血液中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶耐药基因型研究

目的 了解本地区血液标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分离率、耐药性和基因型.方法 收集临床血液标本分离的产ESBLs的大肠埃希菌26株,应用PCR基因扩增技术分别检测SHV、TEM、CTX-M、PER、CTX-M-2、Ampc、GES基因,DNA测序确定CTX-M、TEM基因型.结果 在26株菌株中15株为CTX-M型,占57.69%,11株为TEM型,占42.31%.结论 本地区临床血液标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型.     

多重PCR检测临床产ESBLs大肠埃希菌的耐药基因型研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性、产ESBLs的阳性率及耐药基因之间的关系。方法采用Kirby-Bauer(K-B)琼脂扩散法检测120株临床分离的大肠埃希菌对18种抗生素的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,运用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果120株大肠埃希菌产ESBLs的有51株,阳性率为42.5%。120株大肠埃希菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的大肠埃希菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢类抗菌药物的耐药率高达100%;51株产ESBLs菌株其中46株扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,2株扩增到SHV基因,1株OXA型基因,未检出PER和VEB型。结论大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青酶烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物;产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型别为CTX-M型和TEM型。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型分型及耐药分析

[目的]了解大连市中心医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌耐药基因型及耐药情况。[方法]收集该院2005年11月-2006年2月连续不重复产ESBLs大肠埃希菌40株,采用美国国家临床实验室标准化委员会推荐的表型确认方法进行筛选。在此基础上,分别用针对TEM、SHV、CTX-M-Ⅰ、CTX-M-Ⅱ、CTX-M-Ⅲ、CTX-M-Ⅳ型β-内酰胺酶基因的六对特异性引物对每株细菌进行聚合酶链反应（PCR）,毛细管电泳方法检测所有产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因。应用K-B纸片扩散法检测产ESBLs大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性。[结果]毛细管电泳结果显示,40株产ESBLs大肠埃希菌中,仅携带一种基因型的分别为SHV型1株（2.50%）,CTX-M-Ⅰ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅱ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅲ型2株（5.00%）,CTX-M-Ⅳ型4株（10.00%）。有18株（46.15%）同时携带两种或两种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型共同存在;药物敏感试验结果显示,产ESBLs大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素均表现出较高的耐药性,对碳青霉烯类药物（亚胺培南和美洛培南）的耐药率最低。[结论]该院产ESBLs大肠埃希菌近期流行的主要基因型别为CTX-M型,而且多基因携带情况常见;碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌耐药性及基因型检测

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠埃希菌的分子流行病学及对常用抗菌药物的耐药情况.方法 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的初筛试验采用纸片法,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其ESBLs基因片段;用K-B琼脂扩散法进行菌株的药敏试验.结果 124株大肠埃希菌中共检出54株产ESBLs (43.5%).在耐药性检测中,其对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药率分别为3.7%、0.0%和5.6%,PCR扩增基因型阳性结果为TEM型23株、SHV型13株、CTX-M型41株、OXA型8株,其基因型以CTX-M型为主.结论 本院大肠埃希菌产ESBLs率显著升高,应引起重视;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带两种或两种以上耐药基因;其治疗首选药物建议使用亚胺培南、头孢哌酮/ 舒巴坦和哌拉西林/ 他唑巴坦.     

产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和克雷伯菌的主要基因型分布特点。方法用表型确证试验筛选出临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌114株。应用PCR方法扩增产酶株的TEM、SHV和CTX-M基因。结果PCR结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的总阳性率分别为40.4%、20.7%和83.3%,其中大肠埃希菌分别为48.1%、1.3%和93.5%,肺炎克雷伯菌分别为24.3%、81.1%和62.2%。46.8%的大肠埃希菌和51.4%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因。结论产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV。大多数菌株同时携带多个基因。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的:了解某医院分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理用药提供依据。方法:收集大肠埃希菌544株,其中161株为产ESBLs菌株。采用VITEK 2 Compact分析仪进行药敏检测,双纸片协同试验确证产ESBLs菌株,PCR法扩增耐药基因。结果:产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药率高于不产ESBLs菌株（P<0.05~P<0.01）。161株产EBSLs菌株携带CTX-M-9型基因98株、TEM型84株、CTX-M-1型62株、OXA-2型15株、OXA-10型7株、SHV型5株。CTX-M-1型和TEM+CTX-M-1型菌株对头孢他啶的耐药率分别为43.5%、59.1%明显高于CTX-M-9型和TEM+CTX-M-9型菌株15%、11.8%的耐药率（P<0.05和P<0.01）。结论:该院产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M与TEM型,产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药性高于不产ESBLs菌株。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的：分析临床大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的基因型分布以及产ESBLs细菌中头孢菌素酶的存在情况。方法：质粒接合实验分析耐药性转移，根据超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶各种已知基因序列设计引物，进行聚合酶链反应分析，确定超广谱β-内酰胺酶的基因型分布以及头孢菌素酶基因。结果：80.4％的菌株质粒接合实验成功，66％的菌株为TEM基因型，14％的菌株为SHV基因型，10％的菌株为CTX-M型。2株菌同时存在AmpC酶。TEM阳性的大肠埃希菌RAPD带型呈多样性。结论：临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性可以发生转移，ESBLs以TEM基因型为主，部分菌株为SHV、CTX-M型。同一菌株内可以产生2种不同基因型的超广谱β-内酰胺酶。产ESBL菌株不是以细菌克隆播散为主。     

泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药表型和基因分型

目的:了解本地区泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药表型及其基因型分布.方法:收集2003-03/2004-06间临床分离的尿培养阳性大肠埃希菌共258株,ESBLs的检测采用NCCLs规定的ESBLs型筛选和确定实验,用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性检测,并应用聚合酶链反应(PCR)方法对所分离的产ESBLs菌株进行SHV,CTX-M基因型检测.结果:产ESBLs大肠埃希菌检出率为24.0%(62株),67.7%(42株)携带CTX-M基因,14.5%(9株)的菌株携带SHV型基因,并有1.6%(1株)同时携带CTX-M基因和SHV型基因.结论:本地区泌尿系感染产ESBLs大肠埃希菌以耐头孢曲松和头孢噻肟为主;CTX-M型的ESBLs最为常见.     

杭州市产超广谱β-内酰胺酶菌株耐药性和基因型分布研究

目的了解杭州市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ES-BLs基因型分布.方法采用浓度梯度法(Etest)测定分离自杭州市五家医院的51株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对12种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),通过聚合酶链反应(PCR)法及克隆测序分析其所产生的ESBLs基因型.结果 51株菌株对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮舒巴坦、头孢他啶和哌拉西林/三唑巴坦的敏感率为60.00%～80.00%,而对其它抗菌药物敏感率较低,对头孢噻肟的敏感率仅为5.88%.51株菌株有47株产CTX-M型ESBLs,其中CTX-M-14最多见,其次为CTX-M-3、CTX-M-24、CTX-M-22.结论杭州市产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性严重,ESBLs基因型以CTX-M型为主.     

大肠埃希菌药敏结果和产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药基因分析

目的 对我院2011年上半年分离出的147株大肠埃希氏菌药敏及耐药基因型进行分析,为临床合理应用抗生素,减少耐药菌株的出现提供参考依据.[方法]采用梅里埃公司的VITEK2全自动微生物分析仪,对标本进行细菌鉴定和药敏分析.对产生超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum β-lactamase,ESBLs)的大肠埃希菌确证实验,采用美国临床检验室标准化委员会( Clinical and Laboratory Standards Institude,CLSI)推荐的纸片扩散法,进行确证实验.耐药基因采用多重PCR检测鉴定.[结果]147株大肠埃希氏菌,ESBLs菌株有71株,百分比为48.1%.对71株ESBLs大肠埃希氏菌的质粒进行PCR扩增,显示29株CTX-M基因阳性,检出率为40.8%;TEM 基因型菌株25株,所占百分比35.2%;SHV基因型菌株17株,所占百分比23.9%型;OXA基因型菌株11株,所占百分比15.4%.[结论]本地临床分离大肠埃希菌对抗生素敏感性,存在有一定的地域差别,这可能跟不同地区用药习惯用药历史有关.本地区ESBLs大肠埃希菌具有较高的CTX-M型ESBLs检出率.是本地区产ESBLs大肠埃希菌流行的的主要耐药基因型.     

深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药表型和基因型分析

目的:分析临床分离大肠埃希菌耐药性、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率及耐药基因之间的关系。方法:用K-B法检测117株大肠埃希菌耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,用PCR法检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果:117株大肠埃希菌产ESBLs 49株,阳性率41.9%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率100%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率>95%,对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率<20%,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。49株产ESBLs菌株PCR均扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,未扩增到其他基因型。DNA序列分析证实为CTX-M-14亚型、CTX-M-3亚型和广谱酶TEM-1亚型基因。结论:大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著;耐药基因以CTX-M-14亚型为主,其次为CTX-M-3亚型,尚未检出其他ESBLs基因。TEM-1亚型广谱内酰胺酶基因在大肠埃希菌中普遍存在。     

第三代头孢耐药大肠埃希菌表型及基因型研究

目的 检测3代头孢耐药的大肠埃希菌的表型及基因型,了解产ESBLs大肠埃希菌的最佳检测底物及耐药机制,以利于耐药性的控制与指导临床用药。方法 收集广东省中医院来自各种标本对3代头孢耐药的大肠埃希菌242株,用双纸片确诊法检测ESBLs;标准纸片扩散法(Kirby-Bauer test)检测耐药性;聚合酶链反应（PCR）对ESBLs阳性菌进行耐药基因检测并测序。结果 检测ESBLs的最佳底物是头孢噻肟。242株大肠埃希菌中,产ESBLs 146株,占60.3％ ,产酶株对头孢噻肟等16种抗生素的耐药率比不产酶株都有不同程度增加,但亚胺培南对所有产酶株都敏感。146株产ESBLs细菌中,120株产CTX-M型β-内酰胺酶,52株产TEM型β-内酰胺酶,12株产OXA型β-内酰胺酶,除66株为CTX-M单独存在外,其余均与TEM、OXA共存。结论 临床资料及药敏资料证明产ESBLs大肠埃希菌是重要的医院内感染细菌,且呈多重耐药,治疗中碳青霉烯类药物是最可靠的;含β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂耐药程度也较高,应适当增加剂量,并可与阿米卡星联合应用。表型为产ESBLs的菌株中,主要基因型为CTX-M型β-内酰胺酶,其次为TEM型。     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的分布及基因型

目的:了解临床分离的革兰阴性杆菌中产ESBLs的流行特征及ESBLs基因型.方法:对我院临床分离的革兰阴性杆菌,采用改良三维试验检测产 ESBLs 菌株,用PCR对 ESBLs 基因进行分型.结果:175株革兰阴性杆菌分离出49株产ESBLs 菌,阳性率28%,包括大肠埃希菌、克雷伯菌属、阴沟肠杆菌、弗劳地枸椽酸杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌.其中,第一位是阴沟肠杆菌(34.7%,17/49),其次是大肠埃希菌(30.6%,15/49).每种细菌产ESBLs率前三位是阴沟肠杆菌(56.6%,17/30),大肠埃希菌(37.5%,15/40),肺炎克雷伯菌(25.0%,6/24).各病区中神经科产ESBLs菌分离率最高(32.7%).49株产ESBLs 菌携带TEM, SHV, CTX-M分别为34,5,16株,有17株同时携带两种β-内酰胺酶基因的菌株,占34.7%, 其中TEM CTX-M型13株,占基因双阳性菌株的76.5%.结论:我院产ESBLs菌以阴沟肠杆菌、大肠埃希菌为主.神经科是主要产ESBLs菌的病区.ESBLs基因以 TEM 型、CTX-M 型为主,携带双基因的菌株在我院有流行.     

儿童患者中检出产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因分型

目的了解本地区儿童患者临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药基因型别和耐药性的变化情况。方法收集自儿童患者分离鉴定的大肠埃希菌株1327株，通过K-B法作药敏试验，采用美国NCCLS1999年推荐的抑制剂增强纸片法确认产ESBLs株，并对ESBLs进行初步基因分型。结果检出产ESBLs菌株702株，检出率为52．9％，产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为55．5％。95．0％；PCR初步分型结果，单独携带TEM型基因的占56．7％，单独携带SHV型基因的占15．0％，携带两种基因的占25．8％。结论产ESBLs大肠埃希菌检出率逐年上升，具有多重耐药的特点；产ESBLs大肠埃希菌主要携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因，其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶。     

产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌中TEM基因型特征研究

目的 分析临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌中TEM亚型的分布及药敏情况.方法 采用 PCR对ESBLs大肠埃希菌进行TEM基因及TEM-1、TEM-2基因亚型检测研究.结果 在临床分离的351例大肠埃希茵中共检出产ESBLs茵198例(56.4%),198例产ESBLs大肠埃希菌TEM基因型阳性率分为85.4%(169例),其中TEM-1、TEM-2阳性率分别为63.1%(125例)与22.2%(44例),产ESBLs大肠埃希菌TEM-1基因型与TEM-2基因型阳性率比较,有显著性差异.结论 产ESBLs大肠埃希菌耐药情况日趋严重,临床主要流行耐药基因型是TEM-1型,耐药性基因型监测对临床合理使用抗菌药物具有很重要的指导意义.     

临床大肠埃希氏菌耐药性检测及超广谱β-内酰胺酶流行病学调查

目的了解广州地区临床大肠埃希氏菌耐药及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况。方法对临床分离鉴定的57株大肠埃希氏菌进行5大类15种抗菌药物的耐药性检测。通过表型确认试验筛选出产ESBLs菌株,采用PCR法检测15种临床重要且常见的耐药基因。结果 57株大肠埃希氏菌对15种抗菌药物产生了不同程度的耐药性。其中有23株产ESBLs,ESBLs产生率为40.4%;24株产TEM,13株产CTX-M(其中,8株产CTX-M-55、4株产CTX-M-14、1株产CTX-M-27),2株产OXA-1。结论广州地区大肠埃希氏菌耐药情况依然严峻。同时,ESBLs流行趋势发生了变化:以前以流行CTX-M-9型为主,现在以CTX-M-1型和CTX-M-9型同时流行为主要特征。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型分析

目的 了解我院临床分离大肠埃希茼产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率和基因型分布情况.方法 确证试验鉴别临床分离大肠埃希菌中产ESBLs株,PCR扩增CTX-M耐药基因,PCR.RFLP和DNA测序确定CTX-M基因型.结果 确证实验证明,88株大肠埃希菌中有57株ESBLs阳性,其中54株CTX-M基因扩增阳性.PCR-RFLP分析发现,10株携带CTX-M-1组基因,39株携带CTX-M-9组基因,另外5株同时携带CTX-M-1和CTX-M-9组基因.测序证实7株CTX-M-9组扩增产物均为CTX-M-14型,3株CTX-M-1组扩增产物均为CTX-M-3型.结论 大肠埃希菌中产CTX-M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX-M-14和CTX-M-3型为主.     

大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因型与耐药相关性分析

[目的]对临床分离的大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)株的发生率、基因类型及其对抗菌药物的耐药相关性进行分析,为临床治疗产ESBLs大肠埃希菌感染提出建议.[方法]常规分离临床标本,经API系统鉴定.按照NCCLs推荐的纸片扩散法表型确证实验进行ESBLs检测.采用PCR方法对细菌进行耐药基因扩增.采用二倍琼脂稀释法测定抗菌药物对所有菌株的最低抑菌浓度(MIC).[结果]84株大肠埃希菌中产ESBLs30株,占35.71%.30株表型确证实验ESBLs阳性菌中,23株菌有至少一组引物扩增呈阳性.基因型构成以CTX-M型为主.最低抑菌浓度结果,产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南敏感率为100%;对含酶抑制剂的复合β-内酰胺类抗菌药物哌拉西林/他唑巴坦敏感率为76.67%;对头孢噻肟的耐药率为83.33%,对头孢他啶耐药率为46.67%.[结论]本实验ESBLs产生株基因型以CTX-M型为主,其对含酶抑制剂的复合β-内酰胺类抗菌药物哌拉西林/他唑巴坦相对敏感,对头孢他啶耐药率比头孢噻肟相对低,亚胺培南是最敏感的抗菌药物.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药机制研究

目的研究临床分离产ESBLs大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学情况。方法PCR检测大肠埃希菌的I类整合酶、插入序列共同区(ISCR/orf513)、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因;以肠杆菌科间的重复序列(ERIC)为引物进行基因扩增,SPSS13.0分析其遗传多态性。结果102株产ESBLs的大肠埃希菌中,I类整合酶阳性菌有59株(57.8%),orf513阳性菌有6株(5.9%),ESBLs中的TEM型有91株(89.2%),SHV型有0株,CTX-M型有35株(34.3%)。根据指纹图谱,可以把102株大肠埃希菌基因型分为82种,经SPSS系统聚类分析,可归为17个大类。结论产ESBLs大肠埃希菌的整合酶阳性率较高;整合子和ISCR可以共存;ERIC-PCR是一种效果较好的基因分型方法。