显微分光光度计检测乳腺肿瘤及增生性疾患的细胞DNA及其临床意义

在同一种类动物中各种不同器官的细胞核中所含DNA量实际上完全相同。患癌后细胞核染色体倍数增多。但对良性肿物及增生性疾患时的染色体DNA变化研究甚少。本文旨在研究人类乳腺各种肿瘤及增生性疾患时细胞核中DNA含量的变化,从而探讨它在诊断肿瘤性疾患以及发现早期癌变趋势时的应用价值。     

肝癌细胞染色体DNA倍体性模式研究进展

 国内外研究已表明，肝癌(HCC)发生中涉及细胞核的异常分裂，导致细胞DNA的倍体性改变飞现就近年来的有关染色体DNA倍体性的研究作一综述.     

荧光原位杂交对非整倍体毒剂的检测

荧光原位杂交（FISH）技术是近年来开展起来的分子生物学新技术。它是使用生物素或地高辛标记的各类DNA和RNA探针与细胞或组织在玻片上进行原位杂交。然后通过荧光抗体（第2抗体）显色，使被观察的特定DNA片段（或序列）在荧光显微镜下在细胞核或染色体的原有部位显示荧光。这对了解DNA序列（基因）在染色体细胞核内的位置及相互关系，提供了一个强有力的手段。     

不同实验室小鼠肝细胞核DNA总量图像分析结果的比较研究

目的了解图像分析仪测量组织细胞化学物质含量或总量结果的国内现状,为制定用于细胞化学物质量测定的图像分析系统的生产及使用过程中应达到的统一的技术性能标准提供参考。方法正常成年小鼠肝细胞悬液涂片,部分涂片统一进行Feulgen染色,未染色涂片与已染色涂片各一张寄给六个实验室,进行Feulgen染色,测量两种染色涂片的单个完整肝细胞核DNA的量,结果送回本实验室,按统一标准比较单个完整肝细胞核DNA总量的直方图。结果 1.从统一和不同实验室染色涂片测得的DNA总量直方图形状较相似,说明细胞核DNA的Feulgen染色法具有较广泛的适应性;2.各实验室表述DNA量的术语极不规范;3.不同的图像分析仪测得不同投影面积大小肝细胞核的平均光密度或平均光度或平均灰度的值相差较大,而同一图像分析仪测得的值的差异较小;4.不同的图像分析仪和不同的测量参数区分三种DNA总量细胞核群体的能力存在明显的差异,说明这些图像分析仪测量细胞化学物质量的可靠性不同;5.改变图像分析仪关键硬件的设置,摄取相同细胞核的黑白图像和彩色图像,测量结果显示,细胞核DNA的彩色图像与黑白图像在不同的图像分析仪测量软件上可得到不同的测量结果。结论测量细胞化学物质的量,不但应重视图像分析系统测量软件的性能,而且其图像形成和采集硬件的系统性能与功能状态同样不可忽视,建立用于细胞化学物质量测定的图像分析系统性能的评价标准是非常必要的、有益的和刻不容缓的。     

急性非淋巴细胞白血病的定量细胞化学研究

大量的研究证明,染色体畸变和DNA异倍体值是肿瘤细胞的重要特征。为了深入分析肿瘤细胞遗传物质量的变化,本实验应用放射自显影和细胞光度法相结合,测定急性非淋巴细胞白血病(ANLL)细胞的DNA含量和染色体数目变化,以供临床诊断、治疗和估计预后的参考。     

大肠癌和大肠腺瘤DNA含量与细胞增殖活性检测的临床意义

分子生物学及细胞生物学的研究表明,恶性肿瘤最重要的生物学特征为肿瘤细胞异常增殖和分化不良、浸润性生长和远处转移以及细胞恶性特征的遗传性.以上3点癌细胞共同生物学特征的出现,均以细胞核DNA含量和(或)染色体倍体与功能等微细异常为物质基础.因此,测量和分析癌前病变及癌组织中细胞核DNA含量与倍体对恶性肿瘤的病理诊断、恶性程度判定、疗效评估、预测预后均具有重要价值.本研究应用流式细胞术(FCM)检测了经手术或肠镜取得的对照组(正常大肠黏膜)、大肠腺瘤(绒毛状腺瘤、管状腺瘤)和大肠癌组织,检测了它们的DNA倍体、DNA含量和细胞的增殖活性,并进行了临床分析.     

丝裂霉素C、噻替哌诱发人淋巴细胞染色体重排率的比较—染色体与核基质关系的初步研究

染色质与细胞核内蛋白白质框架结构一核基质(NM)的相互作用一直吸引着人们的注意。有研究表明,在分离NM过程中,尽管使用了核酸酶仍有少量DNA与NM结合。由于分离程序的差异,得到的与NM结合的DNA类型也显著不同。这些研究都是在破坏了细胞完整结构的基础上进行的。我们认为NM与染色质的关系有可能通过染色质在活细胞中的行为反应出来,因此选择不同性质的药物做为诱变剂,比较染色体受损后的表现,不失做为研究手段之一。     

急性白血病细胞核DNA含量和核面积变动与化疗关系的初步探讨

利用显微分光光度计法观察5例急性白血病细胞核DNA含量与核面积变动的关系及经HOAP治疗的2例急性单核细胞白血病的细胞核DNA含量及核面积变动与治疗的关系。 结果指出急性白血病细胞DNA含量较正常单核细胞为高,有明显差异,它们的细胞核DNA总含量随核面积的增加呈递增状态,两者呈正相关。饶有兴趣的是细胞核单位面积的DNA(DNA/u~2,F)与核面积(A)之间呈幂函数负相关。 二侧急单经HOAP治疗一周后,细胞核DNA含量有不同程度的下降,但核面积均有不同的增大。完全缓解的一例,大核细胞数目增多,DNA含量趋向正态分布。     

细胞核DNA含量AU值处理软件系统

经Feulgen染色的细胞核可用显微分光光度计测定其DNA含量。肿瘤细胞核DNA含量与正常细胞及非肿瘤增生细胞有明显的差异;恶性程度不同的肿瘤细胞核DNA含量也有差别。因此,核DNA含量测定,在研究肿瘤的生物学特性、肿瘤的恶性程度以及鉴别诊断、观察治疗效果等方面,均有应用价值。     

eccDNA在癌症中的研究进展

真核生物细胞DNA主要存在染色体上,但事实上染色体外同样存在一种特殊的环形DNA,即染色体外环状DNA(extrachromosomal circular DNA,eccDNA)。目前已经发现多种类型的eccDNA,包括小多分散DNA(small polydispersed DNA,spcDNA)、端粒环、染色体外rDNA环和微DNA(microDNA,miDNA)等。eccDNA从基因组中分离或者脱落,与染色体DNA并存,游离于染色体基因组之外,以某种特殊的方式参与机体病理或生理过程。本文针对eccDNA的分类、形成机制、在癌症中的表达和作用进行综述。     

乳腺癌细胞核DNA含量不同分析方法的比较

目的:比较组织原位分析乳腺癌细胞核DNA含量的不同方法。方法:收集30例乳腺癌标本的归档蜡块,4m和相邻8m切片各一张,Feulgen染色,采用TIGER细胞图像分析仪测量每个癌巢的以单个完整细胞核体积为单位计算的DNA指数和以细胞核切面面积为单位计算的DNA指数,它们均以同一病例正常上皮细胞核作内参照。结果:(1)同一病例的VIOD分布直方图比IOD更集中;(2)30例标本的90个样本中,以VIOD为单位所测得的DI值比以IOD为单位测得的DI值高。结论:使用细胞图像分析仪对组织切片内细胞核DNA含量进行定量分析时,应以单个完整细胞核体积的DNA含量为单位,计算DI值。     

FADU法检测~(60)C_0γ-射线照射DNA的损伤及修复

DNA是生物细胞遗传、分裂、增殖的主要物质基础。DNA双链断裂被认为是引起细胞死亡及染色体畸变的主要原因之一,因此它的损伤比细胞中任何其它成分的损伤都更为重要。本文采用了FADU法检测了体外培养的CHL细胞在受(60)~C_0γ射线照射后DNA的双链断裂与剂量之间的关系,同时对温育后断裂的双链DNA修复能力也进行了初步探讨,实验结果表明,在0-20 Gg的剂量范围内(剂量率245尺/分),双链DNA的存留率D％及DNA相对损伤量Q_D与剂量之间存在着明确的剂量效应关系、温育1小时     

组织原位三维测量和分析计算几种正常细胞核的的DNA含量

目的　探讨在肿瘤组织切片上确定二倍体参考细胞核的选择依据 ;方法　五只健康兔的七种正常组织 ,每种组织包埋在同一包埋块内切片 ,Feulgen染色 ,TIGER细胞图像分析仪测量和分析计算其中五种组织细胞核的以完整细胞个体体积为单位的DNA含量 ;结果　脊神经节细胞核和小脑浦肯野氏细胞核都未能染上颜色 ,其余五种正常组织着色呈紫红色 ,其细胞核的DNA含量值存在一定程度的差异 ( 5 5～ 13 6% ) ;结论　在进行肿瘤细胞核的DNA倍体和DNA恶性度等指标的分析时 ,最好选择与肿瘤组织同一个体和和同源的正常组织细胞核作为二倍体参考细胞 ,采用同样的样品制备和同步的染色方法 ,才可获得准确的分析结果。     

人乳头状瘤病毒与癌症

人乳头状瘤病毒(HPV)除可引起良性肿瘤和疣外,还与癌有关,主要是鳞癌和疣状癌。 乳头状瘤病毒(PV)是DNA亲上皮病毒,感染宿主后染色体一般不插入宿主染色体中,但在宿主细胞核中保留许多环状DNA。PV有宿主特异性但各种动物PV均可感染人体,现已分离的HPV至少有42型,但均有共同的内抗原。HPV的类型,基因组成,免疫反应和其他因素均影响其感染结     

五氯酚钠的细胞遗传毒性研究

背景与目的:探讨五氯酚钠诱发中国仓鼠卵巢细胞(CHO)DNA损伤和染色体畸变的效应.材料与方法:五氯酚钠对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)进行梯度染毒,应用单细胞凝胶电泳试验和体外染色体畸变试验观察其诱发细胞DNA损伤和染色体畸变.结果:80 μg/ml和160 μg/ml五氯酚钠诱发细胞DNA链断裂损伤的频率与对照组相比显著升高(P＜0.01),且随着剂量增加,其损伤程度加重;无论是否加入代谢活化剂,受试物均引起染色体畸变率的明显增加(P＜0.01).结论:五氯酚钠能诱发CHO细胞DNA损伤和染色体畸变.     

维甲酸诱导的基因RA109染色体定位和蛋白质定位

目的：确定全反式维甲酸诱导肺腺癌细胞系GLC－82表达上调的基因RA109在染色体上的位置及其编码蛋白在细胞中的位置。方法：应用辐射杂交细胞系（RH）定位的方法进行染色体定位,应用绿色荧光蛋白（GFP）基因作为报告基因,结合荧光显微摄影进行蛋白质定位。结果将RA109基因定位在5号染色体长臂5q35,RA109蛋白定位在细胞核。结论RH定位是一个快速、简捷、精确的染色体定位方法,以此方法可将RA109定位在5号染色体长臂的一个疾病基因富含区。利用GFP进行蛋白质定位简单明了,以此可将RA109蛋白定位在细胞核这个重要的细胞结构中。     

核仁组成区在食管癌病理诊断中的意义

核仁组成区(Nucleolar OrganizerRegions,NORs)是位于细胞核仁内的DNA环,其具有转录rRNA及参与合成核仁的功能。由于NORs蛋白具有嗜银性,用胶银染色技术显示染色体核仁组成区(AgNORs),可作为判断细胞增生与分化程度的一项形态定量指标。本文作者应用AgNORs染色技术,对食管癌手术标本各部位组织细胞核内AgNORs的形态及数目进行观察和对比分析,旨在为食管癌的细胞学诊断提供客观的病理诊断指标。     

砷对人二倍体细胞的遗传毒性作用

本研究首次用一系列细胞遗传毒理学指标如SCE、DNA含成抑制、UDS、DNA单链断裂和DNA蛋白质交联来检测砷对人二倍体细胞DNA损伤和修复作用。结果表明:①As_2O_3(As1×10~(-8)-10~(-6)M)明显诱导人外周血淋巴细胞SCE频率,且呈剂量效应关系;②一定剂量砷能抑制2BS细胞DNA合成、诱导UDS和DNA蛋白质交联和单链断裂,表明砷对DNA有一定程度损伤作用;③3μM砷可能细胞毒性较小,而与蛋白质结合量较大,故诱导的DNA蛋白质交联作用最大,我们认为砷对DNA损伤作用较弱,可能不是其致癌作用的主要原因。与DNA损伤效应不同,砷是断裂剂,引起染色体断裂,可能因易位到另外染色体的某些基因区域上,形成基因重排、激活癌基因而致癌。     

DNA的损伤与修复

细胞的生物信息储存在DNA中。在真核细胞中,绝大多数（98％）DNA与蛋白质结合形成染色质存在于细胞核内,一小部分存在于其他细胞器中,如线粒体内。DNA由鸟嘌呤、腺嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、戊糖和磷酸组成,碱基不同的排列顺序编码了不同的生物信息。在细胞的生存过程中,DNA会遭到内源性和外源性的损伤（表1）,例如放射线和化学物质。正常细胞的DNA损伤是诱发疾病的原     

组织原位分析鼻咽癌细胞核DNA干系倍体及其异质性

组织原位分析鼻咽癌细胞核的DNA干系倍体及其异质性。收集42例鼻咽癌病例的归档蜡块,4μm、8μm连续组织学切片各一张。每个病例选取三个癌巢或肿瘤组织区域(共126个样本),使用TIGER细胞图像分析仪4μm组织切片测量鼻咽癌细胞核DNA的光密度等参数,8μm组织切片测量单个完整鼻咽癌细胞核的体积等参数,计算获得每个癌巢或肿瘤组织区域的以单个完整鼻咽癌细胞核的体积为单位的DNA含量(以体积积分光密度表述),以同一切片内正常鼻咽部上皮非基底细胞作为其内参照,计算其DNA干系倍体。结果显示:鼻咽癌细胞核的DNA干系倍体主要集中在1.76～3.00(DNA指数为0.88～1.50)之间,14个样本为DNA干系四倍体,仅2个样本为DNA干系亚二倍体;DNA干系倍体异质性率为66.67%。可得结论:(1)鼻咽癌DNA干系倍体主要在近二倍体与近四倍体之间;(2)鼻咽癌中存在DNA干系倍体异质性。