扶正胶囊提取物对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠免疫调节作用研究

[目的] 探讨扶正胶囊提取物对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。[方法] 将60只昆明小鼠进行随机分组,每组10只,分为空白组、模型组、阳性对照组以及扶正胶囊提取物低、中、高剂量组。采用环磷酰胺腹腔注射建立小鼠免疫功能低下模型,检测各组小鼠的胸腺指数和脾脏指数、单核细胞吞噬能力、血清中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素-17（IL-17）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）水平和脾T淋巴细胞亚群CD3⁺T淋巴细胞（CD3⁺）、CD4⁺T淋巴细胞（CD4⁺）、CD8⁺T淋巴细胞（CD8⁺）的分布与比例。[结果] 扶正胶囊提取物能提升由环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数和脾脏指数,增强单核细胞吞噬功能,显著提高小鼠细胞免疫因子IL-4、IL-10、IFN-γ含量,降低IL-17、TNF-α含量,上调脾淋巴细胞亚群CD3⁺CD4⁺的表达程度和提升CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺比值。[结论] 扶正胶囊提取物能够提升环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠的免疫功能。     

急性髓系白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的水平变化及临床意义

目的 检测急性髓系白血病（AML）患者外周血T淋巴细胞亚群水平的变化,并探讨其临床意义。方法 选择68例初诊AML患者及76例健康体检者（健康对照组）作为研究对象。根据《成人急性髓系白血病（非急性早幼粒细胞白血病）中国诊疗指南（2017年版）》对AML患者进行预后危险度分层,将患者分为高危组（20例）和非高危组（48例）。经标准化学治疗方案治疗后对AML患者进行疗效评价。采集AML患者及健康体检者外周血,用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群的水平。结果 AML患者外周血T淋巴细胞CD3⁺细胞比例、CD4⁺细胞比例及CD4⁺/CD8⁺细胞比值均低于健康对照组（P均<0.05）,调节性T淋巴细胞（Treg细胞）比例高于健康对照组（P<0.05）。与非高危AML患者比较,高危AML患者外周血T淋巴细胞CD3⁺细胞比例、CD4⁺细胞比例及CD4⁺/CD8⁺细胞比值均降低（P均<0.05）,Treg细胞比例升高（P<0.05）。与未获得完全缓解的AML患者（27例）比较,获得完全缓解的AML患者（41例）外周血T淋巴细胞CD3⁺细胞比例、CD4⁺细胞比例及CD4⁺/CD8⁺细胞比值均升高（P均<0.05）,Treg细胞比例降低（P<0.05）。结论 观察AML患者T淋巴细胞亚群及CD4⁺/CD8⁺细胞比值变化有助于监测AML患者的病情。     

异基因造血干细胞移植后小鼠共刺激分子表达与急性移植物抗宿主病的关系

目的 探究异基因造血干细胞移植后小鼠共刺激分子表达及其与急性移植物抗宿主病（aGVHD）发病的关系。方法 供体为5只C57BL/6J（H2KD^-H2KB⁺）雄性小鼠,受体为30只CB6F1（H2KD⁺H2KB⁺）雌性小鼠。将受体小鼠随机分为单纯照射组、骨髓移植组和aGVHD组,每组10只。单纯照射组：受体小鼠接受γ射线照射后不注射任何细胞;骨髓移植组：受体小鼠接受γ射线照射后注射5×10⁶个供体来源去T淋巴细胞的骨髓有核细胞;aGVHD组：受体小鼠接受γ射线照射后,同时注射5×10⁶个供体来源去T淋巴细胞的骨髓有核细胞和3×10⁷个供体来源脾细胞。采用log-rank生存曲线分析各组小鼠移植后生存情况。分别在移植后7、14、21、28 d采用流式细胞术检测骨髓移植组和aGVHD组小鼠外周血CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞表面共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）、程序性死亡蛋白1（PD-1）、可诱导共刺激分子（ICOS）和CD28的表达情况,以及移植后21 d两组小鼠脾组织CD4⁺T淋巴细胞内白细胞介素（IL）-17、γ干扰素、IL-4的表达情况,并在移植后21 d采用3,3''-二氨基联苯胺（DAB）染色检测两组小鼠结肠组织共刺激分子配体的表达情况。结果 单纯照射组受体小鼠均在γ射线照射后19 d内死亡;骨髓移植组小鼠在γ射线照射后均未出现aGVHD症状,30 d内均存活;aGVHD组小鼠在γ射线照射后出现aGVHD症状的时间为14（11~18）d,生存时间为22（13~30）d。随着时间的推移,aGVHD组小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞表面CTLA-4、PD-1表达在移植后均呈下降趋势,ICOS、CD28表达均呈上升趋势。在移植后28 d时aGVHD组小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞表面CTLA-4、PD-1表达均低于骨髓移植组,ICOS、CD28表达均高于骨髓移植组,差异均有统计学意义（P均<0.05）。DAB染色结果示,骨髓移植组结肠组织CD80、ICOS配体（ICOSL）、PD-1配体（PD-L1）表达均为阴性,aGVHD组结肠组织CD80、ICOSL、PD-L1阳性表达率分别为40%、80%、80%。与骨髓移植组比较,aGVHD组小鼠脾组织CD4⁺T淋巴细胞内IL-17、γ干扰素表达均增加,IL-4表达减少,差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 异基因造血干细胞移植小鼠发生aGVHD后,共刺激分子CTLA-4表达随时间推移逐渐降低。CTLA-4、ICOS、PD-1均可能通过调节辅助性T细胞（Th）1、Th2、Th17等T淋巴细胞亚群分布参与aGVHD的发生、发展。     

移植物细胞组分对异基因造血干细胞移植预后的影响

目的：探讨移植物中单个核细胞（mononuclear cell,MNC）、CD34⁺ 细胞及 T 淋巴细胞亚群剂量对移植后生存的影响。方法：回顾性分析121例行异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）的血液系统恶性疾病患者,研究回输移植物中MNC、CD34⁺ 细胞、CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞、调节性T细胞（regulatory T cell, Treg）剂量及CD4⁺ /CD8⁺ T细胞比值对移植后造血重建及生存的影响。结果：中性粒细胞成功植入120例,高剂量CD34⁺ T细胞 （≥6.90×10⁶ 个/kg）（P < 0.001）、CD3⁺ T细胞（≥6.24×10⁸ 个/kg）（P=0.042）和CD8⁺ T细胞（≥1.05×10⁸ 个/kg）（P=0.021）与中性粒细胞更快植入相关。血小板成功植入119例,高剂量CD34⁺ 细胞与血小板更快植入相关（P=0.001）。53例（43.8%）患者发生急性移植物抗宿主病,28例发生慢性移植物抗宿主病。1年和3年总体生存（overall survival,OS）率为83.5%和68.0%,1年和3年无进展生存（progression-free survival,PFS）率为75.0%和64.4%。单因素分析中,高剂量MNC（≥9.79×10⁸ 个/kg）、高剂量CD3⁺ T细胞和CD4⁺ /CD8⁺ T细胞比值<3.57患者有更好的OS,高剂量MNC患者有更好的PFS（P=0.061）。多因素分析显示,CD4⁺ /CD8⁺ T 细胞比值<3.57患者有更好的OS（HR=0.288,95%CI：0.084~0.988,P=0.048）。1年和3年累积复发率分别为18.2%和26.8%,高剂量MNC和CD8⁺ T细胞患者有更低的累积复发率。结论：移植物细胞组分对异基因造血干细胞移植预后有重要影响,高剂量 CD34⁺ 细胞可促进血小板更快植入,回输移植物中CD4⁺ /CD8⁺ T细胞比值<3.57的患者有更好的OS和更低的累积复发率。     

HIV/AIDS患者CD4+T淋巴细胞检测结果与抗病毒治疗效果

目的 探讨某地区HIV/AIDS患者CD4⁺T淋巴细胞检测结果与抗病毒治疗效果,同时进行相关性分析。方法 2013年2月~2016年1月选择在笔者医院诊治的HIV/AIDS患者60例作为观察组,同期选择在笔者医院进行健康体检的健康人60例作为对照组,观察组都给予HAART标准治疗方案,观察组在治疗前后、对照组在入院时都进行CD4⁺T淋巴细胞与细胞因子表达的检测。结果 观察组外周血的CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例明显低于对照组（P<0.05）,两组CD4⁺CD25⁺的细胞比例对比,差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,观察组的血浆IL-10和TGF-β1含量都显著升高（P<0.05）。治疗后观察组的CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例都明显上升（P<0.05）,而血浆IL-10和TGF-β1含量明显降低（P<0.05）。在观察组中,Spearman秩相关分析显示CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例与IL-10、TGF-β1水平均呈负相关（P<0.05）。结论 HIV/AIDS患者只有较低的免疫功能,具有较低的CD4⁺T淋巴细胞亚群比例和较高的IL-10和TGF-β1水平,HAART治疗能改善免疫功能,为此通过CD4⁺T淋巴细胞就能判断HIV/AIDS患者的治疗效果和病情。     

乳腺增生症超声血流与T细胞亚群的相关性

目的 探讨乳腺增生症彩色多普勒超声血流表现与外周血T细胞亚群的相关性。方法 检测83例乳腺增生症患者的超声图像,观察病变区的彩色多普勒血流显像（color doppler flow imaging,CDFI）,测量其最高血流速度Vmax和阻力指数（RI）,应用流式细胞技术检测外周血中T细胞亚群,分别分析超声血流表现与T细胞亚群变化的相关性。结果 乳腺增生症患者有T细胞亚群失调,CD3⁺CD8⁺下降,CD4⁺/CD8⁺上升,CD3⁺CD8⁺与Vmax呈负相关（r=-0.25,P<0.05）;CD3⁺CD8⁺与RI呈负相关（r=-0.547,P<0.01）;CD4⁺/CD8⁺与Vmax呈正相关（r=0.373,P<0.01）;CD4⁺/CD8⁺与RI呈正相关（r=0.464,P<0.01）。结论 对于乳腺增生症患者,超声检测血流,同时检测外周血T细胞亚群的变化,有助于病情的判断。     

恶性血液病患者异基因造血干细胞移植后骨髓T淋巴细胞亚群重建的动态观察

目的 研究恶性血液病患者经异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后骨髓免疫重建中T淋巴细胞的重建规律及其与外周血中T淋巴细胞重建的差异。方法 本研究采用前瞻性研究设计。收集2015年9月至2017年1月在我院血液科行allo-HSCT的41例恶性血液病患者的骨髓及外周血标本,收集同期7名健康供者的骨髓及外周血标本作为对照样本。用流式细胞术分析移植前和移植后15、30、60、90、180 d时的T淋巴细胞亚群分布,包括CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺ T淋巴细胞、辅助性T细胞（Th）1、Th2,并用Luminex技术检测Th1相关细胞因子白细胞介素2受体（IL-2R）、白细胞介素18（IL-18）水平。结果 恶性血液病患者在移植后15 d和30 d时骨髓中CD4⁺T淋巴细胞比例均低于对照组（P均<0.05）,至移植后180 d仍未见回升;CD8⁺ T淋巴细胞比例在移植后早期（15、30 d）低于对照组（P均<0.01）,60 d时恢复至正常水平;骨髓中CD4⁺和CD8⁺ T淋巴细胞比例整体水平均低于外周血中水平（P=0.001、0.002）。恶性血液病患者在移植后15、30、60、90、180 d时骨髓中Th1比例均高于对照组（P均<0.05）,且整体水平高于外周血中水平（P=0.006）;骨髓中Th2比例在移植后90 d内均无明显变化,在180 d时高于对照组（P=0.034）,但整体水平与外周血中水平无明显差异（P>0.05）。骨髓中CD4⁺/ CD8⁺ T淋巴细胞比值在移植后逐渐下降,至移植后180 d时低于对照组（P=0.040）;而骨髓中Th1/Th2比值在移植后90 d内各时间节点（15、30、60、90 d）均高于对照组（P均<0.01）,180 d时与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。恶性血液病患者骨髓和外周血中IL-2R水平在移植后15、30、60、90 d均高于对照组（P均<0.05）;IL-18水平在移植后15、30、60 d高于对照组（P均<0.05）,但移植后90 d时仅外周血中水平与对照组差异有统计学意义（P=0.021）;骨髓与外周血中IL-2R和IL-18整体水平均无明显差异（P均>0.05）。结论 恶性血液病患者allo-HSCT后,骨髓中各T淋巴细胞亚群的重建规律不同,且与外周血中有所差异。     

食管癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞的测定及临床意义

目的 探讨检测食管癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞（NK）水平变化,从免疫生物学角度探讨食管癌患者手术前后免疫功能的变化。方法 以26例健康体检者为对照组,96例食管癌患者为观察组,采用流式细胞仪检测对照组和食管癌患者手术前1天、术后第3天、术后第10天的外周血T淋巴细胞亚群CD3⁺T淋巴细胞（CD3⁺）、CD4⁺T淋巴细胞（CD4⁺）、CD8⁺T淋巴细胞（CD8⁺）、NK细胞（NK）的水平。结果 观察组术前、术后第3天及术后第10天外周血CD3⁺、CD4⁺、NK、CD4⁺/CD8⁺比值明显低于对照组（P<0.05）,CD8⁺明显高于对照组（P<0.05）。食管癌组术后第3天与术前各指标差异无统计学意义（P>0.05）。食管癌组术后第10天CD3⁺、NK较术前及术后第3天明显升高（P<0.05）,CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺比值较术前明显升高（P<0.05）,术后第10天CD8⁺水平较术前、术后第3天明显降低（P<0.05）。食管癌组CD3⁺、CD8⁺与年龄、分化程度及浸润深度有关（P<0.05）,而与性别、KPS评分、肿瘤部位、病理形态、病变长度、有无淋巴结转移、病理类型均无相关性,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 食管癌患者免疫功能受到抑制,手术解除肿瘤负荷后患者免疫状态改善;T淋巴细胞亚群水平可能与食管肿瘤进展程度有关;T淋巴细胞亚群、NK在食管癌患者免疫监测中具有一定价值。     

CD19+ CD24high CD27+调节性B细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）在儿童传染性单核细胞增多症（IM）中的作用。方法 应用流式细胞术检测53例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群,CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达情况。用荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA。同时用ELISA方法分析血清IL-10、TGF-β分泌水平。以50例健康儿童为对照。结果 IM急性期组与对照组比较CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显降低（t=19.99,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显增高（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值降低（t=16.79,P<0.01）。IM恢复期组与急性期组比较,CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显增高（t=21.54,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显降低（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值增高（t=16.68,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平13.4%±1.87%,与对照组比较显著降低,差异有统计学意义（t=14.61,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平与EBV-DNA病毒载量呈负相关（r=-0.52,P<0.01）。经治疗后IM恢复期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平18.3%±2.11%与IM急性期组比较显著增高,差异有统计学意义（t=12.61,P<0.01）。IM急性期组血清IL-10较对照组明显降低,差异有统计学意义（t=11.50,P<0.01）。治疗后IM恢复期组IL-10较IM急性期组明显增高,差异有统计学意义（t=9.40,P<0.01）。结论 IM急性期存在明显免疫失衡,即CD3⁺ CD8⁺ T细胞增多,CD4/CD8比值降低,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

补阳还五汤对高血压前期大鼠T淋巴细胞亚群的影响

[目的]通过观察补阳还五汤对高盐所致高血压前期大鼠T淋巴细胞亚群比例及γ-干扰素（INF-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,探讨补阳还五汤在调节高血压前期T细胞免疫中的作用机制。[方法]选取7周龄盐敏感大鼠（DS）与盐抵抗大鼠（SS）各20只,SS大鼠随机分为正常组和正常给药组,DS大鼠随机分为模型组和治疗组。各组大鼠适应性喂养后,改用高盐饲料喂养,同时监测大鼠尾动脉收缩压,待其血压值升高至120~139/80~89 mmHg （1 mmHg=0.133 kPa）这一范围时,确定为高血压前期大鼠模型,并以补阳还五汤灌胃治疗。治疗结束后大鼠腹主动脉取血,以流式细胞术检测全血中T淋巴细胞CD4⁺与CD8⁺的百分率,并计算CD4⁺/CD8⁺的比值。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测血清中INF-γ、TNF-α的含量。[结果]补阳还五汤可以下调CD4⁺T淋巴细胞及CD8⁺T淋巴细胞百分率,上调CD4⁺/CD8⁺的比值,降低TNF-α、INF-γ的含量。[结论]补阳还五汤可能是通过下调CD4⁺T淋巴细胞与CD8⁺T淋巴细胞的百分率以及INF-γ、TNF-α细胞因子的表达,改善高血压前期机体T细胞免疫功能及其炎症反应,延缓高血压前期的发展进程。     

小胶质细胞和脑出血

小胶质细胞作为中枢神经系统重要的固有免疫细胞,在神经变性和神经炎性反应过程中起重要作用。小胶质细胞是中枢神经系统的"警察",任何神经中枢微小变化都会引起它的变化。脑出血是人类常见的急危重症疾病,发生率高、致残程度重,给社会和家庭带来沉重负担。本文就脑出血后小胶质细胞的激活、作用、凋亡等方面进行综述。     

脑内微透析的临床运用

通过临床床旁生化分析显示，脑内微透析作为一种常规方法可用于神经外科手术和社会病加强监护治疗过程。现有的技术和设备是标准的，使之能与来源于其它中心的数据相比。该研究提供的正常值可作为一种参考来评价脑外伤和脑出血病人微透析期间的变化。     

Management of Spontaneous Intracerebral Haemorrhage

Background

Management of spontaneous intracerebral haemorrhage (SICH) is still an enigma. The study was conducted to find out the most appropriate mode of treatment and other possible inclusion criteria''s in addition to clot size.

Methods

Sixty consecutive patients of SICH excluding bleeds due to arteriovenous malformations/aneurysm were included in the study. Patients with moderate and large bleeds, progressive neurological deficit and glasgow coma scale (GCS) of more than five were included in the surgical group and rest treated conservatively.

Result

Location of the bleed, other co-morbid conditions and GCS at presentations were more important guidelines than size of the bleed. Mortality was more in surgically treated group where cerebellar bleed fared well after evacuation.

Conclusion

Surgery is preferred in superficially located bleeds and cerebellar bleeds. Intra cranial pressure monitoring will help in categorizing the mode of treatment better than mere clot size.Key Words: Spontaneous intracerebral haemorrhage, Ischaemic penumbra, Ischaemic stroke     

螺旋CT三维成像体表投影定位法在脑内血肿穿刺引流中的价值

目的评价螺旋CT三维成像体表定位法在脑血肿穿刺引流术中的临床应用价值。方法12例脑出血病人经螺旋CT扫描后,利用三维成像体表投影定位法确定穿刺点,然后进性脑内血肿穿刺引流治疗。结果12例治疗中复查CT,引流针均位于血肿中央,其中1例由于再次大出血经抢救无效死亡,其余11例均引流治疗成功,患者好转出院。结论螺旋CT三维成像体表投影定位法引导穿刺治疗脑血肿,是一种定位准确、安全易行的治疗方法。     

早期手术治疗高血压脑出血64例

目的 寻求较的治疗高血压脑出血的手术方法。方法 高血压脑出血病人早期手术治疗后的结果，与同期常规手术治疗结果进行比较。结果 早期手术的病人死亡率为20．3％，同期常规手术死亡率为35．2％。结论 早期手术治疗高血压脑出血能够显降低死亡率，是一种比较安全有效的手术方法。     

神经内镜在高血压脑出血中的应用

目的探讨神经内镜在高血压脑出血中的应用。方法对我科2005年1月～2007年5月收入院行神经内镜治疗的32例高血压脑出血患者资料进行回顾性分析。结果血肿近完全清除者25例，大部分清除者7例；32例患者中存活26例（占81．3％），其中恢复良好12例、中残8例、重残4例，植物状态2例；死亡6例，死亡率为18．7％。结论神经内镜手术清除脑内血肿具有微创、省时、直视等优点，为治疗高血压脑出血提供了全新的方法。     

高血压脑内晚期张力性血肿

[背景 ]高血压脑内晚期张力性血肿尚未引起临床医生的足够重视 .[病例报告 ]2例脑出血病人均符合内科治疗标准 ,治疗后病情好转 ,2周左右又出现高颅压症状 ,脱水治疗效果欠佳 ,复查脑CT见血肿范围增大 ,密度区内高密度区缩小 ,中线结构移位明显 .[讨论 ]高血压脑内晚期张力性血肿早期外科治疗能挽救生命 ,改善预后     

高血压脑出血微创穿刺术临床分析

目的 探讨高血压脑出血微创治疗的疗效.方法 对118例脑出血患者,按超早期、早期、延期等不同时间点进行微创穿刺治疗,并与行内科治疗的43例脑出血患者进行比较,观察其有效率及病死率.结果 手术组有效率为67.8%,病死率为16.9%,对照组有效率和病死率分别为37.2%和27.9%,两组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 微创手术可有效降低脑出血患者的病死率,减轻功能障碍的程度.     

高血压性脑出血的外科治疗

目的：对365例高血压性脑出血的手术治疗进行总结，分析手术时机和手术方法对治疗效果的影响。方法：根据患入院时的一般情况，意识状态，出血部位，血肿量的多少确定手术时机，采用锥颅和钻孔行血肿或脑室穿刺，血肿部分抽吸后置管外引流和／或灌注尿激酶溶解血肿治疗79例，置管时间4－12d，平均8d;CT导向立体定向血肿排空术治疗26例，小切口钻孔扩大骨窗3－4cm直视下血肿清除术治疗129例，开颅血肿清除术治疗131例，其中去骨瓣外减压44例，结果：治疗结果应用格拉斯哥治疗结果分级评价；良好92例（25．2％），中残107例（29．3％），重残85例（23．9％），植物生存2 例0．5％），死亡79例（21．5％），结论：高血压性脑出血的外科手术治疗效果与手术时机的正确把握相关，恰当的手术方法不仅提高患的生存率，而且能提高患的生存质量，获得满意效果。     

自发性脑内出血的研究进展

自发性脑内出血（Spontaneous Intra Cerebral Hemorrhage,SICH）指非外伤性脑实质内出血,发病率为26～60/10万,占脑卒中发病率的10%～30%.