平白术多糖的分离纯化及IR、GC分析

目的:平白术多糖分离纯化及单糖组成的研究。方法:水提醇沉得平白术粗多糖(CAMP),三氯乙酸法脱蛋白,双氧水脱色,DEAE-纤维素柱色谱分离纯化得平白术精多糖(RAMP)。红外光谱(IR)、气相色谱(GC)分析RAMP的结构及其组成。结果:DEAE-纤维素柱洗脱分离得三个主要组分,IR显示RAMP具有典型的多糖吸收峰,GC检测得RAMP单糖组成为阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖。结论:GC具有高分离效能、高检测效能的特点,可用于单糖组分分析;IR可用于多糖的分析鉴别。     

人血浆中MBL-MASP复合物的纯化与分离

目的从人血浆中分离纯化甘露聚糖结合凝集素(MBL)和MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP)。方法用非活化Sepharose 4B两步亲和层析纯化MBL-MASP复合物．再以Sephacryl S-300柱凝胶过滤将MBL和MASP分离。在纯化MBL—MASP复合物的整个过程中，除凝胶过滤缓冲液外，均加入丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲磺酰氟(PMSF)和金属蛋白酶抑制剂1．10-邻二氮杂菲(1，10-phenanthroline)．并控制温度在4℃。结果获得高度纯化的MBL和酶原形式的MASP。SDS—PAGE和Western blotting表明所纯化的MBL相对分子质量为28000和32000肽链构成的功能性多聚体；配体结合测定和酵母菌凝集试验证实所纯化的MBL具有生物学活性：结论建立了一种比较简便的同时分离纯化MBL和MASP酶原的方法。     

人血浆中MBL-MASP复合物的纯化与分离

目的 从人血浆中分离纯化甘露聚糖结合凝集素(MBL)和MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP)。方法 用非活化Sepharose4B两步亲和层析纯化MBL-MASP复合物,再以SephacrylS-300柱凝胶过滤将MBL和MASP分离。在纯化MBL-MASP复合物的整个过程中,除凝胶过滤缓冲液外,均加入丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲磺酰氟(PMSF)和金属蛋白酶抑制剂1,10-邻二氮杂菲(1,10-phenanthroline),并控制温度在4 ℃。结果 获得高度纯化的MBL和酶原形式的MASP。SDS-PAGE和Westernblotting表明所纯化的MBL相对分子质量为28000和32000肽链构成的功能性多聚体;配体结合测定和酵母菌凝集试验证实所纯化的MBL具有生物学活性。结论 建立了一种比较简便的同时分离纯化MBL和MASP酶原的方法。     

白术多糖葡萄糖的含量测定

目的 :研究和分析测定白术多糖、葡萄糖的含量 .方法 :采用水提醇沉法提取白术多糖 ,用硫酸 苯酚法在 4 89.3nm处用紫外分光光度法测定 ,用酶法在 5 0 5nm处测定葡萄糖的含量 .结果 :浙江白术与怀化白术多糖含量差异较大 ,测得结果平均回收率 10 3.1% ,RSD为 1.16 % .结论 :简便 ,快速 ,准确 ,可靠 ,可用于不同产地白术的鉴别和质量控制     

白术及其炮制品的多糖含量测定

用苯酚-硫酸法对各种白术炮制品的水溶性糖及还原糖进行了含量测定，为白术及其炮制品的品质评价提供了新的依据。     

远志多糖的纯化分离研究

目的:对远志多糖进行纯化分离,观察其具有药用功效的单一多糖,为其药用功效进一步研究奠定基础。方法:采用水提醇沉法提取远志粗多糖,用酶法和Sevage法除蛋白,活性炭脱色,葡聚糖凝胶Sephadex G-100分离纯化,并对分离得到的多糖进行初步的结构分析。结果:分离纯化得到的远志单一多糖,紫外可见光260 nm、280 nm处有多糖无蛋白质和核酸的吸收峰,在红外光谱也有表现出多糖的特征官能团。结论:推测该多糖为β-吡喃糖,而非α-吡喃糖,并且不含蛋白质。     

党参多糖的分离纯化及其结构研究

目的 进行党参多糖的分离纯化及结构的研究.方法 经脱脂、热水抽提、乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白得到的粗提党参多糖(CPPS),再经DEAE-纤维素柱色谱分离得到纯化的水洗党参多糖(CPPS1).紫外光谱及SephadexG-200凝胶柱色谱鉴定其纯度.气相色谱、红外光谱和原子力显微镜(AFM)分析其结构.结果 CPPS1不含蛋白质,且为均一多糖.单糖组成为阿拉伯糖、核糖、甘露糖、果糖、半乳糖、葡萄糖.红外光谱显示CPPS1具有典型的多糖吸收峰;原子力显微镜(AFM)分析表明CPPS1分子具有高度分枝的结构,并且糖链间形成大小不等的环状结构.结论 CPPS1是一种含呋喃环结构的均一多糖,且具有高度分枝的结构.     

冬凌草多糖RPPSIIa的分离纯化及其性质研究

目的 从冬凌草Rabdosia rubescens中提取分离获得多糖组分RPPSIIa,并分析其结构性质和探讨免疫活性,为冬凌草临床应用与进一步开发利用提供参考。方法 主要采用水提醇沉透析得冬凌草多糖,经分级醇沉,Sephdex G-100凝胶色谱柱纯化得RPPSIIa,应用HPLC、IR、LC、UV等方法对冬凌草多糖进行组成结构分析及理化性质研究,通过MTT比色法观察该组分在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果 冬凌草多糖RPPSIIa为均一组分,其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖,二者比为7︰93,RPPSIIa具有典型的多糖吸收峰,其结构中存在α-型糖苷键;RPPSIIa在5～100 μg/mL能有效刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,5、50 μg/mL均能有效增强刀豆蛋白A（ConA）诱导的淋巴细胞增殖反应。结论 多糖RPPSIIa是由冬凌草中提取的均一葡聚糖,具有较强的免疫生物活性。     

亮菌多糖的分离纯化

目的 通过醇沉、色谱等分离提取技术对发酵得到的亮菌胞内多糖进行分离纯化,并对纯化的多糖进行结构及部分性质研究。方法 采用水提、醇沉、除蛋白等方法得到亮菌胞内粗多糖,然后通过离子交换色谱、分子筛色谱对粗多糖进行进一步的分离纯化,得到单一多糖。同时采用红外光谱法、紫外光谱法、核磁共振法对该单一多糖进行结构研究,确定其单糖组成及糖链的连接方式。结果 通过去蛋白、醇沉、离子交换色谱和凝胶滤过色谱的方法得到亮菌胞内多糖IPS-B2,该多糖为直链α-D-(1→6)-吡喃型葡聚糖,不含蛋白质、多肽和氨基酸。结论 通过纯化得到了直链α-(1→6-葡聚糖(IPS-B2),该多糖在体内具有较好的抑瘤效果。     

板蓝根多糖分离纯化及其性质的研究

目的从板蓝根中提取分离水溶性多糖,并分析其理化性质,为板蓝根质量控制与进一步开发利用提供参考。方法主要采用DEAE纤维素离子交换色谱柱,Sephadex G 75凝胶色谱柱分离纯化,应用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、IR、TLC、UV等方法对板蓝根多糖进行组成结构分析及理化性质研究。结果从板蓝根水溶性多糖中分离纯化得到4种不同的均一多糖组分PS1、PS2、PS3、PS4,色谱分析表明均由单一木糖组成。其中PS1、PS2、PS3、PS4相对分子质量分别为1.2×104、2.6×104、4.2×103、2.5×103。结论4种均一多糖首次从板蓝根中分离得到。     

桑叶多糖MPA-1的分离纯化和结构性质

通过二乙基氨基纤维素柱色谱和凝胶过滤柱色谱对桑叶碱提粗多糖进行分级分离,从桑叶中获得了均一多糖组分MPA-1。通过糖组成分析、甲基化分析、1H-NMR、13C-NMR、IR等对MPA-1的一级结构进行了鉴定。结果表明：MPA-1是一个重均分子量为1.1×105的葡聚糖,它的主链由α1,4-葡萄糖残基相互连接而成,并存在少量1,6-连接方式的侧链,分支点位于葡萄糖的O-3和O-2位。 定     

白术多糖对大鼠创伤性脑损伤后脑水肿的影响及其机制探讨

目的 探讨白术多糖对颅脑外伤继发性脑组织水肿的影响及其机制。方法 采用自由落体撞击模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、蒸馏水组(溶剂对照)及白术多糖组,每组再根据伤后不同生存时间随机分为3个亚组。取各组动物伤灶区脑组织,分别检测其含水量和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS) 活性。结果 模型组、蒸馏水组及白术多糖组各时间点脑组织含水量均较假手术组明显增加 (P＜0.01),但白术多糖组各时间点含水量均显著低于模型组及蒸馏水组 (P＜0.01)。模型组、蒸馏水组及白术多糖组各时间点脑组织 iNOS 活性均较假手术组明显升高 (P＜0.01),但白术多糖组各时间点 iNOS 活性均显著低于模型组及蒸馏水组 (P＜0.01)。结论 白术多糖可能通过下调伤灶区 iNOS 的表达,而减轻创伤性脑损伤后继发性脑水肿的程度。     

仙人掌多糖的分离、纯化及性质研究

目的分离、纯化具有降血糖作用的仙人掌多糖组分。方法经热水提取、乙醇沉淀、DEAE Sepharose fast flow离子交换色谱和Sephadex G系列凝胶滤过色谱纯化得到5种仙人掌多糖组分。醋酸纤维薄膜电泳检测多糖纯度,凝胶色谱测定相对分子质量,高效液相色谱测定糖的组成。结果5种多糖都已达到电泳纯。它们的相对分子质量依次为2.0×103、1.0×106、4.0×103、9.2×105、5.0×103。ODP1由鼠李糖组成,ODP2可能由鼠李糖和葡萄糖组成,ODP4可能由鼠李糖和D-半乳糖组成。ODP3和ODP5分别由鼠李糖和一未知糖组分组成。结论仙人掌多糖的提取没有必要采用脱蛋白、脱色素步骤,本实验所提取的仙人掌多糖是均一的。     

天花粉多糖的提取、分离与纯化研究

目的系统地研究天花粉多糖分析的样品前处理方法,包括提取、分离及纯化方法,为进一步开展天花粉多糖的组成及相对分子质量等分析研究,探讨其药理药效奠定基础。方法试验了加热回流、不同温度浸提、超声波振荡等方法提取天花粉多糖,对天花粉多糖的沉淀分离条件进行了优化,并采用重结晶、透析、柱色谱等方法进行纯化,采用苯酚-硫酸分光光度法测定多糖的质量分数,并用核磁共振波谱法进行验证。结果天花粉多糖于45℃超声波振荡提取效果最佳,不同纯化方法所得天花粉多糖的质量分数不同,重结晶法得到的多糖质量分数为58.8%,透析法得到的多糖质量分数为51.3%,色谱柱纯化后的多糖质量分数最高可达94%。结论本研究建立了天花粉多糖的样品前处理分析方法,解决了天花粉中淀粉、蛋白以及柠檬酸等化合物的干扰问题,获得了质量分数较高的天花粉多糖,可用于天花粉多糖的进一步分析。     

白毛藤多糖的分离、纯化和鉴定

目的分离、纯化和鉴定白毛藤S olanum ly ra tum中的多糖的成分。方法经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、酶-Sevag法脱蛋白得到的粗多糖,再经DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换和Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱色谱分离得到纯化的白毛藤多糖(SLPS),用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖,凝胶渗透色谱(GPC)法测定其相对分子质量,运用薄板色谱(TLC)和纸色谱(PC)法初步测其结构组成。结果红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰。结论本实验所提取的白毛藤多糖为单一组分的多糖。     

三七多糖的分离纯化及理化性质研究

三七Panax notoginseng（Burk．）F．H．Chen又名田七、参三七，为五加科人参属植物，是祖国医学中常用的理血类药物，传统上主要用于活血、化瘀、补血和止血。近年来对三七药性成分的研究主要集中在皂苷类成分上，而有关三七多糖的研究较少。三七粗多糖具有促进抗体生成，增强巨噬细胞吞噬活性的作用。本实验采用色谱技术对三七多糖进行纯化分级，获得PNPSⅡa、Ⅱb组分并对分离的单一成分进行光谱学分析，表明其是一种典型的多糖，水解后对其分子组成的研究发现，该多糖组分由阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖等单糖组成。     

地菍水溶性多糖MD1的分离纯化及组成分析

目的探讨地菍多糖的提取分离,以便研究其药理功效.方法采用Sevage法、DEAE-纤维素(DEAE-52)离子交换层析法及Sephadex G-100凝胶过滤法提纯地菍多糖(MD1).纯化的地菍多糖MD1的结构经TLC、UV、IR、GC、HPLC方法以及高碘酸氧化、Smith降解等方法进行测定.结果地菍多糖MD1是有许多支链的中性多糖,其组成为Rha∶Xyl∶Ara∶Man∶Glc∶Gal=1∶1.7∶1.9∶24.5∶12.3∶3.5(摩尔比),分子量为3.1×103.