银杏叶提取物抑制c-Jun激活拮抗肾缺血/再灌注诱导的细胞凋亡

目的 研究银杏叶提取物注射液金纳多（Ginaton）对大鼠肾缺血／再灌注（I／R）诱导的肾小管上皮细胞凋亡酶保护作用及机制。方法 SD大鼠分为假手术（Sham）组、再灌注（I／R）组、药物（Ginaton）组；每组6只叠采用双侧夹闭大鼠肾蒂缺血45min后再灌注3h的方法制备肾缺血／再灌注模型。免疫组化法分析转录因子c-Jun的激话变化情况，TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡情况。结果Sham组磷酸化c-Jun的活性变化不明显，I／R组磷酸化c-Jun的免疫活性显著增强，细胞凋亡数明显增加，与Sham组相比有统计学意义；金纳多明显抑制磷酸化c-Jun的免疫活性且减少了肾脏I／R诱导的细胞凋亡，与Sham组相比有统计学意义。结论 金纳多抑制肾I／R诱导的肾小管上皮细胞凋亡、保护肾缺血性损伤的作用可能与抑制c-Jun的激活有关。     

肾脏缺血预适应对核因子-κB活性及细胞凋亡的影响

目的通过建立大鼠肾脏急性缺血/再灌注（I/R）及缺血预适应（I/P＋I/R）模型,初步研究不同的缺血方式后肾脏核因子-κB（NF-κB）活性及二聚体亚单位的构成,探讨其减轻肾脏肾小管细胞凋亡的机制。方法 30只雄性SD大鼠摘除右肾、分离出左肾动脉后随机均分为3组（n=10）：A组为假手术组（Sham组）,只分离左肾动脉,暴露术野60 m in后直接缝合,24 h后取肾;B组为缺血/再灌注组（I/R组）,持续夹闭左肾动脉45m in,恢复血供24 h后取肾;C组为缺血预适应＋缺血/再灌注组（I/P＋I/R组）,左肾动脉夹闭2 m in,松开5 m in,重复3个循环,余同I/R组。分别用生化学方法检测血肌酐值的变化,组织病理学评价肾小管损伤程度评分,凝胶电泳迟滞分析检测肾组织NF-κB/DNA结合活性,超迟滞分析检测NF-κB亚单位的构成,Tunel法检测肾小管上皮细胞的凋亡。结果血清学检查及肾小管损伤评分提示,I/R组肾脏组织病理改变明显,损伤程度重,与Sham组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;与I/R组比较,I/P＋I/R组损伤程度则明显减轻,差异有统计学意义（P〈0.05）。凝胶电泳迟滞分析检测肾组织NF-κB/DNA结合活性I/P＋I/R组明显高于Sham组,差异有统计学意义（P〈0.05）;超迟滞分析检测NF-κB亚单位含有p65、p50;差异有统计学意义（P〈0.05）。结论肾脏缺血预适应可通过抑制NF-κB转录活性,减轻肾小管上皮细胞凋亡,从而发挥损伤保护效应。     

参麦注射液对肢体缺血-再灌注后肾脏脂质过氧化损伤的保护作用

①目的　探讨参麦注射液(SMI)对实验性家兔肢体缺血-再灌注所致肾的脂质过氧化损伤保护作用。②方法　将24只 家兔随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注组(I/R)和缺血再灌注+参麦注射液组(I/R+SMI)。各组均经缺血4小时后再灌注4小 时取材,分别测定血浆、肾组织及出肾血、入肾血中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时测定血清肌酐(Cr)含量。③ 结果　肢体缺血-再灌注后血浆及肾组织中MDA含量较假手术组显著升高,SOD含量显著降低(P<0.05),而参麦注射液治疗组血 浆及组织中MDA含量较缺血再灌注组显著降低,SOD活性显著升高(P<0.05);I/R组出肾血中MDA含量明显高于入肾血(P< 0.05),SOD活性明显低于入肾血(P<0.01);而Sham组和I/R+SMI组出、入肾血中MDA含量和SOD活性无显著差异;I/R组血清Cr较 Sham组明显升高,而I/R+SMI组与I/R组相比血清Cr明显降低,但仍高于Sham组。④结论　肢体缺血-再灌注可引起肾脏的脂质 过氧化损伤,参麦注射液对肢体缺血-再灌注引起的肾脏脂质过氧化具有保护作用。     

二甲双胍预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤模型的影响及机制研究

目的 探讨二甲双胍预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤模型的影响及可能的机制。方法 健康清洁级成年雄性SD大鼠体重220~250g,共30只,采用数字表法将其随机分为3组（n=10）：假手术组（Sham组）,缺血再灌注组（I/R组）和二甲双胍组（metformin+I/R组）。metformin+I/R组在建立I/R模型前给予二甲双胍0.125mg/（kg·d）腹腔注射,共14天,Sham组和I/R组给予等容量生理盐水连续14天。给药结束后I/R组和metformin+I/R组采用切除右肾、夹闭左肾动静脉45min后恢复灌注的方法制备大鼠肾缺血再灌注模型,Sham组切除右肾、不夹闭左肾动静脉。分别于再灌注24h时抽取下腔静脉血测定血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）浓度;然后处死大鼠取肾,光镜下观察肾组织形态学变化,免疫组化法测定Bcl-2、Bax、caspase-3表达,并行Tunel染色评估肾小管上皮细胞凋亡程度。结果 跟Sham组比较,I/R和metformin+I/R组的BUN、Cr均明显升高;同时,相比I/R组,metformin+I/R组的BUN和Cr均明显降低,且差异均有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检测结果显示,跟Sham组比较,I/R组和metformin+I/R组Bcl-2、Bax、caspase-3表达明显增高;跟I/R组比较,metformin+I/R组Bax、caspase-3表达明显降低,同时Bcl-2的表达明显强于I/R组。Tunel结果显示,相比Sham组,I/R和metformin+I/R组肾小管上皮细胞凋亡数目明显增多;同时,metformin+I/R组肾小管上皮细胞凋亡数目明显少于I/R组,且差异有统计学意义（P<0.05）。结论 二甲双胍预处理能改善大鼠肾缺血再灌注损伤过程中肾功能损害,其机制可能与抑制肾小管上皮细胞凋亡有关。     

氢气对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨氢气对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 将18只成年雄性SD大鼠随机分成假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、氢气治疗（H2)组3组,每组6只。I/R组大鼠右肾切除术后,制备左肾缺血再灌注损伤模型;Sham组大鼠右肾切除后,仅分离而不夹闭左肾肾蒂;H2组从再灌注前10 min开始吸入浓度为2.5%的氢气130 min,其余操作与I/R组相同。比较再灌注24 h 3组之间血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN),肾组织丙二醛(MDA)水平以及肾小管损伤的组织病理学半定量评分。结果 I/R可导致大鼠肾脏严重损伤。吸入浓度为2.5%的氢气可以降低大鼠BUN、Cr和MDA水平（P<0.05）;同时,H2组肾组织病理学评分低于I/R组（P<0.05）。结论 吸入低浓度的氢气对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制与减少肾组织中MDA的生成有关。     

臭氧氧化后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤慢性纤维化的作用

目的 观察臭氧氧化后处理(简称"臭氧后处理")对大鼠肾缺血再灌注损伤远期改变的影响.方法 通过随机数字表将36只SD雄性成年大鼠分为假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组和臭氧后处理(Postcond)组,每组12只.Sham组:腹部正中切开后充分游离并显露双侧肾脏,切除右肾结束手术.I/R组:切除右肾后,无创血管夹阻断肾蒂45 min,随后开放肾血管.Post-cond组:同样操作夹闭左肾蒂45 min,在恢复肾动静脉血灌流后,连续10 d经直肠给予臭氧治疗.术后2周测定肾功能,包括血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平浓度.分别于术后2周及8周观察肾组织病理变化,蛋白水平上检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞转化生长因子(TGF-β1)和信号传导蛋白(Smad-2)在肾脏的表达.结果 术后2周各组肾功能已经基本恢复正常(P>0.05).Postcond组引起的肾小管间质损伤接近于Sham组,而I/R组HE显示仍有肾小管细胞萎缩变形,炎性细胞浸润甚至空泡形成.同时Masson染色显示小管间质胶原纤维增加(P<0.05).Postcond组的α-SMA、TGF-β1和Smad-2蛋白的表达高于Sham组,但是都明显低于其在I/R组的表达(P<0.05).结论 臭氧可以减轻肾缺血再灌注损伤从而减少肾纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad-2信号通路,降低α-SMA、TGF-β1和Smad-2蛋白在肾组织的表达有关.     

PPARγ激动剂罗格列酮对大鼠肾脏再灌注损伤的保护作用

目的 探讨罗格列酮(Rosiglitazone,RGZ)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及作用机制.方法 将30只大鼠按照双盲法随机均分成假手术组(Sham)、缺血性肾损伤组(IRI)和罗格列酮(RGZ)组,各10只.利用血管夹夹闭左侧肾蒂,去除右肾诱导大鼠肾缺血再灌注损伤模型,缺血45 min,再灌注4 h.ELISA检测血清血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-8(IL-8)和白介素-6(IL-6)表达水平;RT-PCR检测TNF-α、IL-8和IL-6 mRNA水平;硫代巴比妥酸(TBA)法检测丙二醛(MDA)的含量;Western blot检测PPAR-γ和p-PPAR-γ表达水平;黄嘌呤氧化酶法检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;过碘酸雪夫氏(PAS)染色检测肾组织病理形态.结果 IRI组血清Cr和BUN分别为(160.15±25.17)μmol/L和(90.22±16.17)mmol/L,较RGZ组的(47.16±5.13)μmol/L和(23.11±3.28)mmol/L明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏病理损伤评分为(3±0.5)分,较RGZ组的(1±0.5)分明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);IRI组血清中TNF-α、IL-8和IL-6表达水平分别为(1400±350)pg/mL、(1200±300)pg/mL、(1150±250)pg/mL,较RGZ组的(650±150)pg/mL、(450±120)pg/mL和(550±170)pg/mL明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中TNF-α、IL-8和IL-6 mRNA表达水平分别为(14.00±55)、(11.00±4.3)、(9.50±2.8),较RGZ组的(5.50±1.7)、(6.40±2.1)和(3.80±1.3)明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中MDA含量为(18.12±4.15)nmol/mg,较RGZ组[(7.12±1.15)nmol/mg明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中CAT、GPX和SOD活性分别为(8.77±1.52)U/mg、(7.22±1.03)U/mg和(6.54±1.22)U/mg,较RGZ组的(25.17±3.22)U/mg、(23.42±3.07)U/mg和(21.22±2.79)U/mg明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IRI组肾脏中p-PPAR-γ含量为(0.32±0.07),较RGZ组的(0.51±0.11)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);IRI组与RGZ组P PAR-γ表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 PPAR-γ激动剂罗格列酮对大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用,能够减少肾脏病理改变,其作用机制与抑制氧化应激和炎症反应相关.     

后肾间充质细胞对大鼠急性肾小管损伤的防护作用

目的 观察外源性后肾间充质细胞(MMCs)对缺血再灌注(I/R)后急性.肾小管损伤的防护作用,并探讨其可能的机制.方法 取孕13 d大鼠胚胎分离培养后肾间充质细胞,采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记.建立缺血再灌注急性肾小管损伤大鼠模型,SD大鼠随机分为MMCs组、I/R组和假手术对照组(sham),MMCs组大鼠在成功建立肾脏缺血再灌注损伤后,即经下腔静脉输注BrdU标记后的大鼠后肾间充质细胞,分别于术后24、48、72、96 h处死各组大鼠,自动生化仪检测血清尿素氮(BUN)及血清肌酐(Scr)水平,常规HE染色观察肾脏病理改变,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法观察凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax在肾脏表达,荧光显微镜观察标记的MMCs在肾组织中的定位分布.结果 MMCs组各时相点大鼠BUN、Scr水平均显著低于同时相点I/R组(均P＜0.05),TUNEL结果显示,术后48 h凋亡的肾小管上皮细胞数量MMCs组[(13.4±3.2)/HPF]明显少于同时相点I/R组[(25.4±5.2)/HPF](P＜0.05),免疫组化结果显示I/R组Bcl-2、Bax蛋白表达水平均高于sham组,48 h达高峰,MMCs组Bcl-2表达水平高于同时相点I/R组,而Bax表达水平则低于同时相点I/R组,Bcl-2/Bax比值明显升高(均P＜0.05).MMCs组术后72 h肾组织内可见BrdU阳性细胞[(60±6)/HP],术后96 h阳性细胞明显增多,为[(143±8)/HP].结论 外源性后肾间充质细胞能够迁移、定居于缺血再灌注损伤后的肾脏小管上皮,MMCs输注后可抑制肾小管上皮细胞凋亡、坏死及炎症细胞浸润,对缺血再灌注急性肾小管损伤具有防护作用.     

兔自体骨髓干细胞移植对缺血再灌注损伤肾功能的影响

目的建立兔肾脏缺血再灌注(I/R)损伤模型,通过肾动脉灌注移植自体骨髓干细胞,观察其对I/R损伤肾功能的影响。方法分离28只兔的骨髓干细胞,建立肾脏I/R损伤模型后随机均分为移植组和对照组。移植组于肾血流恢复后经肾动脉推注骨髓干细胞悬液,对照组同样方法推注等量生理盐水。分别于I/R损伤前和I/R损伤后第1、3、5、7、14、21、28天于兔耳缘静脉采血,检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN),观察肾功能情况,相同时间点取肾组织行病理学观察。结果I/R损伤后第1天和第3天两组动物Scr、BUN均达到最高水平,以后逐渐下降;第7天后移植组Scr及BUN水平逐渐低于对照组,到实验观察结束时的第28天,对照组Scr和BUN分别为(135.6±32.5)μmol/L和(10.9±2.5)mmol/L,移植组Scr和BUN分别为(90.1±11.1)μmol/L和(8.0±1.5)mmol/L,两组间有显著性差异(P<0.05)。病理学观察发现,I/R损伤后肾小管上皮细胞变性、坏死、脱落。结论骨髓干细胞移植能较早的降低肾脏I/R损伤后血清Scr和BUN水平,在一定程度上促进I/R损伤后肾功能修复。     

炎性小体在右美托咪定减轻大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价炎性小体(NLRP3)在右美托咪定减轻大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用。方法 清洁级成年雄性Sprague-Dawley 大鼠32只,采用数字表法随机分为假手术组(Sham组,n=8)、肾缺血再灌注损伤组(I/R组,n=8)、肾缺血再灌注损伤+右美托咪定预处理组(I/R+Dex预处理组,n=8)(于缺血前1h腹腔注射右美托咪定10μg/kg)和肾缺血再灌注损伤+右美托咪定后处理组(I/R+Dex后处理组,n=8),于再灌注后1h腹腔注射右美托咪定10μg/kg。肾缺血再灌注损伤模型采用夹闭双侧肾动脉45min后,恢复灌注24h。采用全自动生化分析仪测定各组血肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNF-α和IL-10的水平;TUNEL法检测各组凋亡细胞的数量;Western blot法检测NLRP3、凋亡信号(caspase-1、Cleaved caspase-1、Bcl-2)的表达。结果 与Sham组比较,I/R组血清Cr和BUN、炎性标志物(TNF-α和IL-10)水平及肾组织NLRP3、caspase-1和Bcl-2表达水平明显升高(P<0.05),同时肾小管凋亡细胞显著增多(P<0.05);与I/R组比较,I/R+Dex预处理组和I/R+Dex后处理组血Cr和BUN、TNF-α和IL-10水平均明显降低(P<0.05),肾组织NLRP3、caspase-1、Cleaved caspase-1和Bcl-2表达水平显著降低;肾小管凋亡细胞显著减少(P<0.05)。结论 右美托咪定可显著减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其可能与抑制NLRP3,降低炎性反应和细胞凋亡有关。     

急性缺血性肾损伤中IκB激酶β(IKKβ)的变化及其意义的初步研究

目的:通过建立大鼠肾脏急性缺血再灌注(I/R)及缺血预适应/再灌注(I/P+I/R)模型,初步研究不同的缺血方式后肾脏IκB激酶β(IKKβ)的变化及其与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的相互关系.方法:雄性SD大鼠摘除右肾、分离出左肾动脉后随机均分为3组:假手术组(sham组);缺血再灌注组(I/R组);缺血预适应+缺血冉灌注组(I/P/+I/R组).分别用生化学检测血清肌酐(Scr)的变化,组织病理学评价肾小管损伤程度评分,用免疫荧光定量分析IKKβ的表达,免疫组织化学染色检测肾脏组织中NGAL的表达,免疫印迹检测肾脏组织中IKKβ、NGAL的表达.结果:Scr水平及肾小管损伤评分提示,I/R组肾脏组织病理改变明显,与sham组比较损伤程度重(P<0.01);与I/R组比较,I/P+I/R组损伤程度则明显减轻(P<0.05).免疫荧光定量分析与免疫印迹检测IKKβ的表达提示,I/P+I/R组的表达明显高于sham组(P<0.01,P<0.05);VR+I/P组较I/R组则明显减少(P<0.05).免疫组织化学染色检测与免疫印迹检测NGAL的表达提示,I/P+I/R组的表达明显高于sham组(P<0.01,P<0.05);I/R+I/P组较I/R组则明显减少(P<0.05).且IKKβ与NGAL两种蛋白的表达呈正相关(P<0.01).结论:IKKβ参与了肾脏的缺血再灌注损伤,促进了肾损伤标志物NGAL的产生,肾脏缺血预适应抑制IKKβ的激活,减少NGAL的产生.与肾脏保护作用有关.     

前列腺素E1脂微球载体制剂对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨前列腺素E1脂微球载体制剂(Lipo-PGE1)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用在体大鼠肾脏缺血再灌注模型,以生理盐水空白对照观察前列腺素E1脂微球载体制剂对肾脏缺血再灌注损伤大鼠血浆中超过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量变化的影响,并取肾脏组织作病理检查。结果与模型对照组相比前列腺素E1脂微球载体制剂治疗组可提高缺血再灌注损伤大鼠血浆中SOD活力(194.31±8.02)u/Lvs(185.18±7.03)u/L;降低再灌注大鼠血浆中MDA含量(7.48±0.75)mmol/Lvs(8.22±0.57)mmol/L;明显改善肾功能(血Cr、BUN浓度分别是(112.77±12.29)mmol/L,(30.53±2.73)mmol/L及(127.35±14.78)mmol/L,(35.16±5.39)mmol/L;肾小管损伤病理分级显著减轻。结论前列腺素E1脂微球载体制剂对肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用。     

IL-13对大鼠急性肾缺血再灌注损伤时IL-18表达的影响

目的:观察IL-13对大鼠急性缺血再灌注肾损伤时IL-18表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠37只,随机分为5组:Sham组,I/R组,C组,T-S组和T-L组。阻断大鼠双侧肾脏血流45min,再灌注24h,建立急性肾缺血再灌注损伤模型;治疗组分别于阻断血流后分别从双侧肾动脉开口注射rmIL-13(T-S组:0.5g/kg体重,T-L组:1.5g/kg体重);C组以生理盐水代替。检测各组大鼠IL-18血清水平和肾脏表达,以及肾功能和肾脏病理。结果:①与C组比较,T-L组肾脏IL-18基因和蛋白表达明显减少(P<0.01),IL-18血清水平也明显下降[(102.86±32.82)ng/L vs(231.02±52.96)ng/L,P<0.01];②与C组比较,T-L组肾功能损害减轻,BUN[(43.64±11.72)mmol/L vs(19.01±6.56)mmol/L,P<0.01],SCr[(79.92±15.22)μmol/L vs(165.56±39.87)μmol/L,P<0.01],肾组织病理变化明显减轻,肾小管损害评分明显减少(P<0.01);③血清IL-18蛋白水平与BUN、SCr呈正相关(r=0.710,P<0.01;r=0.770,P<0.01),肾组织IL-18mRNA与BUN、SCr呈正相关(r=0.716,P<0.01;r=0.762,P<0.01)。结论:IL-13能有效地抑制大鼠急性肾缺血再灌注损伤IL-18的表达和保护肾功能。     

单?多循环缺血预处理对缺血性肾损伤保护作用的研究

目的:探讨单、多循环两种缺血预处理方案对大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的保护作用.方法:加只雄性SD大鼠经切除右肾、分离出左肾动脉后随机均分为4组:①缺血再灌注(I/R)组:直接夹闭左肾动脉45 min恢复血供24 h;②单循环缺血预处理(SCP)组:夹闭左肾动脉10 min,开放血流10 min,仅一个循环,余同I/R组;③多循环缺血预处理(MCP)组:夹闭左肾动脉2 min,开放血流5 min,反复三个循环,余同I/R组;④假手术(Sham)组:暴露术野60 min后,直接缝合.24 h后取材行生化、病理检查及肾小管损伤评分.结果:sham组未见明显改变;I/R、SCP、MCP组血肌酐(Ser)水平及肾小管损伤评分明显高于sham组(P<0.01),MCP组低于L/R组,差异显著(P<0.01);SCP组低于I/R组,差异显著(P<0.05);MCP组低于SCP组,差异显著(P<0.01).结论:缺血预处理可从功能和组织学上减轻肾脏的急性缺血再灌注损伤,多循环预处理方案的保护作用在24 h内强于单循环的方案.     

稿 件 首 页题目：淮山药预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

【】　目的　探讨淮山药灌胃预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的可能保护作用。方法　54只3～4周龄雄性SD大鼠被随机分为3组：假手术组(SO, n=6)：行开腹手术,而不夹闭肾蒂;缺血再灌注淮山药灌胃预处理组(I/R淮山药组,n=24)和缺血再灌注无菌生理盐水灌胃对照组(I/R生理盐水组,n=24)：动物造模前5天,两组分别用淮山药灌胃和无菌生理盐水作为安慰剂灌胃,剂量为10g/kg体重,连续5天。建立大肾脏缺血再灌注损伤模型,分别于再灌注2h、12h、24h、48h四个时间点随机选I/R淮山药组和I/R生理盐水组各6只大鼠再次手术行下腔静脉采血和收获肾脏标本。测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量,以及血清丙二醛(MDA)SS (硫代巴比妥酸盐法)含量。肾组织常规病理切片H-E染色光镜下参照Paller评分标准进行评分,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 再灌注后12h、24h、48h,I/R淮山药组与I/R生理盐水组比较, 其血清Scr(P<0.05)、BUN(P<0.05)含量显著下降;于再灌注后2h、12h、24h,I/R淮山药组血清MDA含量较I/R生理盐水组显著下降(P<0.05);肾组织学评分于再灌注后12h、24h、48h, I/R淮山药组较I/R生理盐水组有显著减低(P<0.05);再灌注后2h就有凋亡细胞出现,12h时可见大量凋亡细胞脱落到肾小管腔中,此时I/R淮山药组凋亡细胞数较I/R生理盐水组明显减少(P<0.05)。结论 缺血再灌注可引起明显的肾脏组织结构损伤和功能损害,淮山药灌胃预处理可以减轻氧化损伤和减少细胞凋亡的发生,降低了血清Scr、BUN和MDA水平,从而有效地保护了肾功能。     

七氟醚预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤肾功能的影响

目的:探讨七氟醚预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤肾功能的影响。方法:将SD雄性大鼠72只随机分为假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚预处理组(S组),每组24只,后两组根据再灌注时间分为再灌注后4、12、24 h 3个亚组,每个亚组8只。实验结束检测血BUN、Cr,观察肾组织的病理变化,对肾小管损害进行评分,并进行比较。结果:S组和I/R组BUN、Cr均较C组明显升高(P<0.05),再灌注后同时相点比较,12h、24h S组BUN、Cr均明显低于I/R组,4h两组差异不显著;肾小管Paller氏评分,与C组相比,I/R、S组均高于C组(P<0.05),S组各时相点评分较I/R组降低(P<0.05)。结论:七氟醚预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤有保护作用。     

依达拉奉对大鼠失血性休克复苏后重要脏器功能及血浆炎症因子水平的影响

目的探讨依达拉奉对大鼠失血性休克复苏后重要脏器功能及血浆炎症因子表达的影响。方法 24只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、失血性休克复苏组(I/R组)、失血性休克复苏依达拉奉治疗组(I/R-ED组),每组8只。Sham组仅行股动、静脉置管。I/R、I/R-ED组经股动、静脉置管放血诱导休克,将平均动脉压(MAP)维持于35~45 mmHg(1mmHg=0.133 kPa)60 min。休克期结束后,两组均给予60%的自体血和2倍的乳酸钠林格液复苏,分别在复苏即刻及结束时,I/R组给予生理盐水(2 ml/kg),I/R-ED组给予依达拉奉(2 ml/kg,2 mg/ml)。复苏后2、24 h取血,测定血浆ALT、AST、LDH、CK、BUN、Cr水平,采用ELISA法测定血浆TNF-α及IL-6水平。结果复苏后2 h,I/R组血浆TNF-α、IL-6高于Sham组(P<0.05),I/R-ED组与I/R组差异无统计学意义;复苏后24 h时,I/R组血浆TNF-α、IL-6仍高于Sham组(P<0.05),而I/R-ED组低于I/R组(P<0.05)。复苏后24 h时,I/R组血浆ALT、AST水平高于Sham组(P<0.05),I/R-ED组低于I/R组(P<0.05)。复苏后2 h及24 h时,I/R组血浆BUN、Cr均高于Sham组(P<0.05),I/R-ED组低于I/R组(P<0.05)。复苏后2 h及24 h时,I/R组CK、LDH高于Sham组(P<0.05),I/R-ED组低于I/R组(P<0.05)。复苏后24 h时,I/R组肝、肾、肺均有明显的病理改变,而I/R-ED组病理改变程度均有所减轻。结论依达拉奉可降低失血性休克大鼠复苏后24 h血浆炎症因子(TNF-α、IL-6)水平,在一定程度上改善复苏后重要脏器的功能。     

大豆异黄酮对大鼠缺血再灌注脑组织CaMKⅡ表达的影响

目的:研究大豆异黄酮对缺血再灌注脑组织钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaMK)Ⅱ表达的影响.方法:选取603健康成年SD大鼠,随机分成假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和大豆异黄酮预处理组(SI组),各203.采用Longa改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血2 h后再灌注24 h,行神经功能缺损评分,TTC染色检测脑梗死体积,Western blotting技术检测CaMKⅡ蛋白表达.结果:I/R组神经功能缺损评分明显高于Sham组(P<0.01),与I/R组比较,SI组神经功能缺损评分明显下降(P<0.01).I/R组梗死体积高于Sham组(P<0.01),与I/R组比较,SI组梗死体积降低(P<0.01).I/R组缺血区CaMKⅡ蛋白表达量低于Sham组(P<0.01),与I/R组比较,SI组缺血区CaMKⅡ蛋白的表达量增加(P<0.01).结论:大豆异黄酮可能通过上调缺血区CaMKⅡ蛋白表达,减轻缺血再灌注脑损伤.     

吗啡后处理对兔缺氧复氧损伤肾脏组织的保护作用

目的探讨吗啡后处理对兔缺氧复氧损伤肾脏组织的延迟保护作用及其机制。方法雄性新西兰大白兔30只随机分为正常对照组、缺氧复氧组(H/R组)和吗啡后处理组(H/R+MO组)。H/R组和MO+H/R组吸入8%O23h后立即分别静脉注射生理盐水5mL和吗啡3mg/kg,并空气复氧48h。比较各组肾功能变化和肾脏组织病理学改变,凋亡指数。结果与正常对照组比,H/R组和H/R+MO组复氧48h,血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平提高(P均<0.05),肾小管上皮细胞凋亡指数升高(P<0.05);与H/R组相比,H/R+MO组缺氧复氧48h,SCr和BUN水平降低,肾小管上皮细胞凋亡指数降低(P均<0.05)。结论吗啡后处理可能减轻缺氧复氧损伤引起的肾小管上皮细胞的凋亡,降低SCr和BUN水平,发挥肾脏保护作用。     

冬虫夏草对大鼠肾缺血再灌注模型肾组织HIF-1α及NGAL表达的影响

目的:观察大鼠肾缺血再灌注(I/R)后尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)浓度、肾组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和NGAL的表达以及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,C. sinensis)干预后对其的影响,探讨C. sinensis的肾保护作用机制。方法:健康雄性SD大鼠45只随机分为假手术(sham)组、I/R和C. sinensis组,每组15只。3组组内再按24,48,72 h分成3个亚组,每组5只。用摘除右肾后夹闭左肾蒂1 h恢复再灌注的方法建立肾I/R模型,sham组摘除右肾后未夹闭左肾蒂,术后每日予以生理盐水(2 mL/d)灌胃,I/R组和C. sinensis组分别在术后予以生理盐水(2 mL/d)和人工C. sinensis粉[5.0 g/(kg?d)]灌胃,在相应时间点处死大鼠。检测各组大鼠血尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr),比色法检测各组大鼠的尿中N-Z酰-β-D-氨基酸葡萄糖苷酶NAG含量,ELISA法检测各组大鼠尿NGAL浓度,HE染色观察大鼠肾小管间质病理变化,并用肾小管间质半定量计分法分析各组大鼠病理损伤情况,RT-PCR检测各组大鼠肾组织中HIF-1α mRNA的表达水平,免疫荧光共聚焦法观察各组大鼠肾组织HIF-1α和NGAL蛋白的表达情况。结果:与sham组相比,I/R组和C. sinensis组大鼠的BUN及SCr水平增高(P<0.05),尿中NAG和NGAL增多(P<0.05)。Sham组大鼠肾小球及小管间质均正常,无明显病理改变;I/R组出现肾小管上皮细胞普遍肿胀,可见小管扩张,管腔管型,刷状缘消失,部分上皮细胞变性坏死等改变,肾小球无明显病理改变。与sham组相比,I/R组和C. sinensis组各时间点大鼠肾组织HIF-1α的mRNA及蛋白、NGAL蛋白的表达均明显升高(P<0.05)。与I/R组相比较,C. sinensis组各时间点的BUN和SCr水平下降(P<0.05),尿中NAG和NGAL浓度降低(P<0.05),肾组织NGAL蛋白的表达下调(P<0.05),HIF-1α mRNA及其蛋白的表达上调(P<0.05)。肾小管病理半定量计分显示C. sinensis组较I/R组小管间质损伤明显改善。结论:I/R大鼠模型病理改变表现为肾小管及肾间质受损,与急性肾损伤病理改变特征相符合。I/R后尿中NGAL水平增高,与尿中NAG及肾小管间质损伤程度成正相关,提示 NGAL可能是急性肾损伤时肾小管损伤特异性的生物标志物。C. sinensis可能通过调节肾组织中HIF-1α和NGAL的表达而达到肾保护作用。