ASPM基因在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 研究有丝分裂相关基因ASPM(abnormal spindle microtubule assembly)在乳腺癌中的表达及临床意义,并探讨ASPM作用机制。方法 利用Oncomine数据库检测ASPM在乳腺癌组织中的表达情况,采用GSE3494数据集和Kaplan-Meier在线分析ASPM表达与乳腺癌患者的预后关系,并结合TCGA数据库分析ASPM表达与临床病理指标的相关性。利用GSE3494数据集进行基因富集分析 (GSEA)预测ASPM相关通路。利用String数据库分析与ASPM相关的蛋白并通过TIMER数据库验证。利用RT-qPCR验证在13对乳腺癌组织与配对的癌旁组织中ASPM的表达情况。结果 与正常乳腺组织比较,ASPM在乳腺癌组织中高表达,且高表达组具有较短的总生存期 (HR=1.71, P=0.000)。GSE3494和TCGA数据库分析发现ASPM表达与ER、PR水平显著相关(P=0.000),TCGA数据库分析结果显示ASPM表达还跟年龄 (P=0.002)以及TNM分期中的T分期 (P=0.000)和N分期 (P=0.030)显著相关。ASPM高表达样本主要富集在细胞周期、氧化磷酸化、DNA修复、错配修复、剪接体和蛋白酶体等基因集 (P<0.01),结合String以及TIMER的结果,ASPM可能与BUB1、CCNA2、TTK、CDC20、CDK1相互结合作用,促进乳腺癌的发生、发展。RT-qPCR结果显示,ASPM在乳腺癌组织中表达上调。结论 ASPM基因在乳腺癌组织中高度表达,并与临床病理指标相关,可作为预测乳腺癌预后的标志物进一步研究。     

KIF4A在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨人结直肠癌组织中染色体驱动蛋白KIF4A的表达及其临床意义。方法：收集110例手术切除的结直肠癌及相应癌旁5 cm以上结直肠黏膜组织标本,采用免疫组织化学方法检测其中KIF4A的表达情况,并分析KIF4A的表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及其预后之间的关系。结果：结直肠癌组织中KIF4A的表达显著高于癌旁5 cm以上结直肠黏膜组织（P < 0.001）;KIF4A的表达水平与结直肠癌患者的分化程度（P=0.023）、淋巴结转移（P=0.020）、远处转移（P=0.032）、TNM分期（P < 0.001）和血清癌胚抗原（CEA）水平（P=0.014）有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小等无关（P > 0.05）。在随访的110例结直肠癌患者中,Kaplan?Meier生存曲线显示,KIF4A高表达组的5年生存率明显低于KIF4A低表达组（P < 0.05）。单因素生存分析显示,KIF4A表达程度、肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期及血清CEA水平与结直肠癌患者术后生存时间相关。多因素COX比例风险回归模型进一步分析显示,KIF4A表达水平、TNM分期、淋巴结转移和远处转移为结直肠癌患者预后的独立危险因素。结论：KIF4A在结直肠癌组织中高表达,并且其高表达与结直肠的侵袭转移密切相关,KIF4A对于术后结直肠癌患者的预后评估具有参考价值。     

阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用

目的：探讨阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的影响。方法：用Western blotting方法检测阿霉素处理MCF-7细胞后不同时间该细胞表达的KIF4A蛋白;用不同浓度的阿霉素处理MCF-7细胞96h后,检测KIF4A蛋白,并进行衰老相关半乳糖苷酶染色。结果：与未用阿霉素处理的MCF-7细胞相比,阿霉素处理的MCF-7细胞表达KIF4A蛋白降低;衰老相关半乳糖苷酶染色率由5%提高到42%,染色阳性的细胞形态亦呈衰老样变。结论：阿霉素处理MCF-7细胞可使KIF4A蛋白表达水平降低,KIF4A蛋白表达降低与阿霉素引起MCF-7细胞衰老的关系有待进一步研究。     

染色体驱动蛋白KIF4A对胃癌细胞迁移和转移的影响

目的 前期的研究证实,染色体驱动蛋白KIF4A在胃癌组织中低表达, 过表达KIF4A抑制了胃癌细胞的增殖。本研究进一步研究KIF4A与胃癌细胞迁移与转移的关系,从而为胃癌临床治疗提供新的治疗靶点。方法 应用组织芯片和免疫荧光染色技术研究胃癌及其周围淋巴结组织中KIF4A蛋白分子的表达差异性;利用细胞小分子RNA干扰和Transwell迁移实验,检测KIF4A对细胞迁移运动能力的影响。结果 65%(26/40)的胃癌组织中KIF4A蛋白分子表达水平低于周围的淋巴结组织;KIF4A的表达水平与胃癌组织的TNM分期密切相关;KIF4A蛋白分子的表达随胃癌转移侵袭能力的增强而降低;抑制胃癌细胞内KIF4A蛋白分子的表达明显增强胃癌细胞的迁移运动能力。结论 染色体驱动蛋白分子KIF4A通过抑制胃癌细胞的迁移运动能力参与控制胃癌的临床转移过程。     

基于数据挖掘分析KIF2C在肝细胞癌的表达及临床意义

目的：通过数据挖掘分析肝细胞癌中KIF2C基因的表达并探讨其临床意义。方法：使用Oncomine和GEPIA数据库分析KIF2C在肝细胞癌组织中的表达情况;通过GEPIA数据库进行KIF2C的表达程度与病理分级及肝细胞癌生存期的相关性分析;最后利用STRING数据库分析与KIF2C相互作用的蛋白。结果：通过Oncomine和GEPIA数据库分析显示,在mRNA水平上,KIF2C在肝细胞癌中显著高表达（P=0.000）,表达水平与其预后为负相关（P=0.000）,且肝癌病理分级越高,KIF2C表达水平越高。通过STRING数据库分析显示与KIF2C相关的蛋白有PLK1、AURKB、CENPA等。结论：通过对肿瘤基因数据库进行挖掘发现,KIF2C在肝细胞癌组织中明显高表达且与患者预后相关,为肝细胞癌的致病机制研究和抗肿瘤靶向治疗提供了理论支持。     

筛选与探讨乳腺癌的关键生物标志物及预后价值

目的 基于生物信息学方法筛选乳腺癌的关键生物标志物,并分析其预后价值。方法 利用TCGA和GEO数据库筛选乳腺癌的共有差异表达基因;DAVID数据库对差异基因进行GO和KEGG富集分析;单因素和多因素Cox分析获得具有显著预后价值的基因;利用UALCAN在线工具对关键基因进行病理特征分析。结果 从TCGA和GEO数据库中分别获得1566和231个差异基因;通过共表达分析得到140个共有的差异表达基因;单因素和多因素Cox回归分析中发现S100B和TFF1在乳腺癌中具有独立预后价值;临床病理特征分析结果显示,S100B和TFF1在乳腺癌组织中的表达与其患者的性别、分期、淋巴结转移、TP53突变等均有显著差异。结论 S100B和TFF1可作为关键生物标志物影响乳腺癌的发生和发展。     

沉默驱动蛋白KIF4A的表达对卵巢癌细胞SKOV3迁移的影响

目的  研究沉默KIF4A基因对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响。方法  检索针对KIF4A基因的小干扰RNA（siRNA）,构建shRNA表达质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,通过G418筛选建立稳定低表达KIF4A的SKOV3细胞株。采用蛋白质免疫印记（Western blot）法检测shRNA对KIF4A蛋白分子的敲除效率。并通过细胞迁移实验评价低表达KIF4A对SKOV3细胞迁移能力的影响。结果  成功筛选出稳定低表达KIF4A的细胞株,选择干扰效率较高的细胞株进行实验。Transwell细胞迁移实验显示,低表达KIF4A的细胞株的迁移率较阴性对照组增长近3倍(P＜0.05)。结论   KIF4A低表达,可增强人卵巢癌细胞SKOV3的迁移能力。     

H2A在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 本研究探讨核心组蛋白（core histone H2A,H2A）在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化方法,检测97例乳腺癌组织中H2A的表达情况.结果 H2A在乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于乳腺癌癌旁组织（P=0.000）.H2A的表达强度与TNM分期有关（P =0.026）,与年龄、瘤体大小、腋窝淋巴结转移、组织学分级无相关性.结论 乳腺癌组织中H2A过表达与肿瘤发生发展密切相关.     

高迁移率族蛋白1及生长因子受体Ⅲ在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨高迁移率族蛋白1HMGB1)和生长因子受体Ⅲ,EGFrvⅢ)在乳腺癌组织中的表达情况及其与乳腺癌临床特征的关系.方法 用免疫组织化学染色法分别对48例术前未行放化疗的乳腺癌患者手术后的蜡块标本及16例癌旁组织进行HMGB1和EGFr vⅢ检测.结果 肿瘤组织及癌旁组织中HMGB1阳性率分别是75.0%(36/48)和6.3%(1/16),EGFr vⅢ表达的阳性率分别为70.8%(34/48)和0%(0/16),肿瘤组织及癌旁组织之间的阳性率均有统计学意义,HMGB1表达与EGFR vⅢ表达正相关.结论 HMGB1和EGFrvⅢ在乳腺癌发生发展中起重要作用,HMGB1与EGFrvⅢ联合检测对预测乳腺癌发展及预后评价有重要意义.     

Bim蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的研究Bim蛋白在乳腺正常组织、乳腺普通导管增生组织、乳腺导管轻中度不典型增生组织、重度不典型增生及导管原位癌组织、乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测101例乳腺石蜡包埋组织中Bim蛋白的表达。结果在乳腺普通导管增生、轻中度不典型增生、重度不典型增生及导管原位癌和浸润性导管癌中,Bim蛋白表达阳性率呈递减趋势。Bim蛋白在乳腺普通导管增生与重度不典型增生及原位癌组间、重度不典型增生及原位癌和浸润性导管癌组间阳性表达率差异均具有统计学意义(P均<0.05)。乳腺浸润性导管癌中Bim蛋白的表达与患者的临床分期、腋窝淋巴结转移无明显关系,但与组织学分级有关(P<0.05)。结论Bim蛋白表达水平的改变可能与乳腺癌的发生发展有关。     

细胞周期素E(CyclinE)在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨细胞周期蛋白E(CyclinE)在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌预后的关系。方法:用免疫组织化学的方法检测66例乳腺癌患者及15例乳腺良性肿瘤患者的病理组织切片标本上CyclinE、ER、PR、C-erbB-2(HER-2/neu)的表达,分析CyclinE的表达与患者临床资料、ER、PR、C-erbB-2(HER-2/neu)、中位生存期的关系。结果:CyclinE的表达情况:乳腺癌明显高于乳腺良性肿瘤(P<0.01),临床分期晚者高于临床分期早者(P<0.05),雌激素受体(ER)阳性者明显低于ER阴性者(P<0.01),孕激素受体(PR)阳性者与阴性者无明显差异(P>0.05),C-erbB-2(HER-2/neu)阳性者明显高于阴性者(P<0.01),乳腺癌患者中位生存期CyclinE过表达者明显低于阴性表达或弱表达者(P<0.01)。结论:CyclinE的表达水平与乳腺癌患者的预后存在密切的关系。     

MMP9和CD147在乳腺癌的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP9)和CD147在乳腺癌中的表达及意义。方法:应用免疫组化染色S-P法,检测88例乳腺癌组织石蜡切片中MMP9及CD147的表达情况。结果:乳腺癌患者MMP9的表达与肿瘤的分级、大小无明显关系,与淋巴转移有明确相关联系(P<0.05)。CD147与病理分级、淋巴结转移的表达呈显著性正相关(P<0.05)。结论:CD147和MMP9相互影响参与了乳腺癌的侵袭与转移,两种物质的检测是判断乳腺癌预后与治疗的重要指标之一。     

乳腺癌患者 BRCA-1蛋白表达与 HER-2基因扩增的相关性

目的探讨乳腺癌组织乳腺癌易感基因1(BRCA-1)蛋白表达与原癌基因人类表皮生长因子受体2(HER-2)的基因扩增关系.方法分别采用免疫组化法和荧光原位杂交法检测84例乳腺癌(导管内癌32例,浸润性导管癌36例,纤维腺瘤16例)组织中的BRCA-1蛋白表达和HER-2基因扩增情况.结果BRCA-1蛋白阳性表达63例,阳性表达率为75.0%(63/84). BRCA-1蛋白表达与淋巴结转移有关(P<0.05).与不同组织类型无关(P>0.05). HER-2基因扩增阳性40例,HER-2基因扩增阴性44例.36例有淋巴结转移患者HER-2扩增阳性率为86.1%(31/36),明显高于48例无淋巴结转移患者的27.1%(13/48)(P<0.01). HER-2基因扩增阳性组BRCA-1蛋白阳性表达率为90.0%(36/40),高于HER-2基因扩增阴性组的22.7%(10/44)(P<0.01).结论BRCA-1蛋白表达、HER-2基因扩增与乳腺癌的发生发展有关,BRCA-1蛋白表达与HER-2基因扩增可能存在相关性.     

一汉族先天性眼外肌纤维化家系KIF21A基因检测和影像分析

目的：收集一汉族先天性眼外肌纤维化1型家系,分析临床及影像学特征,明确眼外肌病理改变,检测该家系致病突变基因并讨论遗传学基础。方法：对所有参与研究的家系成员进行详细眼科检查、眼眶及颅神经高分辨核磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）检查,通过眼外肌组织切片Masson染色明确眼外肌病理改变,利用Sanger直接测序技术对该家系行KIF21A基因全部外显子及剪接位点区域测序,获取候选突变并分析。结果：该家系为3代先天性眼外肌纤维化1型家系,家系中患者临床表现为双眼中至重度上睑下垂,眼球垂直运动完全受限,水平运动不同程度部分受限。眼眶MRI示患者双侧上直肌提上睑肌复合体发育不良,左眼内、外直肌萎缩,多支眼外肌纤维化样改变。颅神经MRI示患者双侧动眼神经纤细,左侧外展神经缺如。眼外肌Masson染色示蓝染胶原纤维取代红染肌纤维,眼外肌发生纤维化样改变。Sanger直接测序获得致病突变KIF21A c.2860C>T（p.R954W）,该杂合错义突变在该家系中呈共分离。结论：KIF21A c.2860C>T（p.R954W）是该家系的致病突变,这一突变会造成较为少见的单侧外展神经缺如的表型。应用高分辨MRI检查有助于了解眼外肌纤维化患者特异性颅神经和眼外肌改变协助临床诊断和处理。     

乳腺癌患者MMP9和C-erbB-2的表达及意义

目的:探讨乳腺癌患者MMP9和C-erbB-2的表达与转移的之间的关系.方法:应用免疫组化法对48例乳腺癌患者MMP9和C-erbB-2阳性者进行检验分析.结果:48例中MMP9阳性过表达有34例,C-erbB-2阳性过表达31例,两者均阳性表达者26例.淋巴结转移中MMP9阳性过表达有17例(85%),C-erbB-2阳性过表达18例(90%),两者表达与转移密切相关.结论:在乳腺癌患者中MMP9和C-erbB-2表达提示转移几率增加,可以作为乳腺癌的预后指标.     

RhoA在卵巢癌组织中的表达及意义

目的探讨RhoA在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学S-P法检测63例卵巢癌患者、17例卵巢良性肿瘤患者和9例正常对照者卵巢组织中RhoA蛋白的表达。结果卵巢癌患者中RhoA阳性率为76.2%,其中强阳性11例(17.5%),明显高于正常对照组和卵巢良性肿瘤组(P<0.01);高分化、中分化和低分化卵巢癌患者RhoA阳性率依次为76.9%、77.8%和66.7%,差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期卵巢癌患者RhoA阳性率依次为69.0%、76.5%、83.3%和100.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢癌患者RhoA表达水平高于正常人,其可能参与卵巢癌的发生发展,可作为卵巢癌的临床诊断及预后评估提供有价值的参考。     

erbB4/HER4在乳腺癌的表达研究

目的检测第四人体表皮生长因子受体（HER4）在乳腺癌组织中的表达,探讨HER4过度表达与乳腺癌临床病理的关系。方法采用免疫组化的方法检测89例乳腺癌组织中HER4的表达。结果 HER4在正常乳腺细胞中呈阴性表达,HER4在乳腺癌细胞中呈强阳性表达,且HER4在乳腺癌肿瘤细胞中主要定位于细胞核和细胞质,乳腺癌组织中HER4的过度表达率为70.78%,乳腺癌中HER4的过度表达仅与淋巴结转移及TNM分期有关联性。结论 erbB4基因是乳腺癌生长的一个调控基因,干预HER4蛋白的过度表达可能是治疗乳腺癌的有效方法。