胃康宁对胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的影响

目的研究胃康宁对胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt、KDR表达的调控作用.方法以不同剂量的中药复方胃康宁制剂给SD大鼠灌胃制备含药血清,然后以含药血清培养胃癌细胞,共同培养两代后,分别用免疫组化法和RT-PCR检测不同剂量组胃癌细胞中VEGF及其受体Flt、KDR的表达情况.结果胃康宁高、中、低剂量组对P53、VEGF和Flt的免疫组化检测与对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01);中、低剂量组与高剂量组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01).胃康宁高、中、低剂量组对VEGF及其受体Flt、KDRmRNA表达检测与对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01);中、低剂量组与高剂量组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01),提示与用药剂量有一定的关系.结论胃康宁对胃癌细胞血管内皮生长因子及其受体Flt、KDR的表达有抑制作用.     

健脾导滞方对人胃癌细胞的作用

目的:观察中药健脾导滞方对胃癌细胞生长、对P53和VEGF及其受体表达的作用.方法:分别以高、中、低等不同剂量的健脾导滞方制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组的含药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测各组胃癌细胞的生长状况,并用免疫组化法检测各组胃癌细胞中P53和VEGF及其受体Flt的表达.结果:与对照组比较,用药组胃癌细胞的生长及细胞周期明显改变;P53和VEGF及其受体的表达明显减弱(P＜0.05).结论:健脾导滞方对胃癌细胞的生长,对P53和VEGF及其受体的表达均有抑制作用.     

胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与血管内皮生长因子及其受体KDR、Flt-1表达的影响

目的观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长和VEGF及其受体表达的作用。方法分别以高、中、低等不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组合药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测各组胃癌细胞的生长状况,免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体Flt-1的表达,RT- PCR法检测各组胃癌细胞中VEGF及其受体KDR,Flt-1 mRNA的表达。结果与对照组比较,用药组胃癌细胞的生长及细胞周期明显改变(P＜0．01),用药组G_0-G_1期细胞增多,S期细胞减少,凋亡率增加,并呈一定的量效关系。VEGF的灰度值由对照组的147．82±0．15升高到低剂量组的174．80±0．81,中剂量组的178．65±0．56,高剂量组的182．44±0．54(P＜0．01)。Flt-1的灰度值由对照组144．31±0．71升高到低剂量组148．20±0．69,中剂量组162．01±0．52,高剂量组168．51±0．81(P＜0．01)。胃康宁含药血清培养的胃癌细胞中V...     

益气活血中药对人胃癌细胞作用的研究

目的:观察具有益气活血作用的中药党参、五灵脂、水蛭等对胃癌细胞生长及P53和VEGF及其受体表达的作用.方法:分别以高、中、低等不同的剂量的中药制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组的含药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测各组胃癌细胞的生长状况,并用免疫组化法检测各组胃癌细胞中P53和VEGF及其受体的表达.结果:与对照组比较,用药组胃癌细胞的生长及细胞周期明显改变(P＜0.05);P53和VEGF的表达明显减弱(P＜0.05).结论:益气活血中药对胃癌细胞的生长、P53和VEGF及其受体的表达有抑制作用.     

化浊解毒方含药血清对胃癌细胞VEGF及COX-2表达的影响

目的:研究化浊解毒方对胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)及环氧合酶-2(COX-2)表达的调控作用。方法:以不同剂量的化浊解毒方给Wistar大鼠灌胃制备含药血清,然后以含药血清培养胃癌细胞,共同培养2代后,分别用免疫组化法检测VEGF、COX-2的表达情况。结果:化浊解毒方高、中、低剂量组胃癌细胞中VEGF、COX-2的表达减弱,与对照组比较,差异均有显著性意义(P<0.01);而且高剂量组表达减弱更为明显,与低、中剂量组与较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:化浊解毒方对胃癌细胞VEGF及COX-2的表达有抑制作用。     

穴位注射对气滞血瘀证雌性大鼠血清NO及子宫组织VEGF/KDR表达的影响

目的:探讨穴位注射对气滞血瘀证雌性大鼠血清一氧化氮(NO)、子宫组织血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(KDR)表达的影响及可能的作用机制。方法:建立气滞血瘀证雌性大鼠模型,运用免疫组化和RT-PCR法检测空白组、模型组、中药组、穴位注射组大鼠子宫组织VEGF/KDR蛋白及mRNA的表达及血清NO的变化。结果:与空白组比较,模型组大鼠子宫组织VEGF和KDR蛋白及mRNA表达显著降低,NO显著降低;与模型组比较,中药组和穴位注射组子宫组织中VEGF和KDR蛋白及mRNA表达均显著升高, NO明显上升,且2组比较差异无统计学意义。结论:丹红穴位注射能促进气滞血瘀证雌性大鼠血清NO、子宫组织VEGF/KDR的表达,改善子宫组织血流状态,从而达到"祛瘀生新"的作用。     

中药胃康宁对胃癌细胞周期因子Cyclin E、CDK2和p27表达的影响

目的:观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞Cyc lin E、CDK2(Cyc lin dependant k inase 2,CDK2)和p27mRNA及其蛋白表达的作用。方法:分别以高、中、低不同剂量的胃康宁制剂对W istar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组含药血清培养胃癌细胞,采用免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中Cyc linE、CDK2和p27蛋白的表达,RT-PCR法检测各组胃癌细胞中Cyc lin E、CDK2和p27 mRNA的表达。结果:免疫组化法结果显示,胃康宁高、中、低剂量组Cyc lin E和CDK2灰度值均有明显升高,与空白对照组比较,P<0.05~0.01,而p27灰度值则显著降低(P<0.05~0.01);RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,胃康宁低、中、高剂量组均能明显降低Cyc lin E和CDK2 OPTD I值(P<0.05~0.01)。同时,还能升高p27 OPTD I值(P<0.05~0.01)。结论:中药胃康宁可抑制胃癌细胞周期因子Cyc lin E、CDK2及其mRNA的表达,促进细胞周期抑制因子p27及其mRNA的表达,这可能是胃康宁抑制胃癌细胞生长的机制之一。     

补肺颗粒含药血清对哮喘气道平滑肌细胞及气道血管生成的影响研究

目的 观察中药补肺颗粒含药血清对哮喘小鼠支气管平滑肌细胞（ASMC）增殖以及气道血管生成的影响。方法 制备补肺颗粒含药血清,参照文献制备哮喘小鼠模型并分离ASMC,随机分为对照组、高剂量组和低剂量组,分别给予不含药血清、高剂量含药血清及低剂量含药血清加以培养,后测定ASMC增殖率,Western blotting测定ASMC血管内皮生长因子（VEGF）及内皮抑素（ES）的相对表达,RT-PCR检测ASMC VEGF mRNA及ES mRNA相对表达。结果 与对照组对比,高剂量组和低剂量组能显著降低ASMC增殖（P <0.01）,VEGF及内皮抑素的相对表达显著降低（P <0.05）,高剂量组的VEGF m RNA及ES mRNA的相对表达显著降低（P <0.01）。结论 补肺颗粒含药血清能有效抑制哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖,进而改善哮喘气道重塑状态。其作用机制可能与抑制VEGF及内皮抑素表达,调节气道血管生成有关。     

温郁金对胃癌细胞的抑制作用及其对血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨温郁金对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用及其作用机理。方法：采用超临界二氧化碳萃取法提取温郁金成分；以5-Fu为阳性对照药物，采用MTT法，测定温郁金提取物对体外培养胃癌细胞SGC-7901增殖的影响；运用半定量逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）方法检测温郁金提取物对胃癌细胞血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。结果：温郁金提取物对胃癌细胞的生长有显著的抑制作用（均P〈0．01），且抑制率随药物浓度的升高而增高，存在明显的量效关系；100mg／L、200mg／L浓度的温郁金提取物对胃癌细胞生长的抑制率分别为51．59％、64．44％，在这个浓度水平，其抑制肿瘤细胞生长作用与阳性对照药物5-Fu效果相当。温郁金提取物能下调VEGF121和VEGF165mRNA表达。结论：温郁金提取物对人胃癌细胞SGC-7901生长有抑制作用，其抑癌作用的机制可能与下调VEGF表达水平有关。     

芪竹方粗提物对MGC-803细胞VEGF、KDR/flk-1蛋白表达的影响

目的 探讨芪竹方粗提物对MGC-803细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其血管内皮生长因子受体(KDR/ilk-1)蛋白表达的影响.方法 MGC-803细胞处理方法被分成空白对照、二甲基亚砜(DMSO)对照、芪竹方粗提物高(500 μg/ml)、低浓度(250 μg/ml)四组,采用流式细胞仪、western blot...     

罗氏内异方含药血清对子宫内膜异位症合并不孕患者腹腔液细胞的影响

目的 探讨罗氏内异方对子宫内膜异位症合并不孕患者腹腔液细胞的影响。方法 分离、培养子宫内膜异位症不孕患者腹腔液细胞,采用罗氏内异方与内美通含药血清刺激6 h,荧光定量聚合酶链反应测定血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管内皮生长因子受体1(FLT-1)与血管内皮生长因子受体4(FLT-4)mRNA表达水平的变化。结果 与生理盐水组比较,罗氏内异方高剂量组TNF-α mRNA显著降低(P ＜ 0.01),高、中剂量组VEGF mRNA均显著降低(P ＜ 0.01),高、中、低剂量组FLT-1 mRNA均显著降低(P ＜ 0.05);高、中剂量组FLT-4 mRNA均显著降低(P ＜ 0.01)。结论 罗氏内异方治疗轻型子宫内膜异位症不孕症的机制可能是通过降低患者腹腔液细胞VEGF、TNF-α、FLT-1、FLT-4 mRNA的表达,改善腹腔内环境而实现的。     

复胃煎对胃癌前病变大鼠胃粘膜VEGF、COX-2表达的影响

目的：观察中药复胃煎对胃癌前病变大鼠胃粘膜血管内皮生长因子（VEGF）及环氧合酶-2（COX-2）等相关因子表达的影响。方法：建立大鼠胃癌前病变模型,高、中、低剂量中药观察组分别按复胃煎汤剂高、中、低剂量给予每日灌胃,中药对照组予中剂量汤剂每日灌胃,空白对照组和模型对照组大鼠予等体积生理盐水灌胃。采用免疫组化方法检测COX-2及vEGF在大鼠胃组织中的表达;RT-QPCR法检测大鼠胃组织COX-2及VEGFmRNA的表达。结果：高、中、低剂量中药观察组COX-2、VEGF及其mRNA的表达较模型对照组低（P〈0．05）;高剂量中药观察组vEGF及其mR—NA表达量低于中药对照组（P〈0．01）及中药低剂量组（P〈0．05）。结论：中药复胃煎能够降低胃癌前病变大鼠胃组织COX-2、VEGF及其mRNA的表达;并且与VEGF的表达存在一定量效关系。     

补肾活血方对脊髓型颈椎病动物模型VEGF及其mRNA表达的影响

目的：观察补肾活血方对脊髓型颈椎病动物模型血管内皮生长因子（VEGF）及其mRNA表达的影响,以探索补肾活血方对脊髓型颈椎病的治疗靶点。方法：采用颈椎前路置入螺钉的脊髓型颈椎病动物造模方法,将造模成功的动物随机分为中药组及对照组,中药组给予含药饲料喂养,对照组给予普通饲料喂养,分别于15、30天后,分批处死动物,留取病变部位组织作石蜡切片,采用免疫组化法及原位杂交法测定标本中VEGF及其mRNA表达情况。结果：中药组VEGF及其mRNA表达强于对照组（P〈0．05）。结论：补肾活血方可通过调节脊髓型颈椎病VEGF及其mRNA表达而达到治疗效果。     

益气消瘢法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响

目的：观察益气消瘾法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响,探讨该法方药抑制血管生成治疗子宫肌瘤的作用机制。方法：通过去势＋皮下注射苯甲酸雌二醇建立子宫肌瘤模型,并给予不同剂量益气消瘸法中药进行治疗。采用免疫组化法检测子宫组织微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平;采用RT-PCR检测子宫组织VEGFR1 mRNA、VEGFR2 mRNA表达。并对以上指标进行统计学分析。结果：与正常对照组比较,模型组豚鼠子宫肌组织MVD、VEGF、VEGFR表达显著升高（P〈0．01）;与模型组比较,中药各剂量组均有不同程度的降低,其中以高剂量组最为明显,说明益气消瘸法高剂量中药组可以显著抑制MVD、VEGF及其受体的蛋白表达。结论：益气消瘸法通过抑制血管生成进而抗肌瘤细胞增殖,这可能是该法治疗子宫肌瘤的作用机制之一。     

加味四物汤对荷骨肉瘤小鼠肿瘤VEGF及受体表达的影响

目的:探讨加味四物汤对对荷骨肉瘤小鼠肿瘤VEGF及其受体表达的影响.方法:建立KHOS成骨肉瘤原位移植模型,通过加味四物汤灌胃干预动物模型,采用RT-PCR方法定量检测移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体KDR和Flt-1的表达.结果:加味四物汤高剂量组有明显抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用(P<0.05);中、低剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用不明显(P>0.05);中药高剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用优于中、低剂量组(P<0.05).结论:加味四物汤通过抑制VEGF、KDR、Flt-1的表达控制肿瘤新生血管的生长而达到阻止恶性骨肿瘤体内生长、转移的目的,但与药物浓度相关.     

益气消癥法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响

目的：观察益气消癥法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响,探讨该法方药抑制血管生成治疗子宫肌瘤的作用机制。方法：通过去势+皮下注射苯甲酸雌二醇建立子宫肌瘤模型,并给予不同剂量益气消癥法中药进行治疗。采用免疫组化法检测子宫组织微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平;采用RT-PCR 检测子宫组织VEGFR1 mRNA、VEGFR2 mRNA 表达。并对以上指标进行统计学分析。结果：与正常对照组比较,模型组豚鼠子宫肌组织MVD、VEGF、VEGFR 表达显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,中药各剂量组均有不同程度的降低,其中以高剂量组最为明显,说明益气消癥法高剂量中药组可以显著抑制MVD、VEGF 及其受体的蛋白表达。结论：益气消癥法通过抑制血管生成进而抗肌瘤细胞增殖,这可能是该法治疗子宫肌瘤的作用机制之一。     

红花组分HSYA对人胃腺癌BGC-823移植瘤裸鼠VEGF蛋白、KDR与缺氧诱导因子表达的影响

目的:研究红花组分羟基红花黄色素A(HSYA)对人胃腺癌皮下移植瘤裸鼠血管内皮生长因子(VEGF)蛋白、含激酶插入区受体(KDR)和缺氧诱导因子(HIF-1α)mRNA与蛋白表达的影响。方法:采用BALB/C nu/nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株BGC-823于右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、对照组、HSYA高、低剂量组(0.056g/L、0.028g/L),观察抑瘤作用,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测瘤组织VEGF与HIF-1α蛋白以及血清VEGF蛋白表达;蛋白印迹(Western blotting)法测定瘤组织KDR磷酸化蛋白的表达;实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)法检测瘤组织KDR及HIF-1αmRNA表达。结果:HSYA低剂量组抑瘤明显,该组瘤组织及血清VEGF蛋白表达降低,瘤组织KDR磷酸化蛋白表达减弱,与模型组比较差异明显(P0.05,P0.01);HIF-1α蛋白表达较模型组瘤组织明显减少(P0.01)。KDR mRNA表达与模型组相比减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论:一定浓度的HSYA抑制肿瘤生长的可能机制与抑制VEGF、HIF-1α蛋白的表达,减弱KDR蛋白磷酸化及其基因表达,从而抑制内皮细胞活化阻碍肿瘤血管新生以及降低肿瘤缺氧微环境对血管生成的诱导有关。