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在制备超薄切片之前,有些生物样品需要制作半薄切片,在光镜下确定所要观察的结构,并在环氧树脂包埋块上对此结构进行准确的定位,避免盲目的超薄切片,从而提高电镜的观察效率。用环氧树脂包埋的生物样品,如果采用适宜的染色方法对半薄切片进行染色,在光镜下观察,可获得比石蜡切片保存的更多的结构 相似文献
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乔从进 《山西医科大学学报》1991,(4)
在制作电镜的超薄切片前,可用超薄切片机先切数片1μm~2μm 厚的半薄切片进行染色,在光镜下观察以确定方向和部位,同时对特殊细胞观察的筛选更为需要。从而提高所要观察以超薄切片上组织和细胞的准确性。并且半薄切片用甲苯胺 相似文献
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经石蜡包埋的组织,用甲苯胺蓝染色显示肥大细胞的方法已得到了广泛的应用。作者用电镜制样过程中的树脂包埋块,行半薄切片,用甲苯胺蓝染色,光镜观察也能显示肥大细胞的特殊形态。另用石蜡切片,甲苯胺蓝染色光镜观察以及电镜观察证实了树脂包埋、半薄切片的观察结果。 材料及方法 取自外科手术切除的组织, 相似文献
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为了避免超薄切片的盲目性,对于一些较复杂的组织,在进行超薄切片之前,最好做半薄切片,经染色、光镜检查,可精确地选择预检部位,提高观察效率。临床外检和穿刺得到的标本,通常很小,又做石 蜡又做电镜,不仅烦锁,有时也不允许。一般的半薄切片染色,只能用于定位,并不能用于诊断,而且染色时间长,要经过几种试剂和加热等处理,操作复杂,效果并不令人满意。我们在我校病理教研室工作的 相似文献
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半薄切片制作技术的几点改进 总被引:2,自引:0,他引:2
徐敏 《中国煤炭工业医学杂志》2001,4(5):390
环氧树脂半薄切片在形态学研究中应用较多,是介于超微结构观察和常规光镜观察之间的制样手段,也是电镜超薄切片定位的必要手段。由于其厚度比石蜡切片薄,清晰度、分辨率均优于石蜡切片,已广泛应用于光电镜定位、对照观察,甚至可代替石蜡切片。但在半薄切片制作技术中还存在一些尚待改进的问题。如切片染色,以往常用的方法有甲苯胺蓝法、H.E法等,前者一般采用水溶液,通常不易着色;后者步骤较复杂,耗时较长,且难以着色。我们对甲苯胺蓝法(单色染色)及Sata变法(多色染色)做了一些改进,得到了较为满意的效果。困扰半薄切片的另一问题是脱片,常致制样失败。以往大多采用甘油蛋白作贴片剂,效果不甚理想。也曾采用涂布树脂包埋剂防止脱片,但操作较麻烦。我们从免疫细胞化学中受到启示,改用明胶-硫酸铬钾液作为半薄切片粘贴剂。方法简便易行,效果也好,在大量的半薄切片染色中,极少发现脱片。…… 相似文献
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半薄切片(厚切片)有助于超薄切片的定位,以及光镜与电镜观察的密切结合,是应用电镜技术进行生物医学研究的手段之一。半薄切片制片过程中,在载玻片上展片与贴片及切片染色,是该技术的重要步骤。按传统的方法,展片时用酒精灯火焰加热,温度不易控制,且成批制片费时。贴片则是在玻片上涂蛋白甘油,长期保存易生霉,或置50~70℃烤箱中数小时,因空气导热慢,耗时较多,而染色通过火焰加热,易沸腾造成过染或沉淀。因此,我室用自动恒温电熨斗试制了一种半薄切片调温烤片装置(易制作、成 相似文献
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近年来,在临床诊断和科研工作中,在电镜超薄切片技术前制作半薄切片已成为常规。但树脂包埋组织块的半薄切片用HE染液染色时常难使组织着色,一般认为这是由于染液不易透过交联的疏水树脂所致。因而染色前需脱去树脂包埋剂,这常易损伤组织。目前国内外报道的很多染色方法中,则多用软化剂将色理剂软化后再进行染色,以使水溶性染液能渗入组织切片内,达到组织着色的目的,但有的程 相似文献
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[目的]介绍石蜡半薄切片转制透射电镜的制样方法。[方法]对石蜡半薄切片进行脱蜡、水化、锇酸固定、缓冲液漂洗、梯度酒精脱水、环氧树脂包埋、超薄切片机切片、透射电镜下观察。[结果]组织细胞的超微结构保存完好,足以满足病理诊断之用。[结论]用石蜡半薄切片转制电镜比用石蜡组织块转制电镜方法简单,快速易行。 相似文献
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肖同浩 《华南国防医学杂志》1988,(4)
近年来,由于半薄切片机的问世,为电镜工作者制作半薄切片进行定向选择,克服超薄切片的盲目性和电镜视野的局限性,创造了良好条件。但是,国内目前所使用的半薄切片机仍靠进口,价格昂贵。而定位部分的照明光源又不能达到满意效果,对定向选择带来一定困难,操作麻烦,花时间多。两年来,我室利用超薄切片机制作半薄切片,对心肌、肾等组织进行定向选择,省时省力,并获得了满意的效果。现将具体操作步骤介绍如下: 相似文献
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电镜技术在病理学诊断中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
为摸索出适合临床超微结构病理诊断的电镜技术 ,更好地发挥其对疾病诊断的作用 ,现根据多年工作积累并结合临床实际 ,介绍本实验室在疾病诊断中电镜技术的应用情况。1 几种常用电镜技术1.1 常规电镜技术 标本经固定后用 microslicer切片以增加样品量 ,取其中一部分 (其余切片继续保存 )做快速常规包埋、定位及超薄切片 ,用透射电镜观察 ,整个过程 2~ 3d。有些特殊结构在器官组织中分布很少 ,而对于疾病诊断又很有意义。本室的方法是先切大量半薄切片 ,在光镜下先找到这些特殊结构 (必要时可用美蓝染色 ) ,然后再做原位包埋、超薄切片 ,… 相似文献
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半薄切片(semithin section)又称厚切片(thick section).是相对于电镜的超薄切片(Ultrathin section)而讲的。半薄切片厚度是0.5~2μ,介于光镜石蜡切片(7μ)和电镜超薄切片(0.07μ)之间。半薄切片的制法是按电镜常规制备的树脂包埋组织块,在超薄切片机或经 相似文献
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在医学生物学电镜技术中,因树脂包埋块的非水溶性质,其半薄切片染色仍是一十分困难而重要的环节。迄为今止,仅单色染色解决较好,多色染色或特殊染色仍较困难。我们以本室常规的 Giemsa 单色染色为对照,选用 Weigert 铁苏木素—伊红、亚甲兰—碱性复红等多色染色法,对国产环氧树脂618包埋的各种组织进行了半薄切片染色,获得了较为满意的结果。我们体会到:Giemsa 染色简便、快速。各组织成分虽仅兰色即淡兰或深兰反应,但组织结构仍较清晰分明。本法对一般修块作选区定位基本满足要求,作为常规染色是可取的。Weigert 铁苏木素—伊红染色核质分明,类似石腊切片 HE 染色效果。本法的特点是:染色前须用饱和氢氧化钾脱树脂618和用双氧水氧化组织;室温下即能染色;酒精分化时间(1—2分钟)和伊红染色时间(5—10分钟),均较树脂812切片或石腊切片 HE 染色时间为长。本法虽较 Giemsa 染色法繁琐,但细微结构较 Giemsa 法为清,因此,对此需进一步研究,摄片与电镜照片对照的半薄片,拟用此法为宜。对于结缔组织较多、成份较复杂的切片,用亚甲兰—碱性复红浸染法(Jha 法改良法)染色,能获得较满意的对比染色:结缔组织为红或深红色,余为兰或淡兰色。本法也具快速、简便的特点。 相似文献
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在电镜半薄切片标本上可以观察到细胞各部分的整体结构,也是电镜细胞化学研究手段之一。现将我们在制做及观察半薄切片的体会简介如下: 相似文献
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魏泓 《实验动物与比较医学》1992,(2)
大鼠自发性乳腺肿瘤的国内报道较少,深入系统的病理形态学研究不足。作者对收集的28例Wistar系大鼠自发性乳腺肿瘤进行了病理形态学观察,以期为实验动物肿瘤病理学积累资料。材料与方法一、取材将具有胸、腹及腹股沟部皮下肿块的32只Wistar系大鼠处死,对肿块进行大体形态观察、称重及测量大小,采取疑为肿瘤的肿块,分别以10%甲醛及2%戊二醛固定。二、组织学观察将采取的肿块作石蜡切片,HE染色,光镜观察。三、超微结构观察将由组织学观察确定为乳腺肿瘤的材料经半薄切片、次甲基兰-天青Ⅱ染色定位后,作超薄切片,铅铀染色,H-300型电镜观察。 相似文献
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石蜡组织块透射电镜标本快速包埋法 总被引:2,自引:1,他引:1
作者在石蜡组织块作成的电镜切片上,选择需作电镜观察的组织部位,从石蜡块上取下该组织部位,用1%四氧化锇-二甲苯混合液脱蜡再固定,环氧树脂618快速包埋,按电镜常规切片、染色,作成电镜观察用的切片,经电镜观察,效果较为满意,可达到电镜病理诊断要求。本法步骤简单易行,省时,全过程仅需两个半小时。 相似文献
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免疫电镜标本制备方法有:组织块免疫染色法,冰冻切片免疫染色法,超薄冰冻切片法。其中以冰冻切片法最常用,免疫电镜成功与否受很多因素影响,标本块的定位十分重要。国外多用半簿切片定位,即先切一、二张0.5~2μ的大面积切片,在光学显微镜观察,找出免疫酶反应部位。然后将标本与切片对照,进行修块,再制超薄切片。最近我们开展对免疫电镜研究,发现用上法对冰冻切片免疫染色的电镜标本定位不 相似文献