姜黄素对乳鼠心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用

目的 探讨姜黄素对过氧化氢(H2O2)刺激下的乳鼠心肌细胞是否具有作用.方法 培养乳鼠心肌细胞,建立H2O2损伤模型,姜黄素组按12.5、25、50 μmol/L三种浓度给药,分别测定各组心肌细胞存活率及乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;分析心肌细胞凋亡情况.结果 除低剂量姜黄素组外,其它剂量姜黄素组均能显著地提高H2O2所致心肌细胞损伤的心肌存活率(P<0.05);所有剂量姜黄素组均能减少H2O2损伤的心肌细胞LDH和MDA的生成,提高SOD的活性(P<0.05);与H2O2损伤无姜黄素对照组比较,50μmol/L姜黄素组心肌细胞凋亡率显著下降(P<0.01).结论 姜黄素对H2O2损伤的心肌细胞具有保护作用,并呈剂量依赖性,其作用机制可能与姜黄素清除氧自由基有关.     

卡托普利和西卡普鲁斯特对心肌细胞膜流动性及脂质过氧化的保护作用

研究的主要目的旨在探讨卡托普利和西卡普鲁斯特对培养新生乳鼠心肌细胞缺氧缺糖时膜流动性改变的保护作用。为了探讨其它与膜相关的改变，我们同时观察了培养细胞缺氧时脂质过氧化水平及乳酸脱氢酶（LDH）的释放情况。采用荧光分光光度计测定稳态荧光各向异性（rs）的改变来监测膜流动性，脂质过氧化水平通过测定硫代巴比妥酸反应物（简称TBARS）含量来评估，实验表明卡托普利（180μmol/L）、西卡普鲁斯特（30nmol/L）和消炎痛（1μmol/L）对正常新生乳鼠心肌细胞的rs值、TBARS水平及LDH活性均无影响，卡托普利和西卡普鲁斯特均能显著阻止缺氧缺糖所心肌细胞rs值、TBARS含量和LDH释放的增加，且 均有剂量依赖性，消炎痛能取消卡托普利对TBARS产生及LDH释放的作用，但是仍保留膜流动性的保护作用。这些结果说明卡托普利和西卡普鲁斯特具有保护心肌细胞缺氧损伤时膜流动性和脂质过氧化的作用。卡托普利的保护作用可能是通过促进前列环素的合成和／或释放介导的。     

回心康片抗心肌细胞缺氧损伤的作用及机制

目的:探讨回心康片抗大鼠心肌细胞缺氧损伤的作用及其机制。方法:建立体外大鼠乳鼠心肌细胞缺氧损伤模型。采用血清药理学方法,研究回心康片对细胞活力的影响;采用全自动生化分析仪检测谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)含量;采用FLIPR Calcium4试剂盒检测药物对胞浆内钙离子浓度变化的影响。结果:回心康片对正常心肌细胞无明显影响,但可明显提高缺氧损伤心肌细胞的活力,降低NO水平,提高GSH活性,降低心肌细胞因缺氧损伤而造成的钙离子浓度升高,与缺氧损伤组比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:回心康片能抗心肌细胞缺氧损伤,其机制可能与抗氧化和减轻钙超载有关。     

匹那地尔对慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬细胞胞质游离钙浓度及其分泌的NO IL-6的影响

目的观察匹那地尔对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺泡巨噬细胞(AM)胞质游离钙浓度及其分泌的一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法采用支气管肺泡灌洗、细胞培养和荧光指示剂方法,测定AM内钙浓度及其生成的NO和IL-6含量。结果①慢性支气管炎患者肺泡巨噬细胞内钙浓度、NO和IL-6均较对照组胞内钙浓度、NO和IL-6增高(P<0.01);②脂多糖(LPS)刺激以后,胞内游离钙浓度、NO和IL-6均较刺激前增高(P<0.01);③先加匹那地尔孵育AM再加入LPS,胞质内游离钙浓度、NO和IL-6较仅加LPS时减少(P<0.01)。结论匹那地尔可抑制LPS引起的[Ca2+]i增加,对LPS刺激的NO和IL-6升高也有抑制作用;匹那地尔可调节AM激活,抑制NO和IL-6分泌。     

红霉素对人脐静脉内皮细胞一氧化氮及钙离子水平的影响

目的　探讨红霉素对人脐静脉内皮细胞一氧化氮通路及钙离子的影响。方法　应用一氧化氮及一氧化氮合酶试剂盒测定内皮细胞NO的含量及NOS的活性 ,采用Fura 2负载荧光技术检测胞内游离钙水平。结果　红霉素能明显增加内皮细胞NO的产生和胞内游离钙水平 ,并能明显增强NOS的活性 ,具有浓度和时间效应。结论　红霉素对人脐静脉内皮细胞一氧化氮通路的影响可能通过胞内游离钙而起作用。     

槲皮素对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚的影响

目的　研究槲皮素（ Ｑｕｅ） 对异丙肾上腺素（ Ｉｓｏ） 所致大鼠心肌肥厚的抑制作用及作用机制。方法　 Ｉｓｏ ００２ ｍｇ·ｋｇ－ １ ,每日两次,连续ｓｃ ６ ｗｋ ,形成大鼠心肌肥厚模型,分别测定心脏各重量参数、心肌过氧化脂质（ Ｌ Ｐ Ｏ） 含量、超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ） 活性及心肌 Ｃａ２ ＋ 和主动脉 Ｃａ２ ＋ 含量,培养乳鼠心肌细胞,应用 Ｆｕｒａ ２／ Ａ Ｍ 钙荧光指示剂技术测定心肌细胞内游离钙浓度。结果　 Ｉｓｏ 连续ｓｃ ６ ｗｋ 后,心肌和左心室重量明显增加,心肌 Ｌ Ｐ Ｏ 含量显著增加, Ｓ Ｏ Ｄ 活性下降,心肌 Ｃａ２ ＋ 和主动脉 Ｃａ２ ＋ 含量明显增加,给 Ｑｕｅ ７５ ｍｇ·ｋｇ－ １ ,１５０ ｍｇ·ｋｇ － １ 和维拉帕米１０ ｍｇ·ｋｇ － １ 后均能明显减轻心肌肥厚,降低 Ｌ Ｐ Ｏ 含量,增加 Ｓ Ｏ Ｄ 活性,降低心肌 Ｃａ２ ＋和主动脉 Ｃａ２ ＋ 的含量,应用 Ｆｕｒａ ２／ Ａ Ｍ 钙荧光指示剂技术发现 Ｉｓｏ 和 Ｈ２ Ｏ２ 能引起培养乳鼠心肌细胞内游离钙浓度明显升高。槲皮素对心肌细胞静息钙无明显影响,能抑制 Ｉｓｏ和 Ｈ２ Ｏ２ 致培养乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的升高。结论　 Ｑｕｅ 能抑制 Ｉｓｏ 所引起的心肌肥厚, 该作用与清     

丹参酮Ⅵ预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 研究丹参酮Ⅵ(Tanshinone Ⅵ,Tan)预处理对心肌细胞缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤的保护作用及其机制.方法 以细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量等为观察指标,用终浓度分别为0.1、1和10 μmoL/L的Tan预处理原代培养大鼠乳鼠心肌细胞1 h,观察其对A/R损伤的保护作用及NO合成酶抑制剂L-NAME(0.1 mmol/L)、K+-ATP通道阻断剂格列苯脲(12 μmol/L)对其保护作用的影响.结果 Tan预处理能显著提高细胞存活率,降低LDH活性,呈剂量依赖性,且显著能增加SOD及GSH-Px活性,降低MDA含量,能对抗A/R损伤;L-NAME和格列苯脲能部分取消Tan预处理的上述保护作用.结论 Tan预处理对心肌细胞A/R损伤有显著的心肌细胞保护作用,其机制可能与NO生成、K+-ATP通道开放有关.     

丹红注射液预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制

目的探讨丹红注射液(DH)预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其相关机制。方法建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,分离培养SD乳鼠心肌细胞,在培养3d后随机分为5组(每组实验重复6次):正常对照(control)组、缺氧/复氧(A/R)组,丹红注射液低剂量(终浓度为0.2μmol/ml)(DHL+A/R)组,丹红注射液中剂量(终浓度为0.6μmol/ml)(DHM+A/R)组,丹红注射液高剂量(终浓度为1.8μmol/ml)(DHH+A/R)组。测定各组心肌细胞存活率,培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,以及细胞内ATP水平。结果与对照组比较,A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性和细胞内ATP水平均明显降低(均P<0.01),而培养液中LDH水平明显增加(P<0.01)。与A/R组比较,DH+A/R各剂量组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量和细胞内ATP水平均明显增加(均P<0.01),而培养液中LDH水平均明显降低(P<0.01);其中又以DHH+A/R组细胞的存活率升高明显,与DHL+A/R组比较有显著差异(P<0.05)。结论丹红注射液预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,其机制可能为丹红注射液增加了细胞的内源性抗氧化剂活性,改善了心肌细胞能量代谢;且在一定范围内呈剂量依赖性,随着剂量的升高,保护作用更明显。     

尾加压素Ⅱ对心肌细胞氧化应激反应及NADPH氧化酶亚单位p22 phox表达的影响

目的 观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)对心肌细胞氧化应激反应的影响及其机制.方法体外培养新生SD乳鼠心肌细胞,建立尾加压素Ⅱ诱导心肌细胞氧化应激反应模型.用活性氧(ROS)敏感的DCFH DA探针测定胞内ROS水平.以细胞存活率、丙二醛(MDA)含量、上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性、胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性作为心肌细胞损伤的指标,免疫印迹法测定NADPH氧化酶亚单位p22 phox表达情况.结果UⅡ可显著提高胞内二氯荧光黄(DCF)荧光信号强度,降低细胞存活率及SOD活性,上调LDH活性及MDA含量.UⅡ能上调NADPH氧化酶亚单位p22 phox表达.结论UⅡ可诱导心肌细胞氧化应激损伤反应,机制可能与增强NADPH氧化酶亚单位p22 phox表达有关.     

乌头碱对乳鼠心肌细胞的毒性作用

目的 研究乌头碱对乳鼠心肌细胞的毒性作用.方法 分离培养SD乳鼠心肌细胞,给予100.0、10.0、1.0、0.1 μg·ml-1的乌头碱染毒后,观察乳鼠心肌细胞的形态及细胞搏动的情况,测定丙二醛(MDA)的含量,并采用MTT法检测细胞存活率.结果 随着乌头碱浓度的增加,心肌细胞存活率下降.与对照组相比,乌头碱浓度＞1.0 μg·ml-1时,心肌细胞的存活率显著降低(P＜0.01),MDA的含量随剂量的增加而明显升高(P＜0.01).结论 乌头碱浓度＞1.0 μg·ml-1时,对乳鼠心肌细胞有明显的氧化损伤作用,同时表现出较强的细胞毒性.     

卡托普利和低剂量阿司匹林相互作用对心衰大鼠左室重建的影响

目的：观察联用卡托普利和低剂量阿司匹林对心衰大鼠左室重建的影响。方法：采用冠状动脉结扎致急性心肌梗死和心梗后慢性心力衰竭大鼠模型，按照正交设计试验方案服药5周，测定左室重量／体重比（LVW／BW），心肌组织胶原VG染色，图像分析系统测量心肌胶原容积分数（ICVF），血管周围胶原面积（PVCA）。结果：与正常组，假手术组相比，急性心梗模型组，慢性心衰模型组LVW／BW，ICVF，PVCA均显著升高（P＜0．01），卡托普利显著逆转左室肥厚（P＜0．05），减轻间质纤维化（P＜0．05），阿司匹林对其无影响（P＞0．05），但二者联用存在显著的相互作用（P＜0．01，P＜0．05），且表现为拮抗效应。卡托普利对血管周围纤维化无显著性作用（P＞0．05），但与阿司匹林存在显著的相互作用（P＜0．05），其拮抗低剂量阿司匹林对血管周围纤维化的显著不利作用（P＜0．05），结论：低剂量阿司匹林减弱卡托普利逆转左室肥厚及减轻间质纤维化的作用，其本身对血管周围纤维化的发生也存在不利影响。     

卡托普利和低剂量阿司匹林相互作用对大鼠实验性心肌缺血及肝微粒体酶活性的影响

目的　观察卡托普利 (Cap)和低剂量阿司匹林 (Asp)相互作用对大鼠实验性心肌缺血及肝微粒体酶活性的影响。方法　建立异丙肾上腺素致大鼠实验性心肌缺血模型 ,采用正交设计给药方案 ,干式生化片测定LDH、CPK含量 ,同时观察心肌病理变化。采用差速离心法制备大鼠肝微粒体 ,测定细胞色素P4 5 0、b5含量及苯胺羟化酶活力。结果　Cap与低剂量Asp联用时对模型组血清中LDH、CPK水平存在明显的相互作用 ,且表现为拮抗效应。Cap显著减轻心肌组织病理损伤程度 ,而Asp对其无影响。Cap与Asp单用时对细胞色素P4 5 0含量无影响 ,但联用时较正常组及Asp单用组均显著增加。Asp降低细胞色素b5含量 ,联用Cap其含量明显增加。Cap单用时增加苯胺羟化酶活力 ,与Asp联用时活力进一步增加 ,而Asp本身对其无影响。 结论　低剂量Asp不减弱Cap对心肌组织病理损伤的保护作用 ,但二者联用对血清LDH、CPK的水平反而有促进作用 ,其机制可能与进一步诱导P4 5 0活性及苯胺羟化酶活力有关。     

卡托普利和低剂量阿司匹林相互作用对心衰大鼠左室心肌组织c-fos蛋白表达的影响

目的 观察卡托普利和低剂量阿司匹林相互作用对冠状动脉结扎致心衰大鼠模型左室心肌组织c—fos蛋白表达的影响。方法 采用冠状动脉结扎致急性心肌梗死和心梗后慢性心力衰竭大鼠模型，按照正交设计试验方案给药5wk，采用免疫组织化学方法观察联用两药对左室心肌组织c—fos蛋白表达的影响。结果 急性心肌梗死组c—fos蛋白阳性颗粒数目明显增多，卡托普利各剂量组对心肌组织c—fos蛋白表达均无影响，且与低剂量阿司匹林无显的相互作用，而低剂量阿司匹林增加c—fos蛋白免疫反应阳性细胞分布，尤以急性心肌梗死组多见。结论 低剂量阿司匹林介导c—fos蛋白表达增加，可能是其拮抗卡托普利减轻心衰大鼠左室重建作用的机制之一。     

山茶花总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究山茶花总黄酮(TFC)对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法按pu lsinelli方法制成全脑缺血模型,大鼠全脑缺血30 m in后再灌注40 m in。记录脑缺血前、缺血30 m in及再灌注40 m in后的脑电图(EEG),取脑组织,采用荧光指示剂Fura-2定量测定大鼠前脑皮层组织细胞内游离钙离子浓度,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量。结果TFC可促进缺血后EEG波幅的恢复,降低缺血再灌后细胞内游离钙离子浓度的升高,抑制SOD、GSH-Px和LDH活力的下降,降低NOS的活力和脑组织中MDA、NO的含量。结论TFC对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与其抗自由基、抑制钙超载和NO生成有关。     

苦碟子总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究苦碟子总黄酮(TFS)对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法按pulsinelli方法制成全脑缺血模型,大鼠全脑缺血30min后再灌注40min。记录脑缺血前、缺血30min及再灌注40min后的脑电图(EEG),取脑组织,采用荧光指示剂Fura-2定量测定大鼠前脑皮层组织细胞内游离钙离子浓度,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量。结果 TFS可促进缺血后EEG的恢复,降低缺血再灌后细胞内游离钙离子浓度的升高,抑制SOD、GSH-Px和LDH活力的下降,降低NOS的活力和脑组织中MDA、NO的含量。结论 TFS对脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用,其机制可能与其抗自由基、抑制钙超载和NO生成有关。     

淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究淡竹叶总黄酮(TFLG)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用及其机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法,建立心肌缺血/再灌注损伤模型。测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮(NO)含量。结果 TFLG 50、100 mg.kg-1可抑制大鼠心肌中LDH及CK的漏出,降低血清和心肌组织中LDH与CK活性,降低MDA含量,提高SOD、GSH-PX和NO浓度。TFLG 100 mg.kg-1可抑制NF-κB和TNF-α蛋白的表达,下调caspase-3蛋白表达。结论 TFLG对心肌缺血/再灌注损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与抗自由基、抑制炎症反应和减少细胞凋亡有关。     

Effects of Caulophine on Caffeine‐induced Cellular Injury and Calcium Homeostasis in Rat Cardiomyocytes

Abstract: Caulophine is a novel fluorenone alkaloid isolated from the radix of Caulophyllum robustum Maxim. Caulophine showed high affinity for the rat myocardial cell membrane as assessed by cell membrane chromatography, suggesting that the compound may exert bioactivity in the heart. It is known that calcium plays an important role in the pathogenesis of ischaemic heart disease, and caffeine can cause calcium overload in cardiomyocytes by inducing calcium release from the sarcoplasmic reticulum. Therefore, the present study evaluated the effects of caulophine on caffeine‐induced injury and calcium homeostasis in cardiomyocytes. Cardiomyocytes were pre‐treated with caulophine before exposure to caffeine or potassium chloride (KCl). Cell viability was assayed using the MTT method, and lactate dehydrogenase (LDH) and malondialdehyde (MDA) were measured spectrophotometrically. Caulophine‐pre‐treated cardiomyocytes were incubated with Fluo‐3/AM, and then caffeine or KCl was used to induce Ca²⁺ overload. The total intracellular Ca²⁺ concentration was measured by flow cytometry. Fluorescence densities of single cardiomyocytes were detected using a confocal microscope. Caulophine increased the viability of caffeine‐injured cardiomyocytes and decreased LDH activity and MDA level in cardiomyocytes. Furthermore, caulophine significantly decreased the total intracellular free Ca²⁺ concentration and intracellular calcium release in cardiomyocytes in response to caffeine. However, the same concentrations of caulophine did not affect KCl‐induced calcium influx. Our results suggest that caulophine protects cardiomyocytes from caffeine‐induced injury as a result of calcium antagonism. This finding provides a basis for further study and development of caulophine as a new calcium antagonist for treating ischaemic cardiovascular diseases.     

卡托普利保护大鼠缺血再灌注心肌与抗心肌脂质过氧化的关系(英文)

本实验分别用大鼠在体、离体心脏和培养心肌细胞观察了卡托普利(甲巯丙脯酸)抗心肌缺血再灌注损伤与抗脂质过氧化作用。离体心脏缺氧缺糖45 min后再给氧30 min以及在体心脏缺血3 h后再灌注1h,心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降而丙二醛(MDA)含量显著升高。卡托普利能显著保护再灌注(或再给氧)时心肌SOD活性和降低MDA含量。培养心肌细胞缺氧缺糖6 h,细胞MDA含量和乳酸脱氢酶(LDH)释放显著增加。卡托普利显著降低MDA含量和LDH释放。该作用能被吲哚美辛所取消。IIoprost显示有卡托普利相似的保护作用。结果表明卡托普利的保护作用与抗氧自由基和抗脂质过氧化有关。其机理主要通过促进心肌前列环素释放而发挥作用。     

马齿苋总黄酮对垂体后叶素诱发小鼠急性心肌缺血的保护作用

目的 观察马齿苋总黄酮(POTF)对垂体后叶素(Pit)诱发小鼠急性心肌缺血的影响.方法 ip Pit予小鼠,建立急性心肌缺血模型,记录小鼠标准Ⅱ导联心电图(ECG)的变化,观察小鼠存活时间、心肌指数(MI)、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca2+及血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、MDA的变化.结果 POTF能提高小鼠耐急性缺氧的能力、对HT诱发小鼠Ⅱ导联ECG异常有明显改善,同时升高心肌组织中SOD的活性,降低MDA、Ca2+的含量及降低血清中CK、LDH的水平,心脏重量指数显示POTF对心功能也有明显的改善作用.结论 POTF能保护Pit诱发的小鼠急性心肌缺血损伤,其作用机制可能与降低心肌细胞内钙离子浓度、抑制脂质过氧化有关.