基质交联分子-1调控前列腺癌细胞 PC-3中钙离子通道作用研究

目的：探讨前列腺癌细胞PC-3在其细胞内外钙离子浓度改变时,基质交联分子-1（stromal interaction molecule 1, STIMI）实时动态表达水平及其调节钙通道的作用机制。方法利用带有STIM1-YFP荧光探针的腺病毒载体（105病毒颗粒／细胞）,转染前列腺癌细胞PC-324 h后,采用荧光显微镜和细胞计数方法检测病毒探针对细胞形态和数量的毒理影响;利用全内角反射荧光显微镜,观察STIM1在以下几种情况中在细胞膜附近的实时动态变化：100μmol／L肌浆网钙ATP酶（SER-CA）抑制剂环匹阿尼酸（CPA）、2 mmol／L钙离子螯合剂（EGTA）、100μmol／L卡巴胆碱。结果 STIM1荧光探针转染前列腺癌细胞不影响细胞形态和细胞数量。前列腺癌细胞PC-3在SERCA抑制剂CPA处理后,荧光强度增加到（1.45±0.2）（F／F0,n细胞数＝18）;当细胞外钙离子浓度降为0并加入EGTA钙离子螯合剂后,细胞荧光强度增加到（1.38±0.2）（F／F0,n＝7）;加入卡巴胆碱处理后,细胞荧光增加（1.62±0.3）（F／F0,n＝23）,刺激后荧光强度明显增加,有显著性差异（P＜0.01）。结论 STIM1在前列腺癌细胞PC-3中表达并有活性;在其细胞内外钙离子浓度改变时,STIM1在细胞膜上形成多聚体,通过钙库操纵C a2＋通道调节前列腺癌细胞的功能。     

镁对心肌细胞钾通道和钙通道的调节

镁离子对阳离子通道有重要的调节作用,与机体的多种生理功能密切相关。高镁血症或低镁血症可致机体出现多种功能障碍。镁离子可通过与通道蛋白的直接结合、通过酶和G蛋白的间接作用、通过膜表面电荷效应或是通过与膜磷脂的相互作用等方式发挥其对细胞功能的调节作用。本文主要综述离子镁对心肌细胞膜上主要的钾离子通道和钙离子通道的功能调节及其可能机制。     

新型钙通道TRPV与骨代谢的关系

钙离子的代谢和跨细胞转运在机体的多种基本生理过程中起重要的作用。TRPV5和TPRV6为 新近发现的钙离子跨膜转运的通道蛋白。本文从蛋白结构、组织分布、电生理特性、生 理调节等方面阐述TRPV5和TPRV6蛋白的特征及其与骨代谢的关系。 ［关键词］ ［中图分类号］     

各种类型的钙通道

许多细胞功能是由胞液中游离钙离子浓度的变化所决定。有两种增加胞液钙离子浓度的基本机制:一是释放细胞内贮藏的钙离子,一是通过胞膜将细胞外钙离子移至细胞内。控制第二机制的最重要结构是嵌在细胞膜的脂质双层中的蛋白质,其功能是作为钙离子移动的通道或孔。这些通道的分子结构不仅决定哪种离子能通过质膜—即膜的离子选择性,也决定依赖     

钙离子的生理作用及与疾病的关系

钙离子是机体的必需元素，参与细胞的多种生理活动。对维持细胞各种代谢过程极为重要。但它的改变直接影响生物体，导致机体产生多种疾病。下面主要综述钙离子的生理作用及与疾病的关系。     

腺苷三磷酸对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾通道的作用

冠状动脉平滑肌细胞膜上存在许多大电导钙离子激活钾通道(BK通道),该通道具有电压依赖性和钙敏感性。研究发现,腺苷三磷酸可通过激活非选择性阳离子门控通道P2X受体使细胞外钙离子内流增加,也可以通过G蛋白偶联受体P2Y使细胞内三磷酸肌醇敏感钙库释放钙离子,升高细胞内钙浓度,从而激活BK通道,起到扩张冠状动脉的作用。     

钙拮抗剂在高血压治疗中的应用

钙离子跨膜转运、钙通道的进一步阐明及各种新型钙拮抗剂(CaA)的问世,是高血压治疗上的重要进展。细胞外钙离子须通过胞膜上的钙通道才能进入细胞内。钙通道分为电压依赖性和受体依赖性两种。主要分布于心血管系统的是电压依赖性通道,它又可分为T通道(快通道)、N道通(神经通道)和L通道(慢通道)三种亚型。     

Bcl-2基因对脑缺血神经元细胞凋亡时钙离子通道的影响

脑血管病是神经系统常见病、多发病，人类三大死亡疾病之一，50％～70％的存活者遗留严重残疾，脑血管病的发生、发展、康复与神经细胞的凋亡关系十分密切。目前对神经细胞凋亡的机理还不十分清楚，研究表明钙离子参与了细胞凋亡的调控，但是钙离子作用于凋亡过程的具体机理仍不清楚。钙离子的通道有哪些？其中哪些与细胞凋亡尤其是神经细胞凋亡有关？机制如何？     

THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat淋巴瘤细胞株凋亡

目的 探讨昆明山海棠碱在凋亡中对细胞内游离钙离子浓度的影响。方法 THH碱诱导Jurkat细胞后，采用Indo-1 AM及PI进行细胞染色、流式细胞术等手段在单细胞水平上检测细胞内钙离子浓度的变化。结果 THH碱诱导后细胞内钙离子浓度未见明显变化。结论 THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat细胞凋亡。     

钙稳态紊乱和细胞凋亡

多细胞机体包括人 ,均存在细胞的增殖与死亡 ,以维持机体的平衡。细胞死亡有两种形式 :坏死和凋亡。近年来 ,细胞凋亡的研究已成为生命科学研究的热点之一 ,但其详尽机制仍不清楚。现在许多学者指出Ｃａ2 +的变化对凋亡有广泛影响 ,已逐步解释Ｃａ2 +引起凋亡的生化过程。钙离子稳态是维持细胞各项代谢活动的必要条件。正常静息状态下 ,细胞内Ｃａ2 +浓度为 10 - 7ｍｏｌ/Ｌ ,而细胞外为 10 - 3ｍｏｌ/Ｌ ,存在着相差一万倍的极高浓度差 ,其维持有依赖于 :①细胞膜Ｃａ2 +通道的精细调节和高选择性 ;②细胞膜上Ｃａ2 +泵对Ｃａ2 +的排出和细…     

膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统的建立及其在心肌细胞膜钙离子通道研究中的应用

膜片钳技术和激光扫描共聚焦显微镜技术是膜上钙离子通道的功能－形态研究中两种最常用的技术。膜片钳技术能获得膜上钙离子通道的离子电流,但不能够对离子的移动进行实时定位,不能定量分析离子浓度。激光扫描共聚焦显微镜技术可以对钙离子的移动进行实时定位,但不能对单个离子通道的离子移动信号（如单通道电流）进行分析。本文的研究通过在激光扫描共聚焦显微镜上加装膜片钳装置,采用计算机自动控制技术建立膜片钳与激光扫描共聚焦显微镜的同步实时控制系统,并应用于膜上钙离子通道的研究,实现了在利用膜片钳进行全细胞记录观测和测定膜上钙离子通道电流及其开闭时程的同时,利用激光扫描共聚焦显微镜的实时线扫、面扫描技术同步获得了钙火花的显微结构形态图像,测定钙离子的位点变化。该方法可以同时记录钙离子电流信号和胞浆内Ca2＋浓度的变化信息,解决了显微形态与功能同步实时分析的问题,有助于进一步了解膜上钙离子通道的内部机制。     

STIM1在肿瘤中的研究进展

钙离子作为细胞生命活动中重要的信号分子,通过钙信号通路调控多种细胞功能,例如细胞分泌、神经激活、细胞凋亡、基因转录等[1]。几乎所有类型的细胞都要靠调节胞内Ca2＋浓度来维持正常细胞活动。大量研究证实,肿瘤细胞中的Ca2＋浓度远远高于正常细胞,且细胞膜上钙离子通道表达量增高,钙离子依赖的蛋白激酶如蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）等在肿瘤细胞中活性也增高。     

辣椒素通过钙信号抑制感觉神经元的电压门控性钙离子通道

目的 研究辣椒素对大鼠背根神经节神经元的电压门控性钙离子通道的抑制效应及其信号机制.方法 在急性分离的大鼠背根神经节(DRG)神经元上,应用全细胞膜片钳技术记录电压激活性钙离子通道电流以及辣椒素诱导的电流,应用钙离子成像技术检测Ca2+浓度的变化.结果 辣椒素能够抑制大鼠DRG神经元的电压激活性钙离子通道电流.细胞外钾离子浓度显著升高引起细胞去极化并打开膜上电压门控性钙离子通道引起胞外Ca2+内流,辣椒素只在引起胞内Ca2+浓度显著升高的情况下才能抑制高钾诱导的电压门控性Ca2+内流.用咖啡因耗竭细胞内Ryanodine敏感性钙库以后,辣椒素引发的胞内钙浓度升高的效应被显著抑制,说明辣椒素可诱导胞内Ryanodine敏感性钙库释放Ca2+.结论 在辣椒素敏感性的大鼠DRG神经元中,辣椒索通过胞内钙信号抑制电压门控性钙离子通道.Ca2+信号部分来源于Ryanodine敏感性钙库.     

新型钙离子指示剂GCaMP的发展与应用

新型钙离子指示剂GCaMPs是以单个荧光蛋白为基础构建而成,可以定位到特定的细胞亚型或细胞器,对细胞或细胞器内钙离子敏感,荧光强度与钙离子浓度成正比,可用以观察钙离子介导的信号传递过程,研究机体发育、疾病、药物作用等过程中细胞内钙信号的产生、传递和时空特点,近年来被广泛应用于生理学、细胞生物学和临床研究等领域,具有独特的优势和广阔的前景.本文通过对GCaMPs的原理、发展和应用进行综述,旨在为生命科学工作者介绍一种新的钙离子检测工具,以利于更好地探索生理和病理状态下细胞的行为和功能,揭示其内在的病理生理机制.     

葡萄糖诱导胰岛素合成分泌机制与特点

胰岛素合成和分泌受多种因素的调节,葡萄糖是最重要的调节物质,它诱导胰岛B细胞合成和分泌胰岛素有多条信号途径,但主要是通过ATP敏感钾通道途径和第2信使途径使胰岛B细胞内的钙离子、环磷酸腺苷、三磷酸肌醇、蛋白激酶A、蛋白激酶C、一氧化氮等物质含量增加,从而诱导胰岛素的分泌。葡萄糖在3个水平调节胰岛素基因表达:增加转录、稳定mRNA和增加翻译。机体内胰岛素合成、贮存和分泌是相互联系的统一过程。     

瞬时受体电位阳离子通道6作为疾病治疗靶点研究进展

瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)在肾、心脏和肺等多个器官均有表达,是构成细胞膜钙库操纵性通道的分子基础,在细胞信号转导中起着重要作用。其基因突变或过量表达可引起细胞内钙离子信号通路异常,使得大量钙离子内流,导致机体各种病理生理过程的变化。通过特异性TRPC6通道抑制剂和RNA干扰技术干预其在相关疾病中的过量表达,可以改善或缓解病情,提示TRPC6可能作为疾病治疗的新靶点。本文就近年来关于TRPC6作为疾病治疗靶点的研究进展进行综述。     

地尔硫卓上调异黏蛋白在肝癌细胞中的表达

目的研究钙离子通道抑制剂逆转肝癌细胞多药耐药和对异黏蛋白表达的影响及分子机制。方法采用不同浓度钙离子 抑制剂（0、25、50、100、200、400 μmol/L）干预肝癌MHCC97H、7402细胞不同时间（12、24、48 h）后,用体外细胞划痕实验检测处 理后肝癌细胞运动迁徙能力;采用RT-PCR和免疫细胞化学技术检测钙离子抑制剂对肝癌细胞中P-gp和异黏蛋白的表达的影 响。结果钙离子抑制剂能够一过性抑制肝癌MHCC97H、7402 细胞的迁徙运动能力,且具有一定的时间和浓度依赖性特点 （P<0.05）。同时,不同浓度钙离子抑制剂盐酸地尔硫卓均能一过性上调肝癌MHCC97H、7402细胞中异黏蛋白mRNA和蛋白的 表达（P<0.05）,但并不抑制P-gp蛋白的表达。结论钙离子抑制剂地尔硫卓能一过性抑制MHCC97H、7402肝癌细胞的迁徙运 动,并能反馈性上调促癌基因异黏蛋白mRNA和蛋白的表达水平。因而,采用钙离子抑制剂很可能具有增加肿瘤进展的潜在风险。     

小鼠内淋巴囊原代上皮细胞L型钙离子通道定位表达

目的 探讨C57BL/6小鼠内淋巴囊原代上皮细胞中电压门控钙离子通道定位表达。 方法 选取2日龄C57BL/6(P2B6)小鼠60只,P2B6小鼠8只麻醉处死取得颞骨标本,体视显微镜下定位内淋巴囊位置,提取内淋巴囊原代细胞并在低血清状态下培养。P2B6小鼠52只处理同上,颞骨标本用4%甲醛固定后脱钙包埋,采用免疫组织荧光技术和免疫细胞荧光技术定性原代内淋巴囊上皮细胞并确定L型钙离子通道表达。 结果 内淋巴囊上皮细胞在P2B6小鼠内淋巴囊中排列紧密,可见细胞聚集呈嵴状突起,胞体较小,细胞呈椭圆状,以扁平上皮为主,细胞培养光镜观察为不规则铺路石样,细胞形态大小不一,胞浆丰富,核椭圆形且大。免疫荧光检测显示L型Ca²⁺通道在内淋巴囊上皮细胞膜上均呈均匀表达,细胞核上高表达。 结论 小鼠原代内淋巴囊上皮细胞中L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(CACNA1C)、L-型电压依赖钙离子通道α1S亚基(CACNA1S)、L-型电压依赖钙离子通道α1D亚基(Cav1.3/ CACNA1D)表达为阳性,为细胞功能学实验提供依据,有利于进一步研究内淋巴囊维持稳态的机制。     

使用微量泵输入尼莫地平注射液减少不良反应的探讨

尼莫地平注射液为钙离子通道阻滞剂,它通过抑制钙离子进入细胞而抑制血管平滑肌细胞的收缩,能扩张脑血管并改善脑供血,临床上广泛用于脑神经系统疾病的治疗,但也会出现不同程度的不良反应,而不同的输液方法又对其不良反应的严重程度有着一定的影响.     

T型钙离子通道在癫痫发生中的作用研究进展

癫痫作为一种严重影响患者生活质量的全球性疾病,其发病机制与离子通道蛋白的基因突变密切相关.T型钙离子通道作为低电压激活门控通道,能引发棘慢波,参与丘脑-皮质神经元同步化震荡,引发"窗口电流",并可对细胞内外钙离子浓度和膜电位进行调控,这一系列作用使得T型钙离子通道在癫痫的发病过程中起着重要作用.目前临床治疗失神性癫痫的...