单纯疱疹病毒1型US11免疫逃避机制的研究进展

单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type 1,HSV-1）是一种全世界流行的疱疹性疾病病原体,HSV-1感染宿主后潜伏期长,且极难根除。普通病毒感染宿主时机体会产生一系列的抗病毒防御反应,HSV-1具有一种天然RNA外壳蛋白——单纯疱疹病毒US11蛋白,可对抗机体先天的免疫反应,抑制抗病毒反应,达到抑制病毒感染细胞的凋亡利于病毒复制的目的,本文将对目前HSV-1的病毒特性及其皮层蛋白US11逃避机体免疫机制的最新进展做一综述。     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制.方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTY法检测LSE对柯萨奇B3病毒(Cox B3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨.结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制Cox B3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC<,50>值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL.该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用.LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51%.ISE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性.结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现.     

HIV-1与单纯疱疹病毒Ⅰ型的共同感染和协同作用

人类免疫缺陷病毒(HIV-1)将CD4分子由T辅助细胞和激活的巨噬细胞来表达,作为进入宿主细胞的受体。同时感染了单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的组织,可以看到其角质细胞被HIV-1病毒粒子感染,由于这些角质细胞没有CD4分子,一般情况下他们是不会被HIV-1感染的。     

单纯疱疹病毒(Ⅰ型)形态发生方式的研究 Ⅱ、细胞质内形态发生方式的免疫电镜观察

一般认为,Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是在宿主细胞核内装配,经核膜内层出芽呈囊膜发育为成熟病毒。在我们的研究中还发现一种新的形态发生方式。HSV-1在感染细胞质内所形成的病毒基质区里装配成HSV-1核壳体,并发育为有囊膜的病毒颗粒。现报道如下。 材料和方法     

HSV-2W株对Vero细胞分裂指数影响的研究

HSV-2 W株感染Vero细胞后,对细胞的分裂指数可产生以下影响:在一定作用时间内,接种病毒的细胞其分裂指数高于对照细胞而低于接种秋水仙素的细胞;接种病毒最多的细胞高于接种病毒量少的细胞;但超过一定时间,则差别不显著;接种病毒时间长的细胞低于接种病毒时间短的细胞;接种灭活病毒的细胞高于接种未来灭活病毒的细胞。根据以上结果就HSV-2对宿主的某些生物学作用讲行了讨论。     

小鼠HSV-2阴道炎粘膜上皮细胞凋亡和Fas/FasL异常表达关系的研究

目的 :探讨 HSV- 2在体内诱导细胞凋亡的效果、形态学特点和 Fas蛋白的表达。方法 :用 HSV- 2 333株感染小鼠阴道 ,光镜下进行原位观察 ,TUNEL末端标记染色显示凋亡的细胞 ,免疫组化技术检测 Fas蛋白的表达。结果 :感染后的第 1天粘膜上皮内即出现大量的凋亡细胞 ,第 3～ 6天凋亡细胞的数量及在上皮内的分布范围达最高水平。凋亡细胞被 TUNEL标记染成棕褐色 ,经免疫组化技术证实凋亡细胞有 Fas蛋白的表达。结论 :HSV- 2 333株阴道感染可同时诱导细胞坏死及凋亡 ,Fas蛋白的表达参与了细胞凋亡的发生。细胞凋亡可能在限制病毒产生子代及限制感染区域扩展中起重要作用     

大黄提取液体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型作用的实验研究

目的:研究大黄提取液在体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用。方法:用hela细胞做体外培养实验,以不同剂量的大黄提取液作用于病毒复制周期的各个阶段,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变(CPE)、MTT染色细胞保护率(MTT法)作为评价指标,判断药效,对大黄提取液抗HSV-Ⅱ作用进行评价。结果:大黄提取液对hela细胞的增殖无明显作用,且对hela细胞毒性极低,对病毒有直接灭活作用;可干扰病毒向宿主细胞吸附,还可有效抑制病毒复制。结论:大黄提取液在体外对HSV-Ⅱ有显著的抑制和杀伤作用,并且有效抑制病毒复制。     

人α防御素-5多肽体外抗单纯疱疹Ⅱ型病毒作用的研究

目的 探讨人α防御素-5(human α-defensin-5, HD-5)多肽体外抗单纯疱疹Ⅱ型病毒(herpes simplex virus type 2, HSV-2)的作用及其机制.方法 以绿猴肾细胞(Vero)为宿主细胞,采用CCK-8法首先分析10～200 μg/ml浓度范围内HD-5多肽的细胞毒性,再以HSV-2感染Vero细胞,分别于感染前后和感染的同时加入100 μg/ml 的HD-5多肽,72 h后测定细胞保护率,结合细胞病变效应观察,分析HD-5抗HSV-2的作用效果和起效环节,并通过改变培养基中血清的浓度,观察血清对HD-5抗病毒作用的影响.结果 在100 μg/ml 浓度以内,HD-5多肽几乎无细胞毒性,提前或同时加入HD-5多肽可以显著抑制HSV-2病毒引起的细胞病变反应、提高细胞保护率(P<0.01),而在HSV-2感染2 h后加入HD-5多肽对Vero细胞的保护作用不明显(P>0.05);血清浓度会显著影响HD-5多肽的抗HSV-2活性,血清浓度越高,HD-5多肽对细胞的保护率越低.结论 HD-5多肽在体外具有显著的抗HSV-2感染活性,其作用机制主要是通过干扰病毒对细胞的粘附、侵入而发挥作用.     

天花粉蛋白对体内体外单纯疱疹病毒-1的抑制作用

目的 探讨天花粉蛋白对体内体外单纯疱疹病毒-1(HSV-1)的抑制作用.方法 动物随机分为模型对照组和天花粉蛋白治疗组,小鼠颅内接种HSV-1建立病毒性脑炎模型,治疗组于接种HSV-1前30 min腹腔注射天花粉蛋白注射液,接种病毒后12、24、48和96 h、7 d分别测定各组脑组织病毒滴定度.培养神经细胞分为正常对照组、病毒对照组、药物预处理组,接种病毒后12、24、48和96 h分别测定各组培养神经细胞的病毒滴定度.结果 天花粉蛋白治疗组于小鼠颅内接种HSV-1后12、24、48和96 h、7 d脑组织病毒滴度分别为(1.32±0.39)、(1.27±0.44)、(1.33±0.41)、(1.29±O.48)、(1.16±0.45),明显低于模型组(2.91±0.55)、(2.95±O.56)、(2.93±O.54)、(2.89±0.58)、(2.89±O.44),差异有显著性(P<0.001).药物预处理组在12、24、48和96 h后培养神经细胞病毒滴度分别为(1.12±0.34)、(1.18±0.40)、(1.24±0.38)、(1.26±O.42),明显低于病毒对照组(2.65±0.64)、(2.59±O.53)、(2.83±0.55)、(2.82±O.57),差异有显著性(P相似文献   

人乳头瘤病毒、疱疹病毒Ⅱ型及人巨细胞病毒与宫颈癌关系的研究

用人乳头瘤病毒(HPV)16,18,11型、疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)N/BglⅡ,L/HindⅢ片段和人巨细胞病毒(HCMV)DNA等6个核酸探针,通过分子杂交技术对宫颈疾患活检标本进行了检测和分析,结果在同一标本中未发现3种病毒DNA均阳性者,但宫颈癌标本中46%HPV和HCMV DNA同时存在,2例HSV-2 DNA阳性的宫颈癌标本中有1例同时存在HCMV DNA。提示宫颈癌的病毒病因是多因素的,HPV,HSV-2和HCMV均可能有关,在宫颈癌发生过程中3者之间可能有某些内在联系。     

邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性研究

摘要：目的研究邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白（3-Hydroxyphthalic anhydride-modified ovalbumin, HP-OVA）体外对抗单纯
疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的活性。方法采用化学修饰的方法将3-羟基-邻苯二甲酸酐（HP）修饰卵清蛋白（OVA）,合成酸酐
修饰蛋白HP-OVA;选用HSV-2 333病毒株及非洲绿猴肾细胞（Vero 细胞）靶细胞,采用MTT比色法检测HP-OVA的体外
抗HSV-2病毒活性及其对Vero细胞的体外细胞毒性;镜检观察HP-OVA对17株阴道收集的乳酸杆菌的抑菌作用。结果
酸酐修饰卵清蛋白HP-OVA对HSV-2病毒具有明显抑制作用,其IC50为23.56±8.33 μg/ml,且其对病毒作用靶细胞毒性较
低,CC50>1 mg/ml,对17株阴道乳酸杆菌均无明显抑制作用,MIC>1 mg/ml。结论酸酐修饰蛋白HP-OVA体外有较好的
抗HSV-2病毒的活性,有望被开发为预防性传播性疾病的候选杀微生物剂。     

EBV逃避宿主免疫的机制

EB病毒（EBV）在感染宿主的过程中需要克服宿主免疫系统的防御,因此衍生了一系列干扰人体免疫的策略。 EBV感染后会长期潜伏在宿主B细胞中,并对宿主MHC分子的表达进行干扰,影响宿主的抗病毒免疫。 EBV表达的BCRF1蛋白可刺激Th2细胞的产生,BARF1蛋白可诱发α型干扰素等细胞因子的分泌,多种病毒蛋白均可干扰细胞因子网络。同时 EBV 编码的 BHRF1等蛋白可发挥抗凋亡作用。该文就EBV免疫逃避的最新研究进展进行了归纳总结,以期为EBV防控、新型疫苗设计等提供参考。     

小鼠HSV-2阴道炎粘膜上皮细胞凋亡和NF-κB异常表达的关系

目的 探讨HSV-2在体内诱导细胞凋亡的效果、形态学特点、NF-κB蛋白的表达和TNF的促进凋亡作用。方法 用HSV-2333株感染小鼠阴道，光镜下进行原位观察，TUNEL末端标记染色显示凋亡的细胞，免疫组化技术检查NF-κB蛋白的表达。结果 感染后的第l天粘膜上皮内即出现大量的凋亡细胞，第3—6天凋亡细胞的数量及上皮内的分布范围达最高水平。凋亡细胞被TUNEL标记染成棕褐色，经免疫组化技术证实凋亡细胞有NF-κB蛋白的表达。结论 HSV-2333株阴道感染可同时诱导细胞坏死及凋亡，NF-κB蛋白的表达参与了细胞凋亡的发生，TNF可以促进HSV-2在体内诱导的细胞凋亡。细胞凋亡可能在限制病毒产生子代及限制感染区域扩展中起重要作用。     

EB病毒逃避宿主免疫的机制

EB病毒(EBV)在感染宿主的过程中需要克服宿主免疫系统的防御,因此衍生了一系列干扰人体免疫的策略。EBV感染后会长期潜伏在宿主B细胞中,并对宿主主要组织相容性复合体分子的表达进行干扰,影响宿主的抗病毒免疫。EBV表达的BCRF1蛋白可刺激Th2细胞的产生,BARF1蛋白可诱发α型干扰素等细胞因子的分泌,多种病毒蛋白均可干扰细胞因子网络。同时EBV编码的BHRF1等蛋白可发挥抗凋亡作用。该文就EBV免疫逃避的最新研究进展进行了归纳总结,以期为EBV防控、新型疫苗设计等提供参考。     

酵母双杂交筛选与星状病毒衣壳蛋白ORF2互作的宿主蛋白

目的 筛选人星状病毒?(HAstV)?衣壳蛋白ORF2与宿主细胞互作的蛋白质.方法 构建HAstV?ORF2蛋白的重组载体pGBKT77-ORF2,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从人结肠癌细胞Caco-2?cDNA文库中筛选与ORF2蛋白互作的蛋白.以HAstV-1病毒株的衣壳蛋白为模板,通过PCR扩增定向克隆...     

2010年美国疾病控制中心生殖器疱疹治疗指南

生殖器疱疹(GH)是由单纯疱疹病毒(HSV)感染引起的慢性终身性病毒感染性疾病.单纯疱疹病毒2型(HSV-2)主要引起生殖器疱疹,少数情况下HSV-1引起生殖器疱疹.几乎所有的HSV-2为性接触感染,见于肛周和生殖器官感染,HSV-1可见于肛周、生殖器官和口唇感染.     

6-O-取代阿昔洛韦衍生物的合成及其抗病毒活性

目的:通过对阿昔洛韦分子中碱基的结构修饰,设计并合成6-O-取代阿昔洛韦衍生物,并初步测定它们的抗病毒活性.方法:以阿昔洛韦为先导化合物,合成一系列6-O-取代阿昔洛韦衍生物,并以阿昔洛韦为阳性对照对猴肾细胞Vero进行体外抗HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ病毒活性测定.结果:合成了6-O-取代阿昔洛韦衍生物10个,结构均经过元素分析或MS确认.部分目标化合物具有一定的体外抗HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ病毒活性(MIC分别为25、50 ng·L-1),但较阿昔洛韦(MIC为2 ng·L-1)作用弱.结论:所合成的目标化合物虽然可能在体内更易于吸收,但体外初步抗病毒活性实验结果表明作用较弱.     

真菌提取物JN219抗病毒谱的初步研究

目的：探讨真菌提取物JN219的体外抗病毒谱。方法：采用体外细胞病变法，研究JN219对疱疹病毒科病毒（HCMV、HSV-1、HSV-2）、腺病毒科病毒（Ad3）、副粘病毒科病毒（RSV）、呼肠病毒科病毒（RV SA11）、正粘病毒科病毒（流感甲地方株、流感乙地方株）、小RNA病毒科病毒（COX B1-6）、弹状病毒科病毒（VSV）共15株病毒的抗病毒活性。将JN219与以上病毒作用1h后接种于相应宿主细胞（同时设有病毒对照和细胞对照），当病毒对照病变达到90％以上时终止培养，宿主细胞用1％中性红染色，在450nm处读取吸光度A值，计算细胞存活率、半数中毒浓度（TD₅₀）、半数有效浓度（IC₅₀）和抑毒指数（TI）。并根据TI判断JN219的抗病毒活性，确定其抗病毒谱。结果：JN219对HCMV、RV（SA11）、VSV有抑制作用，其IC50分别为1.42、0.96和1.22μg/ml，TI分别为35.26、52.30、40.82；对HSV-1、HSV-2、RSV、流感病毒甲、流感病毒乙有部分抑制作用；对COX B1-6、腺病毒（Ad3）无作用。结论：JN219抗病毒谱比较广泛。     

HSV-2糖蛋白D在昆虫-杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性分析

目的：在昆虫细胞中表达2型单纯疱疹病毒（HSV-2）糖蛋白D（gD2）胞外区基因,检测其免疫原性。方法：以HSV-2病毒基因组为模板,PCR扩增得到gD2片段,构建至杆状病毒质粒Bacmind中,转染sf9细胞,包装重组杆状病毒,收集后连续感染sf9细胞,收获第4代重组杆状病毒（P4）,通过Western blotting法鉴定蛋白表达情况,采用空斑实验检测重组病毒滴度,将P4代重组病毒作为种子大量感染sf9细胞,上清经镍柱亲和层析进行纯化,将纯化后的蛋白在第0、2和4周免疫BALB/c小鼠（gD2组）,以PBS作为阴性对照（PBS组）,ELISA检测小鼠血清中gD2特异性IgG滴度。结果：PCR鉴定和DNA测序,重组表达质粒gD2-Bacmind构建正确,空斑实验检测重组病毒滴度为2.0×10⁹ pfu·mL^-1,纯化的gD2重组蛋白在相对分子质量37000处出现目标条带,纯度达90%以上。第6周gD2组小鼠免疫血清中gD2特异性IgG抗体滴度Log10平均值达到4.34,与PBS组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：利用昆虫-杆状病毒表达系统表达的gD2胞外区蛋白具有良好的免疫原性,可作为HSV-2疫苗的候选。     

shRNA表达载体对HSV-2 ICP4基因的干扰效应

目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,Western blot检测ICP4蛋白的表达情况,终点滴定法测定病毒的滴度。结果与对照组相比,干扰组对mRNA抑制率为71%,使蛋白表达减少71.81%,并且病毒滴度也明显降低(P<0.05)。结论构建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重组质粒表达载体能在体外细胞水平上干扰HSV-2 ICP4的基因表达,抑制HSV-2在细胞中复制。