小剂量羟乙基淀粉对脓毒症大鼠的肺保护作用研究

目的研究小剂量羟乙基淀粉130/0.4(HES)对脓毒症模型大鼠肺毛细血管通透性以及全身及局部炎症细胞因子水平的影响。方法 40只雄性SD大鼠,随机分为小剂量组(S组)、大剂量组(L组)、脓毒症对照组(SC组)及假手术对照组(C组)4组,每组10只。S组、L组及SC组均采用盲肠结扎穿孔的方法建立脓毒症大鼠模型;分别于CLP后4h时静脉输注HES 5ml/kg+生理盐水25ml/kg、HES 30ml/kg,SC组于相应时点输注生理盐水30ml/kg。CLP后6h处死大鼠,取肺组织计算含水量,测定毛细血管通透性、炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平及外周血炎症细胞因子水平。结果与C组比较,S组、L组及SC组肺含水量、毛细血管通透性均明显增高,肺组织及外周血TNF-α、IL-1β、IL-6水平增高(P0.05)。与SC组比较,S组与L组肺含水量、毛细血管通透性均有降低,肺组织及外周血TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P0.05);与S组比较,L组TNF-α、IL-1β、IL-6水平有所降低,但无统计学差异。结论小剂量羟乙基淀粉130/0.4具有一定肺保护作用。     

虫草素对CLP诱导的脓毒症大鼠免疫调节作用及肝肺组织病理变化的影响

目的探索虫草素对盲肠结扎穿孔(CLP)诱导的脓毒症大鼠免疫反应的调节作用及肝肺组织病理变化的影响。方法利用盲肠结扎穿刺法构建大鼠脓毒症模型。SD大鼠随机分为对照组、模型组、加药组(CDP 10、20、50 mg/kg BW) 5组,每组5例。苏木素伊红染色检测肝、肺组织病理损伤情况。TUNEL染色检测肝、肺组织细胞凋亡情况。蛋白免疫印迹检测肺组织Ki67、caspase-3和p65蛋白表达情况。ELISA检测血清炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-10水平。结果与模型组相比较,随着虫草素浓度的增加,加药组肝、肺病理损伤程度减轻;加药组细胞凋亡数目随虫草素浓度的增加而减少(P 0. 01);加药组caspase-3和p65表达水平随虫草素浓度的增加而降低,Ki67蛋白表达水平随虫草素浓度的增加而升高(P 0. 01);与模型组相比较,加药组炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平随虫草素浓度的增加而减少(P 0. 01),IL-10随虫草素浓度的增加而增加。结论虫草素通过抑制NF-κB改善大鼠肝肺组织病理损伤,并降低脓毒症进程中炎症反应。     

丹参酮ⅡA减轻脓毒症大鼠急性肝肾损伤

目的:研究丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠急性肝肾损伤的治疗作用。方法:采用中线剖腹手术和盲肠结扎穿孔法将大鼠随机分为4组:假手术组(CTRL)、盲肠结扎穿孔模型组(CLP)、利奈唑胺模型组(LNZ)、丹参酮ⅡA模型组(TAN)进行后续实验。HE染色检测肝肾组织病理损伤程度,TUNEL染色检测肝肾细胞凋亡情况,全自动生化分析仪检测大鼠肾功能指标,酶标仪检测肝功能指标,ELISA试剂盒检测大鼠炎症因子水平,记录大鼠存活率。结果:丹参酮ⅡA能降低肝肾组织病理损伤程度,抑制肝肾细胞凋亡,下调肝功能指标ALT、AST水平,下调肾功能指标血清肌酐、尿素氮、蛋白尿水平,下调炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平,降低脓毒症大鼠死亡率。结论:丹参酮ⅡA具有减轻脓毒症大鼠急性肝肾损伤的作用。     

草木犀流浸液片对脓毒症大鼠肺组织VEGF及肺血管通透性的影响

探讨草木犀流浸液片对盲肠结扎穿孔术(CLP)脓毒症大鼠肺VEGF及肺血管通透性的影响。将80只雄性SD大鼠随机分为四组:①正常对照组20只;②假手术组20只;③对照组20只;④治疗组20只。假手术组只开腹,不行CLP;对照组和治疗组建立CLP脓毒症模型。术前2h治疗组给予草木犀流浸液片20mg/kg,每8h一次,24h处死各组大鼠大鼠,观察肺组织VEGF mRNA、NF-κB mRNA、NF-κB p65及血清VEGF-a、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-10、IL-12的变化;同时测定肺组织通透性(EB)、湿/干重比(W/D)及肺组织病理变化。研究发现:与正常对照组比较,VEGFmRNA、NF-κB p65mRNA、NF-κB p65、VEGF、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-10、IL-12在假手术者无明显变化,差异无统计学意义P>0.05;对照组、治疗组显著升高,差异有非常显著意义P<0.01;与对照组比较,治疗组VEGF mRNA、NF-κB p65mRNA、NF-κB p65、VEGF、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8显著降低,IFN-γ、IL-10、IL-12显著升高,差异有统计学意义P<0.05。VEGF mRNA与NF-κB mRNA、VEGF与NF-κB p65分别具有正相关性(r=0.852,P<0.05;r=0.794,P<0.05)。病检也发现,治疗组肺病病理损伤较对照组明显减轻。结果提示:草木犀流浸液片能够抑制CLP脓毒症大鼠肺组织NF-κB mRNA、VEGF mRNA的表达,降低血清VEGF、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8水平,促进IFN-γ、IL-10、IL-12的产生,显著降低脓毒症大鼠肺组织微血管通透性,对脓毒症大鼠肺组织具有保护作用。     

山姜素通过PI3K/Nrf2/HO-1通路减少炎症和氧化应激反应改善盲肠结扎和穿刺诱导的脓毒症大鼠的急性肺损伤

目的研究山姜素对盲肠结扎和穿刺(cecal ligation and puncture,CLP)诱导的脓毒症大鼠的急性肺损伤的作用和机制。方法将大鼠随机分为6组:对照(Control)组、CLP组、山姜素(alpinetin)40、80和160 mg·kg~(-1)组、阳性药物对照组(Dex,10 mg·kg~(-1))组,每组9只大鼠。CLP诱导的脓毒症模型后,大鼠通过腹腔注射alpinetin(40、80和160 mg·kg~(-1))和地塞米松(10 mg·kg~(-1))。HE染色观察肺病理变化和评分,称重法测量肺水肿,动脉血气分析仪检测动脉血氧分压(PaO_2)和动脉血CO_2分压(PaCO_2)水平,ELISA试剂盒检测BALF中MIP-2、TNF-α、IL-18、IL-10水平和肺组织中MPO、SOD活性及MDA、GSH水平,蛋白印迹法检测肺组织中Akt磷酸化水平及Nrf2、HO-1表达水平。结果与CLP组相比,山姜素80和160 mg·kg~(-1)组和阳性药物对照组大鼠肺的病理评分显著减少(P0.05,P0.01),大鼠PaCO_2水平显著减少(P0.05),PaO_2水平显著增加(P0.05,P0.01),BALF中MIP-2、TNF-α、IL-18水平显著减少(P0.05,P0.01),IL-10水平显著增加(P0.05,P0.01),肺组织中MPO活性和MDA水平显著升高(P0.05,P0.01),SOD活性和GSH水平显著降(P0.05,P0.01),肺组织中Akt磷酸化、核Nrf-2、HO-1表达水平显著上调(P0.05,P0.01)。结论山姜素通过减少炎症和氧化应激反应来改善CLP诱导的脓毒症大鼠的急性肺损伤,这与激活PI3K/Nrf2/HO-1通路有关。     

黄芪多糖通过TLR4/NF-κB通路保护脓毒症大鼠肺血管内皮细胞

目的:观察黄芪多糖(APS)对脓毒症大鼠肺血管内皮细胞的保护作用，并探讨可能机制。方法:采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症大鼠模型，将建模成功的36只大鼠随机分为脓毒症组、APS组、APS+脂多糖(LPS)组，每组各12只。另外12只大鼠设为对照组。术后6、12、18h APS组灌胃APS(100mg/kg),APS+LPS组灌胃APS (100mg/kg)+腹腔注射LPS(3mg/kg),对照组、脓毒症组分别灌胃、腹腔注射等量生理盐水。检测血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；检测肺组织含水量、Western Blotting法检测肺组织中热休克蛋白70(HSP70)、内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)蛋白，Toll样受体4(TLR4)、髓样细胞分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65蛋白表达量。结果:与脓毒症组比较，APS组血清IL-6、TNF-α水平，肺组织含水量，ESM-1蛋白表达量，肺组织TLR4、MyD88蛋白表达量，p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05),H...     

高容量血液滤过对脓毒症犬肾组织线粒体功能的影响及其可能机制

探讨高容量血液滤过对脓毒症犬肾组织线粒体功能的影响。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型：将健康雄性犬30只随机分为假手术组（A组）;脓毒症模型组（B组）和脓毒症＋高容量血液滤过治疗组（C组）。各组分别于00、.5、1、2、3、4 h等不同时点测定心率、血压、血肌酐（Scr）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。于4 h点处死动物,观察肾组织病理改变及肾小管损伤程度;采用生物发光测量法检测肾组织线粒体丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、活性氧（ROS）、三磷酸腺苷酶（ATP酶）、ATP生成量（P/O比值）变化。结果B组动物与A组相比较,出现心率增快、血压降低;血Scr、TNF-α水平于造模后0.5 h升高,肾组织出现明显的病理损害、肾小管坏死评分值明显增高,肾组织中三磷酸腺苷（ATP）含量明显下降,氧自由基（ROS）含量升高;其中SOD酶活性的下降与TNF-α含量的增高呈现良好的相关性（r=0.65,P〈0.01）。经HVHF治疗后,C组犬肾组织损伤轻于B组,相应指标亦好于B组。氧化应激反应能力的相对不足和氧化损伤在脓毒症急性肾损伤发病过程中起了重要作用;HVHF通过清除异常增高的炎症物质水平,减轻肾组织的氧化损伤,改善肾小管上皮细胞线粒体的能量代谢状态。     

肠淋巴途径在二次打击致大鼠肾功能衰竭中的作用

目的观察结扎肠系膜淋巴管对失血-脂多糖(LPS)致大鼠肾功能衰竭的影响。方法Wistar雄性大鼠45只,均分为结扎组、未结扎组、假手术组,以失血、LPS复制二次打击模型,结扎组行肠系膜淋巴管结扎术致肠淋巴液断流。在手术创伤后24h,选取固定位置,制备10%肾组织匀浆,检测髓过氧化物酶(MPO)、ATPase活性、TNF-α、IL-6含量,观察肾组织细胞超微结构变化。结果二次打击后,未结扎组大鼠肾匀浆MPO、TNF-α、IL-6显著高于假手术组,ATPase活性显著低于假手术组(P<0.01,P<0.05);结扎组大鼠肾匀浆MPO、TNF-α、IL-6显著低于未结扎组,ATPase活性显著高于未结扎组(P<0.01,P<0.05);且结扎组大鼠肾小管上皮细胞超微结构损伤程度较未结扎组轻微。结论肠系膜淋巴管结扎可减轻失血-LPS致大鼠的肾损伤,其机制可能与肠系膜淋巴管结扎降低炎症介质TNF-α、IL-6水平,提升细胞膜ATPase活性等因素有关。     

肠系膜淋巴管结扎对休克大鼠肾功能不全的干预机制

目的： 观察结扎肠系膜淋巴管对不同时期重症失血性休克大鼠肾组织自由基、炎症介质的影响，探讨肠淋巴途径对休克大鼠肾功能不全的干预机制。方法: 雄性Wistar大鼠78只，分为假手术组、休克组、结扎组。休克组与结扎组复制重症失血性休克模型，结扎组于休克复苏后行肠系膜淋巴管结扎术。于休克后90 min、输液复苏后0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h等时点处死大鼠，制备肾组织匀浆，检测MDA、SOD、NO、NOS、TNF-α、IL-6以及MPO水平，RT-PCR法测定各组大鼠肾组织iNOS mRNA表达。结果: 休克组大鼠输液复苏后不同时点肾组织匀浆MDA、NO、NOS、TNF-α、IL-6水平和MPO活性以及iNOS mRNA表达均有不同程度的升高，6 h-12 h持续在较高水平，均显著高于假手术组，肾组织匀浆SOD活性显著低于假手术组（P<0.01，P<0.05）；结扎组输液复苏后6 h、12 h、24 h肾组织匀浆MDA、NO、NOS、TNF-α、IL-6水平和MPO活性以及iNOS mRNA均显著低于休克组相应时点，SOD活性高于休克组相应时点（P<0.01，P<0.05）。结论: 肠系膜淋巴管结扎干预重症失血性休克大鼠肾功能不全的机制与减少肾PMN扣押、降低TNF-α、IL-6的释放、抑制NO生成及iNOS mRNA表达、减少自由基释放与SOD消耗等因素有关。     

肠淋巴途径在二次打击大鼠肺组织细胞凋亡中的作用

目的： 观察结扎肠系膜淋巴管对二次打击大鼠肺组织细胞凋亡、凋亡相关基因以及TNF-α、IL-6水平的影响。方法： 雄性Wistar大鼠45只，均分为结扎组、未结扎组、假手术组，以失血、LPS复制二次打击模型，结扎组行肠系膜淋巴管结扎术。在手术创伤后24 h，选择肺固定位置制作切片，TUNEL法检测细胞凋亡率，免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白表达；并制备肺组织匀浆，ELISA法检测血清、肺匀浆TNF-α、IL-6。结果： 二次打击后，未结扎组肺组织细胞凋亡率、Bax表达、血清及肺匀浆TNF-α、IL-6明显高于假手术组及结扎组，Bcl-2表达显著低于假手术组及结扎组（P<0.01，P<0.05），细胞凋亡以上皮细胞为主；结扎组肺组织细胞凋亡率与假手术组比较无显著差异（P>0.05），肺组织Bcl-2表达显著增高，Bax表达显著低于假手术组（P<0.01，P<0.05）。结论： 阻断肠淋巴途径可减轻失血-LPS致大鼠肺组织细胞凋亡，其机制可能与肠系膜淋巴管结扎降低促细胞凋亡介质TNF-α、IL-6水平、提高Bcl-2表达有关。提示二次打击的肠源性淋巴液在大鼠急性肺损伤的发病过程中发挥着重要作用。