LKB1 - AMPK - mTOR信号通路在良性和恶性胸腔积液中的表达

目的 研究LKB1 - AMPK - mTOR信号通路在肿瘤患者胸腔积液中的表达,从分子水平探明其在良、恶性胸腔积液中的影响,为肿瘤的诊断和治疗提供新思路。方法 以肿瘤患者的胸腔积液为研究对象,其中恶性胸水（肺腺癌）55例,良性胸水45例;将良性胸水作为对照组,恶性胸水为实验组,分别抽提2组细胞总RNA与总蛋白,RT - PCR检测LKB1、AMPKα和mTOR mRNA表达情况,Western blot方法检测AMPKα、P - AMPKα、LKB1、mTOR及p - mTOR蛋白表达情况。结果 RT - PCR 结果显示,与良性对照组比较,恶性胸水中LKB1 mRNA表达量降低,差异有统计学意义 (P＜0.01);AMPKa mRNA表达量降低,差异有统计学意义 (P＜0.001);mTOR mRNA表达量升高,差异有统计学意义(P＜0.001)。Western blot 结果显示,与良性对照组比较,恶性胸水中LKB1蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P＜0.001);AMPKα、mTOR 蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 从分子水平可以初步推测此信号通路是通过激活LKB1进而使AMPK活化,负性调节mTOR表达这一经典活化途径调节恶性积液的基因表达。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白在胃癌中表达

目的 探讨PI3K/AKT/mTOR信号转导通路中PTEN、p-AKT和p-mTOR蛋白在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 应用免疫组化法检测胃癌、癌旁和正常胃黏膜组织中PTEN、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达情况,并分析其与病理参数之间的关系。结果 PTEN在胃癌中的表达率为53.03%,在癌旁与正常胃黏膜中的表达率为84.85%和74.36%,p-AKT在胃癌中的表达率为56.06%,在癌旁与正常胃黏膜中的表达率为16.67%和2.56%,p-mTOR在胃癌中的表达率为90.91%,在癌旁和正常胃黏膜中的表达率分别为71.21%和5.13%,3组间差异均有统计学意义（P<0.001）。PTEN的阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤的直径、分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期均无关（P>0.05）。p-AKT在胃癌中的表达与患者年龄、性别和肿瘤直径无关（P>0.05）,而与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关（P<0.05）。p-mTOR在胃癌中的表达仅与肿瘤浸润深度有关（P<0.05）,与患者年龄、性别、肿瘤的直径、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期均无关（P>0.05）。PTEN蛋白与p-AKT蛋白阳性表达率之间存在负相关关系且具有统计学意义（P<0.05）,p-mTOR蛋白与PTEN蛋白以及p-mTOR蛋白与p-AKT蛋白表达阳性率之间均无明显相关（P>0.05）。结论 PTEN在胃癌组织中低表达,p-AKT和p-mTOR在胃癌组织中高表达,PI3K/AKT/mTOR信号转导通路可能参与了胃癌的发生与发展。     

miR-182-5p和Bcl-2在复发性流产患者胎盘绒毛组织中的表达水平及临床意义

目的 检测微小RNA-182-5p(miR-182-5p)和Bcl-2在复发性流产(RSA)患者胎盘绒毛组织中的表达水平及临床意义。方法 选择2017年6月—2018年12月天津医科大学中新生态城医院收治的55例RSA患者为研究组,自愿要求终止妊娠的50例正常早孕流产者为对照组。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察胎盘绒毛组织的结构和形态,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-182-5p水平,采用免疫组化法检测Bax和Bcl-2水平,分析miR-182-5p、Bax及Bcl-2表达的相关性。结果 研究组孕妇胎盘绒毛形态不一,排列不规则,易见局部脱落,外层合体滋养层细胞数量明显减少,滋养层基底膜厚薄不均,萎缩融合,内层滋养层细胞数量增多,发生异常增生,排列紊乱,可见明显的绒毛间质水肿,绒毛内血管未发育完全,血细胞数量少,可见少量炎症细胞。对照组miR-182-5p、Bax及Bcl-2表达水平分别为(12.26±3.07)、(16.47±5.37)及(57.36±16.27),研究组miR-182-5p、Bax及Bcl-2表达水平分别为(14.38±4.41)、(52.16±...     

干扰lncRNA RHPN1-AS1表达通过靶向miR-339-5p对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA PCNA1(lncRNA RHPN1)反义AS1(RHPN1-AS1)对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法:将si-NC(lncRNA RHPN1-AS1阴性对照组)、si-RHPN1-AS1(沉默lncRNA RHPN1-AS1组)、pcDNA(真核表达载体组)、pcDNA-RHP...     

肝癌中基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的临床意义

目的研究肝癌组织基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TI MP-1)的表达,探讨其与肝癌的关系及其临床意义,为临床上寻找肝癌表达的新的生物学标志物提供理论依据。方法取山东省昌邑市人民医院2008年6月—2010年6月肝癌手术切除标本36例,按照Edmondson-Steiner组织学分级标准进行分级。选用3例外伤性肝破裂患者手术肝切除标本作正常对照。使用鼠抗人TI MP-1多克隆抗体,进行免疫组织化学PV-9000通用型二步法染色。染色结果根据反应强度及面积判断,评分标准按Shi mizu方法,根据两项打分之和判断。结果对照组中TI MP-1的表达为阴性。TI MP-1在肝癌中的表达阳性率为74.8%。TI MP-1的阳性表达与患者年龄、性别、甲胎蛋白(AFP)是否阳性、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是否阳性均无关(均P>0.05)。有癌栓组、无癌栓组和包膜不完整组、包膜完整组的TI MP-1在各组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。高侵袭转移组与低侵袭转移组间,TI MP-1阳性率分别为89.6%和48.3%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TI MP-1在肝癌组织中的过度表达是肝癌侵袭与转移程度的一个重要生物学标志物。     

miR-183在HPV相关型宫颈腺癌中的表达及其对LRIG1蛋白的调节作用研究

目的探讨miR-183在HPV相关型宫颈腺癌中的表达及与富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域基因1(LRIG1)的相互作用关系。方法实时定量PCR法检测HPV相关型宫颈腺癌组织中miR-183及LRIG1 mRNA的表达水平,Western blot法检测腺癌组织中LRIG1蛋白的表达。将miR-183 inhibitors(抑制物)、miR-183 mimics(模拟物)应用阳离子脂质体Lipofectamine TM2000转染至宫颈腺癌Hela细胞,并设立空白对照组、各自的阴性对照组,采用实时定量PCR法检测各组细胞中miR-183及LRIG1 mRNA的表达水平,Western blot法检测宫颈各组细胞中LRIG1蛋白的表达水平。结果miR-183 mRNA在HPV相关型宫颈腺癌组织中的表达(0.91±0.10)明显高于正常宫颈组织(0.52±0.06),差异有统计学意义(P<0.05),而LRIG1的mRNA(0.56±0.03)及蛋白(0.09±0.02)表达水平均明显低于正常宫颈组织(mRNA:1.12±0.08,蛋白:0.25±0.05),差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组(1.06±0.06)相比,转染miR-183抑制物的腺癌Hela细胞中miR-183 mRNA的表达水平(0.69±0.07)显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),转染miR-183抑制物的腺癌Hela细胞和对照组中,LRIG1 mRNA(分别为1.75±0.10、0.71±0.09)及其蛋白(分别为1.16±0.09、0.76±0.04)的表达水平反而均明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组(0.99±0.05)相比,转染miR-183模拟物的宫颈腺癌Hela细胞中miR-183 mRNA的表达水平(2.55±0.25)显著增高(P<0.05),转染miR-183模拟物的腺癌Hela细胞和对照组中LRIG1 mRNA(分别为0.40±0.05、0.75±0.08)及其蛋白(分别为0.32±0.01、0.76±0.06)表达水平反而均明显降低(P<0.05)。结论miR-183在HPV相关型宫颈腺癌中呈高表达,可能通过抑制LRIG1的表达参与宫颈腺癌的发生和发展。     

血浆中miR-199a/b-3p表达水平在肝癌筛查及愈后诊断中的潜在价值

目的 探讨血浆中miR-199a/b-3p表达水平是否可以应用于肝癌的筛查.方法 采用realtime PCR方法及统计学方法分析肝癌患者(90例)和健康人(50例)的miR-199a/b-3p水平,分析肝癌手术前后(44例)miR-199a/b-3p表达水平,肝癌不同分期血浆中miR-199a/b-3p表达水平的差异,以及miR-199a/b-3p表达水平与肝癌患者存活期的相关性.结果 肝癌患者血浆中miR-199a/b-3p表达水平明显低于健康人(t=-4.557,P＜0.01);经手术切除肿瘤之后,患者血浆中miR-199a/b-3p表达水平较术前明显上升(t=-0.414,P＜ 0.01);不同分期肝癌患者血浆中miR-199a/b-3p表达水平差异无统计学意义(F=0.258,P＞0.05);术后miR-199a/b-3p表达水平与患者的存活时间正相关(r=0.788,P＜0.01).结论 通过检测血浆中miR-199a/b-3p表达水平可以对肝癌患者进行筛查,并对术后患者的愈后情况进行判断.     

nesfatin-1、miR-1233-3p、miR-181b在妊娠期高血压疾病中的表达及相关性

目的:探究人新饱食分子蛋白1(nesfatin-1)、微小蛋白miR-1233-3p、miR-181b在妊娠期高血压疾病中的表达及相关性。方法:选取2020年1月—2021年3月本院收治的妊娠期高血压疾病患者94例为病例组,产前检查健康孕妇90例为健康组。RT-PCR检测两组miR-1233-3p、miR-181b表达,酶联免疫吸附法检测nesfatin-1表达水平,分析3指标在妊娠期高血压病症中的相关性。结果:病例组nesfatin-1(9.16±2.61 ng/ml)、miR-1233-3p(2.01±0.38)、miR-181b(3.02±0.51)表达高于健康组(6.75±1.06 ng/ml、0.95±0.17、1.21±0.26),且在妊娠期高血压、子痫前期、重度子痫前期患者中依次升高(均P0.05);nesfatin-1、miR-1233-3p、miR-181b升高是妊娠期高血压发生的危险因素(P0.05),且3指标间均呈正相关(P0.05)。结论:nesfatin-1、miR-1233-3p、miR-181b在妊娠期高血压疾病中呈现异常上升,可能相互协同促进疾病的发生发展。     

FEN1、miR-215-5p在宫颈脱落细胞中的表达及其临床诊断价值

目的:探讨瓣状核酸内切酶1(FEN1)、微小RNA-215-5p(miR-215-5p)在宫颈脱落细胞中的表达水平,并对其临床诊断进行分析。方法:前瞻性选取2017年5月至2019年5月在辽宁电力中心医院进行液基薄层细胞学检查(TCT)的236例患者作为研究对象,并根据TCT结果进行分组：正常宫颈或慢性宫颈炎56例(对...     

低氧诱导因子-1α与P-糖蛋白在原发性肝癌中的表达及意义

目的检测低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和P-糖蛋白（P-gp）在原发性肝细胞癌中的表达,及其与临床病理因素及相互关系。方法用免疫组化法检测43例原发性肝细胞癌中HIF-1α和P-gp的表达情况,并分析HIF-1α和P-gp与肝癌临床病理因素的关系。结果在43例肝癌标本中,HIF-1α和P-gp蛋白阳性表达分别为：60.5%（26/43）、48.8%（21/43）。HIF-1α蛋白表达与肿瘤的大小、分化程度、有无门静脉、胆道癌栓有关;P-gp蛋白表达与肿瘤的大小、有无门静脉、胆道癌栓有关。HIF-1α、P-gp蛋白阳性表达呈正相关性。结论原发性肝癌组织存在着HIF-1α、P-gp蛋白的过表达,HIF-1α过表达对肝癌的多药耐药性的产生起着重要的作用。     

硫氧还蛋白-1在胃癌中表达及意义

目的:探讨TRX-1基因表达水平与胃癌临床病理特征的关系。方法:利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测23例胃癌及相应癌旁组织中TRX-1基因的表达情况并将结果与临床资料进行统计分析。结果:TRX-1在23例胃癌组织中相对表达量(1.15±0.62)明显高于癌旁组织(0.80±0.20)(P<0.01)。胃癌组织中TRX-1 mRNA表达量与性别、分化程度、肿瘤大小无关,其在Ⅲ期胃癌中的表达量相对于Ⅰ、Ⅱ期胃癌以及在淋巴结转移的患者中表达量比未转移的患者略有增强趋势,但无统计学差异。结论:TRX-1在胃癌中高表达,参与了胃癌的发生发展过程。     

细胞凋亡相关斑点样蛋白与半胱氨酸蛋白酶-1在肝癌中的表达及临床意义

目的分析细胞凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）与半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）在肝癌与癌旁组织中的表达及临床意义。方法对30例术前未使用放疗与化疗的肝癌与癌旁组织标本采用免疫组化LSAB法进行ASC、Caspase-1测定,并对各指标进行分析。结果ASC阳性率在肝癌与癌旁组织中分别为10．00％（3／30）和73．33％（22／30）,组间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）;Caspase．1阳性率分别为23．33％（7／30）和66．67％（20／30）,组间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）。ASC与Caspase-1两指标在癌组织中的表达均降低,两者不相关（P〉0．05）,在癌旁组织中表达均显著增高,两者呈正相关（r=0．722,P〈0．01）。结论ASC、Caspase-1在肝癌中表达低,且显著低于癌旁组织,提示ASC、Caspase-1与肝癌的凋亡、发生及发展过程密切相关,可作为肝癌的诊断及治疗有希望的靶点。     

miR-9-5p及其靶基因Sirt 1在华南地区2型糖尿病患者血清中的表达

目的探讨mi R-9-5p及Sirt1的表达量与华南地区2型糖尿病的相关性。方法构建含有野生型及缺失型mi R-9-5p结合位点的Sirt1 3'-UTR报告基因载体,行荧光素酶报告基因。收集华南地区123例糖尿病患者和130例正常者的血清标本,采用q RT-PCR技术检测血清中mi R-9-5p的表达量,采用ELISA检测血清中Sirt1蛋白的表达量。分析mi R-9-5p、Sirt1的表达量与华南地区2型糖尿病的相关性。结果 mi R-9-5p可显著下调野生型而非缺失型Sirt1报告基因的荧光素酶活性,提示mi R-9-5p可靶向调控Sirt1。此外,在2型糖尿病患者血清中mi R-9-5p与Sirt1表达呈负相关(r=-0.087,P=0.033);在正常对照组血清中mi R-9-5p与Sirt1表达也呈负相关(r=-0.076,P=0.041)。且mi R-9-5p的表达量与2型糖尿病患者的年龄呈正相关,而Sirt1则相反(P均<0.05);mi R-9-5p及Sirt1的表达与2型糖尿病患者的性别无关。结论在华南地区2型糖尿病患者血清中,mi R-9-5p高表达,Sirt1低表达,mi R-9-5p联合Sirt1有望成为早期诊断2型糖尿病的联合指标。     

乳腺癌中miR-141表达与临床病理特征、Keap1/Nrf2通路及预后的关系

目的研究乳腺癌中miR-141表达与临床病理特征、KELCH样ECH关联蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)通路及预后的关系。方法选择2014年3月至2015年3月期间在本院接受手术治疗的乳腺癌患者作为研究对象,检测乳腺癌组织和癌旁组织中miR-141、Keap1、Nrf2的表达水平,随访乳腺癌患者的总生存期和无病生存期。结果乳腺癌组织中miR-141的表达水平低于癌旁组织(P<0.05);不同肿瘤直径、TNM分期的乳腺癌组织比较,miR-141表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-141表达水平<中位数的乳腺癌组织比较,miR-141表达水平≥中位数的乳腺癌组织中Keap1的表达水平明显降低、Nrf2的表达水平明显增加(P<0.05);与miR-141表达水平<中位数的乳腺癌患者比较,miR-141表达水平≥中位数的乳腺癌患者总生存期及无病生存期均明显延长(P<0.05)。结论乳腺癌中miR-141表达降低与病理特征恶化、Keap1/Nrf2通路改变、预后变差有关。     

可溶性细胞间粘附分子-1在乳腺癌患者血清中表达的临床意义

目的 检测乳腺癌患者血清可溶性细胞间粘附分子-1（soluble intercellular adhesion molecule-1 ,sICAM-1）表达水平,探讨血清sICAM-1与乳腺癌临床病理学指标的关系及其临床意义。方法 用酶免疫吸附方法(enzyme-linked immunosorbentassay, ELISA)对61例乳腺浸润癌患者和23例乳腺良性肿瘤患者外周血中sICAM-1的水平进行定量测定,并收集患者临床资料进行统计学分析。结果 ①乳腺浸润癌组患者血清sICAM-1表达水平（1389.46+648.91ng/ml）显著高于乳腺良性肿瘤组（879.72+378.62 ng/ml）(t=4.448,P<0.001)。伴淋巴结转移组sICAM-1显著高于无淋巴结转移组(P<0.001),Ⅲ-Ⅳ 期乳腺浸润癌患者血清sICAM-1水平显著高于Ⅰ-Ⅱ 期患者（P<0.05）。②ROC曲线分析血清sICAM-1水平1186.87ng/ml是区分乳腺浸润性癌和乳腺良性肿瘤的最佳临界值;sICAM-1水平1257.38ng/ml是判断乳腺浸润性癌是否发生转移的最佳临界值。③血清sICAM-1表达水平与病理分级,年龄,肿瘤大小,乳腺癌免疫组化指标ER,PR,Ki67及HER-2均无相关性（P>0.05）。结论 血清sICAM-1可作为乳腺癌的血清学观察指标,对判断肿瘤发展程度、转移状态及复发状况有较好的临床意义。     

PD-1/PD-L1在非小细胞肺癌中表达的生物学作用及临床意义

目的研究PD-1/PD-L1及EGFR在非小细胞肺癌中的表达和相关性。方法收集我院96例非小细胞肺癌患者的病理标本和临床资料,使用免疫组化检测PD-1/PD-L1的表达情况,PCR检测EGFR的表达情况。使用Logistic回归分析评价PD-1/PD-L1和EGFR的相关性。结果吸烟患者的PD-1阳性率为76.7%(23例),显著高于不吸烟患者的21.2%(14例)(P<0.05)。女性患者的PD-L1阳性率为82.0%(41例),显著高于男性的45.7%(21例)(P<0.05)。腺癌患者的PD-L1阳性率为78.3%(47例),显著高于鳞癌的41.7%(15例)(P<0.05)。EGFR突变型患者的PD-L1阳性率为91.9%(34例),显著高于野生型的47.5%(28例)(P<0.05)。结论 PD-1在吸烟患者中高表达;PD-L1与EGFR呈正相关,且在女性、腺癌患者中高表达,PD-L1与EGFR基因表达的关系可能为个体化免疫治疗联合靶向治疗提供新的依据。     

孤儿核受体-雌激素受体相关受体α-1亚型在卵巢癌中表达的临床意义

目的:明确孤儿核受体-雌激素受体相关受体(Estrogen receptor-related receptors,ERRs)α-1亚型在卵巢癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组化方法检测人ERRα-1在45例卵巢癌组织标本和15例正常卵巢组织中的mRNA和蛋白表达情况;采用ELISA方法分析各样本的血清CA125水平;随访指标为整体生存时间和无瘤生存时间。结果:免疫组化分析表明ERRα-1在卵巢癌组织中的表达率显著高于正常组织(P<0·05)。定量PCR分析表明卵巢癌组织中ERRα-1的mRNA平均表达丰度显著高于正常卵巢组织(P<0·05)。卵巢癌患者血清CA125水平分析显示ERRα-1阳性组CA125明显升高(P<0·05)。随访结果显示ERRα-1阳性的卵巢癌患者的整体生存时间比ERRα-1阴性患者明显减少(P<0·05),但两组无瘤生存时间并无差异(P>0·05)。结论:ERRα-1可能在卵巢癌的发生发展中起重要作用,ERRα-1表达增加与卵巢癌的预后不良有关。     

环氧合酶-2和细胞周期素D1在大肠癌中表达的研究

目的 通过观察环氧合酶-2(COX-2)和细胞周期素D1(Cyclin D1)在大肠腺瘤、大肠癌中的表达及其与大肠癌生物学特性的关系,初步探讨二者在大肠癌发生、发展过程中的作用机制.方法 对78例大肠癌组织(大肠癌组)、21例大肠腺瘤组织(大肠腺瘤组)和13例正常大肠黏膜组织(对照组)采用SP法进行免疫组织化学染色,观察COX-2及Cyclin D1的表达情况,并分析其与大肠癌临床病理特征的关系.结果 大肠癌组COX-2阳性表达率(78.2%,61/78)明显高于大肠腺瘤组(52.4%,11/21)和对照组(7.7%,1/13);COX-2表达与Dukes分期、组织分化程度、淋巴结转移有相关性(P＜0.05),而与患者性别、组织学类型无明显相关性(P＞0.05).Cyclin D1在大肠癌组的过表达率(69.2%,54/78)明显高于大肠腺瘤组(19.0%,4/21),而对照组中未见Cyclin D1过表达;Cyclin D1过表达与患者性别、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移均无明显相关性(P＞0.05),而与Dukes分期呈显著正相关(P＜0.05).结论 COX-2和Cyclin D1在大肠癌组织中表达率明显高于大肠腺瘤;其表达与大肠癌生物学特性有明显相关性.Cyclin D1过表达可作为大肠癌预后不良的指标之一.     

p38 MAPK/AP-1信号通路在1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿形成中对iNOS表达的上调作用

目的探究p38 MAPK/AP-1信号通路在小鼠1?2-二氯乙烷(1?2-DCE)中毒性脑水肿形成过程中对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的作用及其对脑水肿的影响。方法选取40只雌性昆明种小鼠随机分为对照组、染毒组、低剂量以及高剂量p38抑制剂组。染毒小鼠于染毒柜中1.2 mg/L 1?2-二氯乙烷染毒3.5 h/d,连续染毒3 d,低、高剂量抑制剂组小鼠于染毒前1 h腹腔注射200μl 3.75、15 mg/kg的p38 MAPK抑制剂(SB202190)。染毒结束次日取材,测定各组小鼠脑含水量及HE病理观察脑水肿,Western Blot检测各组小鼠脑组织中磷酸化p38、激活蛋白1(AP-1)两个亚基c-fos、c-jun的磷酸化形式表达水平以及iNOS的蛋白表达,Real-Time RT-PCR检测iNOS mRNA表达水平。结果单纯染毒组的小鼠出现抱爪现象,SB202190干预能够明显改善1?2-DCE中毒小鼠的抱爪症状。染毒组小鼠脑组织含水量与对照组小鼠相比明显增加,SB202190干预能够有效缓解小鼠出现脑水肿。单纯染毒组小鼠脑组织中p-p38蛋白、磷酸化c-jun和c-fos表达水平明显上调,iNOS蛋白和mRNA表达水平也显著增加,而SB202190能够显著降低iNOS、磷酸化c-jun和c-fos的表达水平。结论小鼠脑组织iNOS mRNA和蛋白表达水平在1?2-DCE中毒性脑水肿形成过程中显著上调。p38 MAPK/AP-1信号通路参与iNOS表达增多的调控过程。