通用模板信号扩增技术(UT-PCR)

PCR是最常用的分子生物学诊断技术,但常用的PCR都存在种种不足,制约了其在临床的应用.通用模板信号扩增技术(UT-PCR)解决了传统PCR核酸模板质量容易引起的假阴性以及难以实现多基因/多位点同时检测两大难题.UT-PCR具有灵敏度高、特异性强、假阴性低,并能实现高通量检测,在临床诊断和科学研究中有广泛的应用空间.     

检测严重急性呼吸综合征相关冠状病毒的通用模板信号扩增技术

严重急性呼吸综合征 (SARS)是由一种新型冠状病毒(Co V)引起的急性传染性疾病 ,建立快速、准确的 SARS-Co V检测技术是应对 SARS的重要措施之一。目前有关SARS- Co V检测方法的建立主要集中在 EL ISA和 PCR技术的应用方面。以 Taqman为代表的荧光定量 PCR技术已成为分子生物学诊断的重要手段 ,但无论在科研还是临床应用过程中 ,目前的 PCR技术仍存在一些不足 [1 ] 。通用模板信号扩增技术 (universal template signal amplification technol-ogy,UT- PCR) [2 ]是在 Taqman技术基础上发展起来的检测技术 ,克服了 Taqman探…     

噬菌体扩增技术在结核分枝杆菌检测中的应用体会

作为对人类最具威胁性的传染病之一,近年来结核病流行正逐步加剧.目前对结核病诊断主要依靠与实验室检查、临床症状、体征及胸片等其他辅助检查相结合.     

采用PCR技术从高GC含量绿脓杆菌模板中扩增长片段外毒素A全基因

从高GC含量的模板中用PCR方法扩增长片段DNA序列是相当困难的。本室通过对PCR反应体系和条件的优化 ,成功地从绿脓杆菌高GC含量的染色体模板中扩增到了 1966bp的外毒素A(PseudomoneasaeruginosaexotoxinA ,PEA)全长结构基因 ,为实现PEA的高效表达奠定了基础。1　材料与方法1 1　绿脓杆菌PA10 3菌株染色体DNA和PCR引物的制备　　按常规方法提取绿脓杆菌PA10 3染色体DNA。参照Gray等公布的序列设计一对分别位于PEA结构基因两侧的引物。5′引物 :5′ GATCAGCCTCATCCTTCAC 3′(Tm =66) ;3′引物 :5′ GGTCGCGGCAGT…     

通用PCR技术检测临床标本中病原菌的污染及防护

鉴定病原微生物的传统方法是实验室分离培养、生物化学、形态学和血清学试验，都需要微生物生长，而且它们已明显限制了对细菌多样性的认识，并在许多情况下不能实行。分子生物学方法已成为检测细菌、病毒、真菌和原虫的公认方法．尤其是细菌、真菌和原虫的rRNA基因，即通用或广域模板已普遍用于感染病原体检测。在所有已知细菌(包括真细菌)16SrRNA基因中都发现了一些保守区域，     

荧光探针定量PCR技术

PCR技术是通过对基因的选择性片段进行体外高效扩增,实现目的基因的检测。荧光探针定量PCR(FQ-PCR)是一种新的基因定量检测技术,国外文献多用“实时定量PCR(real time quantitative PCR)”或“TaqMan PCR(以美国PE公司商标命名)”。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针,巧妙地把核酸扩增(PCR)、杂交及光谱技术结合在一起,从而实现了对目的基因的准确定量检测,正发展成为临床实验诊断的常规技术。     

临床基因诊断技术（三）

二、核酸杂交技术1.制备探针:1cDNA探针:从相应组织中分离出mRNA,经逆转录得cDNA,由cDNA再复制成双链DNA,后者被重组到适当的质粒中(贮存),转化到细胞中增殖后酶制取。2从建因工程构建的基因文库中,选取含稳定基因的重组体酶切制取。3人工合成(DNA合成仪)寡核苷酸,一般不超过50     

干细胞的研究与临床应用（三）：—干细胞技术在临床的应用

干细胞技术应用于临床的三个阶段(1)把一种组织的成体干细胞直接移植给相应组织坏损的病人。血液系统干细胞的研究已经有几十年的历史 ,大家熟悉的“骨髓移植”治疗白血病 ,实际就是移植造血干细胞。瑞典神经学家及其同事应用从流产胎儿脑中分离的神经组织细胞 ,移植入病人的脑中来治疗帕金森症 ,对一个术后 10年的病人进行跟踪研究 ,发现移植的神经元仍然存活并继续产生多巴胺 ,病人的症状明显改善。我们已经建立了从流产胎儿的组织中分离各种组织成体干细胞的技术 ,准备在几年内建立一个包含 4万份不同组织配型的成体干细胞库 ,就可以基本…     

罗氏诊断（Roche Diagnostics）发布全球首个基于PCR技术的HPV病毒检测试剂盒

罗氏诊断于 2 0 0 4年 1月 30日宣布推出CobasAmplicorHPV核酸检测试剂盒 ,以提高针对妇女的HPV(人类乳头状瘤病毒 )核酸筛查。使用罗氏诊断HPV核酸检测试剂盒 ,可以定期筛查HPV病毒所有基因型 ,以便及早发现 ,从而极大地降低宫颈癌发病率罗氏诊断(Roche Diagnostics)发布全球首个基于PCR技术的HPV病毒检测试剂盒     

因定量诊断技术评价及其临床应用

为了使《中国医药导刊》的内容更贴进读者,全面介绍医药各方面的发展动向,本刊从2003年第1期起,每期设1～2个专题,重点介绍、讨论某一领域的有关进展和存在问题,供读者思索和争鸣。本期重点报道基因诊断技术,该专题由本刊副总编辑郑怀竞教授组稿和审阅。     

Begg正畸技术的临床应用（51例报告）

５１例应用Ｂｅｇｇ正畸技术矫治错畸形，各种类型的牙性及轻度骨性错畸形，均取得满意的效果。对牙轴唇倾并伴有深覆的安氏Ⅱ类错打开咬合、内收前牙的效果尤佳。     

罗氏诊断（Roche Diagnostics）发布全球首个基于PCR技术的HPV病毒检测试剂盒

罗氏诊断于2 0 0 4年1月30日宣布推出CobasAmplicorHPV核酸检测试剂盒,以提高针对妇女的HPV(人类乳头状瘤病毒)核酸筛查。使用罗氏诊断HPV核酸检测试剂盒,可以定期筛查HPV病毒所有基因型,以便及早发现,从而极大地降低宫颈癌发病率。罗氏诊断(Roche Diagnostics)发布全球首个基于PCR技术的HPV病毒检测试剂盒     

红外热像技术在疼痛临床的应用（二）

红外热像诊断技术的基本原理是通过接收人体辐射的红外线,利用映像光学和计算机技术,将人体表面的不同温度分布以黑白或伪彩色图像显示并记录下来。     

免疫组织化学实验技术及其临床应用（第一部分）

免疫组织化学实验技术及其临床应用（第一部分）于颖彦附属二院病理科（０５００００）关键词免疫组织化学；实验技术；临床应用免疫组织化学是在组织或细胞上进行的一种化学反应。７０年代杂交瘤技术与单克隆抗体的问世，特别是免疫酶标技术在福尔马林固定、石蜡包埋组织...     

细胞化学染色技术进展与临床应用

细胞化学染色技术是细胞学和化学相结合而成的一门科学。它是一种以形态学为基础,通过化学处理,在显微镜下对各种化学成分作定位、定性、半定量分析的技术。这种技术于上世纪中期盛行于血液病实验室,在血细胞的识别、血液病诊断和鉴别诊断中发挥过相当大的作用。后来由于有些染色方法特异性不强、难以标准化、新染色技术推出不多、有些项目正在被免疫学技术和分子生物学技术所取代等原因,细胞化学染色技术进展缓慢。但是细胞化学染色技术仍然是骨髓细胞形态学诊断中重要辅助诊断项目,尤其是在白血病诊断方面,世界卫生组织(W H O)及国际血…