苦参碱对人胆管癌细胞QBC939增殖和凋亡的影响

苦参碱作用广泛，具有抗病毒、抗感染、平喘、增强机体免疫力、升高白细胞、保肝等作用。近年来，其抑制肿瘤细胞生长的作用已经用于抗白血病的治疗,但在实体瘤的研究很少。本研究旨在探讨苦参碱对胆管癌细胞的作用及其机制。     

蟾毒灵诱导肝癌细胞凋亡机制的研究及意义

正肝癌90%为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC),为常见恶性肿瘤之一,每年全世界大约增加750,000名新的肝癌患者,有600,000患者死于肝癌,死亡率位居恶性肿瘤第二位,严重威胁人类的健康。每年新发肝癌病例中55%发生于中国,我国肝癌死亡率位居各种癌症死亡率的第2位,仅次于肺癌[1-2]。肝癌的治疗主要包括外科手术、消融、放射和药物治疗等,但肝癌患者能够手术切除不足30%,且     

1,25二羟维生素D3对胆管癌细胞系QBC939增殖和凋亡的影响

目的 探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2 D3]对胆管癌细胞系QBC939的体外增殖及凋亡的影响.方法 将不同浓度的1,25(OH)2 D3与胆管癌细胞系QBC939共同培养,采用MTT法测定细胞增殖能力、显微镜观察细胞形态学的改变、流式细胞仪检测细胞周期与凋亡、免疫细胞化学观察bcl-2的表达.结果 0.1～0.5μmol/L的1,25(OH)2 D3对胆管癌细胞QBC939有抑制作用,呈剂量依赖性.经1,25(OH)2 D3作用72h后细胞G1期比例升高,S期比例下降,其中0.5μmol/L组细胞G1期由(50.3±1.0)%上升至(65.5±3.2)%,S期由(39.4±0.5)%下降至(23.6±0.7)%;并且可诱导细胞产生凋亡,0.5μmol/L组作用后细胞凋亡率由0.5%上升至24.6%;bcl-2的表达下调.结论 1,25(OH)2 D3能抑制胆管癌细胞系QBC939增殖并诱导细胞凋亡,其引起凋亡的机制可能与下调bcl-2的表达相关.     

尼美舒利对体外培养人胆管癌细胞QBC939增殖的抑制作用

近年来研究表明,环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）抑制剂具有抑制结肠癌、胃癌、肝癌等癌细胞增殖的作用.我们采用选择性COX-2抑制剂尼美舒利作用于胆管癌QBC939细胞,观察尼美舒利对胆管癌细胞的影响.……     

蟾毒灵对裸鼠结肠癌原位移植瘤凋亡基因Caspase-3表达的影响

目的:探讨蟾毒灵治疗裸鼠结肠癌原位移植瘤的作用及机制。方法 :应用不同剂量蟾毒灵(0.5、1.0、1.5 mg/kg)处理人结肠癌细胞株HCT-116建立的裸鼠原位移植瘤模型,分别用生理盐水(NS)(0.2 mL/只)、5-FU(25 mg/kg)做阴性(NS组)和阳性对照(5-FU组),测量移植瘤的体积,观察蟾毒灵对移植瘤的肿瘤抑制率、裸鼠生存期的影响;HE染色观察移植瘤的坏死程度;TUNEL标记法检测肿瘤细胞的凋亡指数;荧光定量PCR方法检测基因Caspase-3 mRNA的表达,免疫组化法和Western印迹法检测Caspase-3蛋白的表达。结果:蟾毒灵各剂量组和5-FU组裸鼠原位移植瘤体积明显小于NS组(P<0.05);蟾毒灵各组移植瘤的凋亡指数与NS组相比明显增加(P<0.05)。结论:蟾毒灵能够抑制裸鼠人结肠癌原位移植瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡,其机制可能与上调基因Caspase-3表达有关。     

蟾毒灵抗小鼠原位移植性肝癌整体药效学研究

目的　探讨蟾毒灵对小鼠原位移植性肝癌的抗肿瘤作用。方法　建立肝原位移植瘤模型。随机分为 5组 ,每组 15只 ,蟾毒灵 3组分别给予 1.5、1.0、0 .5mg/kg体重 ,腹腔注射 ;生理盐水 (NS)组给予等体积的生理盐水 ,用法同蟾毒灵组 ;阿霉素 (ADM )组按 8mg/kg体重给药。用药后第 11天每组分别处死 10只荷瘤鼠 ,测量肿瘤大小 ,取瘤组织行病理学检查和瘤细胞超微结构观察。剩余各组观察带瘤生存期。结果　蟾毒灵组肿瘤大小均较NS组明显缩小 (P <0 .0 1) ;中、大剂量的蟾毒灵组带瘤生存期较NS组明显延长 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。大、中剂量的蟾毒灵瘤组织以中重度坏死为主 ,小剂量以轻中度坏死为主。电镜下大、中剂量蟾毒灵组可见肿瘤细胞凋亡征象。结论　蟾毒灵对小鼠原位移植性肝癌有显著的抗肿瘤作用 ,诱导肿瘤细胞凋亡可能是蟾毒灵的抗肿瘤机理之一。     

华蟾素抑制肾癌细胞786-O增殖及促凋亡作用研究

目的研究华蟾素(cinobufotalin)对人肾癌细胞786-O增殖的抑制作用及凋亡的促进作用,并对其作用机制进行探讨。方法将体外培养的肾癌细胞786-O分为对照组、1 mg/mL华蟾素组、10 mg/mL华蟾素组、100 mg/mL华蟾素组,分别给予正常培养液、1 mg/mL华蟾素、10 mg/mL华蟾素、100 mg/mL华蟾素处理,观察并计算细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用Hoechst-PI核染色法观察细胞核凋亡情况,采用Western blot法检测Survivin蛋白表达。结果华蟾素对肾癌细胞786-O增殖率的抑制作用随浓度的升高逐渐增强,且呈时间依赖性;流式细胞术及Hoechst-PI核染色法的检测结果表明,随着华蟾素作用浓度的递增,肾癌细胞786-O凋亡率呈剂量依赖性递增;Western blot结果显示,华蟾素抑制肾癌细胞786-O中Survivin蛋白的表达。结论华蟾素可通过降低肾癌细胞786-O中Survivin蛋白的表达,起到抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的作用。     

异阿魏酸抑制人肾癌细胞A-498增殖和诱导凋亡的机制研究

目的:探究异阿魏酸(isoferulic acid,IFA)抑制人肾癌细胞A-498增殖,诱导细胞凋亡的作用机制.方法:本研究通过克隆形成实验和CCK-8增殖检测实验考察IFA对人肾癌细胞A-498增殖能力的影响;用An-nexin V-FITC/PI双染色法检测IFA对A-498细胞凋亡的影响;用免疫印迹法检测IFA...     

GABA对胆管癌细胞株QBC939增殖及凋亡的影响

目的观察γ-氨基丁酸(GABA)对胆管癌细胞QBC939增殖及凋亡的影响。方法采用MTT比色法观察GABA对人系胆管癌细胞QBC939增殖的作用,流式细胞术检测GABA对胆管癌细胞QBC939凋亡及其细胞周期的影响,放射免疫分析法检测cAMP含量。结果GABA抑制胆管癌细胞的增殖,呈剂量依赖性,流式细胞仪检测结果显示,随药物浓度增加,细胞凋亡率显著增加(4.8%增至28.03%,P<0.05),同时促进胆管癌细胞内cAMP含量的增加。结论GABA抑制胆管癌细胞QBC939增殖,诱导细胞凋亡,可能机制是通过受体后信息介导的。     

胚胎发育不同时期胆总管壁上皮细胞凋亡与增殖

目的: 研究胚胎发育不同时期胆总管壁上皮细胞凋亡与增殖情况. 方法: 取不同胎龄人工流产胎儿胆总管标本各5例均经光镜下观察病理变化,用免疫组织化学法检测细胞凋亡相关指标bcl-2、box及细胞增殖指标PCNA表达情况,用TUNEL法检测细胞凋亡情况. 结果: 胎儿胆管上皮组织完整,多为柱状上皮细胞,可见少量平滑肌细胞分布于纤维组织层中,随胎龄增长纤维层增厚,无明显炎症反应.胚胎发育的6个月、7个月、8个月、9个月及10个月胆总管上皮均存在细胞凋亡与增殖,6个月胎儿胆总管上皮细胞凋亡率、增殖指教及BAX的阳性率最高,而bcl-2的阳性率最低,随胎龄的增加胆总管上皮细胞凋亡率、增殖指数及BAX的阳性率逐渐降低,bcl-2的阳性率随胎龄的增加逐渐升高,胆总管上皮细胞凋亡率、增殖指数在各月份之间差异有显著性(P<0.05). 结论: 细胞凋亡与增殖的动态平衡在正常胆管发育过程中起着重要作用.     

M3受体对胆管癌细胞增殖凋亡的影响

目的研究毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3在胆管癌细胞系RBE中的表达,并探讨其表达对胆管癌细胞增殖及凋亡的影响。方法应用Western blotting检测RBE细胞中M3受体蛋白的表达;应用CCK-8法及流式细胞术分别检测M3受体激动剂及阻滞剂对RBE细胞增殖与凋亡的影响。结果匹罗卡品作用下胆管癌RBE细胞中M3蛋白的表达明显增加,且成浓度依赖性(P0.05);匹罗卡品作用下胆管癌RBE细胞被阻滞于G1期,且凋亡率明显增加(P0.05);以上作用可被M3受体阻滞剂阿托品所抑制。结论毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3可抑制胆管癌细胞的增殖,并可以影响其DNA复制,促进其细胞凋亡。     

内皮抑素质粒联合阿霉素对人脑胶质肉瘤GL15细胞株增殖和凋亡的影响

目的 探讨内皮抑素(ES)以及ES和阿霉素联合应用对人脑胶质肉瘤细胞株GL15增殖和凋亡的影响.方法 通过质粒转染的方法,运用MTT法和流式细胞仪检测了ES以及ES和阿霉素联合应用对GL15细胞株增殖和凋亡的影响.结果 MTT法检测表明阿霉素对转染pcDNA3.1 ES的GL15细胞的生长抑制作用明显增强,细胞增殖明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测表明,转染pcDNA3.1 ES后,G0/G1期细胞明显增加(P<0.05),S期细胞明显减少(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01);联合阿霉素治疗后,上述差异更加显著(P<0.01).结论 ES联合ADM可明显抑制人脑胶质肉瘤GL15细胞株的生长,二者联用可以产生协同抗瘤作用.     

姜黄素抑制肾癌ACHN细胞增殖及促凋亡的实验研究

目的观察姜黄素对人肾癌ACHN细胞株增殖及细胞凋亡的影响,探讨姜黄素诱导ACHN细胞株凋亡的作用机制。方法不同浓度姜黄素作用人肾癌ACHN细胞24 h后,应用MTT比色法检测姜黄素对人肾癌ACHN细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测姜黄素诱导细胞的凋亡率;RT-PCR检测姜黄素对ACHN细胞Bcl-2、Bax、NF-κBP65 mRNA表达的影响;Western blot方法检测其对细胞Bcl-2、Bax、NF-κBP65I、κB蛋白表达的影响。结果姜黄素对人肾癌ACHN细胞有明显的抑制作用,可引起细胞凋亡,并且存在剂量和时间依赖;不同浓度姜黄素作用细胞24 h后,Bcl-2、NF-κBP65 mRNA水平下降,Bax mRNA水平升高(P0.05),Bcl-2、NF-κBP65蛋白表达量下降,BaxI、κB蛋白表达量升高(P0.05)。结论姜黄素通过上调IκB,下调NF-κB活性,调控凋亡基因Bcl-2/Bax的表达,抑制人肾癌ACHN细胞的增殖,诱导人肾癌ACHN细胞的凋亡。     

Effect of norcantharidin on the proliferation,apoptosis, and cell cycle of human mesangial cells

Aims: Norcantharidin (NCTD) regulates immune system function and reduces proteinuria. We sought to investigate the effect of NCTD on proliferation, apoptosis and cell cycle of cultured human mesangial cells (HMC) in vitro.

Methods: HMC cells were divided into a normal control group, and various concentrations of NCTD group (2.5, 5, 10, 20, or 40?μg/mL). Cell proliferation was determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, apoptosis was detected by Annexin V/propidium iodide (PI) assays, and morphological analysis was performed by Hoechest 33258 staining. Finally, cell cycle was analyzed by flow cytometry.

Results: NCTD dose and time dependently inhibits HMC proliferation significantly (p?Conclusion: NCTD inhibits HMC cell proliferation, induces apoptosis, and affects the cell cycle.     

Devazepide suppresses cell proliferation and migration,and induces apoptosis in bladder carcinoma

BackgroundThis study aimed to examine the effects of devazepide on the proliferation, migration, and apoptosis of human bladder cancer (BC) 5637 cells, and its mechanism.MethodsA cell counting kit-8 (CCK-8) for cell viability assays, a colony formation assay, and immunofluorescence were applied to detect the effects of devazepide on the proliferation of 5637 cells. Cell cycle assay, cell apoptosis assay and wound healing assay were performed to detect the effects of devazepide on the cell cycle, apoptosis, and migration of 5637 cells. The protein expression of CyclinD1, Bcl-2-associated X protein (Bax), poly ADP-ribose polymerase 1 (PARP1), and Cleaved Caspase-3 in 5637 cells was detected by a western blot assay.ResultsThe proliferation of 5637 cells was significantly inhibited (P<0.001) after incubation with 12, 25, and 50 µM devazepide for 48 and 72 h. A treatment of 25 µM devazepide for 48 h induced G1–S cell cycle arrest and apoptosis (P<0.01), and inhibited cell migration (P<0.05). By western blot assay, we found that devazepide can down-regulate CyclinD1 expression, and up-regulate Bax, PARP1, and Cleaved Caspase-3 expression.ConclusionsDevazepide inhibits the migration and proliferation of human BC 5637 cells by arresting the G1–S cell cycle, and induces cell apoptosis.     

miR-1246在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察微小RNA-1246（miR-1246）在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其在肝癌发生发展中的作用和意义。方法应用实时定量PCR（qRT-PCR）方法检测miR-1246在肝癌以及癌旁组织的表达;对人肝癌细胞株（BEL7402、SMMC7721）转染miR-1246 抑制剂后,采用MTT法观察肝癌细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果 miR-1246 在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织[（65.39±8.77）vs（10.23±2.58）,P=0.002]。MTT和凋亡实验结果显示,与阴性对照组相比,转染miR-1246抑制剂后,BEL7402细胞增殖能力下降,凋亡增加（P均＜0.05）;SMMC7721细胞也出现增殖能力下降,凋亡增加（P均＜0.05）。结论 miR-1246 在肝癌组织中高表达,并且与肝癌细胞的增殖及凋亡有关,其表达的上调可能与肝癌的发生发展有关。     

反义CD147分子对人胆管癌细胞株侵袭性影响的实验研究

目的探讨反义CD147分子对人胆管癌细胞株QBC939侵袭性的影响。方法构建含反义CD147分子片段的重组真核表达质粒,将人胆管癌细胞株QBC939分为三组:(1)反义CD147组,运用重组真核表达质粒as CD147-pc DNA3.1(-)转染QBC939细胞;(2)空质粒组,运用pc DNA3.1(-)空质粒转染QBC939细胞;(3)对照组,运用DMEM常规处理细胞。采用MTT法检测各组QBC939细胞的生长情况,RT-PCR和Western blotting法分别对三组QBC939细胞中的CD147、MMP-2、MMP-9、TIMP-2的m RNA表达水平及其对应蛋白的表达水平进行检测。结果成功构建了携带反义CD147分子片段的重组真核表达质粒。MTT法检测显示:三组QBC939细胞的生长曲线及对数生长期情况无统计学差异(P0.05)。RT-PCR法检测显示:反义CD147组QBC939细胞中CD147和MMP-2分子的m RNA表达均低于空质粒组和对照组(P0.05),且空质粒组与对照组相比无统计学差异(P0.05);反义CD147组QBC939细胞中MMP-9和TIMP-2分子的m RNA表达与空质粒组和对照组相比无统计学差异(P0.05)。Western blotting检测发现:与空质粒组和对照组相比,反义CD147组QBC939细胞中CD147和MMP-2分子的蛋白表达明显降低(P0.05),空质粒组与对照组相比无统计学差异(P0.05);与空质粒组和对照组相比,反义CD147组QBC939细胞株中MMP-9和TIMP-2分子的蛋白表达无统计学差异(P0.05)。结论 (1)反义CD147对胆管癌细胞株QBC939的生长无影响;(2)反义CD147对胆管癌细胞株QBC939中MMP-9和TIMP-2的m RNA表达及对应蛋白表达无影响;(3)反义CD147降低胆管癌细胞株QBC939中CD147和MMP-2的m RNA表达及对应蛋白表达,可能会降低胆管癌细胞株的侵袭性。     

胆囊收缩素对胆管癌细胞凋亡的调节作用及机制

目的 探讨胆囊收缩素（CCK）对胆管癌细胞凋亡的调节作用及机制。方法 采用TUNEL染色、定量RT-PCR和反义寡核苷酸技术分别研究CCK-8S对QBC939人胆管癌细胞系诱发性凋亡指数（AI）和bcl-2/bax mRNA表达的影响、以及bcl-2在CCK抑制凋亡中的作用。结果CCK-8S组 AI显著降低、bcl-2mRNA表达显著增强,同时加入CCK受体拮抗剂L364.718或L365.206可拮抗;反义bcl-2寡核苷酸转染能逆转CCK-8S对凋亡的抑制作用。结论CCK能提高凋亡阈值、抑制胆管癌细胞凋亡,其机制与上调bcl-2基因表达有关。     

胆道闭锁肝内胆管上皮细胞凋亡与增殖的实验研究

目的　研究胆道闭锁 (biliaryatresia ,BA)肝内胆管上皮细胞凋亡与增殖情况 ,探讨其与BA的关系。方法　应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记技术(TUNEL法 )和Ki -67免疫组化染色方法 ,观察 3 8例胆道闭锁患儿与 16例正常对照儿童肝内胆管上皮细胞凋亡与增殖情况。结果　胆道闭锁患儿肝内胆管上皮细胞凋亡指数为 (5 1.74±19 .93 ) %明显高于正常对照 (12 .3 4± 19.3 2 ) % (P <0 .0 1) ,增殖指数 (19.0 4± 9.78) %相对正常对照 (12 .68± 15 .5 6) %有所升高 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。肝细胞凋亡指数和增殖指数分别与正常对照相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。BA胆管上皮细胞凋亡指数明显高于增殖指数 (P <0 .0 1) ,而肝细胞凋亡指数与增殖指数比较则无统计学差别 (P >0 .0 5 )。正常对照组胆管上皮细胞凋亡指数与增殖指数相比也无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　胆道闭锁的发生及其进行性发展与肝内胆管上皮细胞凋亡增殖不平衡有关 ,该疾病可能是一种波及整个胆管系统的全胆道病变。     

鞘氨醇激酶1表达下调对肿瘤Hela细胞增殖和细胞凋亡的影响及其机制

目的 观察鞘氨醇激酶1(SphK1)表达下调对肿瘤Hela细胞增殖和细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制.方法 将SphKl siRNA和对照siRNA转染肿瘤Hela细胞,转染后将细胞分为3组:未转染组、siRNA对照组和SphK1 siRNA组.应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot技术检测转染SphK1 siRNA后SphK1 mRNA和蛋白的表达.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术分别检测3组细胞增殖和细胞凋亡的变化.进一步利用Westem blot技术检测与细胞增殖和细胞凋亡密切相关蛋白的表达.结果 SphK1 siRNA组中SphK1 mRNA和蛋白的相对表达水平(分别为0.153±0.037和0.123±0.037),显著低于未转染组(分别为1.000±0.000和0.688±0.049)和siRNA对照组(分别为0.932±0.039和0.673±0.057)(P＜0.05).细胞增殖结果表明,与未转染组和siRNA对照组比较,SphK1 siRNA组中Hela细胞的增殖明显受到抑制(P＜0.05).流式细胞结果表明,SphK1 siRNA组中Hela细胞早期凋亡细胞数比率为(23.85±0.72)％,显著高于未转染组(11.67±1.02)％和siRNA对照组(11.85±0.71)％,差异有统计学意义(F=211.451,P＜0.05).Western blot检测结果表明,SphK1 siRNA组中p21、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3( Caspase-3)和Caspase-9蛋白的相对表达水平(分别为0.381±0.025、0.406±0.041和0.374±0.035),显著高于未转染组(分别为0.127±0.039、0.064±0.023和0.115±0.039)和siRNA对照组(分别为0.125±0.034、0.060±0.018和0.126±0.038)(P＜0.05).结论 SphK1可能与宫颈癌的发生发展密切相关,其表达下调介导的增殖抑制和细胞凋亡可能与p21、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的上调密切相关.