膳食纤维与肌醇六磷酸对1,2-二甲肼诱导大鼠大肠癌发生的作用

背景:随着国内人民生活水平的不断提高,大肠癌的发生率不断提高。大量的流行病学调查表明,膳食因素与大肠癌的高发有着密切的相关性。目的:通过建立大鼠大肠癌的动物模型,观察膳食纤维与肌醇六磷酸(植酸)对大肠癌发生的作用。设计:随机区组设计。单位:青岛大学医学院营养学研究所。材料:实验于2004-03/12在青岛大学医学院营养学研究所进行。将86只4周龄雄性Wistar大鼠按体质量随机区组分为纤维素组(14只)、果胶组(14只)、植酸组(15只)、纤维素 植酸组(14只)、果胶 植酸组(14只)和对照组(15只)6组。方法:对照组:无膳食纤维的基础饲料;果胶组:添加10%的果胶;纤维素组:添加10%的纤维素;植酸组:添加2%的植酸钠饮水;果胶 植酸组:添加10%的果胶和2%的植酸钠饮水;纤维素 植酸组:添加10%的纤维素和2%的植酸钠饮水。对86只大鼠用1,2-二甲肼皮下注射诱发大肠癌,观察大鼠大肠肿瘤的发生率、肿瘤的数量及体积;测定大鼠大肠粘膜细胞的增殖活性(增殖细胞核抗原阳性细胞数/计数的细胞核总数)。主要观察指标:①各组大鼠大肠肿瘤的发生率,平均每只鼠的肿瘤个数和肿瘤体积变化。②大鼠大肠黏膜细胞的增殖活性。结果:①各组大鼠多死于喂养20周前。果胶组、果胶 植酸组及对照组各有1只大鼠死于喂养20周后。②各组大鼠大肠肿瘤的发生率与对照组相比差异无显著性(P>0.05),但植酸组平均每只鼠的肿瘤个数和肿瘤体积显著低于对照组数量:(1.1±0.2),(4.1±1.2)个/只,P<0.01;体积:(176.1±65.5),(1046.7±469.0)mm3,P<0.05,果胶组、果胶 植酸组平均每只鼠的肿瘤个数显著高于对照组(7.5±1.9),(7.2±1.0)个/只,P<0.05。③植酸组大鼠大肠黏膜细胞的增殖活性比对照组显著降低,果胶组大鼠大肠黏膜细胞的增殖活性比对照组升高(41.8±4.7)%,(83.6±2.9)%,(66.7±7.8)%,P<0.01和0.05。结论:膳食中添加果胶能增加诱癌大鼠患大肠肿瘤的危险,而饮水中添加2%的植酸可降低诱癌大鼠患大肠肿瘤的危险。     

复合膳食纤维对大鼠脂代谢的长期作用及其机制

目的:观察复合膳食纤维B(dietary fiber complex B,DFC-B)对大鼠脂代谢的长期作用及可能的作用机制。方法:健康SD大鼠84只,诱导成高脂血症模型后按体质量及血胆固醇均衡的原则分为7组,以基础及高脂饲料作为对照组,其余5组给不同水平的DFC配方B,实验期3个月,观察DFC对大鼠血脂、肝脂水平以及粪胆汁酸排泄的长期影响。 结果:与高脂组相比,大鼠血TC在不同水平的DFC组均显著降低,差异有显著性意义(P<0.05)。DFC可以长期有效地降低大鼠肝胆固醇的水平(mmol/L)(0.42±0.12～2.20±1.02和3.26±0.16,P<0.05)。不同水平DFC均能增加大鼠粪胆汁酸的排泄,并存在明显的量效关系,但长期食用较高剂量DFC会减少大鼠粪胆汁酸的排泄量。 结论:DFC确能长期有效地降低血浆胆固醇水平,减少肝胆固醇的沉 积,增加粪胆汁酸的排泄是DFC降低血胆固醇的机制之一。     

复合膳食纤维对脑损伤大鼠血浆D-乳酸含量的影响

在严重感染、创伤、休克等应激反应时胃肠道是最易受损的靶器官之一，可出现肠源性菌血症和毒血症，导致全身应激与胃肠屏障损伤的恶性循环。至今人们对肠道黏膜屏障损害的病理过程尚无特殊有效的防治手段。因此我们制备了Marmarou’s弥漫性轴索损伤大鼠模型。采用早期肠内单纯补充复合膳食纤维，与生理盐水、不含膳食纤维的肠内营养及含膳食纤维的肠内营养进行比较，探讨其对大鼠血浆D-乳酸含量和小肠组织病理变化的影响，间接评估伤后早期单纯给予复合膳食纤维对肠屏障的影响以及是否优于其他肠内营养。     

复合膳食纤维对大鼠脂代谢的长期作用及其机制

目的：观察复合膳食纤维B(dietary fiber complex B，DFC-B)对大鼠脂代谢的长期作用及可能的作用机制。方法：健康SD大鼠84只，诱导成高脂血症模型后按体质量及血胆固醇均衡的原则分为7组，以基础及高脂饲料作为对照组，其余5组给不同水平的DFC配方B，实验期3个月，观察DFC对大鼠血脂、肝脂水平以及粪胆汁酸排泄的长期影响。结果：与高脂组相比，大鼠血TC在不同水平的DFC组均显著降低，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。DFC可以长期有效地降低大鼠肝胆固醇的水平(mmol／L)(0．42&;#177;0．12～2．20&;#177;1．02和3．26&;#177;0．16,P&;lt;0．05)。不同水平DFC均能增加大鼠粪胆汁酸的排泄，并存在明显的量效关系，但长期食用较高剂量DFC会减少大鼠粪胆汁酸的排泄量。结论：DFC确能长期有效地降低血浆胆固醇水平，减少肝胆固醇的沉积，增加粪胆汁酸的排泄是DFC降低血胆固醇的机制之一。     

膳食纤维肠内营养对全肠道缺血再灌注大鼠肠屏障功能的影响

目的：通过建立大鼠全肠道缺血再灌注模型,探讨膳食纤维肠内营养对肠屏障功能的影响。方法：将实验大鼠随机分成4组,每组10只。第1组为对照组,第2组为缺血再灌注组（I/R组）,该两组为术后24h取材。第3组为普通肠内营养组（EN组）,第4组为膳食纤维肠内营养组（FEN组）,营养支持7d后取材。上述4组均行回、结肠形态学检查,细菌及内毒素移位、结肠固有层淋巴细胞分布检测,用循环D-乳酸法测定肠道通透性。结果：I/R组大鼠回、结肠黏膜萎缩,腺体稀疏,黏膜下层水肿、出血。FEN组肠黏膜形态学变化好于EN组。I/R组细菌移位率、血浆D-乳酸、血浆内毒素显著高于对照组;FEN组D-乳酸、内毒素水平低于EN组。I/R组结肠固有层CD4＋、CD8＋T淋巴细胞显著低于其余各组。FEN组CD4＋、CD8＋T淋巴细胞较EN组增多。结论：添加膳食纤维的肠内营养在维护肠黏膜屏障、改善肠道免疫功能、防止细菌及内毒素移位方面作用优于单纯肠内营养。膳食纤维能提高结肠局部免疫功能。     

卡巴胆碱复合膳食纤维对颅脑损伤后大鼠肠机械屏障保护作用的研究

目的 探讨早期灌胃给予卡巴胆碱复合膳食纤维对弥漫性颅脑损伤后大鼠肠黏膜机械屏障的影响。方法采用Marmarou模型制备方法造成成年雄性Wistar大鼠弥漫性颅脑损伤,造模后成活的大鼠随机分为4个实验组:生理盐水组(NS组,n=32)、卡巴胆碱组(CAR组,n=32)、膳食纤维组(DF组,n=32)、卡巴胆碱复合膳食纤维组(CAR+DF组,n=32)。另设只切开头皮的假手术组(对照组,n=20)。对照组自由饮水,实验组从造模成功后2 h开始灌胃,分别给予生理盐水、卡巴胆碱(100μg·kg-1·12h-1)、膳食纤维(8g·kg-1·d-1)、卡巴胆碱+膳食纤维,于伤后6、12、24、48 h活杀取材,检测血浆中二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性、D-乳酸含量,并观察小肠绒毛病理学改变。结果 成功制备弥漫性颅脑损伤大鼠模型,弥漫性颅脑损伤后大鼠肠黏膜固有层水肿,炎性细胞浸润,部分黏膜上皮细胞变性、坏死、脱落,绒毛变短,在12 h损伤最重。CAR组、DF组及CAR+DF组肠绒毛较NS组恢复快,表现为炎症、水肿减轻,肠绒毛高度增加,并且血浆中DAO活性及D-乳酸含量低于NS组,但至伤后48 h均并未恢复至对照组水平。CAR组、DF组与CAR+DF组比较,除6 h CAR组D-乳酸含量较CAR+DF组低且差异有统计学意义(P<0.05)外,CAR组、DF组及CAR+DF组6~48 h DAO活性、D-乳酸含量及肠绒毛高度均无统计学差异(P均>0.05)。结论 弥漫性颅脑损伤后早期灌胃给予卡巴胆碱、膳食纤维、卡巴胆碱复合膳食纤维可减轻肠黏膜损伤,保护肠黏膜机械屏障,但本实验中卡巴胆碱复合膳食纤维与单药应用比较并未显现出明显优势。     

缺氧诱导因子-1α的表达及其与大肠癌细胞凋亡及增殖的关系

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大肠癌中的表达及其与细胞凋亡、增殖的关系.方法:运用免疫组化的方法检测HIF-1α、Bcl-2、增殖细胞核抗原(PCNA)在13例正常大肠组织及50例大肠癌组织中的表达.结果:正常大肠组织HIF-1α均为阴性表达,癌组织中HIF-1α阳性表达率为64.0%.HIF-1α表达与肿瘤浸润、淋巴结转移及Dukes分期相关.Bcl-2在两组中阳性表达率为15.4%、76.0%,癌组织Bcl-2阳性表达率显著高于正常组织.Bcl-2表达与肿瘤大小、分化、Dukes分期无关.癌组织PCNA高增殖活性表达显著高于正常组织.大肠癌增殖程度与肿瘤浸润及Dukes分期相关.大肠癌HIF-1α表达与Bcl-2及PCNA增殖程度呈正相关.结论:HIF-1α抑制大肠癌细胞凋亡,促进其增殖,与肿瘤浸润转移密切相关,在大肠癌发生发展中发挥重要作用.     

血红素加氧酶-1对高糖诱导大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子β1和纤维连接蛋白表达的影响

目的研究血红素加氧酶-1（HO-1）对高糖作用下体外培养的大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）转化生长因子β1（TGF-β1）和纤维连接蛋白（FN）表达的影响。方法将原代培养的第3代RPMC随机分为对照组、高糖组、钴原卟啉（CoPP）＋高糖组和CoPP组。同步培养72h后,以反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组细胞TGF-β1和FNmRNA表达情况;酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞上清液中TGF-β1和FN的蛋白质水平。结果高糖组、CoPP＋高糖组和CoPP组的HO-1mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组,其中CoPP＋高糖组显著高于高糖组;高糖组和CoPP＋高糖组的FNmRNA及蛋白表达水平显著高于对照组及CoPP组;高糖组、CoPP＋高糖组TGF-β1mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组及CoPP组,其中CoPP＋高糖组显著低于高糖组。结论 HO-1可抑制高糖诱导的RPMCTGF-β1和FN的表达,具有抗腹膜纤维化的作用。     

羧胺三唑对TNF-α诱导的成纤维样滑膜细胞增殖及MMP-1、MMP-3表达的影响

目的 研究羧胺三唑（CAI）对TNF-α诱导的佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖以及MMP-1、MMP-3表达的影响.方法 用弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎模型,并分离培养佐剂性关节炎大鼠的FLS.实验分为对照组,20 ng/ml TNF-α组,同时加入TNF-α和溶剂DMSO组,以及同时加入NF-α和不同浓度CAI（10、20、40 μmoL/L）组.CCK-8法检测FLS的增殖反应,Western blot法检测MMP-1和MMP-3的蛋白表达.结果 20 ng/mlNF-α能明显增加佐剂性关节炎大鼠FLS的增殖反应,增加MMP-1和MMP-3的蛋白表达（P＜0.01）.CAI（20、40 μmol/L）能够显著抑制TNF-α对佐剂性关节炎大鼠FLS的促增殖反应（P＜0.01）,抑制率分别为（31.13±7.07）％和（42.48±5.84）％,且CAI能够降低TNF-α诱导的MMP-1和MMP-3产生（P＜0.01）.结论 CAI体外给药能够抑制TNF-α诱导的佐剂性关节炎大鼠FLS增殖以及产生MMP-1和MMP-3,这可能是其抗关节炎作用的机制之一.     

c-Jun氨基末端激酶信号通路抑制对白细胞介素-1诱导的大鼠椎间盘纤维环细胞基因表达的影响

目的研究c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路抑制对白细胞介素-1(IL-1)诱导的大鼠椎间盘纤维环细胞基因表达的影响,为阻止椎间盘退变提供新的治疗靶点。方法分离培养大鼠尾椎纤维环细胞,IL-1刺激纤维环细胞后,Western blot检测JNK信号通路的激活;传代的纤维环细胞培养48 h后,以IL-1(10 ng/ml)加或不加JNK通路抑制剂SP600125刺激24 h,Real-Time PCR检测JNK通路抑制对IL-1诱导的大鼠纤维环细胞基因表达的影响。结果 JNK通路抑制可显著抑制IL-1引起的诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(Cox-2)和基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13表达上调,同时,可显著逆转IL-1引起的Ⅰ型胶原和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因表达下调。结论 JNK通路抑制可作为阻断IL-1诱导的椎间盘退变的治疗靶点。     

内皮素—1在大肠癌中的表达及其临床意义

目的 研究ＥＴ－１含量与大肠癌分化,淋巴结转移及预后的关系,方法 对６９例经５年以上随访的大肠癌手术切除标本及１５例正常大肠粘膜活检标志进行免疫组化染色及图像分析,结果 大肠癌及正常大肠粘膜上皮细胞中均有ＥＴ－１阳性表达,但大肠癌细胞的阳性表达率,阳性强度及ＥＴ－１的含量均高于正常大肠粘膜细胞（Ｐ〈０．０１）,大肠癌中高,中,低分化癌组之间的阳性反应也不相同,分化低者阳性率最高,阳性强度最大,含量     

Effects of differing purified cellulose, pectin and hemicellulose fiber diets on mucosal morphology in the rat small and large intestine

The effects of increasing amounts of differing single-fiber sources in chemically-defined and nutritionally-equivalent diets on morphometric measurements of the rat small and large intestinal mucosa were examined. Male Wistar rats received a fiber-free diet, or diets containing 4.5% or 9.0% cellulose, pectin, or hemicellulose. Cellulose and pectin increased jejunal (but not ileal) villus and crypt heights, whereas hemicellulose increased ileal (but not jejunal) mucosal height. Moreover, cellulose and pectin (but not hemicellulose) increased crypt heights in cecum and proximal (but not distal) colon. Parallel increases in the mitotic index were seen with cellulose and pectin diets, but there was a decrease with hemicellulose, suggesting different mechanisms for altered patterns of cell renewal induced by orally-administered single-fiber sources. These changes indicate that differing single-fiber sources exert differential structural effects along the length of the small and large intestine in the rat.     

地塞米松对大鼠光气急性肺损伤血管生成素-1、2的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠光气急性肺损伤(ALI)血管生成素-1、2(Ang-1,2)表达的影响.方法 采用大鼠光气吸入性肺损伤动物模型.36只SD大鼠随机(随机数字法)分为3组:正常对照组(吸入与光气染毒组同等流量的空气)、光气染毒组(吸入8.33 mg/L纯度为100％的光气5min)、地塞米松处理组(尾静脉注入2.5 mg/kg地塞米松1h后,吸入同等剂量的光气).染毒2h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)测定中性粒细胞细胞数、蛋白含量和肺湿/干质量比(W/D).采用双抗体夹心酶标免疫分析法(ELISA法)测定各组血清和BALF中Ang-1,2水平.RT-PCR法对肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2mRNA的水平进行半定量研究.Western blot技术检测肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2蛋白含量.结果 与正常对照组比较,光气染毒组肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组的肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-1和Tie-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-1和Tie-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论 地塞米松可能通过抑制Ang-2表达并促进Ang-1和Tie-2表达来有效地保护大鼠光气吸入性急性肺损伤.     

Effects of dietary fiber on vascular calcification by repetitive diet-induced fluctuations in plasma phosphorus in early-stage chronic kidney disease rats

Vascular calcification progresses under hyperphosphatemia, and represents a risk factor for cardiovascular disease in chronic kidney disease (CKD) patients. We recently indicated that phosphorus (P) fluctuations also exacerbated vascular calcification in early-stage CKD rats. Dietary fiber intake is reportedly associated with cardiovascular risk. This study investigated the effects of dietary fiber on vascular calcification by repeated P fluctuations in early-stage CKD rats. Unilateral nephrectomy rats were used as an early-stage CKD model. For 36 days, a P fluctuation (LH) group was fed low-P (0.02% P) and high-P (1.2% P) diets alternating every 2 days, and a P fluctuation with dietary fiber intake (LH + F) group was fed low-P and high-P diets containing dietary fiber alternating every 2 days. The effect on vascular calcification was measured calcium content. Effects on uremic toxin were measured levels of indoxyl sulfate (IS) and investigated gut microbiota. The LH + F group showed significantly reduced vessel calcium content compared to the LH group. Further, dietary fiber inhibited increases in blood levels of IS after intake of high-P diet, and decreased uremic toxin-producing intestinal bacteria. Dietary fiber may help suppress progression of vascular calcification due to repeated P fluctuations in early-stage CKD rats by decreasing uremic toxin-producing intestinal bacteria.     

青年大肠癌的内镜特点和临床分析

目的 探讨30岁以下大肠癌的内镜表现及主要临床特点。方法 回顾性分析电子结肠镜 病理确诊30岁以下大肠癌58例。结果 30岁以下大肠癌早期无特异症状，早期诊断率低。进展期主要症状为排便里急后重38例(66％)，黏液脓血便24例(41％)，临床诊断符合率近31％。内镜下发病部住以直肠最常见(54％)，其次为乙状结肠(24％)；病变形态以浸润型常见(69％)，组织学以腺癌尤其低分化腺癌和印戒细胞癌常见；病变侵犯肠腔1周者达72％，侵犯肠腔1／2周以上者达97％。结论 30岁以下大肠癌无特异临床表现，病变恶性程度高，发展快，内镜确诊时往往为进展期，预后差。     

血管内皮细胞生长因子诱导大肠癌LOVO细胞粘附作用

目的研究观察血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)对大肠癌LOVO细胞粘附作用。方法采用3H-TdR掺入及鼠尾胶粘附实验测定VEGF诱导大肠癌LOVO细胞同质性和异质性粘附作用。结果1ng/ml、5ng/ml VEGF诱导LOVO细胞60min、90min3H-TdR掺入实验(dpm/min)分别为1558.27±251.11、1380.03±198.05和2829.30±2262.14、2641.6±473.24,10ng/ml VEGF诱导LOVO细胞60min、90min、120min3H-TdR掺入实验分别为1302.20±201.04、2797.50±413.24、2066.79±187.97,显著低于对照组60、90、120min的1984.14±216.74、3361.00±175.27、4173.40±373.98,P<0.05或0.01;5ng/ml、10ng/ml VEGF诱导LOVO细胞60分钟鼠尾胶粘附实验OD值为0.250±0.018、0.230±0.036,1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml VEGF诱导LOVO细胞90min、120min鼠尾胶粘附实验OD值分别为0.263±0.021、0.373±0.083、0.378±0.080和0.329±0.056、0.389±0.095、0.419±0.102,分别高于对照组的0.130±0.025、0.143±0.036、0.210±0.028,P<0.05或0.01。结论VEGF可以促进大肠癌细胞异质性粘附作用以及降低大肠癌细胞的同质性粘附作用。     

细胞间黏附分子-1、巨噬细胞炎性蛋白-2在吸烟诱导的支气管炎大鼠模型中的变化及其意义

目的:制备吸烟诱导的慢性支气管炎大鼠模型,探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1),巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)在慢性支气管炎大鼠模型气道炎症中的作用.方法:雄性Wistar大鼠随机分为两组,对照组、模型组.采用单纯吸烟的方法建立慢性支气管炎大鼠模型.光镜下观察支气管肺组织病理形态学改变.分析支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数和分类;用ELISA法测定肺组织匀浆MIP-2的含量;用免疫组化方法检测ICAM-1在各组支气管肺组织中的表达.结果:模型组病理形态学改变符合人类慢性支气管炎的特点.模型组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及肺毛细血管内皮细胞ICAM-1表达强度与BALF中白细胞总数、中性粒细胞数成显著正相关(分别为r=0.882及r=0.843;均P＜0.01);肺组织匀浆MIP-2与BALF中白细胞总数、中性粒细胞数成显著正相关(分别为r=0.706及r=0.819;均P＜0.01).与对照组比较,模型组支气管上皮细胞,肺泡上皮细胞及肺毛细血管内皮细胞ICAM-1表达强度明显增强(P＜0.01);肺组织匀浆MIP-2含量明显升高(P＜0.01).结论:ICAM-1表达上调及MIP-2的特异性趋化作用可能参与了吸烟诱导的慢性支气管炎大鼠模型的气道炎症过程.     

微血管计数与大肠癌临床病理特征及预后的关系

目的探讨微血管计数（MVC）与大肠癌临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组织化学法及鼠抗人CD34单克隆抗体标记43例大肠癌组织中的微血管,对微血管进行计数,并分析其与大肠癌组织学分级、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、预后及Dukes分期的关系。结果MVC与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移和远处转移、Dukes分期（AB期和CD期）密切相关（P〈0．01或P〈0．05）,与组织学分级无关（P〉0．05）;MVC≥169．2的大肠癌患者5年生存率较低（P〈0．05）。结论MVC可作为判断大肠癌临床病理特征和预后的可靠指标之一。