CD19+ CD24high CD27+调节性B细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）在儿童传染性单核细胞增多症（IM）中的作用。方法 应用流式细胞术检测53例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群,CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达情况。用荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA。同时用ELISA方法分析血清IL-10、TGF-β分泌水平。以50例健康儿童为对照。结果 IM急性期组与对照组比较CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显降低（t=19.99,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显增高（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值降低（t=16.79,P<0.01）。IM恢复期组与急性期组比较,CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显增高（t=21.54,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显降低（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值增高（t=16.68,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平13.4%±1.87%,与对照组比较显著降低,差异有统计学意义（t=14.61,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平与EBV-DNA病毒载量呈负相关（r=-0.52,P<0.01）。经治疗后IM恢复期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平18.3%±2.11%与IM急性期组比较显著增高,差异有统计学意义（t=12.61,P<0.01）。IM急性期组血清IL-10较对照组明显降低,差异有统计学意义（t=11.50,P<0.01）。治疗后IM恢复期组IL-10较IM急性期组明显增高,差异有统计学意义（t=9.40,P<0.01）。结论 IM急性期存在明显免疫失衡,即CD3⁺ CD8⁺ T细胞增多,CD4/CD8比值降低,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞在类风湿关节炎患者免疫耐受失衡中的变化

目的 检测CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ 调节性T细胞（Treg）在类风湿关节炎（RA）患者外周血和关节液中的变化,探讨该细胞亚群在RA免疫耐受失衡中的作用。方法 采用流式细胞术检测活动期RA患者关节液、外周血和健康对照外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞比例;实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测外周血和关节液单个核细胞FoxP3基因的表达。分析外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg细胞比例与病情活动指标的相关性。结果 活动期RA患者关节液CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞比例（7.56%±2.89%）高于外周血（1.84%±0.97%）和健康对照外周血（2.19%±0.54%）,差异均有统计学意义（P<0.01）;RA患者抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体（ACPA）阴性组外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg细胞水平（2.85%±0.87%）高于ACPA阳性组（1.40%±0.63%,P<0.01）。活动期RA患者关节液单个核细胞FoxP3基因表达水平高于RA患者外周血和健康对照外周血（P<0.01）;活动期RA患者外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞比例与疾病活动指标无相关性（P>0. 05）。结论 RA患者关节液CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞的变化更能反映RA炎症部位免疫耐受失衡机制。     

ITP 病人外周血CD4+ CD25+ CD127－ 调节T 细胞的检测及临床意义

目的: 探讨特发性血小板减少性紫癜( ITP) 病人外周血CD 4⁺ CD 25⁺ CD 127^－调节T 细胞( T
regulatory cells,Treg) 表达水平的变化及意义。方法: 观察32 例ITP 病人及20 例正常对照,应用流式细胞仪检
测外周血CD 4⁺CD 25⁺CD 127^－Treg 细胞的表达水平。结果: ITP 病人治疗前CD 4⁺ CD 25⁺ CD 127^－ Treg 细胞表
达水平明显降低( 2． 90±1． 00) ,与治疗恢复期( 7． 36±1． 46) 及正常对照组( 4． 52±0． 94) 比较,差异均有统计学意
义( P＜0． 05) 。治疗恢复期病人CD 4+CD 25+CD 127－Treg 细胞表达水平明显高于正常对照组( P＜0． 05) 。结论:
ITP 病人外周血CD 4⁺CD 25⁺CD 127^－Treg 细胞表达水平下降,激素的有效治疗能提高病人机体内CD 4⁺CD 25⁺
CD 127^－Treg 细胞表达水平。     

非小细胞肺癌患者外周血CD8+CD39+T细胞水平及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平及临床意义。方法选取60例NSCLC患者为NSCLC组,60例健康人群为对照组。检测两组外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平,分析NSCLC患者外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平与其临床特征和预后的关系。结果NSCLC组外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平显著高于对照组(P＜0.05)。肿瘤直径＞3 cm、低分化、TNMⅢ期的NSCLC患者外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平高于肿瘤直径≤3 cm、中高分化、TNMⅠ~Ⅱ期的患者(P＜0.05)。CD8⁺CD39⁺T细胞高水平组术后1年肿瘤无进展生存率及无进展生存期均低于低水平组(P＜0.05)。TNM分期、外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平是NSCLC患者预后的影响因素(P＜0.05)。结论CD8⁺CD39⁺T细胞在NSCLC患者外周血中呈高水平,且与临床病理特征及预后关系密切,可作为患者病情和预后的评估指标。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD3－CD16+CD56+NK细胞水平变化的临床意义

分析系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3－CD16⁺CD56⁺NK细胞水平变化。94例SLE患者作为研究对象,另选取同期健康体检者50例为对照组。结果显示SLE组CD3－CD16⁺CD56⁺NK细胞计数和百分率均明显低于对照组(P＜0.05);Pearson积差分析显示CD3－CD16⁺CD56⁺NK细胞计数与SLEDAI评分和24 h尿蛋白定量呈明显负相关性(P＜0.05);以8.04%为临界值,CD3－CD16⁺CD56⁺NK细胞计数判断SLE活动性的灵敏度为57.78%,特异度为78.57%,AUC为0.677。 实验表明SLE患者外周血CD3－CD16⁺CD56⁺NK细胞表达明显减少,观察其表达水平变化可为判断病情活动度和肾功能损害提供参考依据。     

人乳牙牙髓干细胞对干燥综合征患者CD4+T细胞的免疫抑制效应

目的 探讨在体外人乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth, SHED)及其联合IL-6抗体对干燥综合征患者(Sjgren syndrome, SS)外周血活化的CD4⁺T细胞的免疫抑制效应。方法 培养并鉴定SHED;流式细胞术检测健康者和SS患者外周血CD4⁺T细胞中Th1、Th2、Th17、Treg及Tfh的比例;将健康者和SS患者PBMC各自单独培养或与SHED共培养,ELISA法检测培养上清液中IL-6浓度,在各组中添加或不添加IL-6抗体,72h后流式细胞术检测CD4⁺T细胞增殖情况。结果 SS患者外周血CD4⁺T细胞中Th17及Tfh比例较健康者升高(P<0.05);健康者与SS患者共培养组的Th17比例显著降低(P<0.001),SS患者共培养组的Treg比例有所升高(P<0.05);在SS患者共培养组中添加IL-6抗体,可显著降低CD4⁺T细胞中Th2的比例(P<0.05)。结论 SHED可抑制SS患者CD4⁺T细胞的增殖,降低SS患者CD4⁺T细胞中Th17的比例且增加Treg的比例;IL-6抗体可降低与SHED共培养的SS患者PBMC中CD4⁺T细胞Th2亚型比例。     

HIV/AIDS患者CD4+T淋巴细胞检测结果与抗病毒治疗效果

目的 探讨某地区HIV/AIDS患者CD4⁺T淋巴细胞检测结果与抗病毒治疗效果,同时进行相关性分析。方法 2013年2月~2016年1月选择在笔者医院诊治的HIV/AIDS患者60例作为观察组,同期选择在笔者医院进行健康体检的健康人60例作为对照组,观察组都给予HAART标准治疗方案,观察组在治疗前后、对照组在入院时都进行CD4⁺T淋巴细胞与细胞因子表达的检测。结果 观察组外周血的CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例明显低于对照组（P<0.05）,两组CD4⁺CD25⁺的细胞比例对比,差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,观察组的血浆IL-10和TGF-β1含量都显著升高（P<0.05）。治疗后观察组的CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例都明显上升（P<0.05）,而血浆IL-10和TGF-β1含量明显降低（P<0.05）。在观察组中,Spearman秩相关分析显示CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例与IL-10、TGF-β1水平均呈负相关（P<0.05）。结论 HIV/AIDS患者只有较低的免疫功能,具有较低的CD4⁺T淋巴细胞亚群比例和较高的IL-10和TGF-β1水平,HAART治疗能改善免疫功能,为此通过CD4⁺T淋巴细胞就能判断HIV/AIDS患者的治疗效果和病情。     

探讨CRTh2、CysLT1R及H1R在支气管哮喘患者外周血CD3+CD56+NKT细胞中的表达

目的：　探讨Th2细胞趋化因子同源分子（chemoattractant receptor homologous molecule expressed on Th2 cells,CRTh2）、半胱氨酸白三烯受体1（cysteinyl leukotriene 1 receptor,CysLT1R）及组胺1型受体（histamine 1 receptor,H1R）在支气管哮喘（bronchial asthma,BA）患者外周血CD3⁺CD56⁺自然杀伤T细胞（natural killer T cells,NKT）中的表达情况及临床意义。方法：　收集2020年9月至2021年9月锦州医科大学附属医院BA患者（BA组,n=40）和健康对照组（healthy control,HC组,n=38）的外周血,流式细胞仪检测BA组和HC组外周血中CRTh2、CysLT1R及H1R在CD3⁺CD56⁺标记的NKT细胞上的表达,同时对其与血清总IgE（total immunoglobulin E,TIgE）、呼出气一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide,FeNO）及肺功能第一秒用力呼气量/用力肺活量%（forced expiratory volume in the first second/forced vital capacity%,FEV1/FVC%）的相关性分析。结果：　BA组[22.50（15.78,29.20）]外周血CD3⁺CD56⁺NKT细胞百分比较HC组[27.90（21.50,32.45）]降低（P=0.024）;进一步比较BA组[70.05（63.20,78.45）]CD3⁺淋巴细胞百分比低于HC组[73.70（69.88,79.38）]（P=0.035）。BA组[0.08（0.05,0.17）]CysLT1R百分比较HC组[0.16（0.10,0.34）]降低（P=0.004）;BA组CRTH2、H1R百分比[1.12（0.53,1.88）;5.21（1.41,10.10）]与HC组[1.17（0.60,4.25）;4.61（1.42,8.53）]比较,无统计学差异（P=0.234;P=0.697）。进一步对比CRTh2、H1R的平均荧光强度（mean fluorescence intensity,MFI）,BA组[925.52（623.50,1 279.25）]CRTh2 MFI较HC组[1 345.50（891.00,1 977.75）]降低（P=0.002）;BA组[769（657.50,975.00）]H1R MFI与HC组[835.00（560.00,959.25）]无统计学差异（P=0.834）。CD3⁺CD56⁺NKT细胞与血清TIgE、FeNO无明显相关性（r=-0.052、r=0.014）,与FEV1/FVC%水平呈正相关（r=0.402,P=0.01）。CRTH2（r=0.166、r=-0.040）、CysLT1R（r=0.114、r=-0.150）及H1R（r=0.103、r=-0.096）与血清TIgE、FeNO无明显相关性。结论：　CD3⁺CD56⁺NKT细胞可能在支气管哮喘发病过程中起重要作用,H1R在CD3⁺CD56⁺NKT细胞上可能不表达,CRTh2与CysLT1R在BA患者CD3⁺CD56⁺NKT细胞上表达减少可能会为临床精准诊疗提供依据。     

二烯丙基二硫对CD44+人胃癌AGS细胞生长的影响

目的分析二烯丙基二硫(DADS)对CD44⁺胃癌AGS细胞增殖与周期分布的作用,为DADS抑制胃癌作用机制研究提供进一步实验依据。方法经免疫磁珠技术富集人胃癌细胞株AGS中的CD44⁺细胞,流式细胞术检测CD44⁺细胞比率。肿瘤球形成、Transwell迁移及侵袭实验验证CD44⁺细胞的干样特性。MTT、软琼脂集落形成及流式细胞术分析DADS对干样细胞的生长、细胞周期分布的作用。结果免疫磁珠术富集了99.9% CD44⁺细胞。相较于未分选的AGS组,CD44⁺AGS组细胞生长2周后成球状态良好,且表现出更强迁移、侵袭能力(P＜0.05)。不同质量浓度DADS处理可明显抑制CD44⁺细胞增殖,且其抑制作用呈质量浓度依赖性(P＜0.05);30 mg/L和60 mg/L DADS可抑制CD44⁺细胞集落形成能力(P＜0.05),且可导致细胞周期呈现G₂/M期阻滞(P＜0.05)。结论DADS可明显削弱CD44⁺细胞的生长能力,与阻断细胞周期于G₂/M期有关。     

类风湿关节炎患者外周血腱糖蛋白C 与CD4+T细胞亚群的关系

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血腱糖蛋白C(TN-C)的表达,并分析其与CD4⁺T细胞亚群及临床指标的相关性。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对RA患者(n=130)和健康对照者(n=40)进行血清TN-C检测,流式细胞术(FCM)检测所有受试者外周血CD4⁺T细胞亚群的计数及百分比,并记录RA患者的各项临床指标。比较两组血清TN-C水平,分析其与外周血CD4⁺T细胞亚群及临床指标的相关性。结果 RA患者血清TN-C水平显著高于对照组(P=0.000);类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)阳性患者血清TN-C水平高于阴性患者(P＜0.05)。TN-C的曲线下面积(AUC)为0.85,敏感度为63.10%,特异性为95.00%,95%CI为0.79～0.91。与对照组、TN-C正常组比较,TN-C升高组Treg细胞计数及百分比降低,Th17/Treg比值升高(P＜0.01)。RA患者血清TN-C水平与Treg细胞计数及百分比均呈负相关 (r=-0.368、-0.237,P＜0.01),与Th17/Treg比值呈正相关(r=0.229,P＜0.05)。结论 RA患者血清TN-C高表达,外周血Th17/Treg失衡,TN-C可能通过影响Th17/Treg平衡参与 RA 过程。     

IL-21对恒河猴SHIV特异性CD8+T细胞毒性效应的影响

目的探讨白细胞介素21(interleukin 21, IL-21)对SHIV特异性CD8⁺ T细胞毒性效应的影响。方法定时采集16只SHIV感染恒河猴的外周血,应用实时荧光定量RT-PCR测定病毒载量,流式细胞仪测定CD8⁺ T细胞绝对数,并且体外检测经IL-21刺激SHIV特异性CD8⁺ T细胞后其IL-21R、CD107a及胞内穿孔素(perforin)的表达水平。结果体内实验结果表明外周血病毒载量和CD8⁺ T细胞绝对数之间呈一定程度的负相关。体外实验结果表明SHIV特异性CD8⁺ T细胞经IL-21刺激后其细胞表面表达的IL-21R显著上调,而且perforin⁺ CD8⁺T细胞和CD107a⁺ CD8⁺T细胞的百分比上升,同未经刺激的对照组相比具有统计学差异。结论IL-21能够促进SHIV特异性CD8⁺T细胞的毒性效应。     

外周血淋巴细胞和CD4+T细胞在类风湿关节炎中的表达和意义

目的 研究外周血淋巴细胞亚群绝对数量及CD4⁺T细胞亚群绝对数量在类风湿关节炎患者中的表达机制及临床意义。方法 入组137例RA患者和50例健康人用流式细胞技术检测外周血淋巴细胞亚群及CD4⁺T细胞亚群绝对计数,并收集临床资料包括性别、年龄、病程、DAS28评分等;比较早期RA患者(病程≤2年)与非早期RA患者(病程>2年)淋巴细胞亚群及CD4⁺T细胞亚群绝对计数,评估不同病程RA患者的免疫功能;比较初治(初发患者)、复治患者(使用DMARDs≥6个月)与健康人CD4⁺T细胞亚群绝对计数,评估治疗与未治疗对RA患者免疫状态的影响;按DSA28评分分层,比较不同疾病活动组与健康对照组Th17、Treg细胞绝对计数及Th17/Treg比值的不同。结果 RA患者Th细胞明显高于健康对照组、 NK细胞明显低于健康对照组, 差异均有统计学意义(P<0.05); Th1、 Th2、 Treg、 Th1/Th2、 Th17/Treg与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);非早期RA患者总T、Th17细胞明显低于早期RA患者,差异有统计学意义(P<0.05);初治组、复治组与健康对照组CD4⁺T细胞亚群比较,Th1、Th2、Th1/Th2、Th17/Treg差异均有统计学意义(P<0.05);在RA不同疾病活动分层中,Treg细胞绝对数均低于健康对照组,Th17细胞绝对数高于健康对照组。其中3.2相似文献   

急性痛风性关节炎患者外周血脂联素与CD4+T细胞亚群的分析及相关性研究

目的 比较急性痛风性关节炎患者与健康对照组外周血脂联素及CD4⁺T细胞亚群的差异,并探究痛风患者脂联素与血尿酸、疾病活动度、CT4⁺T细胞亚群及部分细胞因子的相关性。方法 收集急性痛风组(n=90)及健康对照组(n=72)的临床资料(包括一般资料、中性粒细胞、红细胞沉降率、C反应蛋白、血尿酸、CT4⁺T细胞亚群及部分细胞因子);检测两组外周血脂联素水平,比较两组间外周血脂联素及CD4⁺T细胞亚群的差异;分析脂联素与各临床资料的相关性。结果 与健康对照组比较,急性痛风组外周血脂联素水平明显降低(P＜0.001),且Th2、Th17、Th17/Treg均升高(P＜0.05),Treg、Th1/Th2均降低(P＜0.05)。急性痛风组外周血脂联素与中性粒细胞、红细胞沉降率及C反应蛋白均呈负相关(r=-0.244,P＜0.05;r=-0.311,P＜0.05;r=-0.506,P＜0.001),而与血尿酸无相关性。急性痛风组外周血脂联素与Th1和Th1/Th2均呈正相关(r=0.252,P＜0.05;r=0.218,P＜0.05)。急性痛风组外周血脂联素与白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)均呈正相关(r=0.323,P＜0.05;r=0.377,P＜0.05;r=0.359,P＜0.05);而与白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)呈负相关(r=-0.265,P＜0.05;r=-0.299,P＜0.05)。多元线性回归分析显示,急性痛风组外周血脂联素与红细胞沉降率、C反应蛋白、IL-6及TNF-α均呈负相关(BESR=-12.541,P=0.003;BCRP=-8.256,P=0.024;BIL-6=-15.907,P=0.037;BTNF-α=-79.770,P=0.040),而与Th1呈正相关(BTh1=2.959,P=0.006)。结论 急性痛风性关节炎患者外周血脂联素水平降低,Th2和Th17升高,而Treg降低,脂联素降低与急性痛风性关节炎患者免疫紊乱及免疫炎症相关。     

胃癌病人外周血及肿瘤组织调节性T 细胞的表达水平及临床意义

目的: 探讨胃癌病人肿瘤组织及外周血中调节性T 细胞( Regulatory cell，Trey) 表达水平及其临床意
义。方法: 自2015－04～ 2016－04 连续性纳入于我院就诊胃癌病人68 例为研究组，同期纳入我院体检中心70 例
健康人员为对照组。检测并比较两组外周血CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 及TGF－β1 表达水平; 分析胃癌肿瘤组
织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 表达水平与血清CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 及TGF－β1 表达水平之间相关性; 以及
肿瘤组织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 与胃癌病人病情严重度之间的相关性。结果: 研究组外周血CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 比例( t = 16．254，P = 0．000) 及TGF－β1( t = 5．841，P = 0．000) 表达水平均显著性高于对照组。胃癌病
人肿瘤组织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 表达水平与外周血CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs( r = 0．793，P= 0．000) 及TGF
－β1( r = 0．690，P= 0．000) 表达水平呈明显正相关。胃癌病人血清及肿瘤微环境CD4⁺、CD25⁺、Foxp3 Tregs 表达
水平与病人TNM 分期，分化程度及有无淋巴结转移显著性相关( P＜0．05) 。结论: 肿瘤组织CD4⁺、CD25⁺、Foxp3
Tregs 表达水平与胃癌病人疾病严重程度息息相关，可作为胃癌诊断、治疗和预后评估的重要指标。     

基于大鼠模型的骨髓CD34+、Fas(CD95)、TNF-α与再生障碍性贫血中医辨证分型关系的研究

  目的：探讨再生障碍性贫血(aplastic anermia,AA)大鼠模型的骨髓中凋亡因子CD34⁺、Fas(CD95)、TNF-α表达与中医证型的关系。  方法：将60只Wistar 雄性大鼠随机分为正常组、模型组、心脾两虚组、脾肾阳虚组、肝肾阴虚组,每组12只。采用马利兰丙酮提取液腹腔注射制备大鼠AA模型,然后按相关文献方法加重模型大鼠的心脾两虚、脾肾阳虚、肝肾阴虚症状。检测各组大鼠的白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)水平及其骨髓CD34⁺、Fas、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况。  结果：①与正常组比较,其余各组大鼠的Hb、RBC、WBC、PLT水平均显著降低(P<0.05),提示造模成功;与模型组比较,肝肾阴虚组大鼠的Hb、RBC、WBC、PLT水平降低更加显著(P<0.05)。②与正常组比较,其余各组大鼠的骨髓CD34⁺表达均明显下调(P<0.05),Fas、TNF-α表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,肝肾阴虚组大鼠的骨髓CD34⁺下调更加显著(P<0.05),Fas、TNF-α表达上调更加显著(P<0.05)。  结论：肝肾阴虚型再生障碍性贫血大鼠的病情更加严重,这与临床中再生障碍性贫血“阳虚易治,阴虚难调”的理论基本一致,同时也为再障的中医辨证分型提供了一定的客观化依据。     

CD4+ CD25+ Foxp3+及CD4+ CD25- Foxp3+调节性T细胞在小鼠衰老过程中的变化规律

目的分析小鼠脾细胞中CD4⁺ CD25⁺ Foxp3⁺及CD4⁺ CD25^- Foxp3⁺调节性T细胞随小鼠年龄增长的变化, 探讨调节性T细胞与衰老的关系。方法2个月(青年)、6个月(中年)和15个月(老年)小鼠各5只，无菌取脾脏制备单个脾细胞悬液，首先用PECy5-CD4抗体和FITC-CD25抗体进行细胞表面染色，PBS洗涤后，经打孔液和固定液处理，最后用PE-Foxp3抗体进行核内染色，并用流式细胞仪检测CD4⁺调节性T细胞的变化。结果脾脏中CD4⁺ T细胞的数量在不同年龄小鼠间变化不大，CD4⁺ T细胞中CD4⁺ CD25⁺ T细胞的数量也无明显改变，但随小鼠年龄的增长CD4⁺ Foxp3⁺ T细胞的数量明显升高，15个月小鼠CD4⁺ Foxp3⁺ T数量高达（16.83±0.44）%，明显高于2个月和6个月小鼠（P＜0.01）。随着年龄的增长CD25⁺ Foxp3⁺调节性T细胞数量逐渐减低，CD25⁺ Foxp3⁺ T细胞在15个月和6个月小鼠脾细胞中的数量明显低于2个月小鼠（P＜0.05）；而CD25^- Foxp3⁺ 调节性T瞎胞的数量随着年龄的增长持续升高(P＜0.01)；随着年龄的增长小鼠脾细胞中CD4⁺ CD25⁺ Foxp3⁺ T细胞与CD4⁺ CD25^- Foxp3⁺ T细胞的比值呈下降趋势。结论小鼠衰老过程中CD4⁺ CD25⁺ Foxp3⁺ T细胞的数量明显下降，而CD4 ⁺CD25^- Foxp3⁺ T细胞的数量明显上升，提示这两群调节性T细胞亚群在小鼠衰老中可能发挥不同作用。     

哮喘伴抑郁患者CD4+ T淋巴细胞五羟色胺受体及转运体基因的表达

目的 探索哮喘和抑郁二者共病的可能机制。 方法 使用自制量表、哮喘控制测试表（ACT）、哮喘生存质量问卷（AQLQ）、汉密尔顿抑郁量表（HRSD）对受试者（分为哮喘组、哮喘伴抑郁组、正常对照组）的一般情况及哮喘严重程度、哮喘控制情况、哮喘生活质量、心理卫生情况进行评估。对哮喘及哮喘伴抑郁组受试者测定肺功能及血中嗜酸性粒细胞及IgE水平。所有受试者的血样提取分选CD4⁺ T细胞,行实时荧光定量聚合酶链式反应（real time-PCR）检测SLC6A4、HTR7、HTR1A、HTR2A基因的表达水平。 结果 哮喘组及哮喘伴抑郁组SLC6A4基因的相对表达量低于正常对照组( P=0.000);哮喘组HTR2A基因的表达量低于正常对照组( P=0.021),哮喘组HTR2A基因表达有低于哮喘伴抑郁组的趋势( P=0.077);哮喘伴抑郁组较哮喘组有更低的哮喘生活质量评分( P=0.004)。结论 支气管哮喘及抑郁可能存在基因水平的联系,SLC6A4基因的表达水平下降可能是二者共病的机制之一。     

NAD+在心脏缺血及再灌注损伤中的作用

目的 通过建立大鼠心肌缺血再灌注(ischemia/ reperfusion, I/R)模型,探索药物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD⁺)在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的保护作用。方法 采用手术结扎前降支建立大鼠心肌I/R模型,20只Sprague-Dawley ( SD)大鼠随机分入I/R+NAD⁺组(n=10)和I/R+NS组(n=10),通过血清肌钙蛋白(cTn-I),TTC染色检测心肌损伤程度, TUNEL染色用于检测缺血区域凋亡信号。结果 成功建立大鼠I/R模型,I/R+NAD⁺组大鼠血清cTn-I水平显著低于I/R+NS组[(10.01±3.26)ng/ml vs. (57.17±14.83)ng/ml, P＜0.01]。TTC染色结果显示: I/R+NAD⁺组大鼠心脏梗死体积显著低于I/R+NS组[(68.06±16.04)mm³ vs. (11.42±9.65)mm³, p=0.02]。TUNEL染色结果显示: I/R+NAD⁺组大鼠心脏梗死区域凋亡信号显著低于I/R+NS组。结论 NAD⁺在大鼠心肌缺血再灌注损伤具有显著保护作用,而其具体保护机制需进一步研究。     

经皮125I植入联合化疗在中晚期非小细胞肺癌治疗中的应用及对CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的影响

目的 探讨经皮放射性碘125粒子（¹²⁵I）植入联合化疗在中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）治疗中的应用及对CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺的影响。方法 选取2017年1月-2019年1月咸阳市中心医院收治的120例中晚期NSCLC患者,根据治疗方案分为研究组78例（经皮¹²⁵I植入联合化疗）和对照组42例（同步放化疗）。统计两组基线资料,并记录粒子植入情况及并发症情况,治疗6个月后评估两组临床疗效。比较两组外周血T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺占比及CD4⁺/CD8⁺治疗前后的变化。统计治疗期间不良反应发生情况。结果 两组性别、年龄、病灶部位、肿瘤直径、病理类型、临床分期及治疗前卡氏评分比较,差异无统计学意义（P >0.05）。研究组91.03%（71/78）患者植入粒子的分布符合术前模拟剂量分布;术后气胸30.77%（24/78）,肺内渗血28.21%（22/78）,发热19.23%（15/78）,粒子移位2.56%（2/78）,围术期均无死亡病例。两组临床疗效比较,差异有统计学意义（P <0.05）,研究组有效率高于对照组。两组治疗后外周血CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺及治疗前后的差值比较,差异有统计学意义（P <0.05）,研究组高于对照组;两组治疗后外周血CD8⁺及治疗前后的差值比较,差异无统计学意义（P >0.05）。两组不良反应（胃肠道反应、粒细胞减少及放射性食管炎发生率）比较,差异无统计学意义（P >0.05）;两组放射性肺炎发生率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,研究组低于对照组。结论 经皮¹²⁵I植入联合化疗可有效治疗中晚期NSCLC,可明显改善患者免疫功能,减少不良反应。     

维胃方对胃溃疡大鼠胃黏膜MPO、H+-K+-ATP酶活性的影响

[目的]观察维胃方对胃溃疡大鼠胃黏膜髓过氧化物酶(MPO)和H⁺-K⁺-ATP酶的影响,探讨维胃方治疗胃黏膜损伤的可能机制。[方法]采用乙酸烧灼法,建立胃溃疡模型,用比色法测定胃黏膜MPO和H⁺-K⁺-ATP酶活性,并观察胃黏膜组织病理学变化。[结果]从胃黏膜大体标本、切片观察,维胃方中剂量组疗效最佳。与自愈组和模型组比较,维胃方各组胃黏膜MPO活性显著降低(P<0.01或P<0.05),其中以维胃方中剂量组值最小。维胃方各剂量组的H⁺-K⁺-ATP酶活性均高于自愈组(P<0.01或P<0.05),接近正常组(P>0.05),表明维胃方能恢复其活性。[结论]维胃方对大鼠实验性胃溃疡具有明显的保护作用,其机制可能是通过降低大鼠胃黏膜MPO活性,进而减轻炎症介质对胃黏膜的损伤。同时其能修复已损伤的胃黏膜,故能恢复H⁺-K⁺-ATP酶活性。