINC01605表达与TNM分期、分化程度、淋巴结...     

SMARCA5在口腔鳞癌中的表达及其对HSC4细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨染色质A5的SWI/SNF相关基质关联肌动蛋白依赖调节因子(SMARCA5)在口腔鳞癌(OSCC)中的表达水平及其对人OSCC细胞系HSC4增殖、迁移和侵袭的影响。方法 从高通量基因表达(GEO)数据库中分析OSCC组织中SMARCA5 mRNA表达情况,并分析其与OSCC患者预后的关系。慢病毒shRNA沉默HSC4细胞中SMARCA5的表达,实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)验证沉默效果;将细胞分为Control组(不做转染处理,空白对照)、sh-NC组(转染无序列质粒载体慢病毒,阴性对照)和sh-SMARCA5组(转染沉默SMARCA5质粒载体慢病毒),CCK-8实验检测HSC4细胞增殖能力的变化,细胞划痕实验检测HSC4细胞迁移能力的变化,Transwell实验检测HSC4细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 SMARCA5在OSCC组织中的表达水平明显高于人正常口腔组织(P<0.05);SMARCA5高表达的患者总生存率低于低表达的患者(P<0.05)。sh-SMARCA5组HSC4细胞的增殖、迁移和侵袭能力较sh-NC组明显降低(P<0.05)。...     

U0126对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖、迁移及侵袭的影响

[目的]探讨U0126对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖、迁移及侵袭的影响.[方法]用不同浓度MEK/ERK抑制剂U0126(25,50,100μmol/L)处理Tca8113细胞24,48,72 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制情况,划痕实验检测细胞迁移距离,Transwell实验检测48 h时的细胞侵袭率,细胞免疫荧光染色和Western blot法检测48h时的细胞ERK1/2,p-ERK1/2,MEKK1,p-MEKK1在细胞内定位和蛋白表达情况及E-cadherin和Vimentin表达水平.[结果]U0126对细胞的增殖、迁移和侵袭具有明显的抑制作用(P<0.01),且呈现出浓度和时间依赖性;细胞中磷酸化的ERK1/2主要表达在细胞核膜和核内,U0126对磷酸化的ERK1/2表达具有明显的抑制作用(P<0.01);与对照组比较,U0126各剂量组E-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),而Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.01),且均呈现出浓度依赖性.[结论]U0126可抑制Tca8113细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制认为可能与抑制ERK1/2活化、促进E-cadherin表达及抑制Vimentin表达有关系.     

口腔鳞癌中MMP-1、MMP-2、uPA的表达与肿瘤侵袭和转移的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-1、2（MMP-1、MMP-2）及尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）的表达与口腔鳞癌侵袭和转移的关系。方法选取我院收治的60例口腔鳞癌患者,用免疫组化检测癌旁正常组织和癌组织中MMP-1、MM P-2、uPA的含量并进行比较。结果口腔鳞癌患者肿瘤组织与口腔癌旁正常组织MMP-1、MMP-2、uPA的含量有统计学差异（P〈0.05）。结论口腔鳞癌中MMP-1、MMP-2、uPA的表达与肿瘤的侵袭、转移有着密切的关系,有可能成为评价肿瘤侵袭、转移程度的指标。     

NPM1促进骨肉瘤细胞迁移、增殖、侵袭的体外研究

目的 探讨核仁磷酸蛋白1 (NPM1)对骨肉瘤细胞(143B及U2细胞)恶性表型迁移、增殖和侵袭能力的影响。方法 采用Oncomine数据库查询NPM1在骨肉瘤中的表达水平;构建重组慢病毒载体,制成过表达NPM1慢病毒(Lv/ShNPM1)、阴性对照慢病毒(Lv/negative)和沉默NPM1慢病毒(Lv/ShNPM1)。分别转染人源骨肉瘤细胞系(143B及U2细胞),分为Lv/NPM1组、Lv/ShNPM1组、NC (Lv/negative)组。运用Western blot法检测各组别中NPM1蛋白的表达水平。分别运用CCK8法、Wound healing法、Transwell invasion法检测各组细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力。结果 Oncomine数据库查询结果显示,NPM1在骨肉瘤中呈高表达水平;检测各组中NPM1蛋白表达的结果显示：与NC组比较,Lv/ShNPM1组中NPM1蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);U2-OS细胞中NC组、Lv/NPM1组和Lv/ShNPM1组细胞迁移率分别为(49.7±3.3)%、(64.1±7.4)%、(24...     

干扰整合素转接激酶表达对口腔鳞癌细胞迁移侵袭影响研究

目的 研究干扰整合素转接激酶(ILK)表达对口腔鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响及机制。方法 以口腔鳞癌SCC-25细胞为研究对象,细胞转染小干扰RNA阴性对照(siRNA control)和ILK小干扰RNA(ILK siRNA)分别记为si-NC组和ILK siRNA组,同时以没有转染的SCC-25细胞作为对照组。RT-PCR和Western blot法检测转染效果;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;细胞划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室检测细胞侵袭;Western blot法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达。结果 si-NC组ILK mRNA水平和蛋白水平、细胞存活率、细胞迁移率、细胞侵袭数目以及细胞中的MMP-9、MMP-2蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ILK siRNA组ILK mRNA水平和蛋白水平、细胞存活率、细胞迁移率、细胞侵袭数目和细胞中MMP-2、MMP-9蛋白表达水平明显低于对照组和si-NC组(P<0.05)。结论 干扰ILK能够下调口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。     

PD-L1对肝细胞癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的 探讨程序性死亡配体(PD-L1)在肝癌细胞增殖、侵袭、迁移中的作用。 方法 转染有效的PD-L1基因siRNA干扰片段进入人肝细胞癌HepG2细胞中,下调细胞中PD-L1表达。采用荧光定量PCR法检测HepG2细胞中PD-L1基因表达情况,采用Western blotting法检测HepG2细胞中PD-L1蛋白表达情况。通过MTT实验观察其对HepG2细胞增殖能力的影响,采用细胞划痕实验检测细胞融合率,采用Transwell小室进行侵袭实验,观察其对HepG2细胞迁移及侵袭能力影响。 结果 下调PD-L1后,HepG2细胞PD-L1基因表达量、PD-L1蛋白表达量和细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力均明显低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.01),阴性对照组和正常对照组上述指标差异均无统计学意义(P＞0.05)。 结论 下调PD-L1后,肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力有一定程度下降,PD-L1可能成为肝细胞肝癌免疫治疗中的一个新基因靶位。      

INI1调节胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力的机制研究

目的：探讨INI1在胃癌进展中的作用及其调节胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力的相关机制。 方法：以荧光定量RT-PCR和Western-blot技术检测胃癌、癌旁组织的INI1表达情况并进行比较;将INI1-GFP真核表达质粒转染人胃癌SGC7901细胞株,MTT法检测肿瘤细胞增殖活性、流式细胞术检测细胞周期,以TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划伤试验和侵袭小室试验检测细胞侵袭转移能力。同时,用荧光定量RT-PCR和Western-blot技术检测转染前后细胞株的INI1水平,检测增殖相关基因P16、P21、Cyclin D1、Cyclin A水平,检测凋亡相关基因P53、Bax、Bcl2、Caspase3水平和侵袭相关基因ICAM1、MMP2、MMP9、TIMP1水平。 结果：胃癌组织的INI1表达水平低于癌旁组织。INI1-GFP真核表达质粒转染人胃癌SGC7901细胞株后细胞的增殖和侵袭能力受到抑制、凋亡能力及G0/G1期细胞增高。转染后INI1和P16、P21、P53、Bax、TIMP1表达增高,Cyclin D1、Cyclin A、Bcl2、ICAM1、MMP2、MMP9表达下调,而Caspase3表达无明显变化。 结论：INI1在胃癌癌变、进展中发挥重要作用,这种作用是通过调节胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭能力而实现的。     

siRNA沉默Msi1表达对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法针对Msi1基因mRNA序列设计合成siRNA,转染人宫颈癌Hela细胞;实验分Msi1siRNA组、空白对照组、脂质体组及阴性对照组;通过RT-PCR法检测Msi1基因在mRNA水平的表达;分别利用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色试验、群体倍增时间及平皿克隆实验分析干扰Msi1基因对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制效应;通过细胞划痕实验观察干扰Msi1对细胞迁移能力的影响;利用Transwell小室实验观察干扰Msi1对细胞侵袭能力的影响。结果Msi1siRNA能有效抑制人宫颈癌Hela细胞中Msi1基因的表达;Msi1siRNA转染Hela细胞24、48、72h后,与其他各组比较,Msi1siRNA组Hela细胞的生长、增殖速度明显减缓（均P＜0.05）。空白对照组Hela细胞群体倍增时间为（20.18±0.01）h,而干扰Msi1基因处理后的Hela细胞,群体倍增时间延长至（35.68±0.04）h（P＜0.05）;同时平皿克隆实验结果发现,Msi1siRNA处理后的Hela细胞与其他各组相比,Hela细胞生长明显减慢（均P＜0.05）;细胞划痕实验和Transwell小室实验分别显示处理后的Hela细胞其迁移和侵袭能力均明显下降,与其他各组相比差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭有负性调节作用。     

Cyclin D1与口腔鳞癌关系的研究进展

口腔鳞癌细胞的基本生物学特征是细胞增殖与分化失控.细胞周期素D1(cyclin D1)在细胞周期的正常调控中起重要作用,其功能异常与口腔鳞癌发生发展密切相关.现综述Cyclin D1与口腔鳞癌研究的最新进展.     

PD-L1对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨程序性细胞死亡配体1 (PD-L1)在口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞中的表达及其对OSCC CAL27细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。方法：采用Western blotting法检测口腔上皮HOK细胞和OSCC CAL27、TCA8113和SCC15细胞中PD-L1蛋白表达水平。免疫荧光染色法检测CAL27细胞中PD-L1蛋白表达和定位情况。将CAL27细胞分为对照组（转染si-NC）和si-PD-L1组（转染si-PD-L1）,Western blotting法检测2组细胞干扰效率,CCK-8法检测不同时间点2组细胞增殖活性,平板克隆实验检测2组细胞克隆形成数,细胞划痕愈合实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测2组细胞中迁移和侵袭细胞数。结果：OSCC细胞中PD-L1蛋白表达水平均高于HOK细胞（P<0.05或P<0.01）, PD-L1在CAL27细胞的细胞质和细胞核中均有表达。CCK-8法和平板克隆实验,与对照组比较,不同时间点si-PD-L1组CAL27细胞增殖活性明显降低（P<0.05或P<0.01）,克隆形成...     

ICAM—1在口腔鳞癌中的表达

目的：探讨细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）在口腔鳞癌中的表达及间谍。方法：用ＡＰＡＡＰ免疫组织化学方法检测ＩＣＡＭ－１在３７例口腔鳞癌原发灶及９例转移淋巴结中的表达，并分析其与临床参数的关系。结果：原发肿瘤最大直径≥３ｃｍ，仅５例弱表达；直径〈３ｃｍ，７８．９％表达。９例有区域淋巴结转移的原发灶及转移淋巴结均不表达ＩＣＡＭ－１；无转移的原发灶７１．４％表达。     

circBACH1靶向miR-4500调控口腔鳞状细胞癌HSC3细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

目的：探讨circBACH1对口腔鳞状细胞癌HSC3细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法：体外培养HSC3细胞,分为si-NC组、si-circBACH1组、miR-NC组、miR-4500组、si-circBACH1+anti-miR-NC组、si-circBACH1+anti-miR-4500组,分别转染si-NC、si-circBACH1、miR-NC、miR-4500 mimics、si-circBACH1与anti-miR-NC、si-circBACH1与anti-miR-4500。qRT-PCR检测口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织及各组HSC3细胞中circBACH1、miR-4500的表达量;CCK-8、平板克隆形成实验分别检测细胞增殖及克隆形成能力;划痕实验与Transwell小室实验分别检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测circBACH1对miR-4500的靶向调控作用;Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin的蛋白表达量。结果：与癌旁组织比较,口腔鳞状细胞癌组织中circBACH1的表达量明显升高(P<0...     

LncRNA PCBP1-AS1对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA PCBP1-AS1（LncRNA PCBP1-AS1）对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、侵袭及凋亡的影响及其可能机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测OSCC细胞中PCBP1-AS1的表达水平;采用Lipofectamine 2000将pcDNA-PCBP1-AS1及pcDNA-control转染入口腔鳞癌CAL-27细胞;甲基噻唑基四唑实验检测CAL-27细胞的增殖能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞的凋亡率;蛋白免疫印迹法检测细胞周期依赖蛋白激酶1（CDK1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）、Janus激酶2（JAK2）/信号转导与转录激活因子3（STAT3）信号通路相关蛋白表达。结果与正常口腔上皮细胞比较,OSCC细胞CAL-27、Tca8113、KB中PCBP1-AS1的表达水平显著降低（P < 0.01）;PCBP1-AS1过表达可显著抑制CAL-27细胞的增殖、侵袭（P < 0.01）,促进细胞凋亡（P < 0.01）;PCBP1-AS1过表达可显著抑制CDK1、MMP-2、Bcl2、p-JAK2、p-STAT3的蛋白表达（P < 0.01）,而促进Bax的蛋白表达（P < 0.01）。结论PCBP1-AS1过表达可抑制OSCC细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡,其作用可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。