黄芪菟箭合剂对高糖诱导的足细胞损伤及凋亡的影响

目的 探讨黄芪菟箭合剂(HTD)对高糖诱导足细胞损伤及凋亡的影响.方法 体外培养永生化的肾小球足细胞,待足细胞分化完全后,用不同浓度HTD(0.25,0.5,0.75,1,1.25,1.5 mg/ml)刺激足细胞24 h,用乳酸脱氢酶释放法(LDH法)判断细胞的损伤程度,进而筛选HTD的最佳浓度,并观察其对足细胞形态的...     

黄芪甲苷抑制糖尿病大鼠足细胞凋亡的作用和机制研究

目的探讨黄芪甲苷（AS- IV）抑制糖尿病大鼠足细胞凋亡的作用及其机制,为糖尿病肾病的治疗开辟新途径。方法将体重180~220g健康雄性SD大鼠按配伍法分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病AS- IV治疗组,每组10只,链脲霉素（STZ）腹腔注射法建立糖尿病大鼠模型,糖尿病AS- IV治疗组予AS- IV 10mg/（kg·d）治疗,共8周;糖尿病组予等量1%CMC混悬液;正常对照组不予处理。第8周末测量大鼠体重、24h尿白蛋白、血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、ALT、血尿素氮、肌酐水平;PAS、Masson染色,光镜观察肾脏病理变化;肾母细胞瘤基因1（WT-1）免疫组织化学染色观察肾小球足细胞密度变化,TUNEL染色观察足细胞凋亡,real- time PCR及Western blot测大鼠肾皮质凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及其mRNA表达的变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组大鼠血糖、HbA1c和24h尿白蛋白增高,肾小球足细胞数量减少,系膜增生,足细胞凋亡增加,Bcl-2及其mRNA表达下调,Bax及其mRNA表达上调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。AS- IV可显著改善糖尿病大鼠蛋白尿,抑制肾小球足细胞数目减少、系膜区增生、足细胞凋亡,上调Bcl-2表达,抑制Bax表达。结论 AS- IV对早期糖尿病大鼠足细胞具有保护作用,可能与其调节凋亡蛋白Bcl-2和Bax,抑制足细胞凋亡相关。     

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制

目的:观察黄芪甲苷(AS-IV)对糖尿病肾病(DN)大鼠血糖、尿微量白蛋白、血清总蛋白、白蛋白、血清脂联素水平的影响及对肾脏的保护作用。方法:40只清洁级雄性SD大鼠分为正常组、模型组、黄芪甲苷低剂量组及黄芪甲苷高剂量组各10只。予链脲佐菌素造模,治疗8 w后处死大鼠取材及采血,取肾皮质行电镜观察,并检测血糖、尿微量白蛋白、血清总蛋白、白蛋白及脂联素水平。结果:与模型组比较,治疗后黄芪甲苷组血糖、尿微量白蛋白水平明显下降(P0.05),血清总蛋白、白蛋白及血清脂联素水平明显增加。结论:AS-IV对DN肾脏有明显保护作用,能降低血糖和尿白蛋白排泄量,改善低蛋白血症,升高血清脂联素水平,从而延缓糖尿病肾病的进展,其作用机制可能与上调血清脂联素水平有关。     

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠足细胞的影响及其机制研究

目的：探讨黄芪甲苷（AS- IV）对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞的保护作用及其机制,为DN早期防治开辟一条新途径。方法体重180~200g健康雄性SD大鼠45只按配伍法分为正常对照组（NC组）、DN组和AS- IV治疗组（DN＋AS- IV组）,链脲佐菌素腹腔注射建立大鼠早期DN模型。DN＋AS- IV组大鼠在造模前2周予AS- IV 10mg/（kg＆#183;d）灌胃预处理至实验结束,共14周。造模后第6、12周末收集并测定24h尿量及尿蛋白;同时各组按抽签法选取5只大鼠测体重,处死大鼠后测血生化指标,取肾组织,光镜观察肾脏病理病理变化,电镜观察足细胞形态变化,肾母细胞瘤抑制基因1（WT1）免疫组织化学染色观察肾小球足细胞密度变化,Western blot法测定大鼠肾皮质α3β1整合素蛋白水平的变化。结果与NC组相比,DN组大鼠血糖和24h尿蛋白增高,肾脏肾小球系膜区增生,足细胞足突融合,肾小球足细胞数量减少,α3β1整合素蛋白水平下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。AS- IV可显著改善DN大鼠蛋白尿,抑制肾小球系膜区增生,抑制足细胞足突融合和数目减少,上调α3β1整合素表达。结论 AS- IV对早期DN大鼠足细胞具有保护作用,可能与其上调足细胞α3β1整合素表达相关。     

黄芪对糖尿病肾脏保护作用

黄芪为豆科植物内蒙黄芪 [Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ (Ｆｉｓｈ)Ｂｇｅ .Ｖａｒ.Ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ (Ｂｇｅ)Ｈｓｉａｏ]或膜荚黄芪 [Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍ ｂｒａｎａｃｅｕｓ (Ｆｉｓｈ)Ｂｇｅ]的干燥根。其味甘 ,性温。有固表止汗、补脾益气、托毒排脓和利水等功效。主要药理成分为黄芪多糖 (ＡＰＳ)和黄芪皂甙类。对心血管、血液、肾脏、代谢及免疫系统均有作用[1 ] 。本文从糖尿病肾病 (ＤＮ)发病机制上就其对糖尿病 (ＤＭ)肾脏保护作用及其机制综述如下。1　对糖代谢的影响1.1　降血糖作用　黄芪是中医…     

坎地沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞保护作用的研究

目的 探讨糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞超微结构及其相关分子nephrin表达的变化,以及坎地沙坦对其干预的影响,为DN的防治提供理论依据.方法 选择健康雄性SD大鼠36只,按随机数字表法分为A组(正常对照组)、B组(DN组)和C组(DN+坎地沙坦组),每组12只.B、C组尾静脉注射链脲佐菌素(30 mg·kg-1)制备DN大鼠模型,于DN模型成模1周后将3组大鼠分别在代谢笼中喂养,C组给予坎地沙坦5 mg·kg-1·d-1灌胃,A组及B组给予等量生理盐水灌胃.用药后第4周和第7周检测各组大鼠的血糖、体质量、24 h尿蛋白和内生肌酐清除率(Ccr),于第7周取肾组织行光学显微镜及电子显微镜观察肾脏病理改变、RTPCR法检测nephrin-mRNA表达.结果 与A组比较:B组24 h尿蛋白排泄增多(P＜0.05),Ccr在7周时下降(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达下调(P＜0.05);肾组织足细胞足突宽度增加并出现融合,肾小球基底膜增厚.与B组比较:C组24 h尿蛋白排泄量降低(P＜0.05),Ccr升高(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达增加(P＜0.05),足细胞足突宽度及肾小球基底膜厚度变小.结论 DN时存在足细胞分子nephrin表达异常和超微结构改变,坎地沙坦对肾脏的保护作用机制可能是通过增加nephrin表达、改善足细胞超微结构而实现.     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠肾脏足细胞保护作用的研究

目的探讨厄贝沙坦对糖尿病大鼠尿蛋白以及足细胞、足突顶膜区主要的带负电荷跨膜蛋白Podocalyxin的影响。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin STZ,65mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。将30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、糖尿病模型组和厄贝沙坦(ARB)治疗组。连续监测血糖8周,8周后处死各组大鼠的前一天行24小时尿蛋白定量和肾功检查了肾组织;处死大鼠后取行苏木素伊红染色(hematoxylin and eosin stain,HE)观察其病理变化;透射电镜观察足细胞、裂孔隔膜等变化。采用Western蛋白印迹从蛋白水平观察nephrin蛋白水平的表达。结果模型组大鼠镜下见肾小球体积增大,基底膜增厚(P<0.05)及系膜物质增多,足细胞与正常对照组比较明显减少(P<0.01),肾小球内可见散在炎细胞浸润。部分毛细血管腔受压变窄,部分肾小管上皮细胞胞浆疏松,轻度水肿。治疗组与模型组分别比较,肾小球基底膜未见明显增宽,足细胞数明显增加(P<0.05)。模型组大鼠血糖、24h尿蛋白、血肌酐水平明显升高,与对照组相比差异显著(P<0.05)。治疗组与模型组相比,上述生化指标均有所改善(P<0.05)。West-ern蛋白印迹结果表明,与正常组相比,模型组nephrin蛋白水平明显下降,经过厄贝沙坦干预后nephrin表达明显上调。结论厄贝沙坦能改善糖尿病肾病大鼠足细胞及肾脏的病理损害,显著减少糖尿病大鼠24h尿蛋白,上调nephrin的表达,具有一定的肾保护作用。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响

近年来 ,临床和动物实验研究发现黄芪多糖 (ＡＰＳ)对糖尿病及其肾脏病变有降低血糖、减少蛋白尿等作用[1 ,2 ] 。本研究旨在观察黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响。材料与方法一、材料1.实验动物 :2月龄健康雄性ＳＤ大鼠 (清洁级 ) ,体重180～ 2 0 0 ｇ ,由上海市计划生育研究所ＢＫ公司提供 ,实验期间饲养于计划生育研究所动物房。2 .实验试剂 :链脲佐菌素 (ＳＴＺ)购自美国Ｓｉｇｍａ公司 ,ＡＰＳ由中国科学院上海生理研究所提供。二、ＳＴＺ 糖尿病大鼠模型的建立ＳＤ大鼠禁食约 12ｈ后 ,左下腹腔内注射ＳＴＺ溶液 (ｐＨ4.2 ,0 .…     

黄芪甲苷抑制p-130Cas表达缓解糖尿病肾病的作用机制研究

目的探讨黄芪甲苷（AS-IV）通过调节p-130Cas表达缓解糖尿病肾病（DN）的作用机制,以期为DN的治疗开辟新途径。方法将条件永生化的小鼠足细胞株分为正常对照组、高糖组、高糖+低剂量AS-IV组、高糖+高剂量AS-IV组,采用Realtime-PCR、Westernblot法检测各组足细胞p-130CasmRNA与蛋白表达水平。将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病+低剂量AS-IV组、糖尿病+高剂量AS-IV组,每组各10只。链脲霉素65mg/kg单次腹腔注射法建立糖尿病大鼠模型。造模成功后高糖+低剂量AS-IV组、高糖+高剂量AS-IV组AS-IV干预8周,检测干预第4周末、第8周末各组大鼠24h尿白蛋白水平,光镜和电镜下观察第8周末各组大鼠肾脏病理学变化,免疫荧光法检测肾小球足细胞p-130Cas蛋白表达水平。结果高糖组足细胞p-130Cas蛋白与mRNA表达明显上调,AS-IV剂量依赖性抑制高糖诱导的p-130Cas蛋白与mRNA表达上调。糖尿病大鼠24h尿白蛋白水平明显上升,肾小球系膜增生,足细胞足突融合,足细胞p-130Cas蛋白表达明显上调。AS-IV剂量依赖性抑制糖尿病大鼠肾脏足细胞p-130Cas蛋白表达上调,抑制肾小球系膜增生,缓解足细胞足突融合,降低24h尿白蛋白水平,缓解DN。结论AS-IV可能通过抑制p-130Cas表达上调,抑制高糖诱导的足细胞足突融合,缓解DN。     

黄芩苷对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的修复作用研究

目的:研究黄芩苷对糖尿病肾病(DN)大鼠血液AngⅡ及肾脏TGF - β1表达的影响,从细胞因子角度探讨黄芩苷通过修复足细胞损伤防治DN的作用机制.方法:应用链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射法建立DN模型,并随机分为DN模型对照组和黄芩苷治疗组,另设空白对照组.黄芩苷治疗组腹腔注射黄芩苷水溶液40 mg/kg,DN模型...     

天合保肾合剂对大鼠糖尿病肾病肾脏保护作用的研究

目的：探讨天合保肾合剂对糖尿病肾病（DN）大鼠的肾脏保护作用。方法：单肾切除及链尿佐菌素（STZ）尾静脉注射诱导DN模型;设正常组,模型组,卡托普利组,天合保肾合剂高、中、低剂量组;8 w后测定DN大鼠空腹血糖（GLU）、糖化血红蛋白（GHb）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,光镜观察肾脏病理组织学变化。结果：天合保肾合剂能够降低DN大鼠血糖、糖化血红蛋白（GHb）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）含量,与模型对照组比较有显著性差异（P〈0.01）,肾脏病理改变较模型组有明显减轻。结论：天合保肾合剂可以降低糖尿病肾病大鼠血糖,抑制糖化血红蛋白生成,改善肾功能,减轻肾脏病理变化,对DN大鼠具有肾脏保护作用。     

褪黑素对糖尿病大鼠氧化应激及足细胞凋亡的影响及作用机制

目的探讨褪黑素对糖尿病大鼠氧化应激反应和足细胞凋亡信号传导的影响及作用机制。方法 21只雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(N组,n=7),糖尿病组(D组,n=7),褪黑素治疗组(M组,n=7只)。腹腔注射链尿佐菌素制造糖尿病模型。8周末生化检测24h尿白蛋白排泄率、血肌酐、血糖水平;比色法检测肾组织MDA和T-OC的水平;免疫组化检测肾组织Nephrin表达水平;TUNEL法检测足细胞凋亡水平;HE、PAS、Masson染色观察肾小球病理改变;透射电镜观测肾小球超微结构变化。结果 8周末,与N组相比D组尿白蛋白排泄率显著增加(P<0.05),血肌酐升高,差异无统计学意义(P> 0.05);而与D组相比,M组尿白蛋白排泄率显著降低(P<0.05),血肌酐降低但差异无统计学意义(P> 0.05);与N组相比,D组肾组织MDA显著升高(P<0.05)、T-OC的水平显著降低(P<0.05);与D组相比,M组肾组织MDA显著升高(P<0.05)、T-OC的水平显著降低(P<0.05)。8周末与N组相比,D组免疫组化检测肾组织Nephr... 更多     

辛伐他汀对糖尿病肾病大鼠尿足细胞排泄的影响

目的:观察辛伐他汀对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠尿蛋白及尿足细胞排泄的影响?方法:雄性SD大鼠运用STZ法制作DN模型,设立正常对照组?DN组及辛伐他汀处理组?于实验第12周收集大鼠24 h尿检查尿白蛋白,间接免疫荧光法检测大鼠尿沉渣的podocalyxin用于检测尿中足细胞的数量?结果:他汀药物组与糖尿病肾病模型组(DN组)相比,空腹血糖(FBG)无明显下降,但总胆固醇(TCHO)?血肌酐(Scr)?24 h尿蛋白定量均显著下降?同时,对照组SD大鼠尿中很少见到足细胞的排泄,而DN组尿排泄足细胞显著增多,应用辛伐他汀治疗12周后,排泄足细胞数虽然仍比正常对照组高,但与DN组相比明显减少,差异有显著性?结论:糖尿病大鼠尿足细胞排泄明显增加,而辛伐他汀处理可减少尿蛋白及足细胞的排泄,可保护肾功能?     

糖尿病肾病足细胞损伤机制及中药对其保护作用的研究进展

<正>随着我国糖尿病(DM)发病率逐年攀升,预计到2025年,我国糖尿病增长率将接近发达国家2倍。糖尿病肾病(DN)继发于DM,以蛋白尿为突出表现,最终发展至终末期肾病(ESRD)。足细胞(podocyte)是肾小球基底膜(GBM)外侧的高分化细胞,有Nephrin、Podocin等多种裂隙膜蛋白构成肾小球滤过的屏障,膜蛋白的损伤或缺失可引起大量蛋白尿。近年研究发现,足细胞损伤是DN发生、发展的关键环节之一。1 足细胞损伤机制1.1     

足细胞及其相关分子在糖尿病肾病中的作用

糖尿病肾病是糖尿病最常见的并发症之一。微量白蛋白尿是糖尿病肾病的诊断标志，也是糖尿病肾病进展的独立危险因素；新近研究表明：足细胞损伤与糖尿病肾病蛋白尿产生和肾小球硬化进展明显相关。通过阐述足细胞损伤与糖尿病肾病的关系，能进一步拓宽对糖尿病肾病发病机制的认识，为糖尿病肾病研究提供一些新的思路。     

通络方剂对糖尿病大鼠肾小球足细胞的保护作用

目的观察通络方剂对糖尿病大鼠肾小球足细胞的保护作用,探讨糖尿病肾病足细胞损伤的可能机制。方法通过腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg)制作糖尿病大鼠模型,将成模大鼠随机分为糖尿病组(DM组,12只)、糖尿病TLR干预组(DM+TLR组,12只),另设正常对照组(CON组,8只)。DM+TLR组大鼠予以TLR[0.4g/(kg.d)]灌胃,DM组和CON组每日均在同一时间予同体积蒸馏水一次性灌胃。干预12周后测定各组大鼠24h尿蛋白定量;取大鼠肾皮质,采用电子显微镜观察肾小球足细胞超微结构;采用体视学方法计数足细胞、计算足细胞相对密度;采用蛋白质印迹分析法检测足细胞nephrin蛋白的表达;测定血浆和肾皮质中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量。结果与CON组比较,DM组和DM+TLR组大鼠肾质量/体质量比值、血糖和24h尿蛋白升高(P均<0.01);12周时DM组大鼠肾小球基底膜增厚、足细胞足突融合、微绒毛化,足细胞计数减少(P<0.01)、足细胞相对密度降低(P<0.01)且nephrin表达减少(P<0.01)。DM+TLR组足突形态接近正常,基底膜增厚,但较DM组减轻,足细胞计数、足细胞相对密度和nephrin表达量均高于DM组(P均<0.01)。与CON组比较,DM组和DM+TLR组大鼠在观察终点血浆和肾皮质SOD、GSH-Px活性均降低(P<0.01,P<0.05),MDA含量则升高(P<0.01,P<0.05);与DM组相比较,DM+TLR组血浆和肾皮质SOD、GSH-Px活性增加(P均<0.01),MDA含量降低(P<0.01,P<0.05)。结论 TLR可以改善糖尿病大鼠肾小球的足细胞损伤,可能与其抗氧化应激作用有关。     

通络方剂减轻糖尿病大鼠肾小球足细胞损伤

目的：采用糖尿病大鼠模型研究通络方剂对肾小球足细胞的保护作用及其可能的机制。 方法：SD大鼠分为正常对照组、糖尿病对照组、通络方剂组和α硫辛酸组。干预组大鼠分别予以通络方剂（0.4g/kg/d）、α硫辛酸（100mg/kg/d）灌胃,干预12周后处死大鼠,留取血清和尿标本,测定肾重体重比,24h尿蛋白定量、BUN、Cr、Alb/Cr等肾功能指标,留取肾组织标本,体视学方法计数足细胞数量,计算足细胞相对密度,western blot方法检测肾皮质Nephrin的表达,同时测定肾皮质MDA含量和SOD活力。 结果：通络方剂组和α硫辛酸组大鼠24小时尿蛋白定量低于DM对照组,足细胞计数和Nephrin表达量高于DM对照组,差异有统计学意义（p<0.05）;与DM组相比,通络方剂组和α硫辛酸组大鼠肾皮质MDA含量较少,SOD活力较高（p<0.05）。 结论：通络方剂对糖尿病大鼠肾小球足细胞损伤具有保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

水蛭素通过RhoA信号传导保护足细胞骨架改善糖尿病肾病作用机制研究

目的 通过构建足细胞损伤模型及糖尿病肾病动物模型,研究水蛭素对高糖所致足细胞骨架蛋白损伤的影响。方法 动物模型部分,使用8周龄db/m和db/db雄性小鼠,随机分为3组：（1）db/m组[db/m小鼠每天灌胃0.3 mL磷酸缓冲盐溶液（PBS）];(2)db/db组（db/db小鼠每天灌胃0.3 mL PBS）;(3)db/db+水蛭素组（db/db+水蛭素小鼠每日口服0.3 mL PBS中含200 mg/kg水蛭素）;最后一次给药后24 h处死小鼠,检测肾功能、尿蛋白定量,以及进行肾脏病理学检查。细胞模型部分,将小鼠足细胞用RPMI-1640培养基培养,用不同剂量的水蛭素或高糖处理细胞,检测足细胞骨架相关的蛋白质nephrin、podocin、synaptopodin和TRPC6等。结果 水蛭素治疗的db/db小鼠的24 h尿蛋白水平呈时间依赖性下降,同时血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平也下降,肾脏病理改变得到改善;在水蛭素治疗的db/db小鼠中,nephrin、podocin、synaptopodin和TRPC6的水平明显恢复;与db/m组相比,db/db小鼠足细胞中的F-肌...     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏保护作用

目的研究黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法以链脲佐菌素（STZ）诱导产生糖尿病大鼠模型，将模型大鼠随机分为糖尿病模型组及黄芪多糖组，另设正常对照组，连续灌胃4wk。观察治疗后大鼠体重、血糖、尿微量白蛋白排出量及肾皮质Na^＋,K^＋-ATPase活性的改变。结果糖尿病组大鼠体重明显下降，血糖显著升高，尿微量白蛋白排出量增加，肾皮质Na^＋，K^＋—ATPase活性增加；黄芪多糖治疗后，体重增加，血糖降低，尿微量白蛋白排出量减少，肾皮质Na^＋,K^＋—ATPase活性增加受抑制。结论黄芪多糖对糖尿病肾脏病变有防治作用，对肾脏有保护作用。