糖皮质激素对哮喘大鼠T-bet及γ-干扰素表达的影响

目的 研究糖皮质激素对哮喘大鼠肺组织 T-bet 及 Th1类细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)表达的影响,初步探讨糖皮质激素治疗哮喘的机制.方法 用卵清蛋白建立哮喘模型,24只 SPF 级SD雄性大鼠随机分为3组:正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组.留取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类;采取双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定 BALF 中IFN-γ的含量;应用免疫组化及流式细胞术测定肺组织中 T-bet 的表达.结果 ①哮喘组 BALF 中嗜酸性粒细胞占细胞总数百分比(EOS%)高于正常对照组及地塞米松组(P<0.01);②哮喘组 BALF 中IFN-γ水平低于正常对照组(P<0.01),地塞米松组 BALF 中IFN-γ水平则低于哮喘组(P<0.01);③免疫组化及流式细胞术显示,哮喘组与正常对照组相比,T-bet表达降低(P<0.01),地塞米松组 T-bet 表达则低于哮喘组(P<0.01).结论 IFN-γ、T-bet 的低表达参与哮喘的病理生理过程;地塞米松使哮喘大鼠 IFN-γ及 T-bet 表达下调的同时对 Th2 类细胞因子更加强烈的抑制,从而使 Th1/Th2 比例趋向平衡,可能为其抑制哮喘呼吸道炎症的重要作用机制之一.     

不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠Th1／Th2类细胞因子分泌的影响

目的：观察不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法：选取Wistar大鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、麻杏甘石汤1高剂量组（简称麻1组）、麻杏甘石汤2高剂量组（简称麻2组）。观察不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠BALF中IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值比较、外周血中IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值比较、肺组织中IFN-γ、IL-4和内参照激动蛋白cDNA扩增后半定量和电泳结果的影响。结果：与哮喘模型组比较,不同配比的麻杏甘石汤组大鼠BAIF和外周血中IL-4水平下降（P〈0.05,P〈0.01）,效果与地塞米松组相似（P〉0.05）、IL-4/IFN-γ比值也相应降低,IFN-γ水平升高。麻杏甘石汤组大鼠RT-PCR结果显示,IFN-γmRNA表达水平明显高于地塞米松组的IFN-γmRNA（P〈0.05）,而地塞米松组IL-4 mRNA与正常组相比表达减少（P〈0.05）,与哮喘组相比IL-4 mRNA的表达明显减少（P〈0.01）。IFN-γmRNA的表达与正常组相比表达无明显差异（P〉0.05）,与麻杏甘石汤组相比IFN-γmRNA的表达明显减少（P〈0.01）。麻1、2高剂量组间比较无显著差异（P〉0.05）。结论：不同配比麻杏甘石汤可能通过抑制IL-4水平及提高IFN-γ水平,使Thl/Th2失衡得到一定程度的纠正,从而控制气道炎症,减缓哮喘发作。不同配比比较无显著差异（P〉0.05）。     

三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型血清IL-4、IFN-γ含量及其肺组织 mRNA表达的影响

目的观察三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型血清IL-4、IFN-γ含量及其肺组织mRNA表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组、三步序贯组、第一步方组、第二步方组、第三步方组、普米克令舒组。制备激素干预后哮喘大鼠模型,于第3周起开始撤减激素用量,按照每周地塞米松0.1mg/kg速度递减,直至第7周完全撤除。采用ELISA法检测血清中IL-4和IFN-γ含量,用原位杂交技术检测各组大鼠肺组织中IL-4mRNA和IFN-γmRNA的表达变化。结果与哮喘模型组和激素干预组比较,三步序贯组IL-4的血中含量和肺组织中mR-NA的表达在各个时段均有显著性降低(P<0.01),而IFN-γ的血中含量和肺组织中mRNA的表达在各个时段均有显著性升高(P<0.01),与普米克令舒组比较,在第2周末,二者无统计学意义(P>0.05);在第7、9周末皆有极显著性差异(P<0.01)。结论三步序贯法可减少激素干预后哮喘大鼠模型IL-4血中含量及其在肺组织中的mRNA表达,提高IFN-γ血中含量及其在肺组织中mR-NA表达,调节IL-4/IFN-γ的失衡,减轻气道炎症的作用。     

NGF参与支气管哮喘大鼠气道炎症的发生及作用机制

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor, NGF)对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响及作用机制.方法 24只雄性SD大鼠分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)和抗NGF组(C组),每组8只.测定各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总细胞及细胞分类计数;HE染色观察气道病理改变;RT-PCR和ELISA法检测各组大鼠白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、NGF mRNA和蛋白表达水平.结果 B组与A组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数增多(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达增加(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达减少(P＜0.01).C组与B组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数减少(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达减弱(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达水平无显著差异.B组BALF中NGF含量与细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞呈正相关(r=0.833、0.944、0.949,P＜0.05);与IL-4含量呈正相关(r=0.944,P＜0.01),与IFN-γ含量不相关(r=0.122,P＞0.05);与肺组织中IL-4 mRNA表达水平呈正相关(r=0.848,P＜0.05),与IFN-γ mRNA表达不相关(r=0.611,P＞0.05).结论 NGF与哮喘大鼠气道炎症密切相关,它可以通过使Th2型细胞因子分泌亢进参与哮喘的发生.     

肺炎链球菌3型多糖对支气管哮喘小鼠气道炎症及Treg/Th17细胞的影响

目的观察肺炎链球菌3型多糖(T3P)对支气管哮喘小鼠气道炎症以及Treg/Th17细胞的影响,探讨T3P对哮喘小鼠的免疫调节作用。方法 BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和T3P组,每组8只。哮喘组以卵清蛋白(OVA)致敏、气道激发建立哮喘模型,对照组以PBS代替,T3P组在OVA致敏前皮下注射T3P进行干预。观察小鼠肺组织病理改变,对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,ELISA法检测血清OVA特异性IgE(OVA-IgE)以及BALF中白介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-10、IL-17浓度,实时荧光定量PCR法检测肺组织中转录因子Foxp3和RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测Treg和Th17细胞占CD4~+细胞百分比。结果 T3P组小鼠肺组织炎症反应程度弱于哮喘组,血清OVA-IgE,BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞比例以及IL-4、IL-17浓度均低于哮喘组(P<0.05),IFN-γ、IL-10浓度高于哮喘组(P<0.05),小鼠肺组织Foxp3 mRNA表达水平及Treg占CD4~+细胞百分比均高于哮喘组(P<0.05),RORγt mRNA表达水平和Th17细胞占CD4~+细胞百分比均低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和T3P组小鼠肺组织Foxp3-mRNA/RORγt-mRNA比值及Treg/Th17细胞比例与BALF中嗜酸粒细胞数量呈负相关。结论 T3P可以通过抑制过敏原特异性IgE表达调节Th1/Th2、Treg/Th17细胞平衡,抑制气道炎症。     

哮喘氧化应激模型大鼠TGF-β、IFN-γ的表达及温通方对其调节作用研究

目的观察哮喘氧化应激模型大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液中TGF-β、IFN-γ的表达,及地塞米松、温通方高、中、低剂量对模型的干预作用。方法大鼠随机分为正常组,模型组,温通方高、中、低剂量组,地塞米松组6组,每组10只。使用卵蛋白与氢氧化铝混合液致敏大鼠后再行卵蛋白激发的方法,复制出支气管哮喘模型,各组均给予相应药物灌胃,连续14 d。观察大鼠一般状态,并检测TGF-β、IFN-γ在肺组织、支气管肺泡灌洗液的含量。结果模型组大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液中TGF-β、IFN-γ含量可见明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。经给药治疗后,上述因子水平均可见不同程度的升高,其中高剂量组、地塞米松组效果尤为突出。在改善肺组织IFN-γ含量方面,中剂量组效果较好;高剂量组、低剂量组IFN-γ含量升高不明显,与模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论温通方高、中剂量组能够不同程度的调节肺组织及灌洗液中TGF-β、IFN-γ含量,以减低哮喘大鼠炎症反应,缓解症状,从而达到治疗支气管哮喘的作用。     

半夏提取物对气道黏液高分泌的影响

目的 探讨半夏提取物(EP)对脂多糖诱导的大鼠气道黏液高分泌模型的干预作用.方法 30只Wistar大鼠随机分为5组(n=6),分别为空白组、模型组、低剂量EP组、中剂量EP组及高剂量EP组.模型组和EP组经气道注入脂多糖(LPS)复制大鼠气道黏液高分泌模型.低、中、高剂量EP组连续4 d分别给予管饲EP 10、30及60 g/kg;采用免疫组化法检测肺内气道的黏蛋白5AC(MUC5AC)蛋白表达,RT-PCR法检测肺组织MUC5AC mRNA、水通道蛋白5(AQP-5)mRNA;ELISA法检测BALF中的TNF-α浓度.结果 大鼠气道上皮MUC5AC蛋白和肺组织MUC5AC mRNA的表达在模型组中均明显高于空白组(P<0.05);在低剂量及中剂量EP组较模型组稍降低(P>0.05),仍显著高于空白组(P<0.05);在高剂量EP组显著低于模型组(P<0.05).大鼠AQP-5 mRNA表达在模型组显著低于空白组(P<0.05);在低剂量及中剂量EP组较模型组稍升高(P>0.05),仍较空白组显著降低(P<0.05);在高剂量EP组显著高于模型组(P<0.01).BALF中TNF-α浓度与肺组织MUC5AC mRNA的表达呈正相关(r=0.948,P<0.05),肺组织AQP-5 mRNA与MUC5AC mRNA及TNF-α的表达呈负相关(r=-0.955,P<0.05;r=-0.909,P<0.05).结论 高剂量的EP能明显抑制大鼠气道上黏液高分泌状态.     

黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘模型大鼠白细胞介素4和γ干扰素的影响

目的通过测定与分析各组大鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)含量,观察黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘(CVA)模型大鼠免疫功能的影响,进而探讨黄龙止咳口服液调节CVA免疫功能紊乱的作用机制。方法利用卵蛋白(OA)和氢氧化铝共同激发致敏建立CVA大鼠模型,将大鼠分为正常组、模型组、黄龙高剂量组、黄龙中剂量组、黄龙低剂量组、先声咳喘宁组、布地奈德组,记录引喘诱咳时2 min内大鼠咳嗽次数及血清和支气管BALF中IL-4、IFN-γ含量。结果与正常组比较,模型组咳嗽次数明显增多(P<0.01),血清和支气管BALF中IL-4含量显著升高(P<0.01),IFN-γ含量降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组咳嗽次数均明显减少(P<0.01),血清及BALF中IL-4含量明显降低,IFN-γ含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);黄龙高剂量组与黄龙低、中剂量组比较,咳嗽次数明显减少,血清及BALF中IL-4含量明显降低,IFN-γ含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与先声咳喘宁组比较,黄龙高剂量组血清IFN-γ值相对升高,BALF中IL-4值相对降低,IFN-γ值相对升高,差异有高度统计学意义(P<0.01);与布地奈德组比较,黄龙高剂量组血清IFN-γ值相对升高,BALF中IL-4值相对降低,IFN-γ值相对升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄龙止咳口服液通过降低机体的IL-4含量、升高IFN-γ含量发挥治疗CVA的作用。     

支气管哮喘豚鼠肺组织和肺泡灌洗液炎症细胞中Bach1和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达

目的 探讨BTB-CNC异体同源体1(Bach1)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)在支气管哮喘豚鼠肺组织和肺泡灌洗液(BLAF)炎症细胞中的表达.方法 38只健康雄性豚鼠按随机数字表法随机分为对照组、哮喘组和地塞米松治疗组,卵蛋白致敏法复制哮喘模型,检测3组豚鼠肺组织匀浆中丙二醛浓度.RT-PCR和Western blot法分别检测肺组织中Bach1、γ-GCS mRNA和蛋白;原位杂交法和免疫细胞化学法检测BLAF炎症细胞中Bach1、γ-GCS mRNA和蛋白.结果 肺组织中丙二醛浓度哮喘组高于对照组和地塞米松治疗组.肺组织和BALF炎症细胞中γ-GCS mRNA和蛋白表达哮喘组低于对照组和地塞米松治疗组;Bach1 mRNA三组间差异无显著性;Bach1蛋白细胞核内表达哮喘组高于对照组和地塞米松治疗组.肺组织和BALF炎症细胞中γ-GCS mRNA和蛋白表达呈正相关;肺组织和BALF中γ-GCS mRNA表达与Bach1核内表达呈负相关.结论 肺组织和BALF炎症细胞中γ-GCS、Bach1表达结果 一致;支气管哮喘急性期豚鼠肺组织和BALF炎症细胞中γ-GCS表达较低,而细胞核内Bach1蛋白表达增加,地塞米松增加哮喘豚鼠的抗氧化能力可能与调控Bach1核转位而增加γ-GCS表达有关.     

桦褐孔菌多糖抗哮喘作用实验研究

目的探讨桦褐孔菌多糖对哮喘小鼠肺部炎症和Thl/Th2类细胞因子变化的影响.方法雄性BALB/c小鼠32只随机分成4组,即正常对照组、哮喘模型组和桦褐孔菌多糖(PIO)低、高剂量组各8只.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、IL-5及γ干扰素(IFN-γ)含量,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变.结果与正常对照组相比,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数,IL-4和IL-5升高,而IFN-γ降低(P<0.05).PIO低、高剂量组小鼠BALF中炎症细胞数量和IL-4、IL-5水平明显降低,IFN-γ水平升高(P<0.05).结论桦褐孔菌多糖处理能明显减轻哮喘小鼠肺组织病理学改变.桦褐孔菌多糖对哮喘小鼠具有保护作用.     

Effect of Fufei Gushen Decoction on airway inflammation and glucocorticoid receptor of chronic obstructive pulmonary disease rat

Objective: To investigate the effect of Fufei Gushen Decoction on airway inflammation and glucocorticoid receptor in rats with chronic obstructive pulmonary disease. Methods: Fifty Wistar male rats were randomly divided into 5 groups: blank control group, COPD model group, Fufei Gushen Yin high, medium and low dose groups, 10 rats in each group, except the blank control group, the remaining 4 groups were Smoked combined with lipopolysaccharide (LPS), cold air stimulation to create CODP rat model. After successful modeling, the blank control group and COPD model group were fed with distilled water 3ml/only, Fufei Gushen Yin high, medium and low dose groups were given 1.02, 0.51, 0.26g Chinese medicine granules/100g/day, respectively. 2 times a day for 28 consecutive days. Samples were collected, hematoxylin-eosin (HE) staining was used to observe the pathological changes of lung tissue, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the tumor necrosis factor alpha (TNF-α) in the serum and right alveolar lavage fluid (BALF) of rats in each group. ), the content of transforming growth factor β1 (TGF-β1), interleukin-17 (IL-17A) and matrix metalloproteinase (MMP-9) and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) in the left lung tissue The expression level of real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Real-time PCR) rat left lung tissue GRmRNA, immunohistochemistry (IHC) to determine the expression level of left lung tissue glucocorticoid receptor (GR). Results: The content of TNF-α, TGF-β1 and IL-17A in the serum of COPD rats in Fufei Gushen Yin high, medium and low dose groups and BALF were significantly reduced compared with the COPD model group (P<0.05); The expressions of TIMP-1 and MMP-9 in tissues were lower than those in COPD model group (P<0.05); the expressions of GRmRNA and GR in lung tissues were higher than those in COPD model group (P<0.05), and were higher in Fufei Gushen Yin Among the middle- and low-dose groups, the middle-dose group has the most significant effect. Conclusion: Fufei Gushen Decoction can inhibit the release of inflammatory factors in lung tissue of COPD rats, improve airway inflammation and remodeling, and increase hormone sensitivity.     

姜黄素衍生物WZ01对哮喘气道炎症介质IL-13和组胺及糖皮质激素受体的影响

目的：研究姜黄素衍生物WZ01对哮喘气道炎症反应、白细胞介素（IL）-13、组胺及糖皮质激素受体（GR）的影响,探讨WZ01抑制哮喘气道炎症的机制。方法：30只小鼠,随机分为：正常对照组、哮喘组、低剂量WZ01组、中剂量WZ01组、高剂量WZ01组,每组6只。在第21～第27天1%卵清白蛋白（OVA）雾化激发,每次雾化前30 min予腹腔注射相应剂量0.9%氯化钠溶液或WZ01。末次激发24 h内,麻醉并处死小鼠,留取肺组织标本HE染色检测炎症病理改变,留取支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞分类计数,ELISA法检测IL-13和组胺浓度,Western blot和免疫组织化学染色检测肺组织GR蛋白的表达。结果：与正常对照组比较,哮喘组小鼠气道周围可见明显炎症细胞浸润及黏液分泌,BALF中炎症细胞数量、IL-13及组胺水平均显著升高（P＜0.01）。与哮喘组相比,各剂量WZ01组气道周围炎症细胞浸润及黏液分泌显著减少,BALF中淋巴细胞和嗜酸性粒细胞数量明显减少,BALF中IL-13和组胺浓度显著下降,差异均有统计学意义（P＜0.01）;BALF中淋巴细胞数量与IL-13和组胺浓度均呈显著正相关（r值分别为0.886、0.886,P均＜0.01）,嗜酸性粒细胞数量与IL-13和组胺浓度均呈显著正相关（r值分别为0.897、0.898,P均＜0.01）。Western blot和免疫组织化学染色结果显示,哮喘小鼠肺组织GR表达明显降低,与哮喘组相比,不同剂量WZ01均能显著上调哮喘小鼠肺组织GR表达水平。结论：姜黄素衍生物WZ01可显著抑制哮喘气道炎症细胞浸润和黏液分泌,可能与其降低炎症介质IL-13和组胺浓度及上调哮喘小鼠肺组织GR表达水平有关,WZ01可能有望成为防治哮喘气道炎症的新药。     

IL-8和Eotaxin在哮喘大鼠中的表达及地塞米松的作用

目的研究哮喘大鼠外周血、肺泡灌洗液(BALF)中白介素-8(IL-8)、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)水平和肺组织Eotaxin mRNA及蛋白表达及地塞米松(DXM)对其影响。方法 30只SD大鼠随机平均分为正常组、哮喘组、DXM组。以卵蛋白(OVA)致敏和激发建立大鼠哮喘模型,BALF行细胞计数和分类;ELISA法检测血、BALF中IL-8、Eotaxin水平;肺组织切片HE染色观察病理变化;采用实时荧光定量PCR和免疫组化检测肺组织Eotaxin mRNA及蛋白表达。结果哮喘大鼠BALF中白细胞总数,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞百分比显著高于正常组(P<0.01);血清、BALF中IL-8、Eotaxin水平均显著高于正常组(P<0.01),DXM组明显低于哮喘组(P<0.05);哮喘组肺组织Eotaxin mRNA及蛋白的表达水平明显高于正常组(P<0.05,P<0.01),DXM组介于两组之间。结论 IL-8和Eotaxin参与了哮喘炎症过程,DXM可通过抑制其表达来减弱中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的趋化与激活,这可能是DXM减轻哮喘炎症反应的作用机制之一。     

Impact of psychosocial stress on airway inflammation and its mechanism in a murine model of allergic asthma

Background  It has already been recognized that psychosocial stress evokes asthma exacerbation; however, the mechanism of how stress gets inside the body is not clear. This study aimed to observe the impact of psychosocial stress on airway inflammation and its mechanism in the ovalbumin-induced asthmatic mice combined with social disruption stress.

Methods  Thirty-six male BALB/c mice were randomly divided into: control group, asthma group (ovalbumin-induced), asthma plus social disruption stress group (SDR), and SDR group. The open field video tracking system was used to assess animal behaviors. The invasive pulmonary resistance (RL) and dynamic lung compliance (cdyn) test system from Buxco was applied to detect pulmonary function. The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was utilized to determine OVA-IgE, T-helper type 2 (Th2) cytokines (IL-4, IL-5, IL-13) and corticosterone in mouse serum, the Th2 cytokines (IL-4, IL-5, IL-13, IL-6, TNF-α) in bronchoalveolar lavage fluid (BALF), and IL-6 and TNF-α levels in the supernatant of splenocytes cultured in vitro. Hematoxylin-eosin (H&E) staining was used to assess airway inflammation in lung histology. The cell count kit-8 assay (CCK-8) was applied to evaluate the inhibitory effect of corticosterone on splenocyte proliferation induced by lipopolysaccharide (LPS). Real time-PCR and Western blotting were utilized to determine glucocorticoid receptor (GR) mRNA and GR protein expression in lungs.

Results  The open field test showed that combined allergen exposure and repeated stress significantly shortened the time the mice spent in the center of the open field (P <0.01), increased ambulatory activity (P <0.01) and the count of fecal boli (P <0.01), but deceased vertical activity (P <0.01). Results from pulmonary function demonstrated that airway hyperresponsiveness (AHR) was enhanced by psychosocial stress compared with allergy exposure alone. The ELISA results showed that cytokines in serum and BALF were significantly increased (P <0.05). Moreover, the lung histology showed that infiltrated inflammatory cells were significantly increased in the asthma-SDR group compared with the asthma group (P <0.05). Interestingly, serum corticosterone was remarkably raised by psychosocial stress (P <0.05). In addition, the inhibitory effect of corticosterone on IL-6 and TNF-α in LPS-stimulated splenocyte cultures in vitro was diminished in the asthma-SDR group compared to the asthma group. The CCK-8 test revealed that the inhibition effect of corticosterone on splenocyte proliferation induced by LPS was significantly impaired in the SDR and asthma-SDR groups, while no significant effect was observed in the control and asthma groups. Furthermore, expression of GR mRNA and GR protein were significantly reduced in the lung tissues of the asthma-SDR group (P <0.05).

Conclusions  Social disruption stress can promote anxiety behavior, activate the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis, increase AHR and inflammation, and also impair glucocorticoid sensitivity and its function in a murine model of asthma. The down-regulation of GR expression induced by social disruption stress is in part associated with glucocorticoid insensitivity, which leads to asthma exacerbation.

     

补肾平喘膏方对支气管哮喘大鼠肺组织糖皮质激素受体的影响

目的：观察支气管哮喘大鼠肺组织中糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的变化情况以及补肾平喘膏方对其的影响,以探讨补肾平喘膏方防治支气管哮喘的作用机制。方法：60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组、膏方预防组、膏方治疗组和膏方防治（预防加治疗）组,每组10只。除正常对照组外,各组大鼠以卵白蛋白致敏并诱发哮喘模型。采用地塞米松或膏方治疗后,HE染色法检测大鼠肺组织病理学改变,免疫组织化学法检测肺组织中GR的表达情况。结果：模型组肺组织GR表达低于正常对照组（P〈0.05）,膏方预防组、治疗组、防治组肺组织GR的表达较模型组明显上调（P〈0.05）,与正常对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。其中膏方预防组GR的表达显著上升（P〈0.01）,膏方各组与地塞米松组相比亦明显上升（P〈0.01）。结论：补肾平喘膏方可能通过上调哮喘大鼠肺组织中GR的水平治疗哮喘。     

烟草烟雾暴露对哮喘小鼠肺组织NF-κB p65表达的影响

目的 探讨烟草烟雾暴露对支气管哮喘小鼠气道炎性细胞浸润及肺组织核转录因子-κB p65（NF-κB p65）表达的影响。方法 将雌性无特定病原体级（specific pathogen free, SPF）级BALB/c纯系小白鼠40只随机分为4组,即正常对照组、哮喘组、烟草烟雾暴露组和烟草烟雾暴露+哮喘组,每组各10只。正常对照组给予雾化吸入生理盐水,哮喘组给予雾化吸入卵蛋白（OVA）致敏从而复制模型,烟草烟雾暴露组则在正常对照组基础上予以烟草烟雾暴露1 h,而烟草烟雾暴露+哮喘模型组则在哮喘模型组的基础上给予同样的烟草烟雾暴露1 h。28 d后采集支气管肺泡灌洗液（BALF）,测定BALF中白细胞(WBC)、嗜酸性粒细胞（EOS）及中性粒细胞（NEU)计数。用蛋白质免疫印迹法（Western-blot）检测肺组织NF-κB p65蛋白表达水平。结果 哮喘组、烟草烟雾暴露+哮喘组小鼠BALF中白细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞均高于对照组及烟草烟雾暴露组,烟草烟雾暴露+哮喘组BALF中白细胞总数和中性粒细胞计数高于哮喘组,嗜酸粒细胞计数低于哮喘组（P<0.05);哮喘组、烟草烟雾暴露+哮喘组小鼠肺组织NF-κB p65蛋白表达均上升,但烟草烟雾暴露+哮喘组小鼠升高更明显,与哮喘组相比差异有统计学意义（P<0.05)。烟草烟雾暴露+哮喘组白细胞计数与肺组织NF-κB p65表达水平呈正相关（r=0.781,P=0.008）。结论 烟草烟雾暴露可能通过上调NF-κB p65蛋白表达,促进支气管哮喘气道炎性细胞浸润。     

哮喘大鼠静脉血和支气管肺泡灌洗液中降钙素基因相关肽的研究

目的 观察大鼠哮喘模型静脉血和支气管肺泡灌洗液（BALF）中降钙素基因相关肽（CGRP）的变化及其在哮喘发病机制中的作用。方法 用卵蛋白（OVA）致敏SD大鼠并雾化吸入刺激,制作大鼠哮喘模型。10只大鼠作为哮喘组,7只大鼠作为正常对照组,收集静脉血和BALF。肺组织做病理切片,BALF进行HE染色并细胞分类计数,采用ELISA法检测静脉血和BALF中CGRP的浓度。结果 哮喘组BALF中可见大量嗜酸粒细胞,与对照组比较,有极显著性差异（P〈0．01）。哮喘组静脉血中CGRP水平与对照组比较有极显著性差异（P〈0．01）;哮喘组BALF中CGRP水平与对照组比较,有显著性差异（P〈0．05）。结论 哮喘大鼠静脉血和BALF中CGRP均明显升高,CGRP在哮喘的发病机制中可能起着重要的作用。     

旋毛虫感染对过敏性哮喘模型小鼠干扰素-γ、白细胞介素4及白细胞介素5水平的影响

目的通过观察感染旋毛虫小鼠并发过敏性哮喘后血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素5(IL-5)水平的变化,探讨旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠的影响。方法随机将15只雌性BALA/c小鼠分为空白对照组(A组)、单纯过敏性哮喘组(B组)及感染旋毛虫后并发哮喘组(C组)各5只,建立单纯过敏性哮喘模型和感染旋毛虫后过敏性哮喘模型,取小鼠血清和BALF,采用酶联免疫吸附法进行检测,比较3组之间IFN-γ、IL-4及IL-5的差异。结果与A组比较,B组血清及BALF中的IFN-γ水平差异无统计学意义(P>0.05),IL-4、IL-5水平显著升高(P<0.05);而C组血清及BALF中的IFN-γ水平较A组显著升高(P<0.05),IL-4、IL-5水平差异无统计学意义(P>0.05)。C组与B组比较,血清及BALF中IFN-γ水平差异无统计学意义(P>0.05),而IL-4、IL-5水平显著降低(P<0.05)。结论旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠血清及BALF中IL-4、IL-5的表达有抑制作用,对IFN-γ无影响。     

抗哮喘药物对大鼠气道重塑模型干预效果的评价

目的：观察辅舒酮和喘乐宁联合用药和孟鲁斯特对大鼠哮喘气道重塑模型的干预效果,阐明哮喘及气道重塑的发病机制。 方法：40只Wistar大鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组（模型组）,给药1组（辅舒酮和喘乐宁雾化吸入）和给药2组（给予孟鲁斯特）,每组10只。采用卵清蛋白（OVA）致敏和激发, 建立大鼠哮喘气道重塑模型。观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞数目的变化;检测大鼠血清IL-12水平的变化及与气道重塑的关系,观察气道纤毛上皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞结构的变化。结果：与阴性对照组比较,阳性对照组大鼠BALF中炎性细胞数明显升高(P<0.05）;与阳性对照组,给药1组和给药2组大鼠BALF中炎性细胞数明显降低(P<0.05）,但给药1组与给药2组比较差异无显著性(P<0.05）。与阴性对照组比较,阳性对照组大鼠血清IL-12水平明显降低(P<0.05）;与阳性对照组比较,给药1组和给药2组大鼠血清IL-12水平明显升高(P<0.05或P<0.01）;且给药1组与给药2组比较差异有显著性(P<0.01）。与给药2组比较,给药1组大鼠气道纤毛排列整齐,弹力纤维基本正常,胞核及胞质无明显改变;平滑肌轻度增厚,淋巴细胞中度浸润。结论：辅舒酮和喘乐宁联合用药较孟鲁斯特更能抑制炎性细胞浸润,减轻气道慢性炎症,从而减弱哮喘气道重塑,降低气道高反应性,保护气道形态和功能。     

青蒿素对骨关节炎大鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨青蒿素对骨关节炎大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法 32只骨关节炎模型大鼠随机分为对照组和青蒿素高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组各8只,对照组给予生理盐水20 mL灌胃,每日1次,青蒿素高、中、低剂量组分别给予青蒿素400、300、200 mg.kg-1(均溶于20 mL生理盐水)灌胃,每日1次,连续7周,实验结束后右心房取血,放射免疫法检测血清TNF-α水平,反转录聚合酶链式反应、蛋白质印迹检测关节软骨组织中TNF-α的表达。结果青蒿素低、中、高剂量组血清TNF-α水平均较对照组下调(P<0.05),低剂量组水平高于中、高剂量组(P<0.05),中剂量组水平高于高剂量组(P<0.05);低剂量组组织mRNA水平与中剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05),高剂量组的组织mRNA水平低于低、中剂量组和对照组(P<0.05);组织TNF-α蛋白水平中剂量组与高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05),但均低于对照组和低剂量组(P<0.05)。结论青蒿素可降低关节炎大鼠TNF-α的表达,有效控制炎症反应进程。