乳腺癌中p16,Cyclin D1基因蛋白的表达及意义

目的：探讨细胞周期调控因子p16及Cyclin D1蛋白的表达与乳腺癌发生发展的关系。方法：采用免疫组织化学染色检测49例乳腺癌及14例癌旁组织中p16及CyclinD1蛋白表达。结果：Cyclin D1在乳腺癌中有较高表达，过表达率为49％（24／49），明显高于癌旁正常组织（P＜0．05）；p16在乳腺癌中过表达率（40．8％）低于癌旁正常组织（阳性率为92．8％，P＜0．05）；淋巴结转移组的p16蛋白表达明显低于淋巴结无转移组（P＜0．05）；p16的低表达与CyclinD1的高表达有关。结论：Cyclin D1过表达及p16蛋白的失表达参与乳腺癌的发生；p16蛋白的表达异常可能参与乳腺癌的转移。     

头颈部鳞癌中端粒酶活性与调节蛋白p16、CyclinD1和pRb表达的关系

目的：探讨端粒酶活性与细胞周期调节蛋白p16、cyclinD1和pRb的关系.方法：采用TRAP-PCR-ELISA法对32例原发头颈部鳞癌组织进行端粒酶活性检测,并应用免疫组织化学方法检测细胞周期调节蛋白p16、CyclinD1和pRb的表达.结果：32例原发头颈部鳞癌中,有27例端粒酶活化,阳性率为84.4%.p16、CyclinD1、pRb的总异常率为90.6%（29/32）,其中p16和pRb蛋白表达缺失分别为62.5%（20/32）和34.4%（11/32）,CyclinD1过表达为34.4%（11/32）.p16与pRb呈负相关性（P＜0.01）.端粒酶活性与细胞周期调节蛋白p16、CyclinD1和pRb总异常无相关性 端粒酶活性与p16、CyclinD1和pRb两两之间无相关性 p16、pRb的表达组与失活组端粒酶活性值无统计学差异,CyclinD1的正常表达组和过表达组端粒酶活性值无差异 但按照p16、CyclinD1和pRb表达不同将32例标本分成八组后,分析发现p16＋/pRb-/CyclinD1过表达组端粒酶活性值明显高于其它组,其余各组间无统计学差异（P＞0.05）.结论：端粒酶活化与头颈部鳞癌的发生发展有密切关系.p16/CyclinD1/pRb通路异常与HNSCC的发病机制密切相关.头颈部鳞癌中端粒酶活性与p16、CyclinD1和pRb的确切关系有待深入研究.     

口腔鳞癌组织中细胞周期蛋白D1和p27蛋白的表达

①目的探讨细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）和p27蛋白在口腔鳞癌组织中的表达及其临床意义。②方法免疫组化SP法检测Cyclin D1和p27蛋白在56例口腔鳞癌组织中的表达情况,取12例正常口腔黏膜组织做对照。③结果口腔鳞癌组织中细胞周期蛋白CyclinD1呈高表达,p27呈低表达,二者与对照组差异均有统计学意义（P〈0.05）;口腔鳞癌组织中CyclinD1与p27的异常表达与肿瘤的分化程度、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）,与患者年龄、性别等因素无关（P〉0.05）;口腔鳞癌中Cyclin D1和p27表达呈负相关（r=-0.42）。④结论CyclinD1和p27蛋白的异常表达与口腔鳞癌的发生、发展密切相关,联合检测CycinD1及p27蛋白的表达有助于综合评估口腔鳞癌的生物学行为。     

SLeX和p16在甲状腺乳头状癌中的表达及其意义

目的探讨甲状腺乳头状癌（PTC）组织SLeX和p16基因蛋白表达与肿瘤侵袭转移的关系。方法应用微波-链霉菌素-生物素（微波-LSAB）法检测69例PTC组织SLeX和p16蛋白的表达。结果SLeX和p16阳性率分别为69．6％和58．0％,伴有浸润和颈部淋巴结转移者SLeX阳性表达率均显著高于无浸润和无淋巴结转移者（P〈0．05）,而p16表达阳性率则显著低于无浸润和无淋巴结转移者（P〈0．05）。SLeX表达与p16表达呈显著负相关（P〈0．05）。结论SLeX和p16表达与PTC侵袭转移密切相关,联合检测可作为判断PTC预后的参考指标。     

皮肤鳞状细胞癌中p16、CyclinD1、pRb蛋白表达与临床病理特征的关系

目的:分析皮肤鳞状细胞癌中p16、Cyclin D1、pRb蛋白表达与临床病理特征的关系为临床诊断提供依据。方法:采集45例皮肤鳞状细胞癌标本及10例正常皮肤标本,采用免疫组化法测定其中的p16、Cyclin D1、pRb蛋白表达情况。结果:皮肤鳞状细胞癌的p16蛋白阳性表达率明显低于正常皮肤,Cyclin D1、pRb蛋白明显高于正常皮肤,差异有统计学意义(P<0.05)。Broders分级为Ⅲ~Ⅳ级、有淋巴结转移者p16蛋白阳性表达率明显低于Ⅰ~Ⅱ级者(P<0.05),Cyclin D1、pRb蛋白阳性表达明显高于Ⅰ~Ⅱ级、无淋巴结转移者(P<0.05)。直线相关分析显示,p16蛋白阳性表达与Cyclin D1、pRb蛋白呈负相关;cyclin D1蛋白阳性表达与pRb蛋白呈正相关。结论:皮肤鳞状细胞癌的发生和进展可能是p16蛋白、Cyclin D1、pRb蛋白异常表达的结果。故认为可通过对三种指标进行检测来评估皮肤鳞状细胞癌的恶性程度及预后。     

高低发区食管癌p16基因甲基化及其表达的比较

目的比较p16基因甲基化在食管癌高发区广东揭阳和低发区广东佛山之间的异同,探讨p16基因甲基化在两地食管癌变过程中所起的作用。方法采用甲基化特异性PCR方法（MSP）分别检测两地食管癌组织、癌旁组织和切缘组织p16基因启动子区域CpG岛甲基化状态。采用EnVision免疫组化法检测两地食管癌组织及癌旁组织的p16蛋白的表达。结果高发区75例标本中,食管鳞癌、癌旁及切缘组织的p16基因甲基化率分别为41．3％（31／75）、13．3％（10／75）和6．7％（5／75）。鳞癌及癌旁组织p16蛋白的阳性表达率分别为29．3％（22／75）和56．7％（17／30）。31例甲基化阳性标本中有2例（6．4％）检测到p16蛋白表达,而44例甲基化阴性的标本中有20例（45．5％）检测到p16表达;低发区55例标本中,食管鳞癌、癌旁及切缘组织的p16基因甲基化率分别为18．2％（10／55）、5．5％（3／55）和0（0／55）。食管鳞癌、癌旁组织p16蛋白阳性表达率分别为36．4％（20／55）和66．7％（20／30）。10例甲基化阳性标本中有1例（10．0％）检测到p16蛋白的表达;而45例甲基化阴性的标本中有19例（42．2％）检测到p16表达。两组鳞癌组织的p16基因甲基化率均明显高于癌旁及切缘组织（P〈0．05）;p16蛋白表达与p16基因甲基化呈负相关。高发区癌组织p16基因甲基化率明显高于低发区,差异有显著性（P〈0．05）。两组间癌组织p16蛋白表达率差异无显著性（P〉0．05）。结论p16基因异常甲基化可能是高发区食管癌癌变过程的重要事件,而在低发区p16基因异常甲基化可能不是其失活的主要机制。高、低发区可能存在不同的食管癌致癌机制。本研究从环境因素和p16基因之间的相互作用方面,为高发区和低发区食管癌的发生提供了一定的理论依据。     

磷酸化AKT及Cyclin D1、MMP-9在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的 分析磷酸化AKT（p-AKT）及其下游分子Cyclin D1、MMP-9在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况，探讨p-AKT及其下游分子在肺癌发病机制中的作用。方法 应用免疫组化的方法，检测80例NSCLC组织及35例非肿瘤性肺组织标本中P—AKT、Cyclin D1和MMP-9的表达，并与临床病理因素进行相关性分析。结果p—AKT、Cyclin D1和MMP-9在NSCLC中高表达，阳性率分别为78．8％、76．3％和72．5％，显著高于非肿瘤性肺组织中阳性表达0、0和11．4％（P〈0．05）。p-AKT在高中分化腺癌中阳性表达（95．0％）显著高于低分化腺癌的表达（50．0％）（P〈0．05），而与患者年龄、性别、组织学类型及鳞癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移无关（P〉0.05）。CyclinD1、MMP-9表达与淋巴结转移、鳞癌的分化程度有关（P〈0.05），MMP-9还与TNM分期有关（P〈0.05），P—AKT的表达与Cyclin D1呈正相关（rs=0．787，P〈0．01），与MMP-9蛋白表达无关（rs=0．022，P〉0.05）。结论 在NSCLC中存在AKT的活化，Cyclin D1的高表达可能与AKT的活化有关，MMP-9可能通过其他的调控机制参与了肺癌的发生发展。在NSCLC组织中存在着AKT信号转导通路的激活。     

周期蛋白A、D1和增殖细胞核抗原在肺癌中的表达及临床意义

目的观察细胞周期蛋白A、D1（Cyclin A、D1）和增殖细胞核抗原（PCNA）在肺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化和RT-PCR方法观察94例肺癌组织和10例假瘤炎性肺组织（对照组）中Cyclin A、D1和PCNA的表达。结果在94例肺癌中，Cyclin A蛋白表达阳性率为84.0%；Cyclin D1蛋白表达阳性率为63．8％;PCNA蛋白表达阳性率为68．1％；肺癌的分期与Cyclin A和PCNA蛋白的表达相关（P〈0．05）。在小细胞癌、鳞癌中Cyclin A、D1的mRNA表达较对照组均存非常显著的提高（P〈0.01）;在腺癌中Cyclin A、D1的mRNA表达较对照组也有明照增强（P〈0．05）。结论肺癌中Cyclin A和PCNA蛋白表达有显著升高，Cyclin A和PCNA蛋白的过表达与肺癌的分期相关。     

p15、p16基因在胆管癌中的表达及临床意义

目的研究p15、p16在胆管癌中的表达并探讨其临床意义。方法应用超敏SP免疫组化方法检测38例胆管癌和8例胆总管囊肿中p15、p16蛋白的表达情况。结果p15、p16蛋白在胆管癌中的表达阳性率分别为52．63％和57.89％,均低于在胆总管囊肿中的表达阳性率100％,有显著统计学差异（P〈0．05）;p15、p16蛋白阳性率在胆管癌Ⅰ～Ⅲ级逐级下降,Ⅰ级的阳性率高于Ⅲ级（P〈0．05）;在Ⅰ～Ⅳ期阳性率逐期下降,Ⅰ＋Ⅱ期的阳性率高于Ⅲ＋Ⅳ期的阳性率（P〈0．05）;有淋巴结转移癌组织中的表达阳性率为25．00％和31．25％,显著低于在无淋巴结转移癌组织中的阳性率72．73％,77．27％（P〈0．05）。结论p15、p16可能参与了胆管癌的发生、发展和转移,检测p15、p16蛋白的表达对评估胆管癌的分级、分期及淋巴结转移有重要意义、     

Cyclin D1、p16及Rb在视网膜母细胞瘤中的表达及其相关性

目的探讨CyclinD1、p16、Rb在视网膜母细胞瘤（retinoblastoma，RB）中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学方法（SP法）检测CyclinD1、p16及Rb在46例常规石蜡包埋的视网膜母细胞瘤标本中的表达，并在生物学行为及分化程度不同的视网膜母细胞瘤之间进行比较。结果正常视网膜组织与视网膜母细胞瘤组织中CyclinD1、p16及Rb蛋白表达差异有极显著性意义（P〈0．01）；视网膜母细胞瘤中，Rb与p16、CyclinD1表达之间无明显相关性（P〉O．05）；p16表达率在生物学行为不同的视网膜母细胞瘤之间差异显著，30例视神经未浸润组视网膜母细胞瘤的p16阳性表达率明显高于16例视神经浸润组（P〈0．05）；Rb及p16蛋白表达阳性率随组织学分级降低而下降，分化组与未分化组视网膜母细胞瘤中Rb及p16蛋白表达率差异有极显著性意义（P〈0．01）。结论p16、Rb、CyclinD1在视网膜母细胞瘤发生发展中起着重要作用。CyclinD1的过表达与p16和Rb的表达缺失或失活是视网膜母细胞瘤发生的重要分子事件，p16蛋白失表达可能与其视神经浸润能力有关，Rb及p16蛋白失表达则与其分化程度相关。     

鼻咽癌细胞中外源性p16表达对CDK4,Cyclin D1及pRb的影响

目的：分析外源性ｐ１６表达对ＣＤＫ４,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｐＲｂ的影响,探讨其抑制细胞生长的机制。方法：绘制生长曲线,比较细胞倍增时间,分析ＨＮＥ１,＃４－２及＃３－２克隆中细胞增殖状况;利用流式细胞仪分析上述细胞中细胞周期分布的改变;结合Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法,分析外源性ｐ１６表达对ＣＤＫ４,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｐＲｂ的影响。结果：生长曲线示,ＨＮＥ－１倍增时间为２３．４ｈ,＃３－２和＃４     

鼻咽癌细胞中外源性p16表达对CDK4,CyclinD1及pRb的影响

目的 :分析外源性p16表达对CDK4,CyclinD1及pRb的影响 ,探讨其抑制细胞生长的机制。方法 :绘制生长曲线 ,比较细胞倍增时间 ,分析HNE1,# 4 - 2及 # 3- 2克隆中细胞增殖状况 ;利用流式细胞仪分析上述细胞中细胞周期分布的改变 ;结合WesternBlot方法 ,分析外源性p16表达对CDK4,CyclinD1及pRb的影响。结果 :生长曲线示 ,HNE 1倍增时间为 2 3 4h ,# 3- 2和 # 4 - 2分别为 2 8 8h和 31 2h。流式细胞仪示 ,HNE1和 # 3- 2细胞周期无明显差别 (P >0 .0 5 ) ,# 4 - 2细胞G0 /G1期细胞数明显增多 ,S期的细胞数显著降低 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。WesernBlot示外源性p16表达对CDK4表达水平影响并不显著 ,但下调 # 4 - 2中CyclinD1的表达 ,# 3- 2中CyclinD1的表达反而增强 ;各细胞系均可检测到低磷酸化的pRb ,但在 # 4 - 2 ,# 3- 2中表达强于HNE1及Hela细胞 ;HNE1还可检获高磷酸化的pRb。结论 :外源性p16表达使细胞停滞在G1期 ,抑制细胞生长 ,但其主要机制并非改变CDK4表达水平 ;而对CyclinD1的影响 ,随p16表达水平而变动 ,最终表现为抑制pRb磷酸化。     

基因p16及Cyclin D1在子宫内膜癌中的表达及意义

探讨抑癌基因Ｐ１６及细胞周期素Ｄ（ＣｙｃｌｉｎＤ１）在子宫内膜癌,交界性子宫内膜组织及正常子宫内膜组织中的表达规律及其与子宫内膜癌的关系。方法应用免疫组化ＳＡＢＣ法检测３８例子宫内膜癌,１９例子宫内膜增生过长及不典型增长,１０例正常子宫内膜组织中基因ｐ１６,ＣｙｃｌｉｎＤ１的表达。     

细胞周期调控因子P16、Rb和cyclin D1在膀胱癌中表达的意义

目的：探讨细胞周期调控因子P16-cyclin-Rb的通路与膀胱癌关系。方法：应用免疫组织化学方法检测P16、Rb和cyclin D1在膀胱癌和正常膀胱组织中表达。结果：P16和Rb在膀胱癌中表达显著低于正常组织，而且与肿瘤分级、分期密切相关，但与肿瘤复发无显著相关性；cyclin D1在膀胱癌中表达显著高于正常组织，但与肿瘤分级、分期和复发之间无显著相关性。膀胱癌中三种蛋白总异常率为97．2％，其中同时两种或三种蛋白异常率达61．1％，肿瘤复发率也增高。膀胱癌中P16与Rb和cyclin D1分别呈负相关表达。结论：P16-cyclin-Rb的通路异常与膀胱癌的发病机制密切相关，同时检测三者有助于更好了解膀胱癌生物学行动。     

Cyclin D1蛋白和P16蛋白在子宫内膜癌中的表达及其相关性研究

目的　了解细胞周期调控蛋白 Cyclin D1,P16在子宫内膜癌中的表达及与临床特征的关系 ,并探讨两者表达的相关性。方法　用免疫组化 SP法检测 64例子宫内膜癌标本中 Cyclin D1蛋白和 P16蛋白的表达。结果　 Cyclin D1蛋白的阳性表达率为 5 4.68% ,其表达与 FIGO分期有关 ;P16蛋白的阳性表达率为 5 3.13% ,其表达与年龄、组织学分级和 FIGO分期有关 ;Cyclin D1蛋白和 P16蛋白的表达有相关性 (r=- 0 .40 0 7)。结论　细胞周期调控基因相关蛋白 Cyclin D1和 P16与子宫内膜癌的发生和发展有关 ,且两者间存在协同作用     

Cyclin D1蛋白和P16蛋白在子宫内膜癌中的表达及其相关性研究

目的 了解细胞周期调控蛋白Cyclin D1,P16在子宫内膜癌中的表达及与临床特征的关系,并探讨两者表达的相关性。方法 用免疫组化SP法检测64例子宫内膜癌标本中Cyclin D1蛋白中和P16蛋白的表达。结果 Cyclin D1蛋白的阳性表达率为54．68％,其表达与FIGO分期有关;P16蛋白的阳性表达率为53．13％,其表达与年龄、组织学分级和FIGO分期有关;Cyclin D1蛋白和P16蛋白的表达有相关性（r＝－0．4007）。结论 细胞周期调控基因相关蛋白Cyclin D1和P16与子宫内膜癌的发生和发展有关,且两者间存在协同作用。     

胃癌组织中p16、Cyclin D1和Survivin的表达及其相关性

目的 研究p16、Cyclin D1和Survivin在胃癌中的表达及其相关性。方法 应用免疫组化S-P法检测正常胃黏膜组织、不典型增生和胃癌组织中p16、Cyclin D1和Survivin的表达。结果 正常胃黏膜和不典型增生组织中p16的表达率高于Cyclin D1和Survivin的表达,胃癌组织中p16的表达率低于二者;p16、Cyclin D1和Survivin的表达与胃癌患者年龄、性别均无关;p16的表达与淋巴结转移相关(P＜0.05);Cyclin D1的表达与组织分化程度、淋巴结转移相关(P＜0.001;P＜0.05);Survivin的表达与组织分化程度相关(P＜0.05)。且p16与Cyclin D1在胃癌组织中的表达呈负相关(r=-0.486),p16与Survivin也呈负相关(r=-0.518),Cyclin D1与Survivin呈正相关(r=0.431)。结论 p16、Cyclin D1和Survivin与胃癌的发生发展和预后关系密切。     

卵巢上皮性肿瘤Cyclin D1及pRb的表达与其良恶性关系

探讨卵巢上皮性肿瘤ＣｙｃｌｉｎＤ１,ｐＲｂ的表达水平与其良恶性的关系。方法卵巢上皮性肿瘤石蜡切征Ｃｙｃｌｉｎ,Ｄ１,ｐＲｂ抗体免疫组化染色。结果在１３７例组织切片中ＣｙｃｌｉｎＤ１的阳性表达率分别为：原发性卵巢上皮性癌５８％;交界性卵巢上皮性肿瘤;     

人胰腺腺癌细胞系中p16基因、cyclin D1基因和pR6蛋白的改变

目的：研究胰腺腺癌细胞系ｐＲｂ－ｐ１６细胞调节途径相关因子的异常情况。方法：用ＰＣＲ及单链构象多态性（ＳＳＣＰ）的方法检测５株人胰腺腺癌细胞系ｐ１６基因的缺失和突变;用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的扩增;用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析检测ｐＲｂ基因的表达。结果：２株胰腺腺癌细胞系存在ｐ１６基因第１外显子纯合性缺失,未发现第１、２外显子的基因突变;１株细胞系有ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的扩增;ｐＲｂ基因在５株细胞系中均呈高磷酸化的表达。结论：胰腺腺癌细胞系中存在ｐＲｂ－ｐ１６细胞调节途径的异常,主要表现为ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的改变。