不同浓度葡萄糖对成骨细胞凋亡的影响

目的:观察不同浓度葡萄糖对体外培养的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响.方法:不同浓度的葡萄糖、甘露醇分别刺激体外培养的MC3T3-E1成骨细胞1、3、7、12 d,用流式细胞术检测成骨细胞的凋亡.结果:甘露醇组MC3T3-E1成骨细胞凋亡较正常对照组有一定的增加,但无统计学差异(P＞0.05);而葡萄糖呈浓度、时间依赖性诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡(P＜0.05,P＜0.01).结论:高糖状态下,MC3T3-E1成骨细胞凋亡显著增加.     

不同浓度Netrin-1对人滋养细胞株TEV-1增殖凋亡的影响研究

目的 探讨不同浓度Netrin-1对滋养细胞株TEV-1增殖凋亡的影响。 方法 行经0、10、100及1 000 ng/ml Netrin-1干预TEV-1 24 h后,采用噻唑兰MTT比色法检测细胞增殖指数、流式细胞法检测细胞凋亡率,采用免疫荧光组织化学方法鉴定TEV-1表达Netrin-1情况,采用实时定量PCR及western印迹分别检测各组细胞Netrin-1mRNA及蛋白变化情况。 结果 以递增浓度的Netrin-1预处理TEV-1细胞24 h后,TEV-1细胞增殖行为无影响,但TEV-1细胞凋亡率随Netrin-1浓度增加而降低,当Netrin-1刺激浓度达1 000 ng/ml时,TEV-1细胞总凋亡率下降至(6.63±0.07)%,较空白组(0 ng/ml)凋亡率(14.44±0.85)%下降明显(P<0.01)。Netrin-1表达于滋养细胞细胞质。在培养的滋养细胞株TEV-1中加入不同剂量的Netrin-1干预24 h后,TEV-1 Netrin-1蛋白表达水平无明显变化。 结论 Netrin-1能明显降低滋养细胞的凋亡程度,期间涉及机制与滋养细胞Netrin-1表达水平无关。      

孕激素对成骨细胞增殖和凋亡的影响

绝经后骨质疏松症（osteoporosis，OP）采用孕激素替代治疗可促进骨形成，减少骨丢失，其机制尚未完全阐明。研究发现，成骨细胞的增殖和凋亡在骨重建过程中起重要作用。我们观察了孕酮（progesterone，P）对人成骨细胞（human osteoblast cells，hOB）增殖和凋亡的影响，旨在探讨孕激素治疗绝经后OP的作用机制。     

不同浓度As2O3对293t细胞和HeLa细胞的凋亡及增殖的影响

目的初步研究三氧化二砷(As2O3)作为急性早幼粒细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)的治疗剂和环境污染物的毒副作用.方法用As2O3作用于293t细胞和HeLa细胞不同时间后,用流式细胞仪、Hoechst33258染色、形态学和超微结构观察检测细胞凋亡和增殖;检测293t细胞增殖用细胞记数板连续记数6天.结果 3～5μmol/L As2O3作用24h可诱发HeLa细胞发生凋亡,而293t则不发生明显的凋亡.低浓度As2O3(<2μmol/L)可抑制293t细胞增殖.结论不同浓度的As2O3对HeLa细胞和293t细胞的增殖和凋亡作用不同.     

不同碘浓度对培养血管内皮细胞增殖的影响

目的：探讨不同碘浓度对人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞株HUECV-304,在培养液中加入不同浓度的碘化钾,共分9组,分别为正常对照组及加碘组（0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0μmol/L）,连续培养24h后,观察细胞形态改变并细胞计数,MTT比色法检测细胞活性。结果:0.5～4.0μmol/L剂量组在24h内内皮细胞计数和MTT检测均明显高于对照组,且细胞形态没有异常。而5.0μmol/L以上组,虽在8h内内皮细胞数目和MTT检测均明显高于对照组,但12h后内皮细胞数目和MTT检测均明显低于对照组;显微镜观察在4h始即可看见内皮细胞内有中毒颗粒出现,且随浓度增加和时间延长而增加,并出现明显的内皮形态变化。结论:碘对体外培养的内皮细胞有刺激增殖的作用,其作用与投碘的剂量及作用时间有关。     

不同葡萄糖浓度对小鼠胰岛β细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨不同葡萄糖浓度对小鼠胰岛β细胞株MIN-6细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度葡萄糖培养MIN-6细胞72h,MTT法观察不同浓度葡萄糖作用后MIN-6的细胞活性增殖率,Annexin V-FITC染色流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果低浓度（5.6mmol/L、11.1mmol/L）及高浓度葡萄糖（33.3mmol/L）作用72h后可抑制MIN-6细胞的生长;5.6mmol/L、11.1mmol/L、33.3mmol/L组处理72h后,细胞凋亡明显（P〈0.05）。结论低浓度（5.6mmol/L）及高浓度（33.3mmol/L）葡萄糖均可抑制小鼠MIN-6细胞增殖并使其凋亡增加。     

不同血清浓度对大鼠软骨细胞增殖、形态和基因表达的影响

目的 观察不同血清浓度对大鼠软骨细胞体外培养的形态、增殖和基因表达的调控作用。方法 取出生24h SD大鼠关节处软骨,0.1%浓度的Ⅱ型胶原酶多次消化后获得软骨细胞。软骨细胞培养于含5%胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）,10% FBS和20% FBS的DMEM低糖培养基中,分别为5FBS组,10FBS组和20FBS组。24h后镜下观察细胞形态变化,CCK8方法检测24、48和72h软骨细胞增殖。Western blot法检测软骨指标Ⅱ型胶原A1（COL2A1）和MMP13（matrix metalloproteinases13）表达,定量PCR检测软骨特异性基因Sox9、A-can、ADAMTS5、MMP9和MMP3的表达及代谢相关基因Nme2和PnP表达。结果 5FBS组的软骨细胞呈由鹅卵石样排列,10FBS组和20FBS组细胞呈现长梭形改变,且血清浓度越大,形态改变越明显。和5FBS组比较,10FBS组和20FBS组细胞增殖明显,呈血清浓度依赖性增加。10FBS组和20FBS组的MMP13表达显著上调,Ⅱ型胶原表达显著下调。PCR结果表明,和5FSB组比较,10FBS组和20FBS组的A-can和Sox9表达下降,MMP9、MMP3和ADAMTS5表达上调,且基因表达变化和血清浓度改变呈正相关。同时随着血清浓度增加,Nme2和PnP表达显著上调。结论 血清浓度的增高促进软骨细胞代谢,引起软骨细胞退变。     

不同浓度五味子乙素对人胃癌细胞株MGC-803增殖、凋亡的影响

目的：观察五味子乙素诱导人胃癌细胞株MGC-803凋亡作用。方法：用10、50、100、200μmol/L浓度五味子乙素作用胃癌细胞株48 h,倒置显微镜下观察细胞增殖情况;MTT法检测五味子乙素对细胞增殖的抑制作用;凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结果：倒置显微镜下,随着五味子乙素作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降;MTT法亦检测到上述结果;当五味子乙素作用浓度是100μmol/L时,可检测到明显的凋亡细胞。结论：高浓度的五味子乙素可诱导胃癌细胞株MGC-803细胞的凋亡,具有量效依赖关系。     

不同浓度脂多糖对JEG-3细胞系凋亡的影响

目的探讨不同浓度脂多糖(LPS)对JEG-3细胞系凋亡的影响,以阐明LPS在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法采用流式细胞术检测JEG-3细胞凋亡率,荧光染色和透射电镜观察滋养细胞凋亡的数目变化、细胞形态和超微结构。结果荧光染色及电镜观察到LPS处理后滋养细胞染色体浓缩,细胞核裂解,见凋亡小体等典型凋亡表现。25、50、100ng/ml的LPS处理后JEG-3细胞的凋亡率分别为(2.06±0.33)%、(7.44±0.68)%、(13.44±0.90)%,显著高于对照组(P均<0.01)。结论LPS能够诱导滋养细胞过度凋亡,且凋亡率随着LPS浓度的增加而增加。     

不同浓度丙泊酚对缺氧海马神经元凋亡的影响

目的:探讨不同浓度丙泊酚预处理对缺氧海马神经元凋亡的影响。方法:体外培养8～10天的海马神经元,随机分成四组:缺氧组;低浓度丙泊酚(5μg/ml);中浓度丙泊酚(10μg/ml);高浓度丙泊酚(20μg/ml)。测定MTT,流式细胞仪测定细胞凋亡比例。结果:与缺氧组比较,丙泊酚预处理能增加神经细胞的增殖力,减少神经元的凋亡比例。中浓度丙泊酚组此作用最强。结论:丙泊酚预处理可以增加神经细胞的增殖力,减少神经元的凋亡比例。该作用具有剂量相关性,适中浓度(10μg/ml)的丙泊酚此作用最强。     

不同浓度葡萄糖对大鼠大脑皮层神经元凋亡的影响

目的探讨不同浓度葡萄糖对大鼠大脑皮层神经元凋亡的影响。方法取新生1 d内SD大鼠的大脑皮层,皮层神经元经原代培养,通过胰蛋白酶消化法获取单细胞悬液,免疫荧光染色鉴定神经元纯度,然后随机分为正常组(葡萄糖浓度为25 mmol.L-1)及50、75、100 mmol.L-1葡萄糖组,Hoechst染色检测细胞凋亡,噻唑蓝比色法检测各组神经元活性。结果与正常组和50 mmol.L-1葡萄糖组相比,75、100 mmol.L-1葡萄糖组大鼠大脑皮层神经元凋亡率明显升高(P<0.01),活性显著下降(P<0.01);且100 mmol.L-1葡萄糖组大鼠大脑皮层神经元凋亡率高于75 mmol.L-1葡萄糖组(P<0.01),大鼠大脑皮层神经元活性低于75 mmol.L-1葡萄糖组(P<0.01)。结论高浓度的葡萄糖可引起大鼠大脑皮层神经元的凋亡,且神经元的凋亡情况呈剂量依赖关系。     

不同浓度的续断总皂甙对成骨细胞增殖、分化和细胞周期的影响

目的通过续断总皂甙对成骨细胞的体外培养,探寻不同浓度的续断总皂甙对成骨细胞增殖、分化和细胞周期的影响及可能存在的量效关系。方法 (1)分离、培养小鼠的原代成骨细胞。(2)将续断总皂甙配制成不同浓度的培养基(10-6g/ml、10-5 g/ml和10-4g/ml 3组),并分别培养成骨细胞,采用四氮唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖能力;细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测细胞的分化;流式细胞分析细胞周期。结果与空白对照组比较,续断总皂甙能够促进成骨细胞的增殖,增加碱性磷酸酶的表达及显著提高细胞增殖率、S期细胞比率和细胞增殖指数,其中10-5g/ml浓度组比10-6g/ml和10-4g/ml浓度组更加显著。结论在一定浓度范围内续断总皂甙可促进成骨细胞增殖、分化和提高细胞增殖指数,可能是该药促进骨折愈合、防治骨质疏松的机制之一。     

不同浓度菟丝子乙醇提取物对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

目的评估不同浓度的菟丝子乙醇提取物对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法将培养好的宫颈癌Hela细胞分为5组,对照组仅给予1%DMSO,其余4组为实验组,分别加入3.125、6.25、12.5、25mg/ml菟丝子乙醇提取物。分别在培养12、24、48h时检测HeLa细胞增殖情况,培养48h后分析各组的细胞周期以及细胞迁移和侵袭能力的变化;检测Caspase-3和Bcl-2蛋白的表达。结果与对照组相比,仅12.5、25mg/ml组G2/M期的细胞数比例显著增加,G0/G1期细胞比例下降（均P＜0.05）。培养24、48h时25mg/ml组对Hela细胞的增殖抑制率均显著高于其余各组（均P＜0.05）,12.5mg/ml组在24、48h的增殖抑制率均显著高于12h的增殖抑制率（均P＜0.05）,25mg/ml组的增殖抑制率随着时间增加显著增加（均P＜0.05）。迁移及侵袭实验中12.5、25mg/ml组的穿膜细胞数较对照组均明显减少,Hela细胞中Caspase-3表达较对照组显著增加,Bcl-2蛋白表达较对照组显著减少（均P＜0.05）。结论高浓度的菟丝子乙醇提取物可以通过阻滞细胞周期于G2/M期,抑制Hela细胞的侵袭和迁移,通过上调Caspase-3和下调Bcl-2促进Hela细胞凋亡,提示高浓度的菟丝子乙醇提取物具有抗宫颈癌的作用。     

不同浓度葛根素对体外培养血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察不同浓度葛根素对体外培养血管内皮细胞增殖的影响。方法：取3只5d龄SD大鼠·分离心脏，在体外消化收集血管内皮细胞并进行培养，第3代细胞用于实验。除空白对照组外·血管内皮细胞分别于含0．01、0．1、1、10和100umol／L葛根素的培养基中进行培养。24h后纠置显徽镜下观察细胞形态并进行细胞计数，采用甲基噻唑基四唑比色法、免疫组织化方法和流式细胞仪检测血管内皮细胞的增殖情况。结果：与空白对照组比较，1、10和100umol／L葛根素组血管内皮细胞细胞计数增加（P〈0．05，P〈0．01）·增殖细胞梭抗啄阳性细胞比率及细胞分裂增殖指数增加（P〈0．05，P〈0．01）．结论：葛根素对体外培养的血管内皮细胞有明显的促进增殖作用，其作用与葛根素的剂量有关。     

不同浓度rhEPO对神经干细胞体外培养增殖的影响

目的观察不同浓度rhEPO对神经干细胞体外培养增殖的影响,探讨rhEPO联合神经干细胞移植治疗脊髓损伤修复的影响。方法用不同浓度（5、50、500 U/mL）rhEPO干预从新生SD大鼠（出生24 h以内）取材来的神经干细胞,分别检测每组神经干细胞克隆形成率 在不同时间分别用MTT法检测细胞增殖率 神经干细胞分化的免疫细胞化学染色及计数。结果添加rhEPO各实验组细胞增殖较快最终神经球的数量多于对照组,以50 U/mL rhEPO组作用显著 添加rhEPO各实验组的细胞生长曲线均高于对照组,尤其是50 U/mL rhEPO组显著高于对照组 NSE和GFAP免疫细胞化学染色和计数结果显示,50 U/mL rhEPO组中NSE免疫阳性细胞明显多于对照组（P〈0.01）。结论rhEPO对神经干细胞体外培养增殖有促进作用,尤以适中浓度（50 U/mL）作用更加明显。     

TSA对不同肝癌细胞株增殖和凋亡的作用及其对HBV复制的影响

目的:比较组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylase,HDAC)抑制剂HDAC曲古抑菌素A(Trichostain A,TSA)对不同肝癌细胞株和正常肝细胞株增殖和凋亡的作用.初步研究TSA对HBV复制的影响.方法:应用四氮唑蓝(MTT)法,DNA琼脂糖凝胶电泳检测经不同浓度TSA处理过的3种肝癌细胞株HepG2、QGY7701、HepG2.2.15和正常肝细胞株L02,观察细胞增殖和凋亡的改变.用微离子酶联免疫法检测TSA处理组和对照组HepG2.2.15细胞上清中HBsAg和HBeAg的含量,实时荧光定量PCR检测细胞上清中HBV DNA含量,初步探讨TSA对HBV复制的影响.结果:TSA在一定浓度范围内能明显抑制不同肝癌细胞株的增殖,呈剂量依赖关系.对正常肝细胞株L02的增殖无明显影响.DNA凝胶电泳结果显示:在TSA处理组的3种肝癌细胞株HepG2、QGY7701、HepG2.2.15中可观察到细胞凋亡特异的DNA梯形带,然而,在对照组及正常肝细胞株中未见DNA梯形带.经TSA处理后的HepG2.2.15细胞上清中HBsAg、HBeAg及HBV DNA的含量均高于对照组1倍以上(P＜0.05).结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA虽然可抑制肝癌细胞增殖并诱导凋亡,但是,TSA刺激HBV的复制.因此,对HBV阳性的肝癌患者,应尽量避免使用TSA.     

褪黑素对结肠癌细胞系RKO增殖和凋亡的影响

目的研究褪黑素(Mel)作用下,结直肠癌细胞系RKO细胞增殖和凋亡发生的变化。方法 MTT法检测Mel对RKO细胞增殖的影响,并同时观察不同浓度Mel作用下相应受体表达的变化,通过Hoechst染色观察细胞核染色结果,判断细胞凋亡情况,并同时用Western blot观察凋亡相关蛋白表达的变化。结果毫摩尔级的Mel可以抑制细胞增殖,膜受体MEL1AR随着浓度的增加表达上调,Hoechst染色显示Mel作用下细胞凋亡增加,抑制凋亡的相关蛋白,如Bcl-2和Bcl-XL的表达明显下降,而促进凋亡的相关蛋白,如Bax、Bak等表达量相应提高。结论 Mel通过受体MEL1AR发挥作用,抑制细胞的增殖,并促进细胞凋亡。     

白藜芦醇对胃腺癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的:研究白藜芦醇对胃癌细胞株增殖和凋亡的影响?方法:不同浓度白藜芦醇(0~150 μmol/L)作用人胃腺癌细胞株BGC823(低分化)和SGC7901(中分化),CCK-8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫印迹检测凋亡相关蛋白survivin的表达?结果:白藜芦醇对胃癌细胞株增殖能力呈时间和浓度依赖性抑制,150 μmol/L白藜芦醇作用人胃癌细胞株BGC823和SGC7901 72 h后,早期和晚期凋亡细胞比率均明显增加,而survivin蛋白表达均明显下降(P < 0.05)?结论:白藜芦醇以浓度和时间依赖性模式抑制胃癌细胞的增殖能力和活性,诱导胃癌细胞株BGC823和SGC7901发生凋亡,其机制可能与下调survivin蛋白的表达有关?     

miR-145对视网膜色素上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究微小RNA miR-145对视网膜色素上皮细胞(RPE)增殖和凋亡的影响。方法:建立hRPE细胞的培养及传代体系,并鉴定其细胞迁移能力,构建miR-145慢病毒载体后转染hRPE细胞,MTT检测慢病毒转染RPE细胞后细胞增殖状态细胞,Transwell法检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率。结果:培养成功的hRPE细胞的迁移能力转移能力强,能继续后续慢病毒感染后实验。miR145慢病毒载体转染hRPE细胞后,细胞的增殖减慢,RPE细胞周期G_1期被抑制,细胞凋亡率上升。结论:miR145能减缓视网膜色素上皮细胞增殖,并增加其凋亡率,对由于RPE细胞增殖引起的疾病如增殖性玻璃体视网膜病变等有一定治疗前景。