解整合素金属蛋白酶19/ADAM19在子痫前期胎盘组织中的表达及其对滋养细胞分泌MMPs的调节

目的通过对子痫前期及正常孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶19（ADAM19）的检测及ADAM19对绒毛滋养细胞分泌MMP2,9的调节,探讨ADAM19与子痫前期发病的关系。方法应用免疫组织化学（免疫组化）链霉素抗生物素-过氧化物酶法、免疫印迹技术和RT-PCR技术检测24例正常胎盘组织及46例子痫前期（其中26例为重度子痫前期,20例为轻度子痫前期）胎盘组织中ADAM19蛋白及mRNA的表达;用明胶酶谱方法检测抗ADAM19抗体作用后滋养细胞MMP2,9的分泌变化。结果胎盘组织中,ADAM19主要分布在多种滋养层细胞中,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞一和些绒毛间质结缔组织细胞、毛细血管中,其阳性信号不仅定位于细胞膜上,在细胞质中也有分布。正常胎盘中ADAM19的蛋白表达量为0.372±0.016,重度和轻度子痫前期组ADAM19蛋白定量分别为0.766±0.029和0.693±0.041,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。ADAM19mRNA在正常组胎盘中的量为0.205±0.084,在重度和轻度子痫前期组中分别为0.481±0.057和0.454±0.033,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。在体外培养的滋养层细胞中,100μg/L浓度的抗ADAM19抗体在作用12h即可以抑制滋养细胞MMP2,MMP9的分泌,其作用呈浓度依赖。结论子痫前期胎盘组织中ADAM19过表达可能与子痫前期的发生和发展有关;在子痫前期的发生中,ADAM19可能是在妊娠早期抑制滋养细胞的浸润而导致胎盘浅着床的。     

尾加压素Ⅱ与GPR14 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的研究子痫前期患者胎盘组织尾加压素Ⅱ（UⅡ）及G蛋白偶联受体14（GPR14）mRNA的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法对25例子痫前期（子痫前期组,其中轻度15例,重度10例））患者和20例正常足月孕妇（正常妊娠组）和胎盘组织中UⅡ和GPR14 mRNA表达水平进行检测。结果胎盘组织UⅡmRNA表达水平在轻度子痫前期组,重度子痫前期组均明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。重度子痫前期组孕妇胎盘GPR14mRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论子痫前期患者胎盘UⅡ及其受体基因表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。     

Endoglin基因在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达及意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中Endoglin基因水平的变化及临床意义。方法选择2010年8月至2011年4月在北京军区总医院住院分娩的妊娠期高血压疾病患者共44例（妊娠期高血压疾病组）,其中妊娠期高血压孕妇15例（妊娠期高血压组）,轻度子痫前期孕妇14例（轻度子痫前期组）,重度子痫前期孕妇15例（重度子痫前期组）;以同期正常晚期妊娠孕妇16例为对照组。采用实时定量RT-PCR检测各组孕妇胎盘组织中Endoglin mRNA表达水平。结果妊娠高血压疾病组患者胎盘组织中Endoglin mRNA相对表达量明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;轻度子痫前期组、重度子痫前期组患者胎盘组织中Endoglin mRNA相对表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论 Endoglin在妊娠期高血压疾病患者尤其是轻度子痫前期及重度子痫前期患者胎盘中高度表达,其表达水平可能与病情的发生发展密切相关。     

生长分化因子15在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义

目的探讨生长分化因子-15（GDF-15）在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法选择2009年12月至2010年10月在青岛市市立医院住院分娩的子痫前期孕妇140例,其中早发型轻度子痫前期孕妇35例（早发轻度组）,晚发型轻度子痫前期孕妇35例（晚发轻度组）,早发型重度子痫前期孕妇35例（早发重度组）,晚发型重度子痫前期孕妇35例（晚发重度组）;另选同期健康孕妇35例为对照组。采用RT—PCR检测胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA的表达量;采用免疫组化方法检测胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白的表达。结果RT—PCR显示子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化显示GDF-15表达于胎盘滋养细胞的细胞浆和细胞外基质中,并在各组胎盘滋养细胞中均表达。子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白表达水平均高于对照组组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GDF-15在子痫前期胎盘滋养细胞中表达升高,GDF-15的表达水平变化可能与子痫前期发病有关。     

环氧合酶-2在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的研究环氧合酶-2(COX-2)在子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法采用免疫组化SP法检测50例子痫前期患者(轻度30例,重度20例)胎盘组织中COX-2的表达,20例正常孕妇为对照组。应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测30例子痫前期患者及12例正常孕妇的胎盘组织中COX-2mRNA的表达。结果(1)COX-2主要表达于胎盘血管内皮细胞。子痫前期患者COX-2蛋白的表达均明显增高,且随病情严重程度的增加而升高。子痫前期组COX-2蛋白的阳性表达率为63.1%、显著高于对照组(COX-2阳性表达率为23%)(P<0.01)。(2)子痫前期组COX-2mRNA表达水平为0.61±0.25,对照组为0.66±0.71,两组比较,差异无显著性(t=-0.93,P>0.05)。结论COX-2参与了子痫前期胎盘螺旋小动脉动脉粥样硬化。     

基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 检测子痫前期患者胎盘组织中RECK、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的基因表达,探讨它们与胎盘滋养细胞浸润过程的调控关系。 方法 采用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学检测120例妊娠足月剖宫产（正常妊娠、轻度子痫前期、中度子痫前期、重度子痫前期各30例）胎盘组织中RECK、MMP-9、VEGF的基因表达。结果 3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF的mRNA表达水平均显著低于正常妊娠组（P<0.05）;重度子痫前期组中RECK mRNA的表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）;3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF蛋白表达均显著低于正常妊娠组（P<0.05）,中度和重度子痫前期组中RECK蛋白表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）。结论 子痫前期患者胎盘中RECK与MMP-9、VEGF之间存在负相关性,它们可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程的调控。     

妊娠期高血压疾病胎盘组织中CASR和EGFR的相关研究

目的探讨在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中细胞外钙受体（CASR）和表皮生长因子受体（EGFR）的表达情况及其相互关系。方法通过免疫组织化学方法检测妊娠期高血压疾病患者64例（妊娠期高血压组21例,子痫前期轻度组23例,重度组20例）及健康足月孕妇20例（对照组）胎盘组织中CASR和EGFR蛋白的表达情况。结果 （1）妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中CASR在妊娠期高血压组表达水平为59.0532±8.039,子痫前期轻度组患者中为64.3623±3.7278,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.0001）;CASR在子痫前期重度组患者中表达为112.2831±6.2060,与妊娠期高血压组比较,差异有统计学意义（P〈0.0001）,与子痫前期轻度组比较,差异有统计学意义（P〈0.0001）。CASR的蛋白在妊娠期高血压组患者胎盘组织中表达水平为59.0532±8.039,对照组为54.8585±4.3035,两组比较,差异无显著性（t=0.08,P=0.7759）。（2）妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中表皮生长因子受体（EGFR）在妊娠期高血压组表达水平为56.174±3.1020,子痫前期轻度组患者中为78.6844±2.6713,两组比较,差异有统计学意义（t=18.73,P=0.0001）;EGFR在子痫前期重度组患者中表达为94.2090±6.8352,与子痫前期轻度组比较,差异有统计学意义（t=11.37,P〈0.0001）。（3）胎盘组织中CASR和表皮生长因子受体（EGFR）表达量呈正相关关系（r=0.352,P〈0.05）。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中CASR的蛋白表达升高和EGFR激活及过度增高,可能在妊娠期高血压疾病发生发展中起重要作用。     

子痫前期患者胎盘组织中尾加压素Ⅱ及一氧化氮的表达及意义

目的研究尾加压素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）及一氧化氮在子痫前期患者胎盘组织的表达情况及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法检测45例子痫前期患者（轻度22例,重度23例）及20例正常晚期妊娠孕妇胎盘组织中UIImRNA的表达情况;同时用硝酸还原酶法检测子痫前期组孕妇与正常组孕妇胎盘组织中NO浓度。结果重度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.85±0.40）明显高于正常妊娠组（0.38±0.30）（P〈0.05）;轻度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.64±0.31）,与正常妊娠组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。轻、重度子痫前期患者胎盘组织NO浓度分别为114.42±6.52 u/mg、79.22±3.31 u/mg,均显著低于正常妊娠组241.36±13.24u/mg（P〈0.05）。结论子痫前期胎盘组织中尾加压素Ⅱ水平升高,NO浓度下降,可能在子痫前期的发病中起一定作用。     

IL-21、IL-22在子痫前期患者胎盘组织中的表达水平及意义

目的通过研究子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织中白介素-21(IL-21)和白介素-22(IL-22)的水平,探讨IL-21和IL-22在子痫前期发生机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定轻度、重度子痫前期患者和正常孕妇胎盘组织中IL-21和IL-22的水平,比较3组间细胞因子的表达水平。结果通过比较发现,轻度、重度子痫前期组IL-21、IL-22在胎盘组织中的表达与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。但是,虽然重度子痫前期组IL-21、IL-22在胎盘组织中的表达均高于轻度子痫前期组,但是差异无统计学意义(P0.05)。结论子痫前期组患者胎盘组织中IL-21、IL-22的表达增强可能与子痫前期的发生、发展有关。     

sFlt-1mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达

目的检测可溶性血管内皮生长因子受体-1（soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1）在子痫前期胎盘组织中的mRNA表达水平,探讨其在子痫前期发生发展中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测25例子痫前期患者（轻度（n=8）,重度（n=17））和15例正常妊娠孕妇。结果（1）sFlt-1mRNA在正常孕妇、轻度和重子痫前期患者胎盘组织中均有表达。（2）sFlt-1mRNA的表达水平在轻度和重度子痫前期组均高于正常组,差别有显著性（P〈0.01）。结论胎盘组织中sFlt-1mRNA的过度表达可能与子痫前期的发病有关,并参与了子痫前期的病理生理过程。     

HMGB1、TLR4和NF-B在子痫前期患者胎盘组织及血浆中升高

目的探讨高迁移率族蛋白(HMGB1)、TOLL受体4(TLR4)和NF-B信号通路在子痫前期中的相关作用。方法轻度子痫前期患者10例、重度子痫前期患者20例和同期正常妊娠者30例。免疫组织化学(SP法)检测胎盘中HMGB1、TLR4和NF-κB P65蛋白的表达变化及在组织中的定性、定位;用ELISA法检测血清中HMGB1、TLR4和NF-κB P65蛋白浓度。结果子痫前期患者胎盘中HMGB1、TLR4、和NF-κB P65蛋白表达高于正常对照组(P0.05);轻度和重度子痫前期患者间无差异。子痫前期患者血清中HMGB1、TLR4和NF-κB P65的含量较正常组明显升高(P0.05);且重度子痫前期患者血清中HMGB1、TLR4、和NF-κB P65蛋白表达高于轻度子痫前期患者(P0.05)。结论 HMGB1、TLR4及NF-κB P65蛋白表达水平在子痫前期患者胎盘及血清中显著升高,可能参与了子痫的发病过程。     

ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统在子痫前期患者母胎界面的表达及意义

目的：探讨ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统在子痫前期患者母胎界面的表达及意义。方法：分别选取重度子痫前期、轻度子痫前期、妊娠期高血压患者各20例,另选同期行剖宫产的单胎初产健康妊娠妇女20例作为对照。检测并比较各组胎盘组织NO和cGMP水平、总NOS活性,免疫组化SP法检测胎盘组织eNOS和iNOS表达。高效液相色谱法检测各组脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）内ADMA水平。结果：重度、轻度子痫前期组胎盘组织NO水平分别为（7.6±3.6） μmol/g、（11.4±4.3） μmol/g,均显著低于对照组（均P＜0.05）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织cGMP水平分别为（3.26±0.31）pmol/g、（4.53±0.42）pmol/g,均显著低于对照组（均P＜0.05）,且4组胎盘组织cGMP水平与NO水平呈正相关关系（r=0.672）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织总NOS活性分别为（10.4±3.0）、（14.8±1.6 ）U/mg蛋白质,显著低于对照组（均P＜0.05）,4组胎盘组织总NOS活性与NO水平呈正相关关系（r=0.785）;重度、轻度子痫前期组胎盘组织eNOS表达显著低于对照组（均P＜0.05）,重度子痫前期组iNOS表达显著高于对照组（P＜0.05）;重度子痫前期、轻度子痫前期及妊娠期高血压3组HUVECs内ADMA水平均显著高于对照组（均P＜0.05）,且4组患者HUVECs内ADMA水平与胎盘组织NO水平呈负相关关系（r=-0.582）。结论：ADMA/NOS/NO/cGMP通路系统可能在子痫前期的发病中起重要作用。     

水通道蛋白3、8、9 mRNA在人羊水过少胎盘组织中的表达

目的 检测水通道蛋白(AQP)3、8、9 mRNA在人羊水过少病例胎盘组织中的表达.方法 收集2005年7月至2005年12月在本院选择性剖宫产羊水过少病例以及正常晚期妊娠胎盘组织样本各5例,RT-PCR检测AQP-3、8、9 mRNA的表达并进行比较.结果 羊水过少病例胎盘组织AQP-8 mRNA表达水平低于正常晚期妊娠胎盘组织(0.582 6±0.061 8比0.7911±0.168 9,P<0.05),AQP-3、9mRNA在羊水过少病例胎盘组织表达与正常晚期妊娠胎盘组织差异无统计学意义(P>0.05).结论 AQP-8在羊水过少病例母胎液体交换过程中可能有重要作用.     

妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平及其临床意义

目的 观察妊娠期高血压疾病患者Pro BNP水平及临床意义。方法 选择在我院行剖宫产术的妊娠期高血压疾病患者89例为HDCP组,包括妊娠高血压24例,轻度子痫前期21例,重度子痫前期44例;同期在我院行剖宫产术的妊娠晚期健康妇女88例为对照组,采用电化学发光法检测各组Pro BNP并对比。结果 HDCP组Pro BNP为（844.02±788.74）pg/ml,显著高于对照组的（142.90±187.20）pg/ml,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,轻度子痫前期组和重度子痫前期组Pro BNP均显著增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。与妊娠高血压组相比,轻度子痫前期组和重度子痫前期组Pro BNP显著增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。重度子痫前期组Pro BNP显著高于轻度子痫前期组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平高于妊娠晚期健康妇女,检测妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平可及时了解早期心肌细胞损害及心脏功能情况,对了解病情、观察疗效和预后判断具有重要价值。     

FAS蛋白在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的检测子痫前期胎盘的FAS蛋白表达水平,探讨子痫前期的发病机制。方法采用免疫组织化学方法结合病理图像分析技术,定量分析10例正常妊娠组、17例轻度子痫前期组和13例重度子痫前期组胎盘FAS蛋白表达。结果 FAS蛋白主要表达与胎盘绒毛滋养细胞的胞膜及胞浆内。与正常妊娠组比较,子痫前期组胎盘FAS蛋白表达显著增加,轻度、重度子痫前期组比较,有显著性差异。结沦子痫前期患者胎盘滋养层细胞FAS蛋白表达增加可能是子痫前期的发病机制之一,从而为临床治疗子痫前期提供新的方向。     

XIAP Bax mRNA在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达及其意义

目的探讨凋亡相关基因XIAP Bax mRNA在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达及其意义.方法采用RT-PCR方法研究45例妊娠期高血压疾病病例和15例正常妊娠病例胎盘组织中XIAP Bax mRNA的表达.结果 (1)子痫前期患者XIAP mRNA的表达显著降低(P＜0.01),而妊娠期高血压组XIAP mRNA与正常妊娠组相比表达无显著变化(P＞0.05).(2)Bax mRNA在子痫前期患者中表达显著升高(P＜0.01),而在妊娠期高血压组和正常妊娠组之间表达无显著变化(P＞0.05).(3)XIAP和Bax表达含量间呈负相关.结论 XIAP Bax在妊娠期高血压疾病的发病中起着重要作用,妊娠期高血压疾病的发病可能与XIAP表达的降低和Bax表达的增加有关.XIAP可能通过调节Bax的表达发挥作用.