ALDH1高表达对乳腺癌细胞MCF-7干细胞特性的影响

目的 探讨ALDH1高表达对乳腺癌MCF-7细胞干细胞特性的影响,为乳腺癌的治疗提供理论依据。方法 构建慢病毒ALDH1RNA,转染乳腺癌MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选稳定高表达ALDH1的亚克隆,命名为MCF-ALDH1细胞株。荧光定量PCR和Western blot法检测MCF-ALDH1细胞株及对照细胞中ALDH1在mRNA和蛋白水平的表达;克隆形成实验、悬浮球形成实验及裸鼠成瘤实验检测MCF-ALDH1及对照组细胞的干细胞特性,MTT法测定细胞的耐药性。结果 与MCF-7组细胞比较,MCF-ALDH1细胞株的ALDH1在mRNA和蛋白表达量明显升高;MCF-ALDH1细胞克隆形成数目为128±22个,高于MCF-ALDH1细胞球克隆形成数（46±15个）;悬浮成球实验,MCF-ALDH1细胞悬浮成球数目明显增多（16±2个）,高于对照细胞悬浮球数（8.0±1.5个）;肿瘤细胞在裸鼠皮下接种后,MCF-7细胞组有3只裸鼠成瘤,MCF-ALDH1有5只成瘤,瘤体积明显大于MCF-7组,差异有统计学意义（P<0.05）。耐药实验显示,MCF-ALDH1对顺铂、紫杉醇的耐药性明显提高。结论 高表达ALDH1的乳腺癌MCF-7细胞干细胞特性增强,ALDH1可能成为乳腺癌治疗的靶点之一。     

不同分割照射方式对MDA-MB-231移植瘤增殖活性的影响

目的 以相同剂量下,研究单次大剂量照射对MDA-MB-231乳腺癌移植瘤的生物学效应。方法 建立MDA-MB-231乳腺癌移植瘤模型,待移植瘤直径达8~9mm,随机分为0Gy组（空白对照组）、8Gy组（8Gy/1f/1d）、10Gy组（10Gy/1f/1d）、4×2Gy组（8Gy/4f/4d）、2Gy×5（10Gy/5f/5d）组。每3天观察肿瘤体积变化,绘制移植瘤生长曲线。照射实验组（除对照组）裸鼠分别于放疗结束后第7天、14天行¹⁸F-FDG PET/CT检查,另取各实验组裸鼠分别于放疗结束后7天、14天处死,收集肿瘤组织行免疫组化测定Ki-67的表达。结果 单次大剂量和常规分割照射均能抑制MDA-MB-231移植瘤生长,以单次大剂量10Gy组最为明显（P<0.05）。且在同等剂量条件下,单次大剂量组在放疗后第7、14天PET/CT检查显示移植瘤SUVmax值均低于常规分割照射组（P<0.05）,Ki-67阳性细胞百分比单次大剂量组也低于同剂量常规分割组（P<0.05）。结论 在同等剂量情况下,单次大剂量放疗较常规分割放疗对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖活性的抑制更为显著,同时¹⁸F-FDG PET/CT在一定程度上可以反应早期放疗后MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖活性。     

孕期补锌对汞毒性的拮抗作用

目的 探讨孕期补锌对母儿汞毒性的拮抗作用及其可能的作用机制。方法 根据母血汞值选取病例组（妊娠中、晚期母血汞≥5.8 μg/L）、治疗组（妊娠中期母血汞≥5.8 μg/L,从妊娠16周起,每日补充锌元素10.6 mg直至分娩）、对照组（妊娠中、晚期母血汞正常）孕妇各30例,观察3组孕妇汞、锌水平变化及妊娠结局;应用蛋白质印迹法分析3组胎盘组织凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达水平,应用原位末端标记法检测3组胎盘组织凋亡细胞阳性率。结果 治疗组妊娠晚期母血汞水平[（3.42±0.52）μg/L]低于病例组[（6.16±0.32）μg/L,P<0.05],同时也较妊娠中期[（6.15±0.26）μg/L]下降（P<0.05）;而血锌水平[（671.34±44.65）μg/L]则高于病例组[（483.25±62.20）μg/L,P<0.05],同时也较妊娠中期[（480.73±60.64）μg/L]升高（P<0.05）。病例组早产、胎膜早破、小于胎龄儿的发生率均高于治疗组（P均<0.05）。病例组胎盘组织凋亡细胞阳性率[（35.20±4.96）%]高于治疗组[（13.47±2.43）%]和对照组[（13.27±2.21）%,P均<0.05],促凋亡蛋白Bax的表达水平（3 110.38±136.09）也高于治疗组（2 015.76±177.63）和对照组（2 009.90±152.61,P均<0.05）,而凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达水平（2 055.97±280.82）则低于治疗组（5 187.93±247.89）和对照组（5 308.83±259.97,P均<0.05）。结论 孕期补锌可拮抗汞对母儿的毒性作用,其机制可能与锌同时上调Bcl-2表达及下调Bax表达从而抑制细胞凋亡有关。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血糖波动的特征

目的 观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS）患者全天血糖波动的特征。方法 根据多导睡眠图检测结果选取48例符合OSAHS诊断的受试对象作为OSAHS组,同时选取30例健康者作为对照组（N组）。动态监测两组受试者72 h血糖的变化,同时测定胰岛素抵抗指数（IRI）。结果 OSAHS组全天血糖平均值比对照组（5.98±1.21mmol/L vs 5.21±0.91mmol/L,P<0.05）升高;OSAHS组平均血糖波动幅度（MAGE）、夜间血糖波动幅度（NMAGE）及IRI较对照组（4.25±0.6 mmol/L vs 2.12±0.51mmol/L,1.93±0.04 vs 1.12±0.34和3.7±0.5 vs 2.4±0.2,P均<0.05）明显升高;OSAHS组：MAGE与呼吸暂停低通气指数（AHI）及IRI呈正相关（r=0.357、0.361,P均<0.05）,AHI与IRI呈正相关（r=0.360,P<0.05）。结论 OSAHS患者全天血糖波动异常,存在严重的胰岛素抵抗。     

血管内皮生长因子促进慢性心肌梗死血管生成

目的 探索血管内皮生长因子对猪慢性心肌梗死的治疗作用。方法 通过开胸直视下结扎前降支建立猪的心肌梗死模型,1个月后将建模成功的猪分为血管内皮细胞生长因子（VEGF）组和对照组,分别直视下心肌内注射VEGF和磷酸缓冲盐溶液（PBS）,2个月后行MR检查比较两组心功能参数,梗死心肌组织分别做HE染色和免疫组化染色,分析梗死区域微血管生成和细胞增殖情况。结果 因子注射2个月后,两组干预前后的心功能指标差值比较分别为左心室射血分数（LVEF）（4.0%±10.4% vs 1.8%±1.6%,P>0.05）、心排出量（CO）（2.1±1.6L/min vs 1.4±0.8L/min,P>0.05）、左心室后壁舒张期厚度（LVPWTd）（2.8±0.5mm vs 2.0±0.8mm,P>0.05）、左心室舒张末期容积（EDV）（24.0±5.0ml vs 39.6±16.2ml,P>0.05）。通过免疫组化染色分析,VEGF组的微动脉密度比对照组高（87.0±9.1 vs 50.8±7.2,P<0.05）,毛细血管密度比对照组高（367.5±50.8 vs 188.5±14.3,P<0.05）,增殖细胞核数目较对照组多（432.5±37.7 vs 132.0±29.0,P<0.05）。结论 VEGF能够促进梗死心肌的血管新生,促进梗死区域侧支循环建立。     

乳康饮及拆方对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究乳康饮及拆方对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法 采用乳康饮及拆方含药血清处理人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,分别在24、48、72h时间点,用cell counting kit-8（CCK-8法）检测乳康饮及拆方在不同时间点对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,FCM法（流式细胞术）检测乳康饮及拆方诱导MDA-MB-231细胞凋亡。结果 各组中药处理48h后,细胞增殖出现明显抑制,抑制率分别为46.05%、31.85%、41.24%,相对氟尿嘧啶组抑制作用时间有明显延迟,乳康饮组在48h与氟尿嘧啶组抑制率之间差异无统计学意义（P=0.076）。各处理组48h凋亡率分别为40.7%、16.3%、23.2%、57.5%,比空白对照组凋亡率显著增加（P<0.05）,乳康饮组与氟尿嘧啶组凋亡率差异无统计学意义,但高于拆方2组（P=0.000）。结论 乳康饮及其拆方能够显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡。     

奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案在局部晚期宫颈癌患者中的应用效果

目的 探讨奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案在局部晚期宫颈癌患者中的应用效果。方法 选取2010年9月至2013年3月徐州医学院附属医院收治的局部晚期宫颈癌患者60例,随机分成奈达铂组及对照组,每组30例。奈达铂组采用奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案,对照组采用顺铂联合紫杉醇新辅助化疗方案,对比两组患者的疗效及不良反应。结果 奈达铂组与对照组患者短期总有效率分别为76.7%、80.0%,两组比较差异无统计学意义（χ²=0.098,P=0.754）。与化疗前相比,两组患者化疗后肿瘤直径较化疗前缩小[（5.3±0.9）vs（3.2±0.6）,（5.2±0.8）vs（3.3±0.7）];差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,奈达铂组患者治疗后Ⅰ~Ⅱ级恶心呕吐（36.7% vs 70.0%）、贫血（16.7% vs 40.0%）、肾功能损害（10.0% vs 36.7%）发生率较低,Ⅰ~Ⅱ级血小板降低（56.7% vs 30%）发生率较高,差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案治疗局部晚期宫颈癌疗效与顺铂类似,但不良反应少。     

降钙素促进人牙周膜干细胞的胶原合成和成骨作用

目的 考察降钙素（CT）促进人牙周膜干细胞（hPDLSC）的胶原合成和成骨作用。方法 将50名成人受试者分为慢性牙周炎（CP）组（n=25）和对照组（n=25）。CP组中,选择探诊深度≥5 mm的上颌前部和有骨丢失影像学证据的部位,从每例患者的6个上颌位点收集龈沟液（GCF）样本。对照组中,对没有炎症的多个部位（每名受试者10～12个）进行取样以确保收集足够量的GCF。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测GCF中CT、转化生长因子β1（TGF-β1）和骨形态发生蛋白（BMP）2/4/7的表达,通过Spearman相关分析考察CT表达与临床参数牙周袋探诊深度（PD）、临床附着丧失（CAL）和牙龈指数（GI）及上述指标的相关性。用携带CT基因的重组腺病毒（Ad.CT）感染hPDLSC,并通过实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测TGF-β1、BMP2/4/7、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙蛋白（OCN）和Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白（ColⅠ/Ⅲ）的mRNA和蛋白质表达。结果 CP组患者GCF中CT表达水平高于对照组[（32.62±1.46）ng/mL vs（17.70±0.76）ng/mL,P<0.01）]。CP组患者CT表达与临床参数PD、CAL、GI呈负相关（P<0.01、P<0.05）。CP组患者GCF中BMP2/4/7和TGF-β1的表达水平均高于对照组[BMP2：（138.67±4.04）ng/mL vs（103.96±2.78）ng/mL;BMP4：（155.53±3.55）ng/mL vs（133.15±2.92）ng/mL;BMP7：（106.59±2.85）ng/mL vs（90.22±1.56）ng/mL;TGF-β1：（105.92±3.40）ng/mL vs（89.85±2.42）ng/mL;P均<0.01],且CP患者上述指标均与CT表达呈正相关（P<0.01、P<0.05）。腺病毒感染的CT过表达使hPDLSC中TGF-β1、ColⅠ/Ⅲ及成骨细胞标志物BMP2/4、ALP和OCN表达增加（P均<0.01）。与Ad.CT和空载腺病毒共同感染的细胞相比,用Ad.CT和特异性阻断TGF-β1小干扰RNA（siRNA）的重组腺病毒（Ad.TGF-β1 siRNA）共同感染的细胞胶原蛋白表达水平更低（ColⅠ：0.16±0.02 vs 0.22±0.03;ColⅢ：0.11±0.01 vs 0.15±0.02;P均<0.01）。与Ad.CT感染的细胞相比,Ad.CT和头蛋白共处理细胞中ALP和OCN的蛋白质表达水平更低（ALP：0.19±0.02 vs 0.25±0.03;OCN：0.13±0.01 vs 0.19±0.02;P均<0.01）。结论 CT通过TGF-β1和BMP信号转导途径促进hPDLSC的胶原合成和成骨作用。     

急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的机制

目的 观察急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的功能及形态学变化特点。方法 给C57/BL 6J小鼠完成颈静脉插管后输注20%高糖溶液4 h,建立急性糖毒性小鼠模型,行腹腔葡萄糖耐量实验（intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT）及口服葡萄糖耐量实验（oral glucose tolerance test,OGTT）评价葡萄糖耐量及胰岛素分泌功能。HE染色及电镜观察胰岛形态变化及细胞内胰岛素分泌颗粒亚细胞结构变化。结果 IPGTT实验中急性糖毒性组15 min血糖值较对照组显著增加[（10.3±0.33） mmol/L vs （19.3±1.66） mmol/L],上升87%（P<0.05）,OGTT实验中30 min血糖值较对照组显著增加[（9.8±0.31） mmol/L vs （18.16±1.01） mmol/L],升高85%（P<0.05）,且早期胰岛素分泌高峰受损且分泌延迟。GSIS实验中急性糖毒性组在基础状态时（葡萄糖浓度2.8 mmol/L）和高糖（16.7 mmol/L）刺激后,胰岛素分泌较对照组显著降低[（0.481±0.003） ng/mL vs （0.702±0.121） ng/mL,（2.43±0.03） ng/mL vs （4.07±0.34） ng/mL],分别下降46%和67%（P<0.05）;胰岛素含量测定结果显示,急性糖毒性组比对照组降低[（97.01±2.05） ng/mL vs （65.12±0.42） ng/mL,（121.40±0.58） ng/mL vs （62.7±0.48） ng/mL],下降49%和94%（P<0.05）。HE染色显示急性糖毒性胰岛边界不规则、内部细胞排列不整;透射电镜可见细胞内胰岛素分泌颗粒空泡,线粒体嵴断裂。结论 急性葡萄糖毒性使胰岛β细胞内胰岛素储备减少,导致第一时相分泌胰岛素峰值降低及延迟。     

不同化疗方案对肺癌合并慢性肾衰竭患者肾功能的影响

目的 观察TC、DC、GC、PC 4种化疗方案对非小细胞肺癌合并慢性肾衰竭(代偿期)患者肾功能的影响。 方法 选择67例首次化疗的非小细胞肺癌患者,化疗前处于慢性肾衰竭(代偿期),患者年龄41~70岁,按所接受的方案分为4组:1TC组:紫杉醇135mg/m²,d1+卡铂 AUC 5,d1,21天重复;2DC组:多西他赛75mg/m²,d1+卡铂 AUC 5,d1,21天重复;3GC组:吉西他滨1000mg/m²,d1,8+卡铂 AUC 5,d1,21天重复;4PC组(只限于非鳞癌患者):培美曲塞500mg/m²,d1+卡铂 AUC 5,d1,21天重复;以肾小球滤过率代表其肾功能,检测化疗前及2程化疗后肾小球滤过率,比较不同化疗方案前后患者肾功能的变化。 结果 治疗前,4组患者肾小球滤过率为TC组77.1±16.41ml/min,DC组71.82±12.41ml/min,GC组74.86±10.42ml/min,PC组59.45±9.07ml/min;2程化疗后肾小球滤过率为TC组69.76±8.89ml/min,DC组66.21±13.5ml/min,GC组70.71±9.4ml/min,PC组61.75±10.77ml/min。TC组化疗后肾小球滤过率较前下降7.33±2.46ml/min,DC组化疗后肾小球滤过率较前下降5.61±2.63ml/min,差异均有统计学意义(P<0.05); GC组及PC组化疗前后肾小球滤过率改变差异无统计学意义(P>0.05);TC组化疗后肾小球滤过率下降程度高于DC组, 差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 对于非小细胞肺癌合并慢性肾衰竭(代偿期)患者,使用GC、PC方案化疗对肾功能无明显不良影响,而TC、DC方案可能引起肾功能下降,其中TC方案引起的肾功能不良反应程度高于DC方案。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。