miR-455-3p在糖尿病肾脏疾病大鼠肾小球硬化过程中的作用及厄贝沙坦的干预研究

目的：研究miR-455-3p在糖尿病肾脏疾病（Diabetic kidney disease, DKD）大鼠肾小球硬化过程中的作用,以及厄贝沙坦的干预对miR-455-3p及肾小球硬化过程的影响。方法：取雄性SD大鼠24只,随机取6只作为正常组（Control组）,余大鼠采用高脂高糖饲料喂养及链脲佐菌素（STZ）腹腔注射制备DKD模型,造模成功后随机分为模型组（STZ组）、过表达miR-455-3p组（STZ+miR-455-3p组）、厄贝沙坦干预组（STZ+厄贝沙坦组）。其中,STZ+miR-455-3p组在STZ注射后第二周和第五周以20mg/kg的剂量腹腔注射miR-455-3p 激动剂（miR-455-3p agomir）,STZ+厄贝沙坦组予50mg/kg的厄贝沙坦悬浊液灌胃,其他组予等剂量生理盐水灌胃,12周后记录大鼠24h尿量、24h尿白蛋白水平,采用qRT-PCR法检测各组大鼠血清及肾组织中miR-455-3p的表达水平,PAS染色法观察大鼠肾组织病理改变,Western blot方法检测肾组织中胶原蛋白I（Collagen I）和增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen ,PCNA）蛋白表达水平。结果：（1）STZ+miR-455-3p及STZ+厄贝沙坦组大鼠24h尿量、24h尿白蛋白水平较之STZ组明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;（2）STZ+miR-455-3p及STZ+厄贝沙坦组大鼠血清及肾组织中miR-455-3p表达水平较之STZ组明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;（3）STZ+miR-455-3p及STZ+厄贝沙坦组大鼠肾组织中Collagen I、PCNA表达水平较STZ组明显减少。结论：miR-455-3p参与DKD进程,可能是DKD治疗的新靶点,而厄贝沙坦能够通过调控miR-455-3p延缓DKD肾小球硬化进程。     

缺血性急性肾损伤大鼠miR-214介导的HIF1α、KIM1信号通路作用机制

目的:探讨缺血性急性肾损伤(IAKI)大鼠miR-214介导的缺氧诱导因子l(HIFlα)、肾损伤分子1(KIMl)信号通路作用机制。方法:将48只大鼠分为假手术组、IAKI组和miR-214组,建立IAKI组和miR-214组IAKI大鼠模型,48 h后抽取3组大鼠眼眶静脉血并收集尿液,检测生化指标及KIM1表达,采用Masson’s Trichrome、TUNEL、免疫印迹及PCR检测肾组织病理、肾小管细胞凋亡及肾组织中HIF1α、KIM1蛋白及mRNA表达。结果:IAKI组大鼠血清中血清肌酸酐(Scr)、血尿素氮(BUN)和尿24 h三磷酸尿苷(UTP)表达高于假手术组(P<0.05),miR-214组大鼠血清中Scr、BUN、24 h UTP含量高于IAKI组(P<0.05);假手术组肾脏组织结构完整,肾小管和肾小球形态良好;IAKI组肾小球间质增多,肾间质增宽,炎症浸润严重,肾小管严重萎缩;miR-214组与IAKI组相比,肾小球硬度增加,肾小管周围组织炎症浸润更加严重。IAKI组大鼠肾小管细胞凋亡最为严重,凋亡程度明显高于假手术组;miR-214组与IAKI组相比肾小管细胞凋亡程度增加;IAKI组大鼠肾组织中HIF1α、KIM1蛋白以及mRNA表达高于假手术组(P<0.05),miR-214组与IAKI组相比肾组织HIF1α、KIM1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。结论:miR-214升高会加快肾小管细胞凋亡,加重肾组织损伤,增加HIF1α、KIM1表达,进一步加重IAKI大鼠病情。     

褪黑素对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用

目的 探讨褪黑素对实验性糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法 将实验动物随机分为正常对照组（C组）、糖尿病组（D组）及糖尿病褪黑素治疗组（M组）。给予褪黑素治疗4周。检测血糖、血肌酐、肾脏肥大指数（肾重／体重），放免法测定24h尿白蛋白排泄量，对肾脏标本进行光镜观察，用图像分析仪测量各组大鼠平均肾小球面积、平均肾小球体积。同时用实时荧光定量RT-PCR法对糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA表达进行半定量分析。结果 褪黑素治疗组较糖尿病组24h尿白蛋白排泄量、肾脏肥大指数均明显下降（P〈0.05）。实时荧光定量RT-PCR检测糖尿病大鼠肾脏皮质TGF-β1 mRNA表达明显高于正常对照组，为C组的9．2倍，给予褪黑素治疗后，糖尿病大鼠TGF-β1 mRNA表达水平下降3．95倍，但仍明显高于正常对照组（P〈0.01）。肾小球平均面积、平均肾小球体积M组显著低于D组（P〈0.01）。结论 褪黑素可抑制糖尿病大鼠肾脏皮质TGF-β1mRNA表达，减少糖尿病大鼠的尿白蛋白，减轻及延缓肾小球硬化，发挥保护肾脏的作用。     

活性维生素D3抗炎机制对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

[摘要] 目的 探讨活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能机制。方法 实验选用3月龄雄性SD大鼠(清洁级)24只。按随机数字表法分为3组,分别为正常对照组(NC),糖尿病模型组(DM),活性维生素D3治疗组(DC),每组8只。喂养12周后,观测肾组织形态学和肾功能变化,尿白蛋白排泄率等指标的变化,用免疫组化法检测肾脏转化生长因子- 1（TGF- 1）、核转录因子- B （NF- B）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD68表达水平的变化,RT-PCR方法检测各组大鼠肾皮质TGF- 1 、NF- B、MCP-1 mRNA表达水平的变化。结果 与正常对照组比较,第12周末糖尿病肾病模型组大鼠的肾脏肥大指数（KW/BW）、平均肾小球体积（MGV）、系膜面积比(FMA)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)、均有明显升高(P<0．05),肾皮质TGF- 1 、NF- B、MCP-1 、CD68的蛋白表达水平也有显著增高(P<0．05),同时肾组织TGF- 1 、NF- B、MCP-1 mRNA表达水平均明显升高(P<0．05)。活性维生素D3治疗组的上述指标与糖尿病模型组比较,则有明显的降低(P<0．05)。结论 活性维生素D3对于糖尿病肾脏病变至少具有部分保护作用,其机制可能为通过抑制糖尿病大鼠肾脏的TGF- 1 、NF- B、MCP-1等细胞因子的表达,抑制巨噬细胞的聚集,从而经由抗炎机制发挥对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

miR-214靶向PTEN介导PI3K/AKT信号通路对糖尿病肾病大鼠的保护机制

目的 探讨微小RNA（miR-214）靶向磷酸酶与张力蛋白同源物（PTEN）介导磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路减轻糖尿病肾病(DN)大鼠的氧化应激和肾间质纤维化的作用和机制。方法 将40只SD雄性大鼠分为对照组（control组）、模型组（DN组）、miR-214阴性对照组（DN+miR-NC组）和miR-214模拟物组（DN+miR-214 mimics组）,每组10只;qRT-PCR检测各组大鼠肾组织中miR-214的表达;电子天平称量各组大鼠体质量和肾质量,计算肾指数;血糖仪测定各组大鼠的空腹血糖（FPG）;双缩脲法测定各组大鼠24 h尿蛋白（UP）水平;全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐（Scr）和血清尿素氮（BUN）的水平;HE染色观察各组大鼠肾组织病理变化;Masson染色观察各组大鼠肾组织间质纤维化;ELISA检测各组大鼠血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的表达;免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达;生物信息学工具预测靶基因;双荧光素酶报告基因检测基因或蛋白之间的相互作用;Western blot检测各组大鼠肾组织中PTEN、p-PI3K、p-AKT和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的表达。结果 miR-214在DN大鼠肾组织中呈低表达,在DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中表达显著上调（均P＜0.001）;miR-214 mimics使大鼠的体质量升高,肾指数、FPG、UP、Scr及BUN水平下调（均P＜0.05）;DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中肾间质中的炎性细胞浸润减少,胶原纤维沉积减少（P＜0.01）;miR-214 mimics使大鼠血清中MDA的水平降低,SOD、GSH、GSH-PX的水平升高（均P＜0.05）,大鼠肾组织中TGF-β1的表达水平下降（P＜0.05）;miR-214与PTEN存在靶向关系;miR 214 mimics使大鼠肾组织中PTEN蛋白表达下调,p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达上调（均P＜0.05）。结论 miR-214在DN大鼠肾组织中低表达,过表达miR-214对DN大鼠的肾组织有保护作用,可能与降低肾组织的氧化应激水平、TGF-β1蛋白表达和抑制PI3K/AKT通路激活有关。     

血管紧张素Ⅱ与糖尿病大鼠足细胞损害的实验研究

目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在糖尿病大鼠肾小球滤过屏障外层足细胞损害中的作用,以探讨糖尿病肾病的发生机制.方法:实验大鼠分为3组:正常对照组(C)、糖尿病组(D)和氯沙坦治疗病鼠组(DT),实验第5周末检测肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和尿白蛋白排泄率(UAER)的水平,利用透射电子显微镜观察肾脏足细胞超微结构,同时用免疫组化技术检测肾小球足细胞损伤标志蛋白-desmin蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,糖尿病组大鼠肾皮质SOD和CAT活性显著降低,而MDA含量明显增加,肾小球内desmin蛋白表达上调,足细胞部分足突融合,尿白蛋白排泄率增高;AngⅡ1型受体拮抗剂氯沙坦明显减轻糖尿病大鼠肾皮质SOD、CAT、MDA及肾小球内desmin蛋白表达的改变,减轻足细胞足突融合,降低尿白蛋白排泄率.结论:糖尿病时AngⅡ参与增高肾组织氧化应激,损害肾小球滤过屏障外层足细胞的结构和功能,促使糖尿病肾脏损害和蛋白尿的发生.     

姜黄素对糖尿病大鼠肾脏一氧化氮水平的影响

目的:研究姜黄素(Curcumin,Cur)对糖尿病大鼠肾组织一氧化氮水平的影响及对肾脏的保护作用.方法:链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,并随机分为糖尿病组和姜黄素治疗组,另设一正常对照组.治疗组组予姜黄素200mg/(kg·d)灌胃,为期8周.然后观察肾脏结构和功能及肾皮质一氧化氮(NO)水平的变化.结果:与正常对照组大鼠比较,糖尿病组大鼠、尿白蛋白排泄率(UAER)、尿白蛋白/肌酐(Alb/Cr)、肾重(KW)及肾肥大指数(KW/BW)明显升高;光镜示肾小球体积明显增大,肾小球平均截面积(MGA)和肾小球平均体积(MGV)明显增加;肾皮质NO水平明显增加.而姜黄素治疗组上述异常均明显减轻.结论:姜黄素能降低早期糖尿病大鼠肾组织NO水平,减轻肾小球高滤过和肾脏肥大,降低尿白蛋白,改善肾功能.     

单核细胞趋化蛋白-1和转化生长因子β1及结缔组织生长因子在2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在链脲佐菌素(STZ)诱发的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达。方法将35只SD雄性大鼠随机分为对照组14只和糖尿病肾病组21只。糖尿病肾病组给予高脂饮食,产生胰岛素抵抗后一次性腹腔注射STZ,35 mg/kg;对照组给予常规饲料,腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。采用免疫组织化学法检测两组大鼠肾组织3种因子的表达。结果 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中(主要在肾小管)有较强的表达,糖尿病肾病组大鼠3种因子的平均吸光度分别为(0.29±0.04)、(0.20±0.02)、(0.20±0.02),对照组大鼠分别为(0.21±0.02)、(0.17±0.01)、(0.16±0.02),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中表达增强,参与了糖尿病肾病早期的发病。     

氯沙坦钾对1型糖尿病大鼠肾组织转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的研究氯沙坦钾对1型糖尿病大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法建立链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组（A组）、糖尿病组（B组）、氯沙坦钾治疗组（c组）,每组18只。4周、8周、12周后观察大鼠血糖、尿白蛋白排泄率的变化和肾组织TGF-β1、CTGF的表达水平以及TGF-β1、CTGFmRNA的表达;光镜下观察12周后肾组织的形态变化。结果①各组大鼠血糖、尿白蛋白排泄率、TGF-β1、CTGF的表达水平和TGF-β1、CTGFmRNA的表达除了血糖以外的指标,与A组比较,B组和C组明显增高（P〈0．05）,与B组相比,C组有所下降（P〈0．05）;②光镜下观察12周后B组肾小球肥大,肾小管扩张明显,C组肾小球肥大和肾小管扩张程度较轻。结论氯沙坦钾可下调TGF-β1、CTGF的表达,可减少肾组织的损害。     

姜黄素对大鼠糖尿病肾的实验研究

目的研究姜黄素对糖尿病大鼠肾脏的保护作用并探讨其保护作用的机制.方法用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠动物模型,给予姜黄素250 mg/(kg·d)治疗共6周.测定尿白蛋白排泄量、尿TXB2、Ccr,肾组织光镜和电镜检查了解组织形态,肾组织免疫组化检查观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏皮质TGF-β1表达影响.结果治疗6周后,姜黄素治疗组糖尿病大鼠的尿白蛋白和尿TXB2排泄量明显下降,Ccr亦下降.光镜下和电镜下系膜区基质增生明显减轻,肾脏皮质TGF-β1免疫染色强度比未治疗明显减轻(P＜0.05).结论姜黄素对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制与抑制糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1蛋白过度表达,以及抑制花生四烯酸类生化途径有关.     

结缔组织生长因子在糖尿病大鼠肾脏中的表达及其意义

目的 :研究结缔组织生长因子 (CTGF)在链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏中的表达及其与肾小球肥大的关系。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照 (N)组与糖尿病肾病(DN)组。大鼠单侧肾切除后 ,腹腔注射STZ诱导糖尿病模型 ,观察第 4、8、12周血糖、体重、尿白蛋白排泄 (Ualb)和 2 4h尿蛋白定量 (2 4hUpro)的变化 ,同时观察 12周时肌酐清除率(Ccr)、肾小球面积及体积、肾重、肾组织总蛋白含量和肾皮质CTGF表达的改变。结果 :DN组 2 4hUpro、Ualb和Ccr较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,肾小球面积及体积、肾重和肾组织总蛋白含量均较N组显著增加 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。免疫组织化学半定量检测结果显示 ,DN组肾皮质CTGF表达较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,CTGF表达与肾小球体积及 2 4hUalb呈显著正相关关系 (均为P <0 .0 5 )。结论 :糖尿病大鼠早期肾脏CTGF表达增加可能是DN发生的重要机制     

神经肽Y及其Y2受体表达在糖尿病肾病中的变化及作用

目的 探讨神经肽Y(NPY)及其Y2受体(Y2R)表达、Na+,K+-ATPase活性在大鼠糖尿病肾病(DN)中的变化及作用.方法 采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠动物模型,随机分为对照组和糖尿病组(2周和4周组);采用放射免疫法测定血浆和肾皮质NPY水平,实时荧光定量PCR方法 检测肾皮质NPYmRNA的表达,免疫组织化学方法 检测肾皮质Y2R蛋白表达,同时检测大鼠的血糖、尿白蛋白排泄率(UAER)、肾重/体重和肾皮质Na+,K+-ATPase活性.结果 ①注射STZ诱导糖尿病发生2周、4周后,糖尿病组大鼠血糖、UAER和肾重/体重的显著高于正常对照组;②与正常对照组比较,糖尿病组大鼠血浆和肾皮质的NPY水平和Na+,K+-ATPase活性显著升高(P＜0.01);③糖尿病组大鼠肾皮质的NPY mRNA和Y2R蛋白表达显著高于正常对照组(P＜0.05).结论 糖尿病大鼠早期NPY、Y2R的表达和Na+,K+-ATPase活性的异常改变可能在糖尿病肾病的发生、发展过程中具有重要作用.     

活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1和HGF表达的影响

目的:探讨活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏(Transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)和肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)表达的影响.方法:雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组(NC),糖尿病模型组(DM),活性维生素D3治疗组(DC),每组10只.12周后,观测肾组织形态学和肾功能变化,尿白蛋白排泄率等指标的变化,用免疫组化法检测肾脏TGF-β1表达水平的变化,RT-PCR法检测肾皮质TGF-β1mRNA、HGFmRNA表达水平的变化.结果:与NC组比较,第12周末DM组大鼠肾脏肥大指数(KW/BW)、平均肾小球体积(MGV)、系膜面积比(FMA)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)均明显升高(P＜0.05),肾组织TGF-1mRNA及蛋白表达水平也显著升高(P＜0.05),同时肾皮质HGFmRNA表达也有所增加(P＜0.05).DC组HGFmRNA的表达水平较DM组显著升高(P＜0.05),而上述其他指标与DM组比较,则有明显的降低(P＜0.05).结论:活性维生素D3对于糖尿病肾脏病变至少具有部分保护作用,其机制可能为通过抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1的过度表达,而上调HGF的表达,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用.     

还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾组织糖基化及转化生长因子β1表达的影响

目的观察还原型谷胱甘肽及盐酸氨基胍对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织非酶糖化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,以发现更为有效的防治糖尿病肾病及减少终末期肾病发病率的方法。方法应用链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,随机分为正常对照组、糖尿病对照组(DM组)、氨基胍治疗组(DM AG组)、还原型谷胱甘肽治疗组(DM GLUT组)、氨基胍 还原型谷胱甘肽治疗组(DM AG GLUT组)。第8周留取双侧肾脏,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学等方法研究5组大鼠肾脏TGF-β1mRNA及蛋白质表达、肾皮质糖基化终末产物(AGEs)含量、24 h尿白蛋白、肾组织学形态,测定肾重/体重比值、血糖、糖化血红蛋白、血肌酐水平,计算肌酐清除率。结果(1)与正常对照组相比,各组糖尿病大鼠TGF-β1mRNA表达明显上调(P<0.01);肾皮质匀浆及血清TGF-β1蛋白量均明显高于正常对照组(P<0.01);肾皮质匀浆脂相、蛋白质相荧光值即AGEs含量均明显增高(P<0.01);血糖、糖化血红蛋白、尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率及肾重/体重比值均明显增高(P<0.01);(2)与DM组相比,DM AG组、DM GLUT组及DM AG GLUT 3组TGF-β1mRNA表达增加被明显逆转(P<0.05或P<0.01);肾皮质匀浆及血清TGF-β1蛋白量均明显降低(P<0.01或P<0.05);AGEs含量均明显降低(P<0.01或P<0.05);尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率及肾重/体重均明显降低(P<0.01);(3)PAS、PAM、Masson染色显示:DM组肾小球可见轻度系膜增殖,未见系膜细胞增生、局灶节段性硬化及肾小球基底膜(GBM)增厚;正常对照组、DM AG组、DM GLUT组、DM AG GLUT组肾小球无明显异常。结论还原型谷胱甘肽及盐酸氨基胍可以减轻糖尿病大鼠肾组织的非酶糖化过程,并减轻肾小球肥大及肾肥大,延缓其肾病发展,对糖尿病肾脏具有保护作用,二者对肾脏的保护作用至少部分与抑制TGF-β1在肾脏的过度表达有关。     

棓丙酯对糖尿病大鼠肾小球血管内皮生长因子——氧化氮轴的维护作用

目的 探讨糖尿病肾病大鼠肾小球血管内皮生长因子(VEGF)--氧化氮(NO)轴失衡的原因和(倍)丙酯对糖尿痛肾病肾小球病变保护作用.方法 将动物分为正常对照组、模型组和治疗组,应用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病肾病模型,治疗组每日腹腔注射(倍)丙酯溶液.PAS染色评价各组肾组织病理变化;RT-PCR检测肾小球eNOS和VEGF的表达水平;NOS分型试剂盒检测肾小球组织eNOS活性;氧化试剂盒检测肾小球组织氧化应激水平.结果 与正常组比较,模型组肾小球eNOS mRNA表达无明显变化,但eNOS活性明显降低;VEGF在模型组表达明显升高.模型组肾小球组织氧化应激水平明显较正常组升高,且这种升高与eNOS活性显著负相关.(倍)丙酯治疗组eNOS活性明显恢复,其肾小球病变减轻.结论 糖尿病肾病大鼠肾小球VEGF-NO轴失衡与eNOS功能缺陷有关,(倍)丙酯可纠正肾小球内VEGF-NO轴失衡并减轻肾小球病变.     

茵陈提取物对糖尿病大鼠肾组织中PTEN蛋白表达的影响及其肾脏保护作用

目的：探讨茵陈提取物（HACE）对糖尿病大鼠肾组织中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）表达的影响,阐明HACE对糖尿病大鼠肾脏保护作用的药理学机制。方法：采用链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠模型。30只Wistar大鼠随机分为对照组（6只）、模型组（12只）和HACE组（12只）,HACE组大鼠每天1次灌胃给予HACE（5 g·kg^-1）,对照组和模型组大鼠每天1次灌胃给予等量生理盐水。给药4个月后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率和尿总蛋白排泄率,HE染色观察大鼠肾组织病理形态表现,PAS和Masson染色检测肾小球细胞外基质（ECM）分布情况,免疫组织化学染色法检测大鼠肾组织中PTEN蛋白表达分布情况,Western blotting法检测各组大鼠肾脏组织中PTEN蛋白表达水平。结果：与模型组比较,HACE组大鼠肾小球系膜区扩大、PAS及Masson阳性染色物质聚集和基底膜增厚等现象明显减轻,24h尿白蛋白排泄率明显降低（P<0.05）,尿总蛋白排泄率差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学染色检测,对照组大鼠肾组织PTEN蛋白表达量较高,模型组大鼠肾组织中PTEN蛋白表达量降低,HACE组大鼠肾组织中PTEN蛋白表达量趋向正常。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组大鼠肾皮质中PTEN蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,HACE组大鼠肾皮质组织中PTEN蛋白表达水平明显升高（F=5.06,P<0.05）。结论：HACE提高大鼠肾脏组织中PTEN蛋白的表达可能是其对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制之一。     

转化生长因子β1在糖尿病大鼠肾脏表达中的研究

目的探讨链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠转化生长因子β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）的表达情况。方法实验采用成年雄性Sprague-Dawle大鼠20只,随机分为两组各10只,糖尿病组尾静脉注射STZ制成糖尿病模型,对照组尾静脉注射枸橼酸钠缓冲液。两组大鼠4周后处死,取肾脏组织行苏木精伊红染色法观察糖尿病肾脏组织的形态变化,同时行免疫组织化学SABC半定量检测TGF-β1蛋白的表达水平。结果糖尿病组肾脏组织光镜下出现肾小球的毛细血管球肥大,肾小囊腔呈裂隙状,基底膜轻度增厚,系膜增生,肾小管上皮细胞显示空泡和颗粒变性。TGF-β1蛋白在糖尿病大鼠肾脏上皮细胞和肾小球系膜细胞表达显著增高（P〈0.01）。结论实验动物的高血糖状态会损害肾脏组织,高血糖可能通过活化大鼠肾脏组织内TGF-β1,从而促进肾间质结缔组织增生和纤维化,从而导致肾小球硬化而引起糖尿病肾病。     

甘精胰岛素对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β1及结蛋白表达的影响

目的 探讨甘精胰岛素对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子-31(TGF-β1)及结蛋白表达的影响.方法 Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病组和胰岛素组.成模后1周,胰岛素组开始给予甘精胰岛素干预6周,于治疗前、治疗后1周、3周、6周监测大鼠血糖;治疗前、治疗后3周、6周测24 h尿白蛋白排泄量.光镜下观察肾组织形态学改变,免疫组织化学法观察肾组织TGF-31及结蛋白的表达.结果 与对照组比较,糖尿病大鼠血糖、24 h尿白蛋白、肾组织TGF-β1和结蛋白表达显著增加,经胰岛素治疗后,糖尿病大鼠血糖24 h尿白蛋白明显减少(P＜0.01),肾脏病理损伤显著减轻,肾组织TGF-31和足细胞结蛋白的表达明显减少(P＜0.05).结论 糖尿病大鼠肾组织TGF-β1和结蛋白增加,甘精胰岛素可能通过降低血糖抑制糖尿病大鼠肾组织TGF-β1和结蛋白表达,对肾脏起到保护作用.     

还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制

目的：探讨还原型谷胱甘肽(Glut)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及可能机制。方法：以链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,同时设对照组,给予还原型谷胱甘肽、盐酸氨基胍(AG)单独或联合治疗8周,分别以RT-PCR及免疫组化法检测肾皮质TGF-β1 mRNA及蛋白表达,行肾组织PAS染色测定平均肾小球截面积(MGA)及体积(MGV),同时检测尿白蛋白排泄率(UAER)、糖化血红蛋白(HbALC)、肾小球滤过率(Ccr)及肾重/体重比值。结果：8周时,各组糖尿病大鼠UAER、MGA、MGV、Ccr、肾重/体重比值、TGF-β1 mRNA及蛋白表达均较空白对照组明显增加(P<0.05或P<0.01)。还原型谷胱甘肽、盐酸氨基胍单独或联合治疗组UAER、MGA、MGV、Ccr、肾重/体重比值、TGF-β1 mRNA及蛋白表达均较糖尿病对照组明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论：还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。     

糖尿病大鼠肾组织Nephrin mRNA与Podocin mRNA表达的研究

目的观察糖尿病大鼠肾组织中nephrinmRNA、podocinmRNA蛋白表达与分布，探讨nephrin和podocin分子在糖尿病肾病蛋白尿中的可能作用。方法采用健康雄性Sprague—Dawley大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组，第4、8周任取6只大鼠，收集血、尿标本测定生化指标。大鼠肾组织分别作组织学、超微结构、应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）观察nephrinmRNA、podocinmRNA在肾组织中的表达。结果在4周、8周，糖尿病组血糖、肌酐清除率、尿白蛋白排泄率较正常对照组均有不同程度的升高。糖尿病组大鼠肾组织nephrinmRNA和podocinmRNA和蛋白表达较正常对照组明显降低。尿白蛋白排泄率与nephrin、podocin表达量呈负相关，nephrin与podocin表达量呈正相关。结论糖尿病大鼠肾小球上皮细胞足突nephrin、podocin蛋白表达的减少可能是糖尿病肾病蛋白尿发生的机制之一。