银杏内酯B对血小板活化因子刺激的大鼠中性粒细胞功能的影响银杏内酯B对血小板活化因子刺激的大鼠中性粒细胞功能的影响

目的 研究银杏内酯B对血小板活化因子(PAF)刺激的大鼠中性粒细胞粘附、趋化及脱颗粒功能的影响。方法 从大鼠外周血分离中性粒细胞,用MTT比色法、Boyden小室法及β-葡萄糖苷酸酶释放法分别检测PAF诱导的粒细胞粘附、趋化及脱颗粒反应。结果10 μmol·L^-1 银杏内酯B可显著抑制中性粒细胞的粘附反应;1～1 000 nmol·L^-1 可剂量依赖性抑制10 nmol·L^-1 PAF诱发的粒细胞趋化反应,其IC₅₀为4.84 nmol·L^-1; 0.01～10 μmol·L^-1可抑制1 μmol·L^-1 PAF诱发的粒细胞释放β-葡糖苷酸酶,其IC₅₀为3.56 μmol·L^-1。结论银杏内酯B能够抑制PAF刺激的大鼠中性粒细胞粘附、趋化及脱颗粒反应。     

HPLC-ELSD法测定白果中银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C

目的建立HPLC-ELSD法同时测定白果药材中银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C 3个萜杏内酯成分。方法采用Agilent 5TC C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇–四氢呋喃–水(25∶10∶65)为流动相,体积流量1 m L/min,柱温30℃,蒸发光散射检测器检测,对照品进样量为10、20μL,供试品溶液进样量为5~20μL。结果银杏内酯A在0.37~5.92μg、银杏内酯B在2.8~44.8μg、银杏内酯C在0.65~10.4μg时线性关系良好。银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C平均回收率分别为92.40%、95.03%、91.29%,RSD值分别为2.75%、2.06%、2.88%。结论本法操作简单,重复性好,为白果药材的质量控制提供了依据。     

银杏内酯B及银杏内酯提取物大鼠体内药动学比较

目的:研究银杏内酯B、银杏内酯提取物在大鼠体内的药动学。方法:LC-MS测定血浆中银杏内酯B的血药浓度,采用3p87药动学处理软件,计算药动学参数,Cmax、tmax采用实测值。结果:银杏内酯B单体、银杏内酯提取物大鼠口服后的t1/2α分别为(0.18±0.09)、(0.17±0.07)h;t1/2β分别为(2.3±2.0)、(2.3±1.5)h;AUC0-12h分别为(2701±655)、(2889±836)μg.L-1.h;AUC0-∞分别为(2778±680)、(2966±854)μg.L-1.h,银杏内酯提取物中银杏内酯B的生物利用度是单体的1.07倍。结论:银杏内酯B单体、银杏内酯提取物大鼠口服后的药动学参数差异均无统计学意义,银杏内酯提取物中共存成分对银杏内酯B的大鼠体内药动学行为影响无统计学意义。     

HPLC-ELSD法测定银杏内酯B滴丸中银杏内酯B的含量

目的：建立银杏内酯B滴丸中银杏内酯B的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为E ZORBAX Eclipse Plus C18（5μm,4.6mm×150mm,Agilent）,流动相为正丙醇-四氢呋喃-水（1∶33∶66）,流速为1.0ml/min,柱温为30℃,采用蒸发光散射检测器（ELSD）检测,外标法测定。结果：银杏内酯B滴丸中银杏内酯B的进样量在1.071～21.42μg（r=0.9996）范围内与各自峰面积对数值呈良好的线性关系;平均加样回收率为98.049%,RSD为0.872%,样品在10小时内稳定。结论：所建立的方法可行,准确、重复性好,适用于银杏内酯B滴丸中银杏内酯B的质量控制。     

银杏内酯注射液和银杏内酯ABC对血小板活化因子诱导的家兔血小板聚集作用比较

目的 观察银杏内酯注射液、银杏内酯ABC以及银杏叶提取物注射液（EGb761）对家兔血小板聚集功能、超微结构及PF-4和β-TG含量的影响比较。方法 将日本大耳兔分为对照（生理盐水）组、EGb761（1.02 mL/kg）组、银杏内酯ABC （5.13 mg/kg）组、银杏内酯注射液（1.02 mL/kg,以萜内酯计5.1 mg/kg）组、白果内酯（5.13 mg/kg）组,分别iv相应药物1周。给药结束后,家兔心脏取血,观察PAF诱导下血小板聚集率;电镜观察血小板超微结构;试剂盒法观察PAF诱导下血清中血小板因子-4（PF-4）和β-血小板球蛋白（β-TG）含量。结果 与对照组比较,EGb761组、银杏内酯ABC组、银杏内酯注射液组的血小板聚集率均显著降低（P<0.05、0.01）,白果内酯组无显著变化;血小板聚集抑制率：银杏内酯注射液（43.76%） > 银杏内酯ABC （35.3%） > EGb761（26.52%） > 白果内酯（5.48%）。与对照组比较,EGb761、银杏内酯ABC、银杏内酯注射液均能减少聚集型血小板数量,使树突型血小板突起变少变短。与对照组比较,银杏内酯注射液和银杏内酯ABC均使PF-4和β-TG表达显著降低（P<0.01）,EGb761仅显著降低β-TG表达（P<0.05）。结论 银杏内酯注射液通过PAF途径发挥抗血小板聚集作用,其作用强于银杏内酯ABC,可能是白果内酯发挥了协同增效作用。     

血小板激活因子和银杏内酯B对洗涤兔血小板中cAMP含量的影响

研究了血小板激活因子(PAF)和PAF拮抗剂银杏内酯B对洗涤兔血小板中cAMP含量的作用. 结果表明PAF(0.1-1.0 μmol·L^-1)对血小板的基础cAMP水平无影响, 但对前列腺素E₁(PGE₁) 2 μmol·L^-1及4,5-二氢-6-［4-(1H-咪唑-1)苯基］-5-甲基-3-(2H)-哒嗪酮(CI-930) 20 μmol·L^-1引起的cAMP升高有显著的抑制作用. 银杏内酯B能完全拮抗PAF抑制PGE₁和CI-930升高cAMP的作用, IC₅₀分别为4.7和12.5 μmol·L^-1. 合用磷酸肌酸/磷酸肌酸激酶和阿司匹林对PAF和银杏内酯B的作用均无影响. 提示PAF对磷酸二酯酶的激活作用及腺苷酸环化酶的抑制作用是PAF的直接作用，与其同PAF受体结合有关.     

银杏内酯B防治脑缺血的研究进展

目的:了解银杏内酯B(GB)防治脑缺血的药效学及作用机制的研究进展。方法:根据文献,对GB防治脑缺血的药效学及作用机制进行分析、整理和归纳。结果:在不同种属动物多种脑缺血模型中,GB显示了明显的脑保护作用,可明显改善神经症状,缩小梗死面积,减轻脑水肿;GB通过多种途径发挥抗脑缺血损伤的作用,如改善能量代谢、抑制缺血后炎症因子和炎症反应的发生、抗氧化、降低兴奋性氨基酸所致细胞损伤、抑制一氧化氮的生成、减少缺血细胞凋亡等。结论:随着GB抗脑缺血作用的深入研究,其在保护大脑缺血-再灌注方面将有广阔的应用前景。     

银杏苦内酯B的药理学研究概述

银杏苦内酯为“国宝”银杏叶提取物中的萜类化合物，分为银杏苦内酯A、B、C、M、J和白果内酯，编号分别为BN5加20、BN52021、BN52022、BN52023、BN52024，共约占银杏提取物的6％。银杏提取物中仅含有微量银杏苦内酯B（BN52021），但近年来国内外的研究显示该化合物具有抗炎、抗休克、保护心脑血管、治疗急性胰腺炎等作用。本文对银杏苦内酯B的药理作用进行了概述，为临床应用提供参考。     

银杏内酯B对牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨银杏内酯B(GB)对牛主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响及可能机制。方法细胞的增殖由³H-胸腺嘧啶核苷掺入试验确定,应用流式细胞术测定细胞周期,用MTT法和乳酸脱氢酶活性检测观察细胞代谢的变化。结果无论是否用血管紧张素II诱导,GB与银杏内酯A和B的混合物均呈浓度依赖性地抑制SMC的增殖,其机制与阻止细胞进入有丝分裂期有关。结论GB可抑制动脉壁SMC的增殖,该作用不完全取决于血小板活化因子受体的拮抗活性。     

银杏内酯B对牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨银杏内酯B(GB)对牛主动脉平滑肌细胞 (SMC)增殖的影响及可能机制。方法　细胞的增殖由3H 胸腺嘧啶核苷掺入试验确定 ,应用流式细胞术测定细胞周期 ,用MTT法和乳酸脱氢酶活性检测观察细胞代谢的变化。结果　无论是否用血管紧张素II诱导 ,GB与银杏内酯A和B的混合物均呈浓度依赖性地抑制SMC的增殖 ,其机制与阻止细胞进入有丝分裂期有关。结论　GB可抑制动脉壁SMC的增殖 ,该作用不完全取决于血小板活化因子受体的拮抗活性     

The synthesis and biological evaluation of 10-O-dialkylaminoethyl ginkgolide B as platelet-activating factor antagonist

Four nitrogen-containing derivatives of ginkgolide B were synthesized to improve the physical–chemical properties and bioavailability of ginkgolide B. The reaction was accomplished with the nitrogen atom as neighboring group participating in the replacement reaction. All of the four compounds were proved to have excellent inhibiting effect on rabbit platelet aggregation induced by platelet-activating factor which is as well as ginkgolide B.     

Paradoxical effects of ginkgolide B on cardiomyocyte contractile function in normal and high-glucose environments

AIM: Ginkgo biloba extract is a natural product used widely for cerebral and cardiovascular diseases. It is mainly composed of terpene lactones (ginkgolide A and B) and flavone glycosides (eg quercetin and kaempferol). To better understand the cardiac electromechanical action of Ginkgo biloba extract in normal and diabetic states, this study was designed to examine the effect of ginkgolide B on cardiomyocyte contractile function under normal and high-glucose environments. METHODS: Isolated adult rat ventricular myocytes were cultured for 6 h in a serum-free medium containing either normal (NG; 5.5 mmol/L) or high (HG; 25.5 mmol/L) glucose with or without ginkgolide B (0.5-2.0 microg/mL). Mechanical properties were evaluated using the IonOptix MyoCam system. Contractile properties analyzed included peak shortening (PS), maximal velocity of shortening/relengthening (+/-dl/dt), time-to-PS (TPS) and time-to-90% relengthening (TR90). Levels of essential Ca(2+) regulatory proteins sarco(endo)plasmic reticulum Ca(2+)-ATPase (SERCA2a), phospholamban (PLB) and Na(+)-Ca(2+) exchanger (NCX) were assessed by Western blotting. RESULTS: Ginkgolide B nullified HG-induced prolongation in TR90. However, ginkgolide B depressed PS, +/-dl/dt and shortened TPS in NG and HG cells. Ginkgolide B also prolonged TR90 in NG cells. Western blot analysis revealed that HG upregulated SERCA2a and downregulated PLB expression without affecting that of NCX. Ginkgolide B disrupted the NG-HG response pattern in SERCA2a and NCX without affecting that of PLB. CONCLUSION: Ginkgolide B affects cardiomyocyte contractile function under NG or HG environments in a paradoxical manner, which may be attributed to uneven action on Ca(2+) regulatory proteins under NG and HG conditions.     

环孢素A对银杏内酯B大鼠体内药动学的影响

研究环孢素A (cyclosporine A, CyA) 对大鼠静脉注射中药成分银杏内酯B (ginkgolide B, GB) 药动学的影响, 并进行作用机制研究。实验建立了测定大鼠血浆、脑组织和尿液中GB浓度的LC-MS方法, 研究了CyA对GB在大鼠体内血药浓度、脑分布和肾排泄的影响。结果表明静脉注射CyA (10及20 mg·kg⁻¹) 可以显著增加GB的AUC_{0−360 min} (P < 0.01), 降低其CL (P < 0.001); 静脉注射CYP3A抑制剂伊曲康唑 (itraconazole, ICZ) 则对GB的药动学行为无影响。脑分布结果显示, 高、中、低剂量的CyA均可增加GB在脑中的浓度, 此作用具有浓度和时间依赖性, 在5 min时不同剂量的CyA均可显著增加GB在脑中的分布 (P < 0.001), 但在20及60 min时仅高剂量CyA组可显著增加GB脑中的浓度 (P < 0.01及P < 0.001)。不同P-gp抑制剂均可减少GB的肾排泄, 其中CyA (20 mg·kg⁻¹) 组、维拉帕米 (verapamil, VER) 组及地高辛 (digoxin, DGX) 组GB 8 h累积排泄百分率仅分别为对照组的34.8% (P < 0.001)、59.4% (P < 0.001) 及79.7% (P < 0.05); 而ICZ组则无此作用。大鼠静脉给予P-gp抑制剂CyA可以显著提高GB的血药浓度, 减少肾脏对GB排泄且能增加GB在脑中的分布。     

银杏内酯B对脂多糖刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB活化的影响

目的研究银杏内酯B对脂多糖刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB活化的影响。方法用L929细胞结晶紫染色法检测TNFα的含量，用电泳迁移率改变检测法检测NF-κB的结合活性。结果1和10 μmol·L^-1银杏内酯B能够显著抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα的生成，其IC₅₀为0.26 μmol·L^-1；1 mg·L^-1 LPS和1 nmol·L^-1 PAF均可活化大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB；银杏内酯B能够抑制LPS或 PAF刺激的NF-κB活化。结论银杏内酯B能够抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB的活化。PAF参与LPS激活NF-κB的过程。     

银杏内酯B对内皮细胞的保护作用及分子机制研究

目的探讨银杏内酯B对氧化型低密度脂蛋白刺激脐静脉内皮细胞保护作用的分子机制。方法分别用银杏内酯B 0.2、0.4、0.6 g.L-1预孵育内皮细胞1 h,再加入ox-LDL(0.1 g.L-1)刺激细胞。用Western blot检测Lectin-likeoxidized LDL receptor-1(LOX-1)、PI3K、Nrf2、SIRT1表达及Akt磷酸化。结果 1.ox-LDL刺激内皮细胞LOX-1表达增加,银杏内酯B以剂量依赖方式抑制了LOX-1表达。2.银杏内酯B有效地抑制了ox-LDL刺激的Akt磷酸化,但对PI3K的表达无影响。3.ox-LDL刺激内皮细胞SIRT1表达降低,银杏内酯B有意义地增加了细胞SIRT1表达。4.ox-LDL刺激细胞抗氧化应激蛋白Nrf2表达明显增加,银杏内酯B下调了Nrf2的表达。结论银杏内酯B对内皮细胞保护作用与抑制LOX-1表达、Akt磷酸化,启动细胞内源性保护机制相关。     

Radiolabeling of ginkgolide B with 18F

Ginkgolide B, a terpene trilactone constituent of Gingko biloba extracts and an antagonist for the platelet activating factor (PAF) receptor, was radiolabeled with the positron emitter ¹⁸F for visualizing its in vivo behavior using positron emission tomography (PET). The 7‐[¹⁸F]fluoro analog of ginkgolide B (7‐¹⁸FGB) was synthesized via nucleophilic displacement of the triflate group at C7 with [¹⁸F]fluoride. The reaction was complete in 5–10 min, affording 7‐¹⁸FGB in an average radiochemical yield of approximately 16% (decay corrected). The average specific activity at E.O.S. was approximately 40 GBq/µmol, and the radiochemical and chemical purity was greater than 95%. Copyright © 2004 John Wiley & Sons, Ltd.     

LC-MS/MS法测定Wistar大鼠组织中银杏内酯B的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定大鼠组织中银杏内酯B的浓度,并将此方法应用于银杏内酯B注射液在Wistar大鼠体内的组织分布研究。方法色谱柱:AQVASIL C18柱(100 mm×2.0 mm I.D.,5μm),流动相:乙腈-水-甲酸(体积比为60.0∶40.0∶0.4),流速:0.4 mL.min-1,离子源为电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)源,负离子化方式,以选择反应监测(selective reaction monito-ring,SRM)方式进行扫描定量,用于定量分析的离子反应分别为m/z 423→m/z 367(银杏内酯B)和m/z 444→m/z 138(格列吡嗪)。测定了18只Wistar大鼠静脉注射给予银杏内酯B(给药剂量为3.75 mg.kg-1)后大鼠体内各组织和脏器中银杏内酯B的质量浓度。结果测定大鼠组织匀浆液中银杏内酯B的线性为1.0～500.0μg.L-1,定量下限为1.00μg.L-1。低、中、高3个质量浓度质控样品的日内和日间精密度分别小于6.4%和14.5%,准确度为97.3%～103.6%。银杏内酯B在心、肝、脾、肺、肾、胰、胃、小肠、脑、肌肉、脂肪、子宫、卵巢和睾丸14种组织中(除脑组织6 h时间点外)均被检出。银杏内酯B在大鼠各组织中分布广泛,自各组织中消除也较快。结论该方法适用于银杏内酯B注射液在Wistar大鼠体内的组织分布研究。