蛋白激酶A在TGF-β1影响兔耳创面愈合中的变化

目的:观察TGF-β_1对兔耳伤口肉芽组织和周边组织蛋白激酶A(Protein Kinase A,PKA)活性及伤口愈合时间的影响,探讨PKA在TGF-β_1影响伤口愈合中的作用。方法:在兔耳腹侧伤口外用TGF-β_1,观察上皮化时间并测定正常皮肤组织、伤后1天、3天、6天和上皮化时(11-15天)组织中PKA活性。结果:肉芽组织和周边组织的PKA活性分别上皮化时和伤后6天后高于正常皮肤(P<0.001或0.05);TGF-β_1没有改变PKA活性(P>0.05),但伤口提前愈合1.5天(P<0.05)。结论:伤口PKA活性升高提示PKA与肉芽组织向瘢痕转变有关。TGF-β_1不能影响PKA的活性但可加速伤口愈合提示PKA不介导TGF-β_1的信号。     

己基可可碱对兔耳瘢痕组织的作用

目的观察己基可可碱对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法建立兔耳增生性瘢痕动物模型,21d后瘢痕局部注射不同浓度的己基可可碱或生理盐水,49d后观察药物对瘢痕增生指数(hyper trophicindex,HI)的影响及采用图像系统分析瘢痕组织中成纤维细胞数量和胶原含量的变化。结果治疗组中HI与药物浓度呈负相关(P<0.05),治疗组瘢痕组织中成纤维细胞数量与胶原含量均明显减少,呈剂量效应关系;与生理盐水对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论己基可可碱能抑制瘢痕组织中成纤维细胞增殖,并使胶原合成减少,从而抑制兔耳增生性瘢痕组织增生,有望成为防治增生性瘢痕的新药物。     

反义TGF-β1抑制兔耳增生性瘢痕的实验研究

目的：探讨反义TGF-β1脱氧寡核苷酸对增生性瘢痕动物模型伤口愈合中瘢痕生成的抑制作用，研究局部使用反义。TGF-β1的有效给药途径。方法：成年日本大耳白兔20只，建立兔耳腹侧面增生性瘢痕模型。采用组织形态学的方法对比研究反义TGF-β1在兔耳增生性瘢痕形成中的影响，并用原位杂交法技术检测兔耳增生块内TGF-β1 mRNA、Ⅰ型胶原蛋白(colla-genⅠ)mRNA、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)mRNA的表达水平。结果：兔左耳增生性瘢痕局部注射反义TGF-β1后，按时间段取材，HE和Masgon染色显示真皮层变薄，成纤维细胞数量明显减少，胶原排列趋于一致。增生块的相对增生高度低于对照组。原位杂交显示TGF-β1 mRNA、collagenⅠmRNA、collagenⅢ mRNA阳性细胞表达率明显降低。结论：反义TGF-β1能抑制兔耳增生性瘢痕的增殖过程，使瘢痕组织纤维化程度明显减轻。局部注射裸DNA治疗瘢痕的给药途径是可行的。     

肉芽组织中NK1受体表达与创面愈合关系的实验研究

目的：研究创面愈合过程中NK1受体（NK1R）在肉芽组织成纤维细胞上的表达及其与创面愈合之间的关系。方法：新生Sprague-Dawley仔鼠20只，随机分为两组，每组10只。其中一组注射辣椒素将皮肤内感觉神经纤维破坏，制成“失感觉神经支配模型“，另一组作对照。两组动物均在腹部制作圆形皮肤缺损，并各选5只分别在一定时间点沿创面周缘及底部取材，进行NK1受体的免疫组织荧光染色及HE染色，观察其相应的时间、空间规律；另外5只不取材，而是在一定时间点测量未愈合的残留创面面积，并进行比较。结果：创面愈合过程中正常大鼠与去感觉神经支配大鼠在肉芽组织成纤维细胞均有NK1R表达；损伤后NK1R表达阳性的成纤维细胞形态变肥厚，胞体增大，车增殖旺盛表现；NK1R在感觉神经支配的大鼠成纤维细胞上的表达较正常对照升高；去感觉神经的大鼠与正常大鼠相比，创面愈合速度较慢。结论：大鼠皮肤NK1R表达与创面愈合之间关系密切，由感觉神经末梢所释放的P物质等神经递质可能是调节促进创面愈合的重要因子之一。     

祛瘀生肌中药对糖尿病模型创面转化生长因子TGF-β1、TGF-β3水平的动态影响

目的：探讨祛瘀生肌中药对糖尿病大鼠愈创模型创面TGF—β1、TGF-β3水平的动态影响。方法：72只SD大鼠分另1造成正常创面模型和糖尿病模型，随机分为生肌化瘀方组、化瘀方组和糖尿病创面生理盐水组。分另4于不同干预时段（3d、7d、11d）取材，EnVision二步法免疫组化测定，并行图像扫描定量分析TGF—β1、TGF-β3水平变化。结果：生肌化瘀方及化瘀方组各时段（3d、7d、11d）TGF—β1及TGF-β3水平均高于糖尿病创面生理盐水组（P〈0．05）。化瘀方TGF-β1均低于生肌化瘀方组（P〈0．05），但TGF—β3各组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：生肌化瘀方促进创面TGF—β1及TGF-β3分泌，有利于创面愈合，同时减少瘢痕形成。     

不同浓度的IL-1β和TGF-β1对大鼠肋软骨细胞的影响

目的:研究人白细胞介素-1β(IL-1β)和转化生长因子-β1(TGF-β1,)对体外培养的SD大鼠肋软骨细胞功能的影响.方法:采用免疫组织化学检测不同剂量IL-1β和TGF-β1作用48h后软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达水平.采用RT-PCR方法检测细胞Ⅱ型胶原、aggrccanase-1,2、aggreean的mRNA的表达水平.结果:IL-1β可以促进软骨细胞aggreeanase-1,2的表达,从而降低多聚蛋白聚糖的含量,破环细胞外基质结构,减少II型胶原的含量,使细胞呈现去分化的表现,对软骨细胞起负性生调节作用.低浓度的TGF-β1对软骨细胞起保护的作用;高浓度的TGF-β1(100ng/m1)在促进蛋白多糖表达的同时也促进软骨细胞蛋白多糖的降解,从而打破软骨的代谢平衡,起负性调节的作用.     

积雪草甙对兔耳增生性瘢痕TGF-β1 mRNA表达的影响

目的：通过建立兔耳腹侧增生性瘢痕的模型,探讨积雪草甙（Asiaticoside,hd）对TGF-β1 mRNA表达的影响。方法：新西兰大白兔20只（喂养过程中死亡4只）,在兔耳腹侧制备直径为1cm、深达软骨膜的圆形瘢痕93个,随机分为4组：空白对照组、得宝松组、低浓度积雪草甙组（25mg／m1）、高浓度积雪草甙组（50mg／m1）,分别于瘢痕制备3天后局部应用相应药物,2周后取材,分别测量瘢痕组织TGF-β1 mRNA的表达量。结果：积雪草甙组与空白对照组相比,TGF-β1 mRNA表达量明显降低,有明显统计学差异（P〈0．01）;积雪草甙与阳性对照组相比,二者mRNA表达量无统计学差异（P〉0．05）;积雪草甙组之间,高浓度组与低浓度组相比有统计学差异（P（0．05）。结论：较高浓度积雪草甙注射液局部注射可以减少增生性瘢痕TGF-β1mRNA的表达。     

TGF-β1中和抗体对TGF-β诱导的肌腱胶原产生和术后粘连形成的影响

目的 观察TGF-β1中和抗体对TGF-β诱导的肌腱细胞胶原产生及术后粘连形成的影响,探讨生物学调节在肌腱粘连防治中的作用.方法 取6只成年新西兰大白兔12条屈趾肌腱分离肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞,将细胞随机分成2组,实验组加入1 ng/mL TGF-β后,再加入不同浓度TGF-β1中和抗体,对照组不添加任何试剂,培养3 d后ELISA测定Col Ⅰ的产生.取84只兔行中趾屈趾肌腱切断吻合术,随机分成3组,腱鞘内分别注入生理盐水(NS组,n=36)、1.0 μg/mL TGF-β1中和抗体(1.0 μg/mL TGF-β1组,n=36)和2.0μg/mL TGF-β1中和抗体(2.0.μg/mLTGF-β1组,n=12).术后4、8周取出肌腱行肌腱粘连检测、生物力学测定、组织学观察和扫描电镜观察.1、2、4、8周后取出NS组及1.0 μg/mL TGF-β1组肌腱,原位杂交方法测定TGF-β1和Col Ⅰ mRNA的表达.结果 ELISA检测显示,TGF-β1能明显提高肌腱细胞Col Ⅰ的产生;TGF-β1抗体能降低肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞Col Ⅰ的产生,且呈剂量依赖关系.术后4、8周,NS组屈趾肌腱滑动距离较短,模拟主动屈曲度明显受限,与1.0μg/mLTGF-β1组和2.0μg/mL TGF-β1组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);最大抗断裂载荷各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).扫描电镜和组织学观察结果显示,术后4、8周NS组胶原纤维排列紊乱,1.0 μg/mLTGF-β1组和2.0μg/mL TGF-β1组胶原纤维排列整齐.原位杂交结果显示,术后各时间点1.0μg/mL TGF-β1组TGF-β1 mRNA和Col Ⅰ mRNA表达水半均低于NS组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TGF-β1中和抗体能有效抑制TGF-β1在肌腱损伤修复中的作用,减少粘连形成.     

富血小板血浆对难治性皮肤溃疡创面愈合及肉芽组织中TGF-β1及EGF表达的影响

目的:探讨富血小板血浆联合混合换药对难治性皮肤溃疡的治疗效果及其对肉芽组织中TGF-β1及EGF表达的影响.方法:选择68例难治性皮肤溃疡患者,随机分为对照组和观察组,每组34例.两组患者均给予混合换药治疗,观察组另给予富血小板血浆凝胶治疗.治疗12周后评估两组患者临床疗效、创面愈合时间、创面愈合美学满意度;PRP治疗...     

蛋白激酶C在TGF-β1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成中的介导作用

目的:研究蛋白激酶C(PKC)在TGF-β1刺激增生性瘢痕和正常人皮肤成纤维细胞(HS-FB和NS-FB)增殖和合成胶原中的信号转导作用。方法:利用32P掺入底物法测定PKC活性;MTT法测定增殖能力,3H-脯氨酸掺入法测定胶原合成能力。结果:TGF-β1刺激后NS-FB和HS-FB中PKC的活性逐渐升高,刺激120min时尚未恢复(30min后P<0.05),GF109可阻断TGF-β1活化PKC。TGF-β1和PKC活化剂(含磷脂酰丝氨酸、二酰基甘油和Ca2+)都可刺激NS-FB和HS-FB增殖和合成胶原(P<0.05);而GF109则有抑制作用(60min后P<0.05)且能部分阻断TGF-β1的刺激作用。结论:活化PKC能刺激NS-FB和HS-FB增殖和合成胶原,而抑制PKC活化仅部分阻止细胞增殖。TGF-β1的刺激作用部分经PKC通道转导。     

胰岛素及卡托普利对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

糖尿病肾病（ＤＮ）的发生与众多血管活性物质和细胞因子的作用密切相关,而这种作用主要通过蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）所介导［１］。胰岛素、血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）治疗可延缓ＤＮ肾功能恶化。我们以往的研究显示初发糖尿病大鼠肾小球内ＰＫＣ活性即增强［２］,本研究的目的为进一步观察胰岛素、ＡＣＥＩ（卡托普利）对糖尿病大鼠各阶段肾小球ＰＫＣ活性的影响。 一、材料与方法 １．动物：Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ雄性大鼠１４２只,１５０～１７０ｇ。分为正常对照组刚组）,糖尿病组（ＤＭ）组,胰岛素组（ＤＩ组）及卡…     

氟伐他汀对糖尿病大鼠肾脏组织蛋白激酶C活性作用的影响

目的:观察氟伐他汀对实验性糖尿病大鼠肾脏组织蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法:建立雄性SD 大鼠糖尿病动物模型,分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、氟伐他汀治疗组(C组),分别于第4、6周末收集24h 尿液、血清及肾脏组织标本,测定血胆固醇、甘油三酯、尿白蛋白、肾重/体重、肾脏细胞膜及细胞浆PKC活性,并进行 形态学观察。结果:C组大鼠血胆固醇、甘油三酯、肾重/体重、尿白蛋白及细胞膜PKC活性均高于同期A组,但低于 同期B组(P<0.05);C组大鼠细胞浆PKC活性高于同期B组,但低于同期A组(P<0.05);细胞膜PKC活性与肾重/体 重、尿蛋白排泄率呈正相关(r=0.772,P<0.01;r=0.353,P<0.05);肾脏组织学观察B组银染区及PAS红色染区 明显扩大,基底膜不规则增厚,足突部分融合,系膜区基质增多,C组较B组减轻。结论:氟伐他汀具有降脂、下调PKC 进而保护肾脏的功能。     

TGF-β和HIF-1与肿瘤关系的研究进展

转化生长因子β(TGF-β)是一种功能广泛的多肽类细胞因子,在调节细胞的增殖、分化和迁移中发挥重要作用。缺氧诱导因子(HIF)是在低氧环境下维持氧稳态的核心转录因子,能使许多蛋白质合成增加,促进肿瘤新生血管的形成,增强肿瘤的侵袭性。近年来的研究发现,TGF-β和HIF-1的表达异常与肿瘤的发生发展密切相关,并在肿瘤的侵袭转移过程中起着重要作用。就其研究进展作一综述。     

IFN-γ抑制兔耳皮肤伤口愈合和瘢痕增生中蛋白激酶C的活性变化

目的观察IFN-γ抑制兔耳伤口愈合和瘢痕形成中肉芽组织和瘢痕组织中蛋白激酶C（Protein Kinase C，PKC）活性的变化，探讨PKC的信号作用。方法兔耳伤口或瘢痕组织内使用IFN-γ，用^32P掺入底物法测定伤后3、6d、上皮化时（11～16d），上皮化后14、30和45d瘢痕组织的PKC活性，并观察上皮化时间和瘢痕变化。结果肉芽组织、周边组织和瘢痕组织的PKC活性伤后持续升高（P〈0．01），IFN-γ没有改变PKC活性（P〉0．05，）但延迟创面愈合约1．5d（P〈0．01），并抑制瘢痕增生（P〈0．05）。结论IFN-γ抑制伤口愈合和瘢痕增生的作用不经PKC介导；PKC活化与伤口愈合和瘢痕增生有关。     

Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体皮移植对创面愈合的影响

目的探讨对Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面,采用自体皮移植修复的机制,并评价其疗效.方法采用肉眼、病理组织学、免疫组织化学、电镜和流式细胞术,动态观察成年Ⅲ系小型猪Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体植皮术(A组)后,移植皮片活性与结构,移植床肉芽组织、胶原纤维、微血管、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白表达和成纤维细胞超微结构变化,并与Ⅲ度烧伤后传统的肉芽刮除纤维板创面自体植皮术(B组)进行比较,另设对照组,皮肤仅剃毛(C组). 结果术后3天,移植皮片成活,A组较B组皮片损伤轻、皮肤细胞增殖指数高、移植床血管内皮细胞及肉芽组织增生,bFGF表达明显.5天,两组血管内皮细胞及肉芽组织增殖旺盛,成纤维细胞呈蛋白合成旺盛和功能活跃象,新生胶原纤维出现,但B组增殖更加明显.7～14天,A组表皮结构及真皮毛细血管密度逐渐恢复正常,移植床肉芽组织逐渐成熟为纤维结缔组织,而B组则延后2天左右.21天后,A组愈合创面病理改变轻于B组.30～60天,A组创面收缩及改容程度明显轻于B组,且触之较软、移动度尚可. 结论Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体皮移植术的疗效优于传统手术.     

增生性瘢痕形成和成熟过程中TGF-β1、TGF-β3及其受体的基因表达变化

TGF β1 是一种多功能的细胞因子,与皮肤创面愈合后形成增生性瘢痕密切相关,而TGF β3的生物功能相反,使用该生长因子能够抑制瘢痕的发生[1 ] 。TGF β1 和TGF β3都能够与细胞膜上Ⅱ 型受体(transforminggrowthfactor betareceptorⅡ,TBRⅡ)结合后,磷酸化Ⅰ型受体(TBRⅠ)上的丝氨酸 苏氨酸,将胞外信号传递到细胞内,引起细胞核内特异性的基因表达[2 ] 。目前,关于不同发生阶段的增生性瘢痕中TGF β1 ,TGF β3,TBR Ⅰ和TBR Ⅱ基因表达变化特征的研究还少有报道,对这一规律的揭示,有利于深入了解调控增生性瘢痕发生和成熟的分子机…     

b-FGF和TGF-β1对体外培养的软骨细胞增殖的影响

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)对体外培养的软骨细胞增殖的影响。方法:细胞取自猪耳弹性软骨,体外培养原代至第6代软骨细胞,将培养液中加入TGF-β1或/和b-FGF作用于软骨细胞,并用MTT比色分析法对其增殖行为进行分析,探讨两种因子对软骨细胞增殖行为的影响。结果:b-FGF明显促进原代至第3代软骨细胞的增殖,并逐渐减弱,对第4代细胞无增殖作用,TGF-β1仅促进原代软骨细胞的增殖,TGF-β1和b-FGF联合应用,其刺激细胞增殖的作用明显低于b-FGF单一作用。结论:b-FGF显著促进体外培养的软骨细胞的增殖,主要作用于原代至第2代软骨细胞,明显强于b-FGF和TGF-β1联合应用。     

膀胱癌组织中蛋白激酶C及其抑制物活性的研究

目的　探讨蛋白激酶C(PKC)及其抑制物(PKCI)在膀胱移行细胞癌发生过程中的分子生物学机制。方法　采用Takai法检测20例膀胱移行细胞癌及癌周正常膀胱粘膜中PKC及其内源性抑制物(PKCI)的活性。结果　膀胱癌与癌周正常膀胱粘膜相比,胞膜（8.67±2.07,10.66±1.24）、胞浆（7.68±3.27,20.63±12.77）及总体（7.71±4.52,14.34±7.47）PKC活性(pmol     

大黄和黄芪对兔内毒素性急性肺损伤肺组织IL-1βmRNA表达的影响

白介素-1β（IL-1β）是最早释放的前炎性细胞因子之一,在急性肺损伤（ALI）的发病过程中起着极其重要的作用。IL-1β介导中性粒细胞（PMN）活化,活化的PMN粘附于血管内皮细胞,在趋化因子的作用下,大量在炎症部位聚集,释放大量的炎症介质如花生四烯酸代谢产物,各类自由基和酶等,引起肺损伤。且体内IL-1β水平的高低与感染疾病的严     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β和MCP-1表达的影响

炎症是糖尿病肾病（diabeticn ephropathy，DN）发生的重要环节，转化生长因子-β（TGF-β）和单核细胞趋化因子（MCP-1）表达增高是导致单核细胞和巨噬细胞浸润肾组织的两个重要因素。益肾胶囊系纯中药制剂，