硝酸根电极法同时测定肉制品中硝酸盐和亚硝酸盐含量

用硝酸根电极同时测定肉制品中硝酸盐和亚硝酸盐含量。以0.1mol/l硫酸钠作为总离子强度调节剂,在pH3.4±0.1,硝酸根电极在硝酸钠4.0—30μg/ml浓度范围内呈良好的能斯特应答。一次标准加入法定量。在酸性条件下,用过氧化氢氧化提取液中NO_2~-,测得NO_3~-总量,然后用差减法求得NO_2~-含量。用本法测定了13种市售肉制品中硝酸盐和亚硝酸盐含量。变异系数2.31%—9.83%,回收率95.0%—108.4%。用NO_3~-和镉柱还原法,NO_2~-和萘乙二胺比色法进行了对照,结果无显著性差异(α0.05)。     

不同时间浅低温对蛛网膜下腔出血犬脑血管痉挛的影响

目的 探讨不同时间浅低温对蛛网膜下腔出血犬脑血管痉挛的影响.方法 成年健康犬30只,雌雄不拘,体重14～20 kg,采用枕骨大孔二次注血法制备犬蛛网膜下腔出血模型.随机分为5组(n=6),人工脑脊液组(ACSF组):枕骨大孔处注入ACSF 0.5 ml/ks;蛛网膜下腔出血组(SAH组):制备蛛网膜下腔出血模型,维持直肠温度38～39℃;不同时间浅低温组(H_(1～3)组):在第2次注血后分别立即实施8、16和32 h浅低温(33.5℃),随后复温至38～39℃.于第1次注血或注入ACSF前和第2次注血或注入ACSF 5、12和19 d时行整体功能分级(OPC),并采用ELISA法和硝酸还原酶法分别测定血浆和脑脊液内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)代谢产物NO_2~-/NO_3~-的浓度,采用CT血管造影动态测量脑基底动脉直径.结果 与ACSF组比较,SAH组和H_1,2组OPC分级升高,血浆和脑脊液ET-1浓度升高,NO_2~-/NO_3~-浓度降低,基底动脉直径减小(P＜0.05),H_3组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与SAH组比较,H_2,3组OPC分级降低,血浆和脑脊液ET-1浓度降低,NO_2~-/NO_3~-浓度升高,基底动脉直径增大(P＜0.05),H_1组各时点上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与H_2组比较,H_3组血浆和脑脊液ET-1浓度降低,NO_2~-/NO_3~-浓度升高,基底动脉直径增大(P＜0.05).结论 浅低温16～32 h可缓解蛛网膜下腔出血犬脑血管痉挛,且随浅低温时间延长该作用增强,其机制可能与降低全身和脑组织ET-1水平,升高NO水平,调节脑血管收缩-舒张平衡有关.     

门脉高压鼠血浆前列环素过多产生机制的实验研究

探讨门脉压力升高和门体分流在前列环素(PGI_2)升高中的作用。方法:36只雄性SD大鼠随机分为4组:肝前型(PHPH,n=8)和肝内型门脉高压(IHPH,n=9)、端侧门腔分流(PCS,n=8)以及手术对照组(SO,n=11)。模型制备后两周:(1)测游离门脉压(FPP);(2)应用同位素微球技术研究全身及内脏血流动力学;(3)从股动脉采集血样,用放射免疫法测血浆6-酮-前列腺素F_1α(6-keto-PGF_1α)浓度。结果:心脏指数(CI)和内脏血流量(PVI)是PCS>PHPH>IHPH>SO鼠。门体分流率(PSS)是PCS>PHPH>IHPH。在PHPH、IHPH、PCS和SO鼠,血浆6-keto-PGF_1α的浓度(ng/ml)分别为6.93±2.43、5.09±2.27、2.36±1.01和1.56±0.61,前3组鼠均显著高于SO鼠(P<0.05),且PHPH鼠和IHPH鼠均显著高于PCS鼠(P<0.05)。血浆6-keto-PGF1_1α浓度与FPP值呈非常显著性正相关(r=0.67,P<0.001)。结论:在门脉高压中,PGI_2升高主要是门脉压力升高刺激其在血管内皮细胞的合成增加,而门体分流和肝功能减退起次要作用。此外,本研究结果并不支持PGI_2参与门脉高压高血流动力学的发生。     

一氧化氮在门静脉高压症发病中的作用

目的　探讨一氧化氮在门静脉高压症发病中的作用。　方法　 75例门静脉高压症患者 ,术中胃网膜静脉插管测定门静脉压力 ,检测外周动静脉和门静脉血中内毒素和NO2 -/NO3-的含量。　结果　 ( 1)门静脉高压症患者的血中内毒素和NO2 -/NO3-的水平 [( 0 2 4 9± 0 112 )Eu/ml和( 5 5 9± 2 6 2 ) μmol/L]均显著高于对照组 ,且门静脉血中水平最高。 ( 2 )门静脉高压症患者门静脉压力[( 3 5 5± 4 4 )cmH2 O]与门静脉血NO2 -/NO3-的水平呈显著正相关 (n =2 5 ,r =0 5 5 ,P <0 0 1) ,二者在术后的变化量也呈正相关 (r =0 5 7,P <0 0 5 )。 ( 3 )门静脉高压症患者白蛋白水平与NO2 -/NO3-呈负相关 (n =75 ,r=- 0 3 5 ,P <0 0 1) ,且有腹水组的NO2 -/NO3-水平 [( 72 4± 2 0 3 ) μmol/L]较无腹水组 [( 5 0 3± 2 1 0 ) μmol/L]为高。　 结论　门静脉高压症患者血中内毒素和NO的水平升高 ,后者可能参与了门静脉压力的异常升高且与肝功能损害有关。     

门静脉高压症大鼠胃肠动力变化及其机制的研究

目的　探讨肝硬变门静脉高压症大鼠胃肠动力的改变及其机制。方法　测定肝前、肝内型门静脉高压症大鼠、肝内型门静脉高压症门腔分流大鼠和正常对照鼠的胃肠肌电活动、收缩动力、血浆胃肠激素和肝功能。结果　门静脉高压症大鼠、肝内型门静脉高压症门腔分流大鼠胃肠动力指数 (MI)减小 (P <0 0 5 ) ,消化间期周期性肌电复合波时间延长 (P <0 0 5 ) ,血浆胰高糖素 (Glu)、血管活性肠肽 (VIP)、胃泌素、胃动素水平升高 (P <0 0 5 ) ,血浆白蛋白 (ALB)浓度降低 (P <0 0 5 )。血浆Glu和VIP浓度与空肠MI呈显著负相关 (r =- 0 75 9,r =- 0 6 6 4 ,P <0 0 5 ) ,血浆Glu浓度与空肠周期性肌电复合波时间呈显著正相关 (r =0 80 6 4 ,P <0 0 5 )。结论　Glu和VIP血浆浓度升高是肝硬变门静脉高压症胃肠动力减弱的重要原因。     

一氧化氮在巨噬细胞移动抑制因子抑制大鼠糖皮质激素受体活性中的作用

目的 探讨一氧化氮(NO)在巨噬细胞移动抑制因子(MIF)抑制大鼠糖皮质激素受体活性中的作用.方法 实验Ⅰ原代培养新生SD大鼠肝细胞,随机分为3组(n=48):对照组(C组)、重组鼠MIF组(rMIF组)及rMIF+一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)组,分别于1640培养液、含rMIF20 ng/ml的1640培养液、含rMIF 20ng/ml及L-NAME 100 μmol/L的1640培养液中孵育3 h,随后采用配体结合实验计算大鼠肝细胞糖皮质激素受体的平衡解离常数(Kd),糖皮质激素受体活性与Kd值呈反比.实验Ⅱ健康成年雄性SD大鼠32只,250～300 g,随机分为4组(n=8),对照组(C组)经右侧股静脉注射生理盐水1 ml;rMIF低剂量组(rMIF-L组)、rMIF中剂量组(rMIF-M组)及rMIF高剂量组(rMIF-H组)分别经右侧股静脉注射rMIF 50、100、200 ng(用生理盐水稀释至1 ml).于给药前即刻(T_0)、给药后5min(T_1)、3 h(T_2)、6 h(T_3)、12 h(T_4)及24 h(T_5)时测定血清NO_2~-/NO_3~-水平.结果 实验Ⅰ与C组比较,rMIF组和rMIF+L-NAME组Kd值增大(P＜0.05);rMIF组和rMIF+L-NAME组Kd值比较差异无统计学意义(P＞0.05).实验Ⅱ T_0～5时4组大鼠血清NO_2~-/NO_3~-水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MIF抑制大鼠肝细胞糖皮质激素受体活性的机制与NO无关.     

糖尿病大鼠颈动脉窦隔离灌注异丙酚对血浆内皮素及一氧化氮水平的影响

目的 探讨糖尿病大鼠颈动脉窦隔离灌注异丙酚对血浆内皮素(ET)及一氧化氮(NO)水平的影响.方法 健康清洁级成年雄性Wistar大鼠,体重180 ～ 220 g,采用腹腔注射链脲佐菌素30mg/kg的方法制备糖尿病模型.取糖尿病模型制备成功的大鼠36只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=12):对照组(DC组)、低浓度异丙酚组(DP1组)和高浓度异丙酚组(DP2组).另取非糖尿病大鼠36只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=12):对照组(NC组)、低浓度异丙酚组(NP组)和高浓度异丙酚组(NP2组).颈动脉窦隔离灌流K-H液(对照组)、含50 μmol/L异丙酚的K-H液(低浓度异丙酚组)和含100 μmol/L异丙酚的K-H液(高浓度异丙酚组),30 min后取股动脉血样,测定血浆ET和NO浓度.结果 与DC组比较,DP1组和DP2组血浆ET浓度降低,NO浓度升高(P＜0.05);与DP1组比较,DP2组血浆ET浓度降低,NO浓度升高,NP1组血浆ET浓度升高,NO浓度降低(P＜0.05);与DP2组比较,NP2组血浆ET浓度升高,NO浓度降低(P＜0.05).结论 异丙酚可通过对颈动脉窦压力感受器的局部作用降低糖尿病和非糖尿病大鼠血浆ET水平,升高NO水平,且对糖尿病大鼠的效应更强.     

体外循环时血浆一氧化氮水平的动态变化

本研究通过观察体外循环(CPB)时血浆一氧化氮(NO)代谢产物NO_2~-/NO_3~-水平的动态变化,以探讨NO在CPB时心肌缺血再灌注损伤中的作用。资料及方法先天性心脏病纠治术和风湿性心脏病瓣膜置换术16例,年龄20～64岁,体重38～65kg,ASAⅡ～Ⅲ级,主动脉阻断时间40～140分钟。用安定、芬太尼、依托米酯、潘库溴胺诱导后插管,接Drager麻醉机人工通气,维持用安氟醚、潘库溴胺、芬太尼。术中监测心电图、血压、CVP、鼻温、血气等。采用德国产stockert人工心和西京90型鼓泡式氧合器进行CPB。分别于升主动脉阻断前、阻断后30分钟及开放后30分钟自颈内静脉取血。测定NO_2~-/NO_3~-水平(酶法)及LDH活性(酶动力法),并采用配对t检验及相关回归分析。结果血浆NO_2~-/NO_3~-和LDH在阻断后30分     

甘露醇对肝叶切除术患者红细胞醛糖还原酶、血浆一氧化氮和丙二醛水平的影响

目的 探讨甘露醇对肝叶切除术患者红细胞醛糖还原酶(AR)活性、血浆一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)浓度的影响.方法 择期行肝叶切除术患者40例,性别不限,年龄24～60岁,体重50～ 68 kg,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=20):生理盐水对照组(C组)和甘露醇组(M组).2组均采用硬膜外复合全麻.术中阻断肝门即刻开始静脉输注20％甘露醇1.5 ml/kg,经30 min输完,C组给予等容量生理盐水.分别于麻醉前(基础状态)、肝门开放前即刻、术毕、术后1d、术后3 d(T0-4)时采集静脉血样,测定红细胞AR活性、血浆NO和MDA浓度.结果 与C组比较,M组T1.2时AR活性及血浆MDA浓度降低,血浆NO浓度升高(P＜0.05).结论 甘露醇可降低肝叶切除术患者肝缺血再灌注损伤,其机制与清除氧自由基,抑制脂质过氧化反应有关.     

L-精氨酸对饥饿大鼠内毒素移位和肠黏膜分泌性免疫球蛋白表达的影响

目的 探讨L-精氨酸对饥饿大鼠内毒素移位和肠黏膜分泌性免疫球蛋白(s-IgA)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠90只,3月龄,体重230～270 g,随机分为对照组(C组,n=10)、饥饿组(S组,n=40)和L-精氨酸组(L-Arg组,n=40).C组正常饮食,S组和L-Arg组无饲料供应,自由饮水.L-Arg组以L-精氨酸1.0 g·kg-1·d-1(溶入2 ml蒸馏水中)溶液灌胃.S组和L-Arg组分别于饥饿第3天(T1)、第5天(T2)、第7天(T3)、第9天(T4)随机抽取10只大鼠取门静脉血及小肠组织.测定血浆微量内毒素浓度,免疫组化法检测肠黏膜组织s-IgA的表达.结果 与C组相比,S组各时点血浆内毒素浓度升高,小肠黏膜上皮细胞s-IgA表达下调(P＜0.05),L-Arg组各时点血浆内毒素浓度均升高,T1时小肠黏膜上皮细胞s-IgA表达上调,T3和T4时表达下调(P＜0.05);与S组相比,L-Arg组各相应时点血浆内毒素浓度降低,小肠黏膜上皮细胞s-IgA表达上调(P＜0.05).结论 L-精氨酸可保护饥饿大鼠肠黏膜屏障功能,其机制可能与降低内毒素移位,上调肠黏膜上皮细胞s-IgA表达有关.     

Hepatic and mesenteric nitric oxide synthase expression in a rat model of CCl(4)-induced cirrhosis

BACKGROUND: Cirrhosis and portal hypertension are frequently linked with changes in expression of nitric oxide synthase (NOS) and/or endotoxaemia. AIMS: This study tested the following hypothesis: that inducible (i)NOS activity is increased within the visceral circulation concurrently with decreased constitutive (c)NOS activity in the hepatic sinusoids and that the concentration of NO metabolites in portal blood is consequent on endotoxin concentration. MATERIALS AND METHODS: Plasma concentrations of (nitrite + nitrate) and endotoxin, together with hepatic and mesenteric NOS activity (arginine/citrulline method) and protein expression (histochemistry) plus portal and arterial blood pressure, were determined in rats made severely cirrhotic by intragastric CCl(4) over 14 weeks (n = 6) compared with age-matched controls (n = 5). The concentrations of [nitrite + nitrate] and endotoxin in portal plasma were also directly compared in rats made cirrhotic for a period of 8-14 weeks (n = 10). RESULTS: In rats with advanced cirrhosis, arterial [nitrite + nitrate] was 93.1 (22.4) micromol/L (mean, SEM) compared with 29.1 (6.1) micromol/L in controls (P < 0.05); portal plasma [NO(2)(-) + NO3(-)] was 127.1 (27.2) compared with 24.7 (4.7) micromol/L in controls (P < 0.05). Cirrhotic rats had higher endotoxin concentration in plasma compared with controls (systemic: 85.0 (24.5) versus 1.7 (0.2) EU/ml, P < 0.05; portal: 180.3 (47.9) versus 1.7 (0.2) EU/ml, P < 0.05). The same severely cirrhotic rats possessed decreased cNOS activity in liver (2.95 [0.40] versus 5.29 [0.85] pmol/min/g; P < 0.05) and increased iNOS activity in mesentery (4.83 [1.23] versus 1.47 [0.15] pmol/min/g; P < 0.05) compared with controls. Histochemical observations confirmed these findings. Rats given CCl(4) for a period of 8-14 weeks possessed high endotoxin concentration in portal plasma, with correspondingly high [nitrite + nitrate] (r(2) = 0.954; P < 0.001). CONCLUSIONS: An endotoxin-induced increase in mesenteric iNOS activity and a decrease in hepatic cNOS activity may account for, respectively, the hyperdynamic visceral circulation and the increased intrahepatic resistance of cirrhosis.     

肝硬化门脉高压鼠血浆内皮素变化

目的研究门脉高压时血浆内皮素（ＥＴ）变化的可能机制。方法测定ＳＤ、ＩＨＰＨ、ＰＣＳ组大鼠平均动脉压（ＭＡＰ）、门静脉压（ＦＰＰ）以及腹主动脉、门静脉、肝静脉血中内皮素（ＥＴ）和一氧化氮（ＮＤ）含量。结果与ＳＯ鼠相比，ＰＣＳ鼠和ＩＨＰＨ鼠血浆内皮素水平明显下降（Ｐ＜０．０５），但ＰＣＳ鼠与ＩＨＰＨ鼠间的差异无显著性意义。血浆ＥＴ水平与ＮＯ水平呈显著负相关（ｒ＝－０．５７２３，ｎ＝２９，Ｐ＜０．０１）。结论肝硬化门静脉高压大鼠血中ＥＴ浓度下降主要是肝内血管内皮细胞和肝窦内皮细胞减少，使ＥＴ合成减少所致。此外，ＮＯ升高可能抑制ＥＴ产生，这也是导致ＥＴ减少的原因。【关键词】##4大鼠;;肝硬化;;门静脉高压症;;内皮素;;一氧化氮     

内毒素引起阻塞性黄疸大鼠肾功能障碍的机制

目的 探讨阻塞性黄疸(obstructive jaundice,OJ)时内毒素引起肾功能障碍的机制.方法 SD大鼠60只,胆总管结扎后,分5 d(B1),10 d(B2),15 d(B3)三组,每组各10只,同时建立相应对照组(A1,A2,A3),另30只胆总管结扎后分3组(SHUD,LAC,NS),每组各10只,分别用2 ml舒胆合剂、乳果糖液、生理盐水灌胃,连用9 d.观察内毒素、血和肾组织中内皮素(endothelin,ET)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性及肝、肾功能的变化.结果 血内毒素与血、肾组织ET含量,ET/NO比值呈显著正相关(P＜0.05,r=0.630,0.438,0.496,0.453),与肌肝清除率(creatinine clearance,Ccr)和肾皮质血流量(renal cortical blood flow,BCBF)呈显著负相关(P＜0.05,r=-0.600,-0.410).血、肾组织ET/NO比值与Ccr,RCBF呈显著负相关(P＜0.05,r=-0.449,-0.558,-0.626,-0.731).血和肾组织内NO水平与内毒素水平呈负相关(P＜0.05,r=-0.518,-0.441),与Ccr、RCBF呈正相关(P＜0.05,r=0.422,0.496,0.400,0.659).SHUD组与LAC血内毒素、ET水平组明显降低,血和肾组织NO,NOS活性以及Ccr,RCBF较NS组明显升高.结论 OJ时内毒素可通过刺激ET的释放,提高ET/NO比值,使肾内缩血管因子与扩血管因子比例失调而损伤肾功能.     

术前高压氧治疗对肝硬化门静脉高压症病人的影响

目的 研究术前高压氧（HBO）治疗对肝硬化门静脉高压病人的作用,并探讨其机理。方法 选取肝硬化门静脉高压病人12例接受HBO治疗。观察肝功指标、内毒素和NO水平、肠粘膜通透性、网状内皮系统功能及血流动力学指标在HBO前后变化;另设正常对照组8例,比较两组间肠粘膜通透性、网状内皮系统功能的差异。结果 （1）与正常秩序正常组相比,肝硬化组的肠粘膜通透性增高,而网状内皮系统吞噬功能降低,且内毒素与肠粘膜通透性呈正相关（r＝0．504,P＝0．012）。（2）HBO治疗后,病人的肝功改善;网状内皮系统功能恢复,内毒素、NO较前下降;脾脏厚度、门静脉宽度及门静脉血流量减少。（3）统计分析发现NO与内毒素、脾脏厚度及门静脉血流速度呈正相关（r1＝0．597,P1＝0．000;r2＝0．472,P2＝0．027;r3＝0．463,P3＝0．030）,与门静脉血流速度呈负相关（r＝－0．443,P＝0．030）。结论 HBO能改善肝硬化病人的肝脏功能,改善门静脉高压和高动力循环状态。其作用机理可能与改善肝脏供氧,增加网状内皮系统功能,减少血中内毒素及NO有关。     

肝硬化门脉高压患者围术期血浆一氧化氮和内皮素浓度的变化

目的 观察肝硬化门脉高压患者围术期一氧化氮（ＮＯ）和内皮素（ＥＴ）水平的动态变化。方法 １８例肝炎后肝硬化门脉高压症患者,择期行门腔静脉分流术,分别于麻醉前,麻醉后,术毕及术后第３天抽取静脉血,应用硝酸盐还原酶法及放免法分别测定血浆ＮＯ及ＥＴ的浓度。另选２０例健康人,其血浆ＮＯ及ＥＴ浓度与麻醉前门脉高压症患者血浆ＮＯ及ＥＴ麻醉前浓度（基础值）作比较。结果 与健康人水平相经,肝硬化门脉高压患者血浆Ｎ     

Portal triad occlusion induces endotoxin tolerance: role of portal congestion

BACKGROUND: Portal triad occlusion (PTO) causes portal congestion and damages the intestinal mucosa, which is associated with portal endotoxemia. However, administration of a sublethal dose of endotoxin results in resistance to its toxic activities. We tested the hypothesis that portal congestion due to PTO induces endotoxin tolerance. MATERIALS AND METHODS: Rats were subjected to PTO for 15 min. In Group 1, male rats underwent laparotomy and, 48 h after the surgery, a lethal dose of Escherichia coli lipopolysaccharide was administered. In Group 2, rats were subjected to PTO for 15 min. Then a lethal dose of LPS was administered 48 h after surgery. Group 3 was treated the same as Group 2, except that PTO was performed with portosystemic shunt. Group 4 was also treated same as Group 2, except that rats received polymixin B and neomycin by gavage to eliminate intestinal luminal bacteria before PTO. Survival was examined after the administration of a lethal dose of LPS. Changes in plasma levels of cytokine are also measured after the administration of LPS. The portal endotoxin level in each group after PTO was measured. RESULTS: On survival test, only rats in Group 2 and Group 4 showed significantly higher survival rates. The portal endotoxin level was significantly elevated only in Group 2. The elevation of plasma cytokine levels (IL-6, TNF-alpha) and NO production (NO(2)(-)/NO(3)(-)) in Groups 2 and 4 were inhibited compare to those in Groups 1 and 3. CONCLUSIONS: PTO induced LPS tolerance possibly due to portal congestion and subsequent visceral congestion.     

加味大柴胡汤加用L-精氨酸对阻黄大鼠血浆内毒素的影响

目的　探讨L 精氨酸、加味大柴胡汤及两者合用对保护阻塞性黄疸大鼠的肝功能、抑制脂质过氧化损伤、缓解内毒素血症的作用。方法　制作急性阻塞性黄疸大鼠模型 ,分为 7、14及 2 1d 3个时段 ,每个时段分为 5组 ,每组 6只大鼠。在各时相点 ,检测内毒素和NO2 -/NO3 -的含量。结果　门静脉血浆内毒素的含量 :胆管结扎 7d后 ,门静脉血浆内毒素含量BDL NS组明显高于其他组 (P <0 .0 1)。而BDL L Arg 中药组与BDL L Arg及BDL 中药组间比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。胆管结扎 14d ,门静脉血浆内毒素含量BDL L Arg 中药组与BDL L Arg及BDL 中药组比较差异也有显著性 (P <0 .0 5 )。但在 2 1d时段门静脉内毒素含量BDL L Arg组与BDL NS组比差异无显著性 ,而BDL 中药组及BDL L Arg 中药组门静脉内毒素含量较上述两组差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　在阻塞性黄疸发病早、中期 ,采用加味大柴胡汤加L Arg治疗对保护肝功能与缓解内毒素血症作用较佳