阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织Smad4的影响及意义

目的观察阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织Smad4 mRNA表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用及机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、肺纤维化组和阿魏酸钠治疗组,每组10只。肺纤维化组和阿魏酸钠治疗组以气管内滴入博来霉素(5mg/kg)建立肺纤维化动物模型,治疗组采用阿魏酸钠(150mg/kg体重)灌胃治疗。苏木精-伊红染色检测肺组织病理改变;免疫组化检测Ⅰ型胶原纤维;原位杂交检测Smad4 mRNA的表达。结果与对照组比较,肺纤维化组Ⅰ型胶原纤维(0.97±0.34比0.27±0.08,P<0.001)和Smad4 mRNA(0.17±0.10对0.07±0.03,P<0.01)的表达均显著增高。阿魏酸钠治疗组与肺纤维化组比较,Ⅰ型胶原纤维(0.39±0.25比0.97±0.34,P<0.001)和Smad4mRNA(0.11±0.03对0.17±0.10,P<0.05)的表达均显著降低。结论阿魏酸钠可能通过抑制大鼠肺组织Smad4 mRNA的表达,从而具有抗肺纤维化的作用。     

博来霉素致大鼠肺纤维化模型肺组织MMP-2、MMP-9、MT1-MMP及TIMP-1、TIMP-2的表达

目的:观察博来霉素致肺纤维化大鼠模型肺组织基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type metrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)及组织型金属蛋白酶抑制物(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-1、TIMP-2的表达,探讨其在肺损伤与修复过程的作用,进一步阐明肺间质纤维化的发病机制.方法:采用博来霉素致Wistar大鼠肺纤维化模型,RT-PCR法半定量测定大鼠肺组织MMP-2、MMP-9、MT1-MMP及TIMP-1mRNA的表达;免疫组化方法观察MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在大鼠肺组织的表达.结果:MMP-2、MMP-9、MT1-MMP及TIMP-1 mRNA在正常肺组织中均有少量表达,分别为0.072±0.023,0.334±0.089,0.038±0.013及0.098±0.030;给予博来霉素后1周,MMP-2、MT1-MMP及TIMP-1 mRNA表达显著增加,分别为0.435±0.058,0.312±0.078和0.526±0.120(与对照组相比,P<0.05);至第4周时上述3种mRNA表达明显下降,但仍比正常对照组显著增高(0.126±0.050,0.064±0.022及0.179±0.031,与对照组及1周组相比,P<0.05);MMP-9 mRNA在给予博来霉素后1周表达明显增高(0.711±0.227,与对照组相比,P<0.05),持续至第4周为0.639±0.153,经统计学处理,与1周时差异无显著性(但与对照组相比,P<0.05).免疫组化染色正常肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2有少量染色阳性,博来霉素1周时染色增强,MMP-2、MMP-9、TIMP-1第4周时染色阳性细胞较1周时减少但仍明显高于正常肺组织.TIMP-2博来霉素1周时染色明显增强并保持到第4周.结论:MMP-2、MMP-9、MT1-MMP及其组织抑制物TIMP-1、TIMP-2的在肺纤维化形成中起重要调节作用.     

医用臭氧对特发性肺间质纤维化大鼠的影响

目的探讨医用臭氧治疗特发性肺纤维化的可行性。方法将40只清洁级雄性wistar大鼠随机分为试验组和对照组。所有大鼠采用气管内滴入博来霉素的方法制造肺纤维化模型,对照组大鼠隔日腹腔内注射生理盐水,实验组大鼠隔日腹腔内注射医用臭氧。于第28 d每组随机选取10只检测肺功能后处死,取右肺制作组织切片观察肺纤维化程度,取左肺检测超氧化物歧化酶及羟脯氨酸含量。每组剩余10只观察生存时间。结果对照组大鼠各肺功能指标均较实验组明显下降(P0.05)。对照组大鼠肺纤维程度较实验组严重,肺纤维化程度评分显著高于实验组[(1.9±0.5)分比(1.2±0.4)分,p0.05]。实验组大鼠肺组织中超氧化物歧化酶含量较对照组明显升高[(208.48±29.37)U·mg~(-1)·pro~(-1)比(163.34±21.42)U·mg~(-1)·pro~(-1),P0.05],羟脯氨酸的含量较对照组明显降低[(2.25±0.28)mg/g比(2.68±0.37)mg/g,P0.05]。实验组大鼠中位生存期显著长于对照组(79 d比59 d,P0.05)。结论医用臭氧能延缓大鼠肺纤维化的进展。     

低频复合生理频率电刺激对慢性低压缺氧兔颏舌肌肌球蛋白重链表达的影响

目的 研究低频复合生理频率慢性电刺激对低压缺氧兔颏舌肌肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)亚型表达的影响.方法 成年日本大白兔24 只,雌雄不拘,体质量(2.3±0.1)kg,按随机数字表法分为4组(n=6).A:正常对照组,B:慢性低压缺氧组,C:10 Hz电刺激组,D:10+40 Hz电刺激组.B、C、D组兔置于慢性低压缺氧环境中饲养后,分别给予C组兔颏舌肌低频(10 Hz)电刺激,D组兔颏舌肌低频复合生理频率(10+40 Hz)电刺激,B组兔不予电刺激.采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,分析4组颏舌肌MHC各亚型表达变化.结果 ①与正常对照组比较,慢性低压缺氧组颏舌肌MHCⅠ亚型比例减少[(0.69±0.07)% vs(17.48±4.00)%, P<0.05],MHCⅡa亚型比例增加[(79.89±5.09)% vs(73.33±4.17)%, P<0.05];MHCⅠ亚型mRNA表达量下降[(0.69±0.07) vs( 1.05±0.06),P<0.05].②与慢性低压缺氧组比较,10 Hz电刺激组颏舌肌MHCⅠ亚型比例[(18.78±3.49)% vs(11.37±4.27)%, P<0.05]及10+40 Hz电刺激组颏舌肌MHCⅠ亚型比例[(23.40±4.65)% vs(11.37±4.27)%, P<0.05]均增加,而10+40 Hz电刺激组颏舌肌MHCⅡa亚型比例[(67.90±5.66)% vs(79.89±5.09)%, P<0.05]减少;与慢性低压缺氧组比较,10 Hz电刺激组颏舌肌MHCⅠ亚型mRNA表达量[(0.79±0.07) vs (0.69±0.07), P<0.05]及10+40 Hz电刺激组颏舌肌MHCⅠ亚型mRNA表达量[(0.97±0.08) vs (0.69±0.07), P<0.05]均增高,而MHCⅡa亚型mRNA表达量差异不显著.结论 慢性电刺激后低压缺氧兔颏舌肌MHC呈现Ⅱa 向Ⅰ型转变,即"由快向慢"转变.其中低频复合生理频率电刺激组变化的趋势更加明显.     

MMP-9和TIMP-1在高氧致CLD新生大鼠肺组织的动态变化及其对Ⅳ型胶原的影响

目的 探讨MMP-9(基质金属蛋白酶-9)和TIMP-1(基质金属蛋白酶抑制物-1)在高氧致CLD新生大鼠肺组织中的动态变化和在Ⅳ型胶原重塑中的作用.方法 足月新生大鼠在生后12 h内分别持续吸入浓度为0.90～0.95的高氧和空气,于1,3,7,14和21 d,应用免疫组化的方法分别检测肺组织MMP-9和TIMP-1蛋白表达的动态变化,同时采用ELISA法动态检测肺组织中Ⅳ型胶原蛋白含量.结果 MMP-9在高氧3 d时的表达较空气组增强,蛋白平均灰度值为:(126.23±6.95) vs (130.38±7.36),P<0.05,其余时间点两组比较差异无显著性;TIMP-1在3 d后高氧组肺组织的表达均高于空气组,3 d和7 d时平均灰度值为:(126.22±6.49)vs(129.49±4.75),(119.70±7.33)vs(124.99±6.83)(P<0.05),14 d和21 d差异有显著性,值为(112.35±10.29)vs(120.08±7.77),(109.19±10.56)vs(118.22±6.32)(P<0.01);高氧组ColⅣ含量在14 d[(24.78±5.42)vs(14.90±2.44),P<0.05]和21 d[(40.27±1.94)vs(26.13±1.94),P<0.01]均高于空气组.结论 新生大鼠随着吸入高氧时间的延长,MMP-9/TIMP-1的平衡状态遭到破坏,Ⅳ型胶原降解失衡,促进了早期基膜损伤的加重和晚期伴有Ⅳ型胶原沉积的肺纤维化.     

间充质干细胞条件培养基对实验性肺动脉高压大鼠的干预作用研究

目的探讨间充质干细胞(MSC)条件培养基(CM)对肺动脉高压(PH)大鼠的干预效果。方法实验于2010年3—10月在国家干细胞中心完成。取24只SD大鼠随机分为3组:模型组、治疗组和对照组,每组各8只。野百合碱(MCT)单次皮下注射制备PH大鼠模型,治疗组大鼠于实验的5~9 d应用MSC-CM腹腔注射进行治疗,模型组及对照组同期注射等量PBS。实验第21天分别检测各组大鼠右室收缩压(RVSP)和平均主动脉压(MAoP),同时制备肺组织切片检测肺动脉中膜的厚度(WT),并对各组大鼠进行比较。结果模型组大鼠RVSP明显高于对照组[(48.26±3.93)mmHg vs.(27.58±3.47)mmHg,P<0.01],而MAoP较对照组明显下降[(89.54±15.81)mmHg vs.(116.37±16.17)mmHg,P<0.05]。经MSC-CM治疗后,治疗组大鼠RVSP较模型组明显下降[(31.42±3.38)mmHg vs.(48.26±3.93)mmHg,P<0.01],同时MAoP明显上升[(儿2.97±14.26)mmHg vs.(89.54±15.81)mmHg,P<0.05]。肺组织学检查显示,模型组大鼠的WT较对照组明显增加[(34.12±3.59)%vs.(12.53±1.82%),P<0.01]。而经MSC-CM治疗后,治疗组较模型组有显著的减轻[(13.28±1.78)%vs.(34.12±3.59%),P<0.01]。结论 MSC条件培养基对PH大鼠干预能够有效地抑制PH的进程。     

发现于炎症区域分子1在实验性大鼠肺纤维化组织中的表达及意义

目的研究发现于炎症区域分子1(FIZZ1)在大鼠肺纤维化组织中的表达及意义。方法 10只SpragueDawley大鼠随机分为模型组和对照组,每组5只。大鼠采用气管内注入博来霉素(5 mg·kg-1)的方法复制大鼠肺纤维化模型(模型组);采用气管内注入生理盐水(1.25 mL·kg-1)的方法制造阴性对照(对照组)。第28天处死大鼠,肺组织病理切片行苏木精-伊红染色,Ashcroft评分评定大鼠肺组织纤维化的严重程度;免疫组织化学方法检测大鼠FIZZ1和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果模型组大鼠肺纤维化程度较对照组严重,Ashcroft评分比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组大鼠FIZZ1和TGF-β1表达水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 FIZZ1在肺纤维化发病机制中起重要作用,可能与TGF-β1的高表达有关。     

1,25-(OH)2D3治疗肺纤维化的动物实验研究

目的观察1,25-(OH)2D3对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预效果。方法将C57BL/6雄性小鼠110只分为对照组(n=30),模型组(n=40),干预组(n=40)。对模型组及干预组小鼠用博来霉素(3.5mg/kg)气管内滴入构建肺纤维化模型,对照组滴入等量生理盐水。干预组小鼠每日予罗盖全0.5μg/kg灌胃,对照组及模型组以等体积蓖麻油灌胃。在造模第7、14、28天分批处死各组一定数量小鼠,取右上肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织纤维化程度并评分,除此之外,在第28天增加检测肺组织羟脯氨酸含量。结果造模第7和14天,干预组与模型组肺纤维化评分无明显差别;第28天,干预组小鼠肺纤维化评分低于模型组(P<0.05),干预组小鼠肺组织羟脯氨酸含量低于模型组(P<0.05)。结论 1,25-(OH)2D3可减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化程度。     

润肺治纤汤对实验性肺纤维化模型大鼠肺组织病理变化的影响

目的 探讨润肺治纤汤对实验性肺纤维化大鼠肺组织病理变化的影响.方法 54只Wistar大鼠均分为对照组、模型组、治疗组,14、28 d两个时段处死大鼠做肺系数测定和肺组织羟脯氨酸(HYP)含量检测,28 d肺组织苏木精-依红染色、Van Gieson胶原染色.结果 模型组肺系数和肺组织HYP含量较正常对照组显著增加(P<0.05),肺组织肺纤维化病理变化明显;28 d治疗组肺系数、HYP含量与模型组比较显著降低(P<0.05),肺组织肺纤维化病理变化程度轻于模型组.结论 润肺治纤汤具有减轻实验性肺纤维化大鼠肺组织纤维化的作用.     

~(18)F-FDGPET/CT显像检测肺纤维化的实验研究

目的探讨~(18)F-FDG PET/CT显像检测肺纤维化的诊断价值。方法选取12只雄性SD大鼠随机分为肺纤维化组和对照组,每组6只。肺纤维化组大鼠单次气管内注入博来霉素(5 mg/kg),对照组给予等量生理盐水。造模后28天两组大鼠进行肺组织~(18)F-FDG PET/CT显像,检测两组大鼠肺组织对~(18)F-FDG的摄取情况。显像后处死大鼠并取其左肺叶用于Masson染色,测定羟脯氨酸含量。结果肺纤维组肺组织摄取~(18)F-FDG的%ID/g值为(0.6±0.059),明显高于对照组的(0.095±0.005),差异有统计学意义(t=20.74,P0.05)。肺纤维化组大鼠肺组织羟脯氨酸含量为(1.704±0.145)μg/mg,明显高于对照组的(1.066±0.057)μg/mg,差异有统计学意义(t=10.05,P0.05)。Masson染色显示肺纤维化组大鼠肺组织纤维增生和胶原沉积,~(18)F-FDG PET/CT显像示肺纤维化组大鼠的肺纤维灶处可见明显放射性浓聚。肺纤维化组~(18)F-FDG摄取值与羟脯氨酸含量密切相关(R~2=0.9142,P0.05)。结论~(18)F-FDG PET/CT显像可用于无创诊断肺纤维化。     

结缔组织生长因子与大鼠移植肺纤维化的关系

检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠移植肺内的表达,并探讨其与移植肺纤维化的关系.方法:检测结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠移植肺内的表达,并探讨其与移植肺纤维化的关系.方法:取20只Wister大鼠作为供体,20只SD大鼠作为受体,进行原位左肺移植.急性排斥反应组(AR)大鼠于术后1周处死,慢性排斥反应组(CR)大鼠于术后6周处死,均取其移植肺作标本,取正常Wister大鼠肺标本作对照组(NH),每组10只.测取并计算肺组织的湿/干重比值(W/T);采用HE及Van Gieson染色观察肺组织病理形态,并进行纤维化的半定量评分;采用免疫组织化学方法检测CTGF在肺组织中的表达.结果:肺的W/T比值逐步减小(AR vs.NH:3.48±0.47 vs.4.67±0.51,P＜0.05;CR vs.AR:2.85±0.52 vs.3.48±0.47,P＜0.05);移植肺组织显示:大量炎性细胞浸润、肺间质纤维化、肺泡结构破坏、阻塞性肺炎、肺实变,CR组较AR组更明显;纤维化评分,AR组明显高于NH组(0.98±0.47 vs.0.00±0.00),CR组(2.35±0.52)明显高于AR组,(均P＜0.01).CTGF在移植肺组织中有明显表达,且CR组较AR组更高(P＜0.01),而正常肺无表达.结论:CTGF表达与移植肺纤维化密切相关,且参与了移植肺纤维化的病理过程.     

补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的影响

目的观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的影响。方法采用博来霉素诱导建立实验性肺纤维化大鼠模型,以氢化可的松琥珀酸钠为对照,观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态及血清羟脯氨酸(HYP)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)的影响。结果同正常组比较,模型组大鼠肺组织病理纤维化显著,炎性反应明显,同时伴有血清HYP,HA,LN升高(P0.05,P0.01)。同模型组相比,各治疗组肺组织病理形态明显改善,补肾通络高剂量组大鼠血清HYP,HA,LN含量明显下降(P0.05);补肾通络低剂量组LN含量明显下降(P0.01),氢化可的松琥铂酸钠对照组HYP、HA、LN含量明显下降(P0.05,P0.01)。结论补肾通络方可改善实验性肺纤维化大鼠肺组织病理形态,抑制肺纤维化。     

阿魏酸钠对博来霉素肺纤维化大鼠肺组织TGF β RⅡmRNA表达的影响

目的观察阿魏酸钠对肺纤维化大鼠肺组织TGFβRⅡmRNA表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用及机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组,肺纤维化模型组和阿魏酸钠治疗组,每组10只。模型组和治疗组以气管内滴入博来霉素（5mg/kg）建立肺纤维化动物模型,治疗组采用阿魏酸钠（150mg/kg体重）灌胃治疗。HE染色检测肺组织病理改变,免疫组化检测Ⅰ型胶原纤维,原位杂交检测转化生长因子β受体ⅡmRNA（TGFβRⅡmRNA）。结果与对照组比较,肺纤维化模型组肺组织Ⅰ型胶原纤维显著增加（P〈0.001）。阿魏酸钠治疗组与肺纤维化模型组比较,肺组织内1型胶原纤维表达减弱（P〈0.001）,TGFβRⅡmRNA表达降低（P〈0.05）。结论阿魏酸钠能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度,其机制可能与其抑制肺内TGFβRⅡmRNA的表达,从而阻止Ⅰ型胶原过度沉积有关。     

降低内毒素对大鼠肝肺综合征肺损伤的作用

目的:探讨氧氟沙星降低内毒素对大鼠肝肺综合征的肺损伤保护作用。方法:结扎SD大鼠胆总管,建立肝肺综合征(HPS)动物模型。将大鼠分成3组(每组10只),假手术组:分离大鼠胆总管,腹腔注射生理盐水2ml;HPS模型组:结扎大鼠胆总管,腹腔注射生理盐水2ml;氧氟沙星组:结扎大鼠胆总管后腹腔注射左旋氧氟沙星(20mg/kg体重)。6周后检测血清内毒素,血、腹水、胆汁培养需氧或厌氧菌,血气分析,测定门静脉压力,肺干重/湿重比,肺灌洗液和肺组织匀浆中髓过氧物酶含量及丙二醛浓度,并评价肺组织病理变化。结果:与HPS模型组比,氧氟沙星组血浆内毒素浓度显著下降[(59±6.2vs268±35.6)ng/L,P<0.01],门静脉压力[(19.28±2.3vs17.80±2.18)cmH2O,P<0.01]、肺组织肺干重/湿重比(5.1±0.7vs4.9±0.7,P<0.01)、肺髓过氧物酶[(0.40±0.10vs0.24±0.03)U,P<0.01]和丙二醛[(0.32±0.05vs0.22±0.03)μmol/L,P<0.01]含量均有显著降低,肺组织炎症改变明显减轻。结论:降低内毒素可以减轻肝肺综合征的肺损伤。     

不同时间变应原暴露对大鼠哮喘模型的影响

目的:研究幼年大鼠不同时间接触卵蛋白(ovalbumin, OVA)对成年后气道哮喘炎症的影响及机制.方法:新生SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为哮喘组,出生后第3天、第7天、第14天变应原接触组,以及正常对照组.各变应原接触组分别于出生后第3天、第7天和第14天给予皮下注射OVA 1mg(含氢氧化铝凝胶5mg).大鼠饲养至6周龄后,除正常对照组外其他各组均经OVA致敏并激发为哮喘模型.观察大鼠肺组织病理改变,计数每个细支气管上皮中黏液细胞数量.检测脾及胸腺中CIM+ CD25+ T细胞比例和叉头框P3(forkhead box P3,Foxp3)转录因子mRNA表达水平.结果:出生后第3天组(2.29±0.49)、出生后第7天组(1.25 4±0.46)与哮喘组相比(3.50±0.76)黏液细胞数量减少(P<0.01),气道炎症明显减轻;而出生后第14天组黏液细胞数未见减少[(3.00±1.16) vs (3.50±0.76),P>0.05].出生后第3天组、第7天组脾中CD4+ CD25+ T细胞比例[(13.68±3.54)% vs (7.33±3.39)%,P<0.01;(16.65±4.91)% vs (7.33±3.39)%,P<0.01]和Foxp3 mRNA水平[(18.46±5.01)vs(5.49±1.99),P<0.01;(26.37±4.68) vs (5.49±1.99),P<0.01]与正常组比较均明显升高,且出生后第7天组胸腺中Foxp3 mRNA表达亦增高[(18.73±3.66)vs(11.13±1.75),P<0.01];但出生后第14天组脾CIM+ CD25+ T细胞比例及Foxp3 mRNA表达与正常组比较差异均无统计学意义[(11.04±2.88)% vs (7.33±3.39)%,P>0.05;(8.71±2.19) vs (5.49±1.99),P>0.05].结论:早期接触变应原对大鼠哮喘气道炎症的抑制作用存在"时间窗"现象,其发生机制可能与诱导产生调节性T细胞有关.     

新型气体信号分子硫化氢在大鼠肺纤维化发病中的作用

目的:在博来霉素(Bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化大鼠模型上,观察内源性胱硫脒-γ-裂解酶/硫化氢(CSE/H2S)体系的变化以及应用外源性H2S供体硫氢化钠(NaHS)对肺纤维化的影响,以探讨内源性H2S在肺纤维化发病中的病理生理意义.方法:(1)雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、肺纤维化组(经气管内滴入BLMA5 5 mg/kg)、肺纤维化+NaHS低剂量组(腹腔注射NaHS 1.4 μmol/kg,每日两次)和肺纤维化+NaHS高剂量组(腹腔注射NaHS 7 μmol/kg,每日两次).分别于第7天、第28天取肺组织行HE染色和Masson染色,用生化法测定丙二醛(MDA)、羟脯氨酸含量,采用敏感硫电极测定血浆H2S的生成量及亚甲基蓝法测定CSE活性,用半定量RT-PCR方法测定肺组织CSE的mRNA水平.(2)以羟自由基发生系统Fe2+(5 mmol/L)/H2O2(25 mmol/L)单独及与不同浓度NaHS(10^-5、5×10^-5、10^-4、10^-3mmol/L)共同孵育离体大鼠肺组织,测定MDA含量.结果:(1)第7天纤维化组大鼠血浆H2S含量较对照组下降46%,第28天时增加25%(均P＜0.01);肺组织CSE活性在第7天时比对照组降低26%(P＜0.01),第28天时CSE活性恢复,与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);第7天和第28天纤维化组肺组织CSE mRNA含量较对照组分别升高34%和144%(P＜0.01);第7天及第28天纤维化组肺组织MDA、羟脯氨酸含量均较对照组明显升高(P＜0.01),NaHS高剂量组和低剂量组的MDA、羟脯氨酸含量均较纤维化组显著降低,高、低剂量组间差异无统计学意义(P＞0.05).(2)Fe2+/H2O2孵育组肺组织MDA含量较对照组明显升高,经给予不同浓度NaHS处理后,MDA含量均显著下降.结论:内源性CSE/H2S体系参与了大鼠肺纤维化的病理生理过程,外源性补充H2S可能通过减轻氧化应激抑制肺纤维化的发生.     

肝纤维化大鼠肝组织Na+/Ca2+泵mRNA表达

目的: 了解肝纤维化大鼠肝组织Na /Ca2 泵(Na /Ca2 exchanger,NCX) mRNA表达状况,探讨其与肝纤维化程度的关系及意义.方法: CCl4 sc法诱导大鼠肝纤维化,观察肝组织NCX及α1(Ⅰ) mRNA表达水平,检测血清HA,CⅣ,PCⅢ,血清肝纤维化相关酶 (β-NAG,MAO,ALD)、肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量及肝组织病理学变化,分析其相关性与临床意义.结果: 20只正常大鼠肝组织NCX mRNA表达除1只弱阳性外,其余均为阴性,半定量积分仅为(0.10±0.00);而30只模型组大鼠全部呈阳性,半定量积分显著增加(P<0.05).与正常组比较,模型组大鼠血清HA[(455.79±113.55) vs (112.41±45.62) μg/L],CⅣ,[(159.62±29.64) vs (35.69±9.68) μg/L],PCⅢ [(265.54±98.21) vs (89.99±10.85) μg/L]明显增高(均为P<0.01);β-NAG,MAO,ALD活性显著增加(分别增加2.20,2.14,1.57倍,P<0.01),模型组大鼠NCX mRNA表达与α1(Ⅰ) mRNA表达水平、肝组织Hyp含量、血清HA,CⅣ,PCⅢ水平、肝组织纤维化积分均呈正相关,相关系数r分别为 0.48, 0.64, 0.52, 0.49, 0.56, 0.60(均为P<0.05).结论: 肝纤维化大鼠肝组织NCX mRNA表达明显增强,与胶原代谢水平及肝脏组织病理学变化呈正相关,有望作为判断肝纤维化的有用指标,值得进一步研究.     

丹参联合川芎嗪对肺纤维化大鼠肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1表达的影响

目的:观察丹参联合川芎嗪腹腔注射对博来霉素(bleomycin,BLM)致肺纤维化大鼠肺组织蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导与转录活化因子1(STAT1)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:将90只成年雄性SD大鼠随机分为以下6组:生理盐水(NS)组、BLM组、地塞米松(DM)组、小剂量中药(A)组、中剂量中药(B)组、大剂量中药(C)组,每组大鼠各15只。BLM组、DM组、A组、B组、C组气管内灌注BLM复制大鼠肺纤维化模型,NS组气管内灌注等体积的NS,造模成功24h后各组大鼠给予药物腹腔注射。NS组和BLM组每日给予腹腔注射NS,DM组每日给予腹腔注射DM,A组、B组及C组每日给予不同剂量丹参和川芎嗪复合制剂腹腔注射,分别于造模后第7天,第14天和第28天处死每组大鼠各5只,肺组织多聚甲醛固定后行HE染色和Masson染色观察肺泡炎及肺纤维化程度;免疫组织化学法测定肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达;血清用于肝肾功能的检测以评价药物安全性。结果:①大鼠血清肝肾功能检测结果显示各组两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。②NS组大鼠各时间点肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及纤维化的形成。BLM组大鼠第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,第14天时炎性细胞减少,肺泡间隔内成纤维细胞显著增多,肺泡结构破坏,第28天时肺纤维化程度进一步加重,形成广泛纤维化。与BLM组比较,DM组大鼠各时间点肺泡炎及纤维化程度减轻(P<0.05)。A组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度与BLM组类似。B组、C组第14天肺泡炎及肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。B组、C组第28天肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。③与NS组比较,BLM组、DM组、A组、B组、C组肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达水平明显升高(P<0.05)。④与BLM组比较,DM组及B组、C组肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达水平明显降低(P<0.05)。⑤肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1的表达与肺泡炎及肺纤维化评分呈正相关。结论:丹参联合川芎嗪腹腔注射能减轻BLM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能与抑制肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1的表达有关。     

依那普利对博来霉素致大鼠肺纤维化的影响

目的探讨依那普利对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中细胞因子和肺纤维化的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量依那普利组、中剂量依那普利组、高剂量依那普利组和泼尼松对照组,每组10只。博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型。对各组大鼠进行肺泡炎、肺纤维化半定量评分,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素(IL)-1、IL-2、IL-4和IL-6含量,肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)含量,BALF和血清中间质金属蛋白酶(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的浓度,以及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)m-RNA的表达。结果依那普利剂量依赖性地降低博来霉素诱导的肺纤维化大鼠的肺纤维化评分和肺泡炎评分(P<0.05);降低大鼠BALF中TGF-β1、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6的含量(P<0.05),并升高INF-γ含量(P<0.05);升高肺组织中SOD含量(P<0.05),并降低MDA和HYP含量(P<0.05);降低血清及BLAF中MMP-9、TMP-1的含量,降低MMP-9/TMP-1值(P<0.05);降低肺组织TNF-αm-RNA的表达(P<0.05)。结论依那普利可以有效抑制博来霉素诱导的大鼠肺纤维化。