长链非编码RNA HOTAIR在膀胱癌中的表达及临床意义

目的: 探讨长链非编码RNA HOTAIR在膀胱癌组织与癌旁正常组织的表达差异,了解HOTAIR与膀胱癌恶性程度、进展及预后的相关性。方法: 采用qRT-PCR方法检测88例膀胱癌组织与癌旁正常组织中HOTAIR RNA的差异表达,分析HOTAIR表达水平与患者临床病理特征的关系,采用Kapaln-Meier生存分析及COX 比例风险回归模型分析HOTAIR表达水平与膀胱患者预后的相关性。结果: 膀胱癌组织中HOTAIR RNA 表达明显高于癌旁正常组织,HOTAIR RNA高表达与肿瘤高分级及临床高分期有关（P<0.05）,HOTAIR高表达组膀胱癌患者5年生存率明显低于HOTAIR低表达组（P<0.05）,COX 回归分析提示HOTAIR RNA高表达可能为膀胱癌不良预后的独立危险因子之一。结论: 长链非编码RNA HOTAIR与膀胱癌发生发展及其恶性程度相关,HOTAIR可以作为预测膀胱癌患者生存率的分子标志物。     

长链非编码RNA在膀胱癌中的研究进展

近几年研究发现长链非编码RNA（10ngnon—coding RNA,IncRNA）在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。IncRNA是一类转录本长度大于200个核苷酸不编码蛋白质的RNA分子,在正常细胞与肿瘤细胞的基因表达调节中起着重要作用,lncRNA与肿瘤细胞的增殖、浸润、转移和复发密切相关。在膀胱癌中lncRNA可以作为检测指标及预后因子,有望成为疾病治疗的新靶点。本文对lncRNA在膀胱癌中的研究进展进行综述,探讨lncRNA在调控膀胱癌发生发展中的作用机制。     

长链非编码RNA PVT1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨PVT1加重宫颈癌细胞的恶性生物学行为的作用机制.方法 设计shRNA干扰PVT1,接着用sh-PVT1单独或联合miR-484 inhibitor转染SiHa细胞,荧光定量检测PVT1及miR-484的表达水平;荧光素酶报告实验确定PVT1和miR-484的靶向关系;BrdU染色检测PVT1对细胞生长的影响...     

长链非编码RNA在膀胱癌中的研究概况

随着二代测序技术的广泛应用和基因层面上肿瘤学研究的深入,曾被忽略、被低估的lncRNA被揭示与人类肿瘤的发生发展密切相关,从不同的生物学途径影响肿瘤的发生、发展.研究发现,lncRNA与膀胱癌的增殖、浸润、转移、复发、耐药等密切相关.本文将对ln-cRNA在膀胱癌中的研究概况进行综述.     

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法将人绒毛膜癌细胞JEG-3随机分为空白对照组、空白载体组和LncRNA AFAP1-AS1过表达组。空白对照组细胞未做任何处理,空白载体组细胞转染空白载体,LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞转染LncRNA AFAP1-AS1过表达载体。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,采用细胞计数试剂盒-8实验、Transwell小室实验及流式细胞术检测JEG-3细胞的增殖、迁移和凋亡情况。结果 LncRNA AFAP1-AS1过表达组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白相对表达量均高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组和空白载体组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数显著低于空白对照组和空白载体组,细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组与空白载体组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数及细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P>0. 05)。结论 LncRNA AFAP1-AS1可上调人绒毛膜癌JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白水平,对JEG-3细胞的增殖及迁移有抑制作用,同时可诱导其凋亡。     

长链非编码 RNA HOTAIR 对肾癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨长链非编码 RNA(LncRNA) HOTAIR 对肾癌细胞系786-O 和 ACHN 增殖和凋亡的影响。方法两种细胞系转染针对 HOTAIR 的小干扰 RNA(siRNA),利用qRT-PCR 检测干扰效率,再分别以噻唑蓝(MTT)法、ELISA法和 Hochest 染色法检测 HOTAIR 表达降低后786-O 和ACHN 细胞在增殖和凋亡方面的变化。结果 siRNA 可有效降低 HOTAIR 表达(P <0．05);减少 HOTAIR 含量可显著抑制两种细胞的增殖(P <0．05),同时增加细胞凋亡(P <0．05)。结论 HOTAIR 具有促进肾癌细胞生长的作用。     

长链非编码RNA NORAD在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖能力的影响

目的 研究长链非编码RNA DNA损伤诱导的非编码RNA (NORAD)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法 RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及miRNA的表达改变,根据表达量确定候选LncRNA;q RT-PCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中候选NORAD的表达;免疫荧光检测分析肺癌组织中细胞增殖核抗原Ki-67的表达;通过线性回归分析肺癌组织中NORAD与Ki-67的表达相关性。生物在线软件联合miRNA测序结果,并通过荧光素酶检测分析NORAD与miR-26b-5p、miR-654-5p结合情况。将A549细胞分成空白对照组(Control)、si-NORAD组、miR-26b-5p mimics、miR-654-5p mimics、si-NORAD与miR-26b-5p mimics联合组、si-NORAD与miR-654-5p mimics联合组,利用EdU检测细胞增殖能力、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡、蛋白印迹(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白(Bad、Bcl-2、Cleaved Caspase-3)的表达。结果 NORAD...     

长链非编码RNA PTENP1在膀胱癌发生发展中的分子机制

目的 探讨长链非编码RNA PTENP1在膀胱癌发生发展中的分子机制.方法 通过逆转录实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测PTENP1,PTEN,miR-17在膀胱癌中的基础表达并关联分析.利用Western blot检测膀胱癌细胞系T24与5637中超表达PTENP1后PTEN的表达变化.通过荧光素酶报告试验验证miR-17对PTENP1及PTEN的靶向作用.最后通过在膀胱癌细胞系T24和5637中共表达miR-17和PTENP1,建立稳定共表达细胞系进行增殖和迁移实验,探索长链非编码RNA PTENP1在膀胱癌发生发展中的分子机制.结果 miR-17在膀胱癌中普遍呈现高表达趋势,PTENP1在膀胱癌中呈现普遍低表达趋势(P<0.05).与此同时miR-17和PTENP1的基础表达为负相关,PTENP1与PTEN的基础表达为正相关.WB实验发现于膀胱癌细胞系T24和5637中过表达PTENP1后可以在翻译水平增加PTEN的表达,荧光素酶报道实验验证了miR-17可同时靶向PTENP1及PTEN,在膀胱癌中miR-17具有促癌功能,同时在膀胱癌细胞中我们发现miR-17可以部分回复PTENP1的抑癌功能.结论 长链非编码RNA PTENP1在膀胱癌中发挥抑癌功能的分子机制可能是PTENP1结合miR-17作为竞争性内源RNA竞争,从而降低miR-17对抑癌基因PTEN的表达抑制.     

长链非编码RNA PVT1沉默对K562细胞增殖的影响

目的 筛选靶向抑制长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)的小干扰RNA(siRNA),并探讨其对人白血病细胞株K562细胞增殖的影响.方法 针对PVT1设计合成PVT1-siRNA1、2、3、4序列及无关对照siRNA(SC-siRNA)序列.利用HiperFect转染试剂将各条siRNA转入K562细胞,实验依此分为siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组、siRNA4组和SC-siRNA组,并设空转组和细胞组.转染后用实时定量RT-PCR检测细胞中PVT1 RNA的相对表达情况,用CCK8法检测细胞增殖情况,用流式细胞仪检测细胞周期.结果 转染24、48 h后siRNA4组PVT1 RNA水平下降,与SC-siRNA组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义(P<0.01), 而siRNA1组、siRNA2组和siRNA3组PVT1 RNA水平与细胞组相比差异无统计学意义(P>0.05);转染24、48、72 h后siRNA4组细胞增殖抑制率都增加,与SC-siRNA组和空转组相比差异均有统计学意义(P<0.01);转染48、72 h后siRNA4组出现了G1期阻滞,G1期细胞比例增加,与SC-siRNA组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 PVT1-siRNA可通过阻滞细胞周期的进展而抑制K562细胞的增殖.     

长链非编码RNA PVT1对非小细胞肺癌细胞增殖和迁移能力的影响及其机制研究

目的 通过上调或者下调PVT1的表达，分析探究长链非编码RNA PVT1在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和迁移能力中的作用及机制，并在此基础上运用RNA-Seq分析PVT1的靶向基因，说明其作用机理。 方法 ①通过TCGA数据库(The Cancer Genome Atlas)分析NSCLC细胞中PVT1的表达与NSCLC患者生存时间之间的关系；②探究PVT1上调或下调对NSCLC细胞增殖及迁移能力的影响；③运用RNA-seq技术探究PVT1的下游靶基因，然后运用siRNA沉默该基因，探究此基因对NSCLC细胞增殖和迁移能力。 结果 ①PVT1的高表达与肺癌患者存活时间减少有显著关系(P<0.001)；②PVT1高表达可以显著促进肺癌患者肿块体积的增大，并且与肿瘤分期和淋巴结转移程度密切相关(均P<0.05)；③过表达PVT1可以促进NSCLC细胞的增殖及迁移；④用Si-RNA下调PVT1可以抑制NSCLC细胞的增殖及迁移；⑤PVT1下调会使LATS2的表达水平显著升高。 结论 PVT1通过表观调控LATS2促进NSCLC细胞增殖和迁移能力。      

长链非编码RNA-FENDRR在膀胱癌组织中的表达及临床意义

目的:探究长链非编码RNA-FENDRR在膀胱癌组织中的表达情况及其与膀胱癌患者临床预后的关系。方法:收集50例（对）膀胱癌组织,用qRT-PCR检测FENDRR的表达量;同样在T24、5637、EJ和 253J-BV 等4种膀胱癌细胞系中验证其表达水平。用χ2检验分析FENDRR和患者临床特征的相关性,用Kaplan-Meier生存曲线分析不同表达组患者的生存状况,用Log-rank检验两组患者的肿瘤特异性生存 率差异。结果:LncRNA-FENDRR在膀胱癌组织中明显下调（t=7.222,P＜0.000 1）,细胞系中验证结果一致,其中膀胱癌细胞系5637中表达量最低（P＜0.000 1）。相关性分析发现FENDRR表达水平与患 者浸润深度有关（χ2=4.612,P＜0.05）。生存分析发现,lncRNA-FENDRR低表达组患者的肿瘤特异性生存率显著低于高表达组（HR=3.17,95%CI:1.37～7.32,P<0.05）。结论:LncRNA-FENDRR在膀胱 癌组织中显著下调,其低表达与膀胱癌患者的不良预后有关。     

同时下调长链非编码RNA PVT1和MINCR对Raji细胞增殖的影响

目的 探讨同时下调长链非编码RNA(lncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)和MINCR(MYC-induced long non-coding RNA)对淋巴瘤细胞株Raji增殖的影响及其可能机制.方法 合成靶向PVT1、MINCR的小干扰RNA(siRNA)和无关对照siRNA (SC-siRNA)序列.实验分为PVT1-siRNA组、MINCR-siRNA组、PVT1-siRNA+MINCR-siRNA组、无关对照组和细胞组(未转染的Raji细胞).将各条siRNA转入Raji细胞后,用实时定量RT-PCR方法检测MINCR RNA表达水平;分别用CCK8法、流式细胞仪、Western blot检测细胞增殖、细胞周期和c-Myc蛋白的表达情况.结果 转染MINCR-siRNA后MINCR表达下调,与无关对照组和细胞组相比差异有统计学差异(P<0.05).PVT1-siRNA联合MINCR-siRNA转染到Raji细胞后,细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),细胞周期阻滞于G1期(P<0.05),c-Myc蛋白表达下降(P<0.05),且与单用PVT1-siRNA组、 MINCR-siRNA组相比差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 同时下调PVT1和MINCR可以增强对Raji细胞增殖的抑制作用.     

长链非编码RNA DSCAM-AS1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨长链非编码RNA DSCAM-AS1在乳腺癌患者组织中的表达差异及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR法检测60例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织中DSCAM-AS1的表达水平,同时分析乳腺癌组织中DSCAM-AS1水平与临床病理参数的相关性;采用生物信息学分析Kaplan-Meier Plotter网站在线分析差异表达的DSCAM-AS1对乳腺癌患者总体生存率的影响;采用受试者工作特征曲线 (ROC) 评价组织中DSCAM-AS1水平在乳腺癌诊断中的敏感度和特异性。结果 乳腺癌组织DSCAM-AS1 (0.473±0.073) 水平高于癌旁组织 (0.057±0.008,P=0.000),组织中DSCAM-AS1的表达水平与患者淋巴结转移、雌激素受体(ER)、HER-2、TNM分期及ki-67表达存在相关性 (P分别为0.022、0.029、0.014、0.043、0.013),而与年龄和孕激素受体(PR)无显著相关性。生存曲线分析提示高表达DSCAM-AS1的乳腺癌患者总体生存率降低,特别是ER阳性的乳腺癌患者,总体生存率显著下降 (P=0.007)。ROC曲线分析组织中DSCAM-AS1对乳腺癌的诊断价值结果显示,DSCAM-AS1的曲线下面积均>0.5,且特异性>98%。结论 DSCAM-AS1在乳腺癌患者组织中表达上调,且与淋巴结转移、TNM分期、ER、HER-2及ki-67表达水平有关,对乳腺癌有较高的诊断价值。