胃宁颗粒对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移的抑制作用

目的:探讨胃宁颗粒对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移的抑制作用.方法:制作人胃癌裸鼠原位移植模型,随机分成对照组、环磷酰胺(CTX)组、胃宁颗粒组、CTX 胃宁颗粒组,每组12只,观察瘤体积抑制率、瘤重量抑制率、肝转移发生率、肿瘤组织细胞形念学变化、凋亡指数(AI)、p53、Bcl-2、bax、CD44v6、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.结果:CTX组、胃宁颗粒组、胃宁颗粒组 CTX组和对照组相比,瘤重抑制率、肿瘤体积抑制率差异有显著性(P<0.05);胃宁颗粒组 CTX组与CTX组相比.瘤重抑制率、肿瘤体积抑制率差异有显著性(P<0.05);胃宁颗粒组、CTX组肝转移发生率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);胃宁颗粒组与对照组AI值相比,差异有显著性(JP<0.01);胃宁颗粒组p53、bcl-2、bax、CD44v6、PCNA与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);胃宁颗粒 CTX组与CTX组相比,p53、CD44v6、PCNA表达差异有显著性(P<0.05).结论:胃宁颗粒具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移作用.     

环氧合酶-2抑制剂抑制胃癌转移的实验研究

目的研究环氧合酶-2抑制剂SC236对胃癌转移的影响，并初步探讨其作用机制。方法用人胃癌细胞株SGC7901建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型，随机分为实验组和对照组，分别经尾静脉注射SC236和生理盐水，观察各组生存期和肿瘤转移情况，并通过免疫组化方法检测移植瘤MVD、VEGF及MMP-2蛋白的表达。结果与对照组相比，SC236可明显延长荷瘤鼠生存期，抑制胃癌转移，降低移植瘤MVD，减低移植瘤VEGF及MMP2蛋白的表达。结论SC236能有效抑制胃癌的转移。其机制可能与其抑制肿瘤的血管生成、减低MMP-2的表达有关。     

低剂量替尼泊苷联合沙利度胺对人胃癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨低剂量替尼泊苷(VM-26)联合沙利度胺对人胃癌BGC-823细胞裸鼠移植瘤生长、荷瘤小鼠骨髓造血功能的变化及新生血管形成的影响.方法:建立人胃癌BGC-823细胞裸鼠移植瘤模型,建模成功后随机分为沙利度胺组、高剂量VM-26组、低剂量VM-26组、低剂量VM-26联合沙利度胺组和对照组,每组各10只.经尾静脉注射不同剂量VM-26、生理盐水,经口灌注沙利度胺.用药2周后测量裸鼠移植瘤瘤重,计算抑瘤率;观察裸鼠骨髓造血功能,检测移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、CD44v6的表达以及微血管密度(MVD)的变化.结果:各组裸鼠移植瘤瘤重差异有统计学意义(F=24.570,P＜0.05).各组移植组织中VEGF、CD44v6表达及MVD的差异均有统计学意义(λ2/F=22.881、26.371、19.518,P均＜0.05);各治疗组VEGF的表达和MVD均较对照组显著降低,低剂量VM-26联合沙利度胺组CD44v6的表达较对照组显著降低.低剂量VM-26联合沙利度胺组对骨髓造血功能的抑制较高剂量VM-26组减轻.结论:低剂量VM-26联合沙利度胺能抑制人胃癌BGC-823裸鼠移植瘤的生长、新生血管的形成,且对骨髓的造血功能无明显影响.     

CD44v6、E-Cadherin表达与CNE-2Z-F1裸鼠移植瘤转移的关系

目的　探讨CD44v6、E -Cadherin表达与人鼻咽癌裸鼠移植瘤转移的关系。方法　分别将人鼻咽癌细胞克隆株F1在体外与鼠肺块共同孵育及胸内移植 ,然后将带瘤细胞肺块 (Ⅰ组 )和胸内瘤组织块 (Ⅱ组 )各行裸鼠皮下移植 ,并与瘤细胞悬液皮下移植瘤 (Ⅲ组 )比较 ,观察各组移植瘤转移特点。采用免疫组织化学技术检测各组移植瘤回复培养细胞CD44v6和E -Cadherin表达。结果　Ⅰ组和Ⅱ组皮下移植瘤的总转移率和淋巴结转移率均高于Ⅲ组 (其中ⅠvsⅢ ,P <0 .0 5) ;肺转移仅发生在Ⅰ组。这两组移植瘤细胞CD44v6表达水平明显增高 ,其阳性细胞数分别为 (79.7± 5.7) %、(74.1± 3.1 ) % ,第 3组为 (65.6± 4.31 ) %移植瘤转移率与CD44v6高表达密切相关 ;E -Cadherin阳性细胞分别为 (41 .7± 4.9) %、(43.8± 6.4) %和 (2 7.4± 4.9) % ,Ⅰ组、Ⅱ组与Ⅲ组之间比较 ,有显著差异 (P <0 .0 5)。结论　CD44v6的过表达和E -Cadherin功能障碍 ,可能在鼻咽癌侵袭转移中起一定作用。     

CD44v6、MMP-9、CD34表达与胃癌生物学行为的关系

目的探讨黏附分子CD44拼接变异体v6(CD44 splice variant v6,CD44v6)、基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)表达和癌间质微血管密度(MVD)与胃癌临床病理生物学行为的关系以及它们之间的相关性。方法采用免疫组化S-P法,检测128例胃癌手术标本中CD44v6,MMP-9,CD34表达,用CD34标记血管内皮细胞并计算微血管密度MVD值。结果128例胃癌组织中CD44v6,MMP-9阳性表达率和MVD分别为58.6%,64.1%,28.68±10.25,三者均与胃癌生长方式、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05);CD44v6和MVD与肿瘤远处转移有关(P<0.05);MVD与肿瘤大小和低分化成正相关(P<0.05)。三者在胃癌中表达呈正相关(P<0.05),CD44v6,MMP-9共同表达组发生深度浸润(T3-4)与淋巴结转移的概率和MVD明显高于其中之一或二者皆阴性表达者(P<0.05)。结论CD44v6,MMP-9,CD34过表达促进胃癌的浸润转移,三者具有正协同作用。联合检测CD44v6,MMP-9,CD34表达可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标。     

CD44相关亚型在裸鼠原位胃癌生长转移中的表达变化及机制

目的 通过循环肿瘤细胞(CTC)探讨CD44相关亚型(CD44s、CD44v3、CD44v6、CD44v9)在裸鼠原位胃癌生长过程中表达水平的变化.方法 采用SGC7901、MNK-45两种胃癌细胞株分别构建裸鼠原位胃癌模型,于第1、2、3、4周分别收集裸鼠眼眶血,计数CTC数量,采用RT-PCR检测CTC中CD44s、CD44v3、CD44v6、CD44v9表达水平变化.处死裸鼠后通过免疫组织化学及Western blot检测原位胃癌中CD44s、CD44v3、CD44v6、CD44v9表达水平.结果 成功采用SGC7901、MNK-45两种细胞株构建了裸鼠原位胃癌模型,于第1、2、3、4周分别收集裸鼠眼眶血.在SGC7901组,随着时间进展,各组基因表达量逐渐升高,不同时间组之间,差异有统计学意义(F=461.547,P=0.000),时间和各组基因表达量存在交互效应(F=10.386,P=0.000),CD44v9表达水平在各时间组均明显高于CD44s、CD44v3、CD44v6.在MNK-45组,各组基因表达量在不同时间组之间差异有统计学意义(F=537.642,P=0.000),时间和各组基因表达量存在交互效应(F=16.122,P=0.000),CD44v9表达水平在各时间组均明显高于CD44s、CD44v3、CD44v6.免疫组织化学及Western blot均显示在两种胃癌细胞构建的原位胃癌模型中,CD44v9表达水平最高.结论 随时间延长,CD44v9在CTC中表达水平逐渐增高,在两种胃癌细胞构建的原位肿瘤中相对于其他CD44亚型表达水平最高.     

CD44v6、MMP-9在胃癌侵袭与转移中的作用

目的探讨CD44v6和MMP-9在胃癌中的表达及二者在胃癌侵袭与转移中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测128例胃癌手术标本中CD44v6和MMP-9的表达。结果128例胃癌组织中CD44v6和MMP-9阳性表达率分别为58.59%(75/128)、64.06%(82/128),二者均与胃癌生长方式、浸润深度、淋巴结是否转移、TNM分期有关(P<0.05或0.01);弥漫型胃癌MMP-9阳性表达率明显高于肠型胃癌(P<0.01);MMP-9表达阳性的胃癌患者5年生存率较表达阴性者低(P<0.05);二者在胃癌中表达呈正相关,其共同表达者组发生淋巴结转移的比例明显高于二者仅其中之一阳性表达组或同为阴性表达组(P<0.05或0.01);其共同表达者组发生浆膜浸润的比例均明显高于同为阴性表达组(P<0.01)。结论CD44v6和MMP-9对胃癌的生长、浸润和转移有促进作用,CD44v6和MMP-9表达可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标。     

LY294002增强5-氟尿嘧啶抑制裸鼠大肠癌移植瘤生长及转移的实验研究

目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K/Akt)信号通路抑制剂LY294002在裸鼠体内对5氟尿嘧啶(5-Fu)抑制大肠癌移植瘤生长及肝转移的影响。方法:采用细胞接种法建立裸鼠异位及原位移植瘤模型,观察LY294002、5-Fu及LY294002联合5-Fu对异位裸鼠移植瘤生长的抑制作用,用流式细胞仪检测异位裸鼠移植瘤细胞凋亡,用免疫共沉淀法检测Akt和Akt-ser473蛋白表达;观察LY294002、5-Fu及LY294002联合5-Fu对原位裸鼠移植瘤肝脏转移的影响情况,用免疫共沉淀法检测原位裸鼠移植瘤Akt、Akt-ser473的表达,用免疫组化法检测β-catenin及MMP-7蛋白表达。结果:与对照组比较,5-Fu、LY294002抑制异位移植瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡,LY294002显著促进5-Fu诱导的肿瘤生长抑制、细胞凋亡;与对照组比较肿瘤细胞的Akt表达无改变,Akt-ser473蛋白表达下降。与对照组比较,5-Fu、LY294002抑制原位移植瘤的肝脏转移,LY294002显著增强5-Fu抑制原位移植瘤的肝脏转移;与对照组比较原位移植肿瘤细胞的Akt表达无改变,Akt-ser473、β-catenin及MMP-7蛋白表达下降。结论:LY294002可增强5-Fu抑制裸鼠移植大肠癌生长及肝脏转移的作用。     

转染STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞的影响

目的 通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃腺癌MKN45细胞增生活性及其MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达的影响,寻求胃癌治疗中的新靶点.方法 以人胃癌细胞MKN45为对象,体外药物敏感实验(MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,免疫组化S-P法检测胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达变化情况.结果 (1)STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性;(2)STAT3诱饵寡核苷酸可明显抑制胃癌细胞株细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达.结论 STAT3诱饵寡核苷酸可通过抑制胃癌细胞的分裂和增殖,抑制胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达,干扰肿瘤的转移与复发.     

下调Cyclophilin A对喉鳞癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长和转移的影响

目的 通过RNA干扰技术,研究亲环蛋白A(Cyclophilin A,CypA)基因对喉鳞癌裸鼠移植瘤模型在肿瘤生长和肿瘤转移方面的影响.方法 构建沉默CypA基因慢病毒颗粒,转染Hep2喉癌细胞,将15只裸鼠完全随机分为3组,分别为空白对照组、阴性对照组、基因沉默组,每组5只,建立喉鳞癌裸鼠移植瘤转移模型,观察肿瘤生长情况及淋巴结转移情况.PV二步法免疫组化检测CypA、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN、CD147)、细胞外基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肿瘤组织的表达,RT-PCR检测CypA、CD147、MMP-9 mRNA的表达水平,Western blot法检测CypA、CD147、MMP-9蛋白的表达水平.结果 基因沉默组肿瘤体积较空白对照组、阴性对照组小,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化观察肿瘤为中分化鳞状细胞癌,CypA主要表达在细胞质,CD147主要表达在细胞膜,MMP-9主要表达在肿瘤间质;在mRNA水平和蛋白水平基因沉默组CypA、CD147、MMP-9的表达都明显降低(P＜0.05).结论 下调CypA可以通过调节CD147、MMP-9的表达水平抑制喉癌的生长,延缓肿瘤转移.     

健脾中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的影响

目的:观察以健脾为基础的中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用.方法:采用人胃癌细胞SGC-7901,裸小鼠66只,其中41只制作原位移植瘤模型,另25只制作皮下移植瘤模型.两种模型的裸小鼠分别随机分为3组:胃肠安组,5-FU组和生理盐水对照组.胃肠安组予以含生药0.12 g/ml的胃肠安煎剂0.5 ml灌胃,1次/d;5-FU组以5-FU 50 mg/kg行腹腔化疗,1次/周;生理盐水对照组予以生理盐水0.5 ml/d灌胃.原位移植瘤裸小鼠于造模后第64天处死;皮下移植瘤裸小鼠于造模后第41天处死.观察各组的抑瘤率,原位移植瘤各组肿瘤的转移情况,皮下移植瘤各组增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和细胞凋亡情况.结果:原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组抑瘤率分别为40.82%和37.92%;皮下移植瘤模型中两组的抑瘤率则分别为48.70%和60.10%.原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组裸小鼠胃周淋巴结转移、肝转移、肝门淋巴结转移、横膈转移和腹膜转移比生理盐水对照组明显减少,3组的总转移率分别为30.77%、28.57%和71.43%(P ＜0.05).皮下移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组的PCNA总阳性率低于生理盐水对照组,细胞凋亡指数高于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05或P ＜0.01).胃肠安组和5-FU组瘤重、总转移率和PCNA总阳性率比较,差异无统计学意义,但胃肠安组细胞凋亡指数明显高于5-FU组(P＜0.05).结论:健脾中药复方胃肠安具有抑制人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的作用.胃肠安对胃癌细胞的体内抑制作用可能通过抑制增殖、诱导肿瘤细胞凋亡而实现,对其抑制转移的机制尚需作进一步的研究.     

奥曲肽抑制胃癌侵袭和转移的实验研究

目的　通过体外及体内实验 ,研究生长抑素类似物奥曲肽对胃癌侵袭和转移的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法　选用改良的BoydenChamber膜侵袭系统 ,观察奥曲肽对胃癌细胞迁移和侵袭的影响 ;建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型 ,给予奥曲肽皮下注射治疗 8周后 ,观察胃癌转移情况 ;免疫细胞化学染色检测奥曲肽对胃癌细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响 ;用明胶酶法及RT PCR法了解奥曲肽是否下调胃癌细胞MMP 2表达及MMP 2mRNA的表达。结果　经奥曲肽作用后 ,体外培养的胃癌细胞的趋化细胞数 (5 0± 4 )或侵袭细胞数 (30± 3)均明显低于对照组 (10 7± 11,5 6± 5 ,均P <0 0 1)。奥曲肽明显降低裸鼠人胃癌移植瘤的转移 ,其肿瘤血管的形成数亦明显低于对照组。此外 ,奥曲肽降低胃癌细胞VEGF的表达 ,明显下调MMP 2mRNA的表达 ,导致MMP 2的合成减少。结论　奥曲肽能有效抑制胃癌侵袭和转移。其作用机制可能与降低胃癌细胞运动能力、抑制MMP 2表达及肿瘤血管形成有关     

人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进

目的：建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型。方法：用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下，形成稳定传代的皮下移植瘤。将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层，观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性。结果：肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点，人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100％(20／20)，肝脏转移率为45％(9／20)。结论：人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似，为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型。     

CD44v6、MMP-9与VEGF的表达与胃癌生物学行为的关系

目的:探讨粘附分子CD44拼接变异体v6(CD44 splice variant v6,CD44v6)、基质金属蛋白酶-9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)与血管内皮生长因子(vascular endothelia1 growth factor,VEGF)的表达与胃癌临床病理生物学行为的关系以及它们之间的相关性。方法:应用免疫组化SP法对80例胃癌组织进行CD44v6、MMP-9与VEGF蛋白检测。结果:CD44v6、MMP-9与VEGF的表达与胃癌的临床分期、浸润深度、淋巴结转移及远处转移密切相关(P<0.05),而与组织类型、组织分化程度等无关;CD44v6、MMP-9与VEGF在胃癌组织中表达呈正相关,其共同表达者发生淋巴结转移与深度浸润的几率明显高于其中之一或之二表达者或三者皆阴性表达者(P<0.05)。结论:CD44v6、MMP-9与VEGF的表达促进胃癌的浸润转移,三者具有正协同作用。联合检测CD44v6、MMP-9与VEGF蛋白可作为预测胃癌的浸润转移及评价患者预后的生物学指标。     

CD44v6和MMP-9及VEGF在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中CD44v6，MMP-9和VEGF的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组化方法测定60例胃癌组织CD44v6，MMP-9，VEGF表达情况，并结合患者的临床病理资料进行分析。结果胃癌组织中CD44v6，MMP-9，VEGF的阳性表达率分别为60％，53．8％和75％，CD44v6，MMP-9，VEGF的表达与肿瘤的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论CD44v6，MMP-9，VEGF的表达与胃癌的浸润转移密切相关。     

应用福爱乐医用胶粘贴法构建人胃癌组织块原位移植模型

［摘要］目的: 利用福爱乐医用胶构建人胃癌组织块裸鼠原位移植模型,为研究胃癌的病理生理过程及实验研究提供理想的动物模型。方法: 以人胃癌SGC 7901细胞株反复接种传代于BALB/C裸鼠皮下形成的皮下移植瘤组织块为材料,利用福爱乐医用胶将其粘贴在30只裸鼠胃大弯侧浆膜下,分别在术后4、6、8周随机取10只裸鼠观察原位移植瘤的生长状况、移植成功率及转移情况。结果： 原位移植瘤成瘤率为100％。随着饲养时间的延长,胃癌腹腔淋巴结转移、肝脏黏连等出现率逐渐增高。结论： 利用福爱乐医用胶粘贴法能够安全、便捷地建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,并可模拟胃癌的临床发生发展过程。     

宫颈癌CD44v6和MMP-9的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈癌组织中CD44v6和MMP9蛋白的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法分析65例Ⅰ、Ⅱ期术后宫颈癌组织中CD44v6和MMP9蛋白的表达情况。结果:CD44v6和MMP9在伴有淋巴结转移宫颈癌中的阳性表达率为84.6%和92.3%,无淋巴结转移为67.3%和69.2%,两组间差异有显著意义,P<0.05;CD44v6和MMP9表达与病理类型和临床分期无明显相关。结论:检测宫颈癌转移相关基因表达并分析其表达的相互关系有助于判断宫颈癌的转移潜能及指导术后干预治疗。