犬体内唾液酸受体的组织分布及对H3N2亚型犬流感病毒的易感性研究

目的测定犬体不同组织器官内流感病毒受体的类型和分布差异,验证犬对H3N2亚型犬流感病毒的易感性。方法采集健康英国史宾格犬的不同组织器官,利用凝集素免疫荧光组织染色方法,检测组织内人型流感病毒唾液酸受体唾液酸α2,6-半乳糖(SAα2,6Gal)和禽型流感病毒唾液酸受体唾液酸α2,3-半乳糖(SAα2,3Gal)类型与分布;用H3N2亚型犬流感病毒人工感染英国史宾格犬,采集不同组织器官,用免疫组织化学染色法进行病毒的组织分布差异性分析。结果多种组织器官中同时存在着SAα2,6Gal和SAα2,3Gal两种类型的受体,少数组织器官中存在单一受体;SAα-2,6Gal受体在分布的广泛性、在同一器官中的表达量上高于SAα-2,3Gal型受体。人工感染后,病毒分布量与受体量整体趋势基本一致,仅在个别器官中存在差别。结论禽型和人型流感病毒受体广泛分布于犬的各个组织器官,犬具备同时感染禽型和人型流感病毒的分子基础。     

广州市A型流感病毒血凝素基因的遗传变异研究

 【目的】 了解2006-2007年广州地区流感的病原学分布,掌握 H1N1亚型流感病毒血凝素基因(HA)的遗传和进化特征。【方法】 选取2006-2007年广州市19个流感监测点的流感病毒代表株共45株,应用病原学、血清学和分子生物学方法对病毒的型别进行了鉴定;选取24株H1N1亚型流感病毒进行全长HA基因的扩增、克隆与分子进化分析。 【结果】 A型流感病毒H1N1和B型流感病毒交替成为广州地区2006年流感的优势流行株;2006-2007年广州地区H1N1亚型流感病毒流行株在HA蛋白的抗原区、受体结合位点和潜在糖基化位点均发生了点突变;遗传进化分析结果表明,24株H1N1亚型毒株间基因同源性的平均值为98.4%;与WHO推荐的疫苗株(New Caledonia/20/1999和Solomon Islands/3/2006)相比,同源性高达96.6%和97.8%。【结论】 2006年,广州地区流感的病原体为H1N1亚型流感病毒和B型流感病毒;2006-2007年广州市H1N1亚型流感病毒HA基因发生了一定程度的变异, 有必要对毒株的变异加强监测;WHO推荐的2006-2007年H1N1亚型流感病毒疫苗株适用于我国人群的免疫预防。     

2009-2013年度上海市虹口区流行性感冒监测分析

目的了解2009-2013年度上海市虹口区流行性感冒(简称流感)的流行特征,为预防控制流感提供科学依据。方法对2009-2013年度监测流感样病例(ILI)监测资料、病原学监测结果及聚集性疫情信息进行统计分析。结果上海市虹口区2009-2013年度流感监测哨点医院ILI就诊百分比(ILI%)平均为0.59%,病例以25~59岁青壮年为主,期间共监测3 428份ILI病例的咽拭子样本,其中流感病毒核酸检测阳性819份,阳性率23.89%;分离流感病毒254株,其中47株(18.50%)为甲型H1N1亚型,108株(42.52%)为季节性H3N2亚型,13株(5.12%)为B(yamagata)系,86株(33.86%)为B(Victoria)系;各年度间流感亚型构成差异有统计学意义(χ2=220.97,P<0.001)。报告聚集性流感疫情12起,经检测其中6起病原体为甲型H1N1亚型流感,5起病原体为乙型流感,1起病原体为季节性H3N2亚型流感。结论 2009-2013年度上海市虹口区流感活动强度有所不同,不同亚型流感病毒交替流行。加强流感监测,可以更好的了解疾病特征,有效控制流感疫情。     

2007年深圳市第四人民医院流感监测结果分析

目的了解深圳市福田区2007年流感病原学和流行特征。方法每周采集流感样病例的咽拭子10～40份,用MDCK细胞培养法进行流感病毒分离,采用血凝抑制试验鉴定流感病毒型别。结果2007年全年共监测样品273份,分离出流感病毒62株,阳性率为22.8%,其中H1N1亚型2株,H3N2亚型41株,B(Victoria)亚型13株,B(Yamagata)亚型6株。6月流感分离率(51.52%)最高。结论2007年深圳市福田区流感流行情况较为平稳,有明显季节性,在6月出现流感病毒分离高峰,流行优势株为H3N2亚型,与全市流行株型相同。     

鸡流感病毒SAα-2,3 Gal和α-2,6 Gal受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的作用

目的：探讨鸡流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法：应用凝集素组织化学染色技术检测鸡呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鸡呼吸道、消化道各解剖部位结合。结果：鸡呼吸道均表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,SA-α2,6Gal受体在气管、支气管和次级支气管呈高密度分布,而SA-α2,3Gal受体在呼吸道的分布以副支气管上皮细胞为主;消化道结肠上皮细胞SA-α2,3Gal受体呈弥漫分布,但SA-α2,6Gal受体仅少量分布。同时,禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1均可与呼吸道和消化道上皮细胞结合。结论：鸡同时表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于病毒基因重配,可充当产生人类流感大流行潜在的中间宿主。     

全国流感监测网络宁夏监测点2004-2005年度流行性感冒监测结果分析

目的了解宁夏监测地区2004-2005年度流行性感冒(流感)流行情况和病毒流行株及其构成。方法每周统计监测点流感样病例(ILI),采集ILI咽拭子标本,用鸡胚和狗肾传代细胞进行流感病毒分离,采用血凝抑制试验(HI)进行流感病毒型别鉴定。结果两所监测医院共统计上报流感样病例289例,采集ILI标本220份,分离出流感病毒26株,其中H1N1、H3N2和B型流感病毒分别为14株、6株和6株。结论2004-2005年度宁夏流感监测地区的流行情况较为平静,流行优势株为H1N1亚型流感病毒。     

唾液酸受体并非流感病毒各亚型在雪貂组织中播散分布的决定因子

目的 探讨流感病毒在雪貂组织中的分布与唾液酸受体的关系.方法 用病毒分离的方法分析流感病毒H5N1( SZA06H,A/VN/1203/04),SH1N1,H3N2(Brisbane/09,HK/09)在雪貂各组织中分布,用直接免疫荧光法分析雪貂各组织的唾液酸受体的分布,并通过体外实验证实活病毒与组织上受体的结合.结果 H5N1(SZ)和H5N1(A/VN/1203/04)在雪貂的肝、脾、肺、肠中有分布,H5N1(A/VN/1203/04)在脑组织中也有分布,而SH1N1、H3N2( Brisbane/09,HK/09)只分布于肠组织.而唾液酸受体SAα2,6Gal和SAα2,3Gal的Ⅰ型受体分布于脾、心、肺、肠、脑组织中,和SAα2,3GalⅡ型受体分布于肝、脾、心、肺、肠、脑组织.SH1N1病毒与SAα2,6Gal能结合,而H5N1与SAα2,3Gal结合.结论 H5N1能在雪貂的多器官组织组织中分布和繁殖,而H3N2和SH1N1仅能在肠组织中分布繁殖.SAα2,6Gal和SAα2,3Gal受体在雪貂多器官组织中均有表达,说明唾液酸受体是病毒进入的门户,但不是病毒分布的决定因子.     

泰安市2007-2008年度流感检测分析

目的分析泰安市2007-2008年度流行性感冒的病原学检测结果,了解泰安市流感病毒亚型分布。方法采集流感样病例(ILI)的咽拭子样品,用狗肾细胞(MDCK)进行病毒分离,采用血凝抑制试验(HI)和RT-PCR进行流感病毒型别鉴定。结果检测国家级流感监测医院ILI咽拭子样品281份,分离出流感病毒94株,阳性分离率为33.45%,经分型鉴定H3N2亚型51株,H1N1亚型1株,B型Yamagata系39株,Victoria系3株。结论2007-2008年度泰安市流感流行的优势毒株为H3N2亚型和B型Yamagata系,同时有H1N1亚型和B型Victoria系毒株的存在。     

宁夏2006—2007年度流行性感冒监测结果分析

为了解宁夏监测地区2006—2007年度流行性感冒流行情况,每周统计监测点流感样病例,采集流感样病例咽拭子标本,用MDCK细胞和鸡胚进行流感病毒分离,采用血凝抑制试验进行流感病毒型别鉴定。监测点医院上报流感样病例596例,采集流感样病例507例,分离出流感病毒43株,其中A(H1N1)亚型10株、A(H3N2)亚型32株、1株为其它病毒株。2006—2007年度宁夏流感监测地区的流行情况相对来说较为平稳,流行优势株为A(H3N2)亚型。     

2株广西鸭源H6N2亚型禽流感病毒遗传进化以及对BALB/c小鼠的致病性分析

目的：探讨广西鸭源H6N2亚型禽流感病毒的分子遗传特征，评估其对哺乳动物BALB/c小鼠的致病性。方法：选择前期在广西分离的2株鸭源性H6N2禽流感病毒A/DK/GX/3101/2018(GX3101)、A/DK/GX/5220/2018(GX5220)，基因测序和遗传进化分析病毒全基因组的核苷酸同源性及遗传进化，受体结合特异性法分析2株病毒的受体结合特性，应用BALB/c小鼠评估鸭源H6N2病毒的致病性。结果：2株H6N2病毒属于欧亚谱系，HA裂解位点处为PQIETG/GL，属低致病性禽流感病毒特征，HA蛋白氨基酸位点出现E190V位点的氨基酸突变，2株病毒均识别与结合禽型SAα-2,3 Gal受体。病毒接种小鼠后，肺组织病毒分离培养阳性，小鼠肺组织出现炎症细胞浸润、肺泡结构完整性破坏，免疫组化检测病毒抗原显示，GX3101病毒接种小鼠的肺组织出现流感病毒核蛋白（NP）阳性。结论：广西鸭源H6N2毒株具有禽流感病毒的特点，可不经适应直接跨种属间屏障感染哺乳动物小鼠，须密切监测家禽中流感病毒H6N2流行和进化演变。     

深圳市2007年H3N2亚型流感病毒基因特性分析

目的了解深圳市2007年H3N2亚型流感病毒流行情况及血凝素基因特性。方法用狗肾传代细胞（MDCK）和鸡胚进行流感病毒分离。收获病毒后提取病毒RNA，进行逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR），扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后送大连宝生物公司纯化及测序。测序结果用Simmonic软件和Mega3．1软件进行序列分析。结果H3N2亚型流感毒株为深圳市2007年流感流行的优势株，与2006年的深圳株比较未发生明显变异，但与2007年的疫苗株相比，有多个位点的氨基酸发生了替换，造成了其间的抗原性发生了一定的变化。结论深圳市2007年H3N2亚型流行株，并未形成一个新的变种。推测是由于与疫苗株之间的抗原性的变异导致了2007年深圳市H3N2亚型流感的流行。     

深圳市福田区2007年流感监测结果分析

目的分析深圳市福田区2007年流感流行特征。方法对深圳市福田区人民医院流感样病例进行监测，并对部分流感样病人采集咽拭子进行流感病毒分离和型别鉴定。结果2007年全年共监测样品273份，分离出流感病毒62株，阳性率22．8％，其中H1N1亚型2株，H3N2亚型41株，B（Victoria）亚型13株，B（Yamagata）亚型6株。结论2007年深圳市福田区流感流行情况较为平稳，流行优势株为H3N2亚型，与全市流行株型相同。     

2010年深圳市流感流行病学分析

目的 对2010年深圳市流感监测结果进行分析,了解流感的流行趋势,为流感防治提供科学依据.方法 收集全市31家监测单位的流感样病例数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析.结果 2010年深圳市的流感样病例百分比(ILI％)为5.43％.2010年全市共采集日常监测ILI咽拭标本4 031份,分离出445株流感病毒,阳性率为11.0％,其中14株季节性H1N1亚型(3.1％),42株季节性H3N2亚型(9.4％),171株甲型H1N1亚型(38.4％),213株B(Victoria,47.9％)亚型,5株B(Yamagata,1.1％)亚型.2010年全市报告了89起ILI暴发疫情,发病总人数741人,流感PCR检测阳性79起,其中季节性甲型6起(6.8％),乙型67起(75.3％),甲型H1N1流感6起(6.8％).结论 2010年深圳市流感活动较低,未出现明显的高峰.     

深圳南山区2005年流行性感冒病原学监测分析

目的了解流感病毒的流行情况，探讨流感流行规律，为制订流感控制措施提供依据。方法对辖区监测门诊及疫情点的疑似流感样病例采集咽拭子标本，接种狗肾传代细胞（MDCK）培养进行流感病毒分离及进行血凝试验，并对阳性者进行血凝抑制试验进行分型鉴定。结果全年检测流感样标本与咽拭子标本共480份，分离出流感病毒64株，分离率13．33％。分别为H1N1亚型9株、H3N2亚型44株、B型11株。结论2005年深圳市南山区是以H3N2亚型流感病毒流行为主，九月份以H3N1亚型和B型流感流行为主。     

鹌鹑流感病毒SA受体的分布特点及其在流感病毒生态系统中的作用

目的探讨鹌鹑流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法应用亲和组化法检测鹌鹑呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鹌鹑呼吸道、消化道各解剖部位结合。结果鹌鹑呼吸道均表达SAα-2,3Gal受体和SAα-2,6Gal受体,SAα-2,3Gal受体在呼吸道气管、支气管、次级支气管和消化道结肠上皮细胞均呈弱阳性分布,而副支气管呈阳性弥漫分布;SAα-2,6Gal受体在呼吸道气管、支气管和次级支气管多呈强阳性弥漫分布,而在副支气管、消化道结肠均为缺乏或仅极少量分布。禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1均可与呼吸道和消化道上皮细胞结合。结论鹌鹑同时表达SAα-2,3Gal受体和α-2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于病毒基因重配,可充当产生人类流感大流行潜在的中间宿主。     

全国流感监测网络宁夏监测点2007-2008年度流感监测结果分析

目的了解宁夏2007-2008年度流感流行状况、流感病毒流行株及其构成,为流感预防控制工作提供科学的依据。方法每周统计哨点流感样病例(ILI)数、爆发点ILI数,采集ILI咽拭子标本,用狗肾传代细胞(MDCK)进行流感病毒分离,采用血红细胞凝集试验(HA)和红细胞凝集抑制试验(HI)进行流感病毒型别和亚型鉴定。结果监测哨点医院共上报ILI575份,ILI占门急诊就诊比例0.18%。采集ILI557例,分离出流感病毒51株,其中B型49株,A型(H3N2)2株;爆发一起,爆发点ILI67例,采集ILI咽拭子10份,分离出A型(H3N2)3株。病毒分离阳性率为9.52%,B型(Yamagata株系)占分离阳性毒株的90.74%;A型(H3N2)亚型占9.26%。结论宁夏2007-2008年度流感流行状况显平静、散发状态,优势株为乙型(Yamagata株系),弱势株A型(H3N2)引起小范围局部爆发。     

上海市浦东新区2012-2014年流行性感冒病原学监测

目的 了解上海市浦东新区流行性感冒(流感)的病原学特征及流行规律,比较儿童和成人的亚型特点.方法 对2012-2014年流感病原学监测结果进行分析.结果 2012-2014年流感病毒总体阳性率为19.11％,监测峰值是每年的冬春季和夏季,检测到的流感病毒以季节性A(H3N2)型为主,占62.78％,各年龄组流感病毒阳性率差异有统计学意义(P＜0.05),40岁以上年龄组阳性率最高.儿童和成人的流感病毒阳性率分别为13.50％和25.19％,差异有统计学意义(P＜ 0.01).成人与儿童流感病毒亚型构成不同,而季节性流行规律是一致的.2012年冬春季优势株是B(Victoria)型,夏季是季节性A(H3N2)型.2013年流感病毒阳性率高峰不明显,优势株是季节性A(H3N2)型.2014年春季是B (Yamagata)型、季节性A(H3N2)型、新甲H1N1型交替流行,夏季优势株是季节性A(H3N2)型.结论 上海市浦东新区2012年和2014年流感的流行强度较高,2013年流行强度有所下降,3年中检测出的流感病毒以季节性A(H3N2)型为主,冬春季和夏季阳性率较高.成人流感病毒阳性率高于儿童,成人流感病毒亚型季节性流行规律与儿童一致.     

郴州市2006～2008年流行性感冒病原学监测结果分析

目的了解郴州市2006～2008年流感流行状况及流感毒株的型别分布,分析其流行趋势,为流感防制提供科学依据。方法采集流感样病例（ILI）的咽拭子标本,用传代狗肾细胞（MDCK）进行病毒分离,采用血凝抑制实验（HI）进行流感病毒型别鉴定。结果3年全市4家哨点医院三年共采3124份ILI咽拭子标本,分离到毒株383株。分离阳性率为10．82％,经国家流感中心最后复核鉴定的结果为：H1N1亚型76株,H3N2亚型181株,B型105株,未分型21株;流感及IU暴发疫情病例咽拭子标本78份,分离到流感病毒39株,分离阳性率为50．00％,分型鉴定结果为：H1N1亚型2株,H3N2亚型5株,B型32株。结论郴州市流感监测地区2006-2008年均有流感活动,2006年。HIN1亚型为优势株,2007年H3N2亚型为优势株,2008年,HIN1亚型和H3N2亚型为优势株。而暴发疫情则主要由B型流感病毒引起。     

江西省2004-2005年流感病原学监测结果分析

目的 对流感病毒进行病原学监测，进一步了解流感病毒的变异特点，探索流感流行的规律。方法 采集国家级监测哨点医院流感样病人的鼻咽拭子标本，用MDCK细胞分离流感病毒。结果 2004年共采集标本551份，分离出流感病毒65株，分离率11．81％，其中H3N2亚型53株；B型（Yamagata系）12株。2005年共采集标本926份，分离出流感病毒140株，分离率15．12％，其中H1N1亚型36株；H3N2亚型85株；B型（Yamagata系）28株。结论 2004年江西省有H3N2亚型和B型（Yamagata系）流感病毒流行，H3N2亚型流感病毒为流行优势株。2005年江西省有H3N2亚型、H1N1亚型和B型（Yamagata系）流感病毒流行，虽然于3月出现HlNl亚型流感病毒，但H3N2亚型流感病毒仍然为全年的流行优势株。     

2002年广东省H3N2亚型流感病毒流行的分子基础

目的 了解广东省2002年H3N2亚型流感病毒流行及抗原性变异情况。方法 用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离，用交叉血凝抑制实验对毒株进行抗原性分析；提取病毒RNA，用一步法RT-PCR扩增血凝素基因(H3A)，产物纯化后，并将其克隆到pMD18—T Vector，进行序列测定和分析。结果 2002年1-10月共获得流感病毒246株，其中H3N2亚型210株，占85．4％，H1N1亚型2株，占0．8％，B型34株，占13．8％；2002年流感流行的高峰是6月；抗原性分析显示，2002年广东省H3N2亚型流感病毒A／粤/236/2002和2001年流行株A／粤／448／2001以及目前国内代表株A／闽／151／2001的抗原比分别是5．6和4．0；其HAl区氨基酸序列和国际代表株A／悉尼／5／97同源性为94．2％，有19个氨基酸差异，其中发生在抗原决定族A、B、E上的有6个，受体结合部有3个。结论 2002年广东省流感病毒以H3N2亚型为主，其流行的分子基础是基因变异导致抗原性发生漂移。