下调SUZ12抑制人宫颈癌细胞的增殖及作用机制

目的 探讨下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法 通过RNAi（RNA干扰技术）下调SUZ12和Cdc25C蛋白的表达,通过慢病毒转染法对Hela细胞构建Cdc25C蛋白过表达及其对照细胞株,并用含嘌呤霉素培养基进行为期14 d的筛选,荧光拍照检测绿色荧光蛋白以及Western Blot法进行验证;MTT法检测下调SUZ12和Cdc25C蛋白对细胞增殖的影响;Western Blot法检测下调SUZ12表达后蛋白表达量的改变。结果 MTT结果显示,siSUZ12组中Hela及SiHa的增殖率远低于对照组,细胞增殖明显受到抑制,Hela的生存率为（60.65±7.64）%（P<0.01）, SiHa的生存率为（73.81±9.30）%（P<0.01）。时效研究结果显示,转染siSUZ12后,Hela细胞在转染第2天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为（56.13±7.78）%（P<0.01）;SiHa细胞在转染第1天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为（70.50±3.15）%（P<0.01）。细胞周期结果显示,Hela细胞在siSUZ12作用48 h后,G₀/G₁期的比例明显增加（P<0.05）,细胞发生G₁/S期阻滞。SiHa细胞在siSUZ12作用60 h后,G₂/M期细胞数比例显著升高（P<0.01),细胞发生G₂/M期阻滞。Western Blot结果显示,下调SUZ12表达后,细胞内Cdc25C的表达明显被抑制。阻断Cdc25C的表达后能显著拮抗siSUZ12对Hela、SiHa细胞的抑制作用,而过表达Cdc25C能降低siSUZ12对细胞的抑制作用。结论 下调SUZ12能通过干扰Cdc25C的表达,产生抑制人宫颈癌细胞增殖的作用。     

结核性胸膜炎患者外周血和胸水中Th17、Th1细胞检测分析

目的 探讨结核性胸膜炎患者Th17、Th1细胞免疫应答的特性及作用。方法 应用流式细胞术检测30例健康对照组（HD）、23例潜伏感染组（LTBI）、20例结核性胸膜炎组(TP) 患者外周血单个核细胞（PBMC）与胸水单个核细胞（PFMC）Th17、Th1细胞的变化情况。结果 结核性胸膜炎患组外周血非特异性Th17和Th1细胞百分比分别为（2.81±0.94）和（27.85±11.02）,低于健康对照组（4.63±1.63）、（36.34±9.39）和潜伏感染组（4.13±1.91）、（42.37±13.87）,差异有统计学意义（P<0.001,P<0.05）;结核性胸膜炎患者胸腔积液PFMC的非特异性Th17细胞百分比为（1.85±1.34）,低于外周血PBMC的（2.81±0.94）,差异有统计学意义(P<0.01);同时PFMC结核菌特异性Th17、Th1细胞的百分比分别为（0.68±0.13）和（6.91±1.16）,高于PBMC（0.25±0.11）和（1.98±0.56 ）,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论 结核性胸膜炎患者外周血非特异性Th17、Th1细胞应答及感染局部Th17的非特异性应答反应均受到抑制;感染局部特异性Th17、Th1应答处于高水平状态;Th17、Th1细胞应答在结核性胸膜炎的发病中发挥重要作用。     

吡格列酮抗高糖诱导H9c2心肌细胞炎性损伤的机制研究

目的 探讨PPAR-γ激动剂吡格列酮（pioglitazone, PGZ）通过抑制p38MAPK/NF-κB信号通路减轻高糖诱导的H9c2大鼠心肌细胞炎性损伤。方法 离体培养的H9c2细胞随机分6组,分别为低糖组（5.5 mmol/L葡萄糖,NG组）、高糖组（35 mmol/L葡萄糖,HG组）、高糖+不同浓度PGZ组（HG+5 μmol/L PGZ 、HG+10 μmol/L PGZ、HG+15 μmol/L PGZ、HG+20 μmol/L PGZ）,采用CCK8法检测各组细胞干预24、48 h后细胞活性变化;据CCK8结果选取NG组、HG组、HG+10 μmol/L PGZ （Low组）、HG+20 μmol/L PGZ （High组） 4组细胞干预48 h,ELISA检测各组细胞炎性因子TNF-α、IL-1β的含量,Western-blot检测各组细胞p-p38、p-p65蛋白的表达。结果 CCK8检测结果显示,与NG组比较,24、 48 h后HG组明显活力下降（P<0.01）,表明高糖可诱导心肌细胞损伤;与HG组比较,48 h后HG+10 μmol/L PGZ、HG+ 15 μmol/L PGZ两组细胞活力均升高（P<0.05）,HG+20 μmol/L PGZ组细胞活力明显升高（P<0.01）,提示PGZ可对高糖环境下心肌细胞起保护作用。干预48 h后ELISA结果显示,HG组TNF-α、IL-1β含量与NG组比明显升高（P<0.01）,提示高糖环境可致心肌细胞发生炎性损伤;与HG组比较,Low组IL-1β含量降低（P<0.05）,High组TNF-α含量降低（P<0.05）,IL-1β含量明显降低（P<0.01）。提示PGZ可减轻高糖诱导心肌细胞炎性损伤。干预48 h后Western-blot结果显示,与NG组比较,HG组p-p65和p-p38蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）;与HG组比较,Low组p-p65和p-p38蛋白表达均降低（P<0.05）,High组p-p65和p-p38蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。提示PGZ可下调高糖诱导心肌细胞NF-κB/p38MAPK通路的表达。结论 PPAR-γ激动剂吡格列酮可以减轻高糖诱导H9c2大鼠心肌细胞的炎性损伤,其机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB信号转导通路有关。     

泡型肝包虫患者外周血树突状细胞成熟度

目的 通过研究泡型肝包虫病(alveolar echinococcosis, AE)患者外周血中树突状细胞(dendritic cells, DC)的成熟度,探究DC在AE患者免疫发病机制中的作用。方法 选取2015年9月—2016年6月于青海大学附属医院初诊并经病理证实为AE患者及健康体检者各20例,流式细胞仪检测外周血CD80⁺细胞、CD86⁺细胞、CD83⁺细胞及(CD80%+CD83%+CD86%)/ CD14%比值。选取2016年6月—2017年2月于该院初诊并经病理证实为AE患者及健康体检者各30例,利用流式细胞仪检测DC表面CD83、CD86、CD80表达率。结果 AE组与对照组外周血检测DC表面的共刺激分子(CD80%+CD83%+CD86%)/ CD14%差异无统计学意义（P>0.05),CD86细胞表达（7.94±1.32）较对照组低（P<0.05)。AE组外周血单核源性培养DC表面的共刺激分子CD80、CD83、CD86的表达水平(41.71±8.16、39.69±8.05、50.79±7.72）均低于对照组（62.27±5.94、56.37±7.33、72.00±7.36）（P均<0.05）。结论 AE患者外周血DC成熟度比健康对照组低,存在成熟障碍,可能会导致宿主抗原提呈功能下降,机体抗感染能力降低,从而促进了多房棘球蚴感染的进展。     

大气PM2.5对人支气管上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨PM_2.5暴露后,人支气管上皮细胞（16HBE）的增殖和凋亡的变化,研究PM_2.5对16HBE细胞的影响。方法 将16HBE细胞暴露于0、50、100、200、400、600、800、1 000 μg/mL PM_2.5悬浮液,24 h后加入CCK-8,3~4 h后用酶标仪在450 nm处测量OD值,并计算细胞存活率。将16HBE细胞暴露于0、50、100、200、400、800 μg/mL PM_2.5悬浮液,24 h后加入hoechst33342染色25 min、PI染色30 min,显微镜下观察调亡的细胞并计数,计算细胞凋亡率。结果 PM2.5暴露24 h后,50、100、200、400、600、800、1 000 μg/mL组细胞存活率显著下降,分别为（89.41±5.53）%、（75.71±5.99）%、（82.99±15.09）%、（61.74±9.88）%、（57.23±3.28）%、（46.00±4.23）%、（42.63%±7.79）%,有剂量效应关系,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P均<0.01）。PM _2.5对16HBE细胞的24 h半数致死浓度（LC₅₀）为（762.03±180.25）μg/mL。PM_2.5暴露24 h后,在镜下计数各剂量组调亡细胞,细胞凋亡数量随着剂量升高而增高,0、50、100、200、400、800 μg/mL组细胞调亡率分别为（10.50±2.64）%、（17.90±4.63）%、（21.30±2.26）%、（32.10±4.18）%、（36.90±3.25）%、（50.30±5.81）%,有剂量效应关系,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P均<0.01）。结论 PM _2.5对16HBE细胞有毒性作用,可导致16HBE细胞增殖受到抑制,凋亡增加。     

雷公藤甲素抑制类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞的自噬与存活

目的 探讨雷公藤甲素抑制类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞（rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes, RA-FLSs）的自噬与存活。方法 体外培养人RA-FLSs细胞,使用不同浓度的雷公藤甲素（0、10、20、30、40、50 ng/mL）处理RA-FLSs细胞,处理24、48、72 h后,采用CCK-8试剂盒测定RA-FLSs的增殖能力,确定对细胞增殖能力抑制50%时所需的雷公藤甲素浓度（半数最大抑制浓度,IC₅₀）。基于RA-FLSs增殖能力测定的实验结果,选取最佳雷公藤甲素作用浓度处理RA-FLSs,处理24、48、72 h后,检测RA-FLSs自噬荧光强度;采用Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、Bax和caspase-3蛋白表达水平。结果 雷公藤甲素呈剂量依赖性的抑制RA-FLSs细胞的增殖,雷公藤甲素浓度为40 ng/mL时,细胞增殖活力显著下降（P<0. 001）,24、48、72 h的IC₅₀分别是42.31、40.71、42.71 ng/mL。因此后续的实验选用雷公藤甲素的上药浓度为40 ng/mL。与空白组相比,40 ng/mL雷公藤甲素作用RA-FLSs 24、48、72 h后,均能减弱LC3Ⅱ自噬荧光、显著降低自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1表达水平（P<0. 05）,显著增加凋亡蛋白Bax、caspase-3表达水平（P<0.05）;且在处理48 h时,40 ng/mL雷公藤甲素抑制自噬及促进凋亡的作用较处理24 h及72 h强。结论 雷公藤甲素治疗类风湿性关节炎的作用机制可能与通过抑制RA-FLSs自噬,从而对RA-FLSs产生抑制增殖和促进凋亡作用。这一发现表明雷公藤甲素是一种治疗类风湿性关节炎的潜在药物。     

白细胞介素-37在活动性肺结核中对单核细胞分泌炎症因子的调节作用

目的 研究白细胞介素(interleukin,IL）-37、干扰素(interferon,IFN)-γ和IL-10在活动性肺结核患者单核细胞中的表达水平,探讨IL-37对IFN-γ和IL-10的调节作用及其临床意义。方法 选取深圳龙岗中心医院2016年9月—2017年4月诊断为活动性肺结核的患者32例为结核组,以同期32例健康人群为对照组,提取外周血单核细胞,经脂多糖（LPS）刺激,IL-37抗体处理后,通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清中IL-37、IFN-γ和IL-10水平,实时荧光定量PCR检测IL-10、IFN-γmRNA表达水平。结果 活动性肺结核组上清中IL-37、IL-10水平较健康对照组升高[(311.49±59.72) pg/mL vs (138.72±42.16) pg/mL、(302.65±38.2) pg/mL vs (65.86±6.06) pg/mL],IFN-γ水平下降[(160.88±11.61) pg/mL vs (200.26±13.84) pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。经IL-37抗体干预后,活动性肺结核组IFN-γ、IFN-γmRNA较干预前升高[(193.76±12.46) pg/mL vs (160.88±11.61) pg/mL、(0.88±0.11) pg/mL vs （0.23±0.08）pg/mL],IL-10、IL-10mRNA较干预前下降[(160.24±16.76) pg/mL vs (302.65±38.2) pg/mL、（8.32±2.82）pg/mL vs （15.84±4.02）pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。健康对照组与干预前比较,IFN-γ、IL-10蛋白及mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 活动性肺结核患者外周血单核细胞高表达IL-37;IL-37可抑制IFN-γ分泌,同时促进IL-10分泌,IL-37可能成为结核治疗的新靶点。     

siRNA靶向沉默Rictor基因表达对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨靶向沉默Rictor表达对肝癌细胞增殖、迁移和增殖的影响。方法 采用LipofectamineTM2000向SMMC-7721和Hep3B细胞转染成功构建靶向沉默Rictor表达的siRNA载体片段（沉默组）或无义siRNA片段（对照组）,转染48 h后采用QPCR检测Rictor mRNA水平,以Western blotting检测Rictor、p-Akt、细胞周期蛋白和EMT相关蛋白的表达情况。MTT实验、EdU增殖实验、Transwell实验和Boyden实验分别检测肝癌细胞的增殖、迁移和增殖能力。结果 转染48 h后,沉默组细胞的Rictor mRNA蛋白水平大部分都低于对照组细胞;沉默组细胞的增殖、迁移、侵袭能力均低于对照组细胞,差异有统计学意义（P<0.01）。MTT实验及EdU增殖实验表明,两组肝癌细胞在沉默Rictor表达后增殖减慢、S期细胞比例明显减少（P均<0.01）;Transwell实验和Boyden实验表明,两组肝癌细胞在沉默Rictor表达后穿膜细胞数显著减少（P均<0.01）。结论 Rictor基因在肝癌细胞中起到癌基因的作用,沉默Rictor的表达抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭的过程,可能与下调p-Akt、CCND1和N-cadherin、ZEB1、Vimentin蛋白表达,上调E-cadherin,P21和P27蛋白表达有关。     

广州市番禺区2014—2016年155例登革热实验室检测分析

目的 分析广州市番禺区登革热患者的实验室检测结果 ,为登革热的诊断与防治提供依据。方法 对2014年5月—2016年10月在广州市番禺区中心医院确诊的登革热患者实验室检测结果进行回顾性分析。结果 155例登革热患者年龄4~88岁;男性患者66例,≥ 60 岁者51例。登革热患者外周血中登革热患者组AST、LDH、HBDH、CK、CK-MB、APTT和CRP分别为(75.39±63.75)U/L、(345.79±146.09)U/L、(247.47±95.27)U/L、(340.98±506.73)U/L、(42.30±47.91)U/L、(42.28±9.48)s和(7.45±10.41)mg/L,均高于健康对照组的(20.01±5.79)U/L、(184.95±42.31)U/L、(147.40±32.79) U/L、(97.85±43.84)U/L、(13.46±5.55)U/L、(29.76±4.90) s和(1.79±2.28) mg/L,差异有统计学意义(P<0.05);登革热患者组血白细胞均数、血小板均数、K⁺、Na⁺、CREA和PT分别为(2.84±1.50)×10⁹/L、(79.00±41.25)×10⁹/L、(3.49±0.40)mmol/L、(137.86±3.62)mmol/L、(89.78±24.81) μmol/L和(11.03±2.23) s低于健康对照组的(6.67±1.93)×10⁹/L、(237.49±61.25)×10⁹/L、(4.07±0.34) mmol/L、(139.33±1.73) mmol/L、(95.99±15.40) μmol/L和(12.39±1.25) s,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 2014—2016年期间广州市番禺区登革热病毒感染流行人群中大多数患者为成年人。患者血小板和白细胞计数明显减少,患者凝血功能障碍,部分患者出现肝功能、心肌功能异常及肾功能受损。     

IL-37在活动性肺结核中的表达及其与IFN-γ和IL-10的相关性

目的 研究IL-37、IFN-γ和IL-10在活动性肺结核患者血清中的表达水平,分析细胞因子间的相关性,探讨其临床意义。方法 选取深圳龙岗中心医院2016年9月—2017年4月诊断为活动性肺结核的患者25例为结核组,同期25例健康人群为对照组,通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测结核组治疗前后及对照组血清中IL-37、IFN-γ和IL-10水平,并分析其相关性。结果 活动性肺结核患者治疗前血清IL-37、IL-10水平较对照组升高[(308.87±62.52)vs.(144.72±45.26) pg/mL;(400.75±46.89) vs.(62.75±5.85) pg/mL],IFN-γ水平下降[(167.25±12.71) vs.(195.50±13.70)pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。活动性肺结核患者治疗后血清IL-10水平较对照组仍有升高[(120.25±17.04) vs.(62.75±5.85)pg/mL],且差异有统计学意义（P<0.05）,IL-37及IFN-γ水平较对照组差异无统计学意义（P>0.05）。活动性肺结核患者治疗前与治疗后相比,IL-37、IL-10水平上升[(308.87±62.52)vs.(137.88±62.47)pg/mL;(400.75±46.89) vs.(120.25±17.04) pg/mL],IFN-γ水平下降[(167.25±12.71) vs.(195.75±4.99) pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。相关性分析提示IL-37与IFN-γ具有负相关关系。结论 血清IL-37、IFN-γ和IL-10水平呈现与活动性肺结核病情相关的动态变化,IL-37对抗结核免疫的负性调节可能与抑制IFN-γ分泌有关。     

压力过负荷大鼠心肌肥厚组织中PTEN/FAK的表达

目的 观察磷酸酶-张力蛋白同源物(phosphase and tension homology deleted on chromosome 10, PTEN)及黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK) 在腹主动脉缩窄大鼠左心室肌中的表达,以探讨PTEN及FAK在压力过负荷性心肌肥厚发生发展过程中的作用。方法 采用腹主动脉缩窄术制备压力过负荷心肌肥厚动物模型,于术后4周测量左心室质量指数（LVMI）, 并用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测心肌肥厚相关基因心房钠尿因子（ANF）的mRNA 含量,应用免疫组化方法,观察和检测大鼠PTEN蛋白及FAK蛋白表达在左心室心肌细胞中的变化。结果 模型组和假手术的LVMI、ANF mRNA 相对含量和FAK蛋白表达分别为3.46±0.20 和 2.73±0.15、0.93±0.16 和 0.63±0.12、126.45±2.78和77.64±5.74,模型组均明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）;模型组和假手术的PTEN蛋白表达分别为87.14±6.11和 120.60±4.22,模型组低于假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）;FAK蛋白的表达与LVMI呈正相关（r=0.877, P<0.01）,与PTEN蛋白的表达呈负相关（r=-0.952, P<0.01）;PTEN蛋白的表达与LVMI呈负相关（r=-0.825, P<0.01）。结论 PTEN/FAK通路在压力过负荷性心肌肥厚发生发展过程中发挥了重要调控作用。     

活动性肺结核患者支气管肺泡灌洗液免疫细胞分析

目的 探讨活动性肺结核患者的免疫功能状态,为临床免疫治疗提供理论依据。方法 收集活动性肺结核患者35例,并根据年龄、镜下分型和支气管CT评分对上述患者进行分组,同期选择12例健康志愿者作为健康对照组,分析两组研究对象支气管肺泡灌洗液T细胞、CD4细胞、CD8细胞、单核细胞和B细胞比例的差异。结果 活动性肺结核患者的CD4细胞和CD8细胞的比例分别为（54.76±17.44）%和（41.24±15.65）%,与健康对照组的（65.43±10.00）%和（32.3±8.69）%比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。活动性肺结核组单核细胞比例（9.38±8.1）%高于健康对照组（2.15±2.52）%,差异有统计学意义（P<0.05）。与健康对照者相比,炎性浸润型患者和瘢痕狭窄型患者的CD4细胞比例降低,CD8细胞比例升高,CD4细胞/CD8细胞降低,且具有统计学意义（P<0.05）,另外,炎性浸润型患者的单核细胞高于健康对照者（P<0.05）。溃疡坏死型患者的单核细胞和B细胞均高于健康对照者（P<0.05）;CT评分高的组单核细胞比例显著高于低CT评分组（P<0.05）。结论 支气管肺泡灌洗液免疫细胞水平的检测有助于阐明肺结核的免疫致病机理,同时也可为临床免疫治疗提供理论依据。     

结核患者治疗过程中外周血T细胞和B细胞亚群的动态变化

目的 探讨T和B细胞及其各亚型淋巴细胞的数量在结核患者治疗过程中的动态变化,为抗结核疗效判断提供理论依据。方法 纳入对象包括40例活动性结核患者、65例结核潜伏感染者、94例健康对照者。以流式细胞术检测外周血CD3⁺T细胞、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T细胞的绝对计数,CD19⁺B细胞百分比及绝对数和B细胞各亚群的百分比。结果 治疗前活动性结核患者、健康对照者和潜伏感染者CD3⁺细胞绝对计数和百分比例分别为（796±243）个/μL和（68.35±8.94）%、（1 213±449）个/μL和（65.58±6.07）%、（1 391±538）个/μL和（66.75±6.54）%;CD3⁺CD4⁺分别为（438±153）个/μL和（37.91±7.47）%、（630±254）个/μL和（38.88±6.06）%、（709±242）个/μL和（34.62±3.79）%;CD3⁺CD8⁺T分别为（280±112）个/μL和（23.83±7.33）%、（456±208）个/μL和（23.51±6.52）%、（530±253）个/μL和（25.01±5.90）%;CD19⁺B细胞绝对计数和百分比例分别为（111±50）个/μL和（7.32±2.96）%、（163±69）个/μL和（7.91±2.95）%、（188±99）个/μL和（8.59±3.96）%。治疗前活动性结核患者CD3⁺T、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T细胞的绝对计数比健康对照者和潜伏感染者均低,差异均有统计学意义（P<0.001）。活动性结核患者治疗前、治疗3个月和6个月CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺T细胞绝对计数和百分比例稍增加,但差异无统计学意义（P>0.05）。结核患者未成熟B细胞及记忆性B细胞较健康者及潜伏感染者比较均减少,差异有统计学意义（P<0.05）。结核患者外周血初始B细胞较潜伏感染者增加,差异有统计学意义（P<0.01）,与健康者比较无差异。结核患者外周血浆细胞较健康者比较增加,差异有统计学意义（P<0.05）。结核患者治疗3月记忆性B细胞明显增加,差异有统计学意义（P<0.001）。结核患者治疗过程中,浆细胞进行性减少,差异有统计学意义（P<0.001）。结论 结核患者外周血T、B细胞稳态被打乱,随肺结核患者的治疗及治疗时间的延长,被破坏的T、B细胞稳态将逐渐恢复,动态观察T、B细胞亚群的变化对结核病的诊断和疗效转归的判断有一定的指导意义。     

伯氏疟原虫感染小鼠脾脏T淋巴细胞及其表面分子的检测

目的 探讨感染伯氏疟原虫的C57BL/6小鼠脾脏不同免疫细胞的含量及表面分子变化。方法 将C57BL/6小鼠尾静脉注射伯氏疟原虫进行感染,6 d后分离感染组和正常对照组小鼠的脾脏,制备单细胞悬液,然后通过流式细胞术检测小鼠CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的含量及其表面分子CXCR3、CD69、CD62L的表达水平变化情况。结果 感染伯氏疟原虫的小鼠脾脏CD8⁺T细胞（5.51%±0.76%）、γδT细胞（0.31%±0.03%）和T细胞（18.60%±3.37%）的百分比含量较正常组（14.04%±1.31%、0.75%±0.07%、33.27%±3.76%）明显减低,差异有统计学意义（P<0.01）;与正常组（21.45%±0.10%、33.49%±3.17%、16.72%±2.16%）相比,感染组小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的CXCR3（6.30%±0.15%、18.34%±0.61%、5.25%±0.25%）均明显下调（P<0.05）;感染组小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的CD62L（67.98%±1.18%、54.37%±0.98%、55.06%±1.53%）较正常组（91.96%±0.75%、71.38%±1.02%、82.10%±1.04）%）均明显下调（P<0.05）,而感染组小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的CD69 （28.13%±0.37%、42.58%±2.06%、34.65%±0.43%）表达水平比正常组（3.70%±0.62%、11.59%±0.41%、7.69%±1.56%）高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 感染伯氏疟原虫的C57BL/6小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞及其表达的CXCR3和CD62L均明显下调,而CD69的表达水平升高,提示机体感染疟原虫后,小鼠的T淋巴系细胞增殖不明显,但其迁移情况有所不同,存在一定的复杂性。     

扶正解毒化瘀颗粒对多器官损伤小鼠血清细胞因子的影响

目的 观察扶正解毒化瘀颗粒对克雷伯杆菌肺炎所致多器官损伤小鼠不同感染时相血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-6及IL-10水平的动态变化,探讨其对促炎/抗炎细胞因子表达的影响。方法 将128只小鼠随机分为对照组、模型组、西药组和中药组,每组32只。采用气管插管法直接注入肺炎克雷伯杆菌制备多器官损伤模型,分别于造模后第1、3、5、7天每组各取8只小鼠,摘眼球采集血液,分离血清。采用ELISA法,检测不同感染时相小鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-6及IL-10水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠在感染后第1天血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ和IL-6含量分别为（202.07±22.82）、（502.11±29.44）、（186.50±10.32）、（204.98±8.15）pg/mL,其含量水平显著增高,差异有统计学意义（P<0.05）。IL-10在感染后第1、3、5天含量有所增高,但差异无统计学意义（P>0.05）,在感染后第7天含量为（134.34±0.46）pg/mL,差异有统计学意义（P<0.05）;中药组小鼠在感染后第1天血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ和IL-6含量分别为（147.18±22.67）、（262.09±43.44）、（142.00±0.84）、（177.29±8.03）pg/mL,均显著低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）,在感染第3天后有所下降,但差异无统计学意义（P>0.05）。感染后第1、7天血清IL-10含量为（140.46±4.07）pg/mL和（136.48±0.10）pg/mL均显著增高,有统计学意义（P<0.05）;西药组小鼠在感染后第1天血清IL-6的含量（180.97±8.86）pg/mL、IFN-γ含量（144.39±14.67）pg/mL较模型组均显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 扶正解毒化瘀颗粒能够降低促炎细胞因子的表达,提高抗炎细胞因子的表达,通过调节促炎/抗炎细胞因子的表达,抑制机体炎症反应可能是其治疗多器官损伤的主要机制之一。     

布鲁菌感染患者血清中 sPD-1与Th17/Treg细胞因子改变的相关性

目的 检测布鲁菌感染患者血清中可溶性程序性死亡蛋白1( sPD-1)、Th17细胞分泌的细胞因子白细胞介素17A( IL-17A)及Treg细胞分泌细胞因子转化生长因子-β（TGF-β）的水平,探讨sPD-1与Th17/Treg细胞因子改变的相关性。方法 选取布鲁菌感染患者（布病组）与健康人体检者（健康对照组）,分别采集静脉血,分离血清,采用ELISA 法检测血清中sPD-1的水平,用流式微珠阵列技术(CBA)法检测血清中Th17 /Treg细胞因子水平。结果 43例布病组血清中sPD-1、IL-17A水平和TGF-β水平分别为（53.46±17.13） ng/mL 、（10.42±9.86） pg/mL和（7 510.80±314.34） pg/mL,48例健康对照组分别为（27.78±14.01） ng/mL 、（7.17±1.47）pg/mL和（5 461.58±794.04） pg/mL。布鲁菌感染患者sPD-1与IL-17A不相关（r=0.222, P>0.05）;sPD-1与TGF-β 呈正相关（r=0.789, P<0.05）。与健康对照组相比,布鲁菌感染患者血清中sPD-1、IL-17A及TGF-β水平均明显升高（P<0.05）,且sPD-1水平与TGF-β水平呈正相关（P<0.05）。结论 布鲁菌病患者血清sPD-1的水平与Treg分泌的细胞因子的改变有关。sPD-1可能与TGF-β共同参与了布鲁氏菌病的进展。     

黄芪多糖抑制IL-1β表达及改善脓毒症小鼠心功能研究

目的 探讨黄芪多糖对脓毒症小鼠心肌成纤维细胞IL-1β表达水平及心功能的影响。方法 取2~3月龄C57BL/6小鼠,设立对照组。以腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharidi,LPS)建立脓毒症模型,设立脓毒症组和黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)处理组,6 h后酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠外周血IL-1β蛋白表达,24 h后超声心动图检测小鼠心脏功能。取对照组C57BL/6小鼠,体外分离培养小鼠心肌成纤维细胞,设立对照组、LPS处理组和黄芪多糖低、中、高浓度(1、10、100 mg/L)+LPS处理组。采用ELISA检测细胞上清液中IL-1β,采用免疫印迹法检测Pro-IL-1β及IL-1β蛋白。结果 脓毒症小鼠心脏功能较对照组明显减退(P<0.05),黄芪多糖处理组较未处理的脓毒症小鼠心脏功能明显改善(P<0.05)。脓毒症组外周血IL-1β蛋白较对照组明显升高(P<0.05),黄芪多糖处理组的脓毒症小鼠IL-1β明显降低(P<0.05); LPS或联合三磷酸腺苷(ATP)诱导的心肌成纤维细胞与对照组相比,LPS组(LPS 1 ng/mL)诱导心肌成纤维细胞Pro-IL-1β及IL-1β蛋白明显增加(P<0.05),而黄芪多糖处理组较LPS组相比,Pro-IL-1β及IL-1β蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论 黄芪多糖对脓毒症小鼠心肌成纤维细胞IL-1β蛋白表达有抑制作用,改善脓毒症引起的心脏功能障碍。     

皮炎小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素的表达未受膳食硒水平的影响

目的 了解不同膳食硒水平下皮炎小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）的表达情况。 方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组（n=10）,3个致敏组分别以低硒（0.01 mg/kg）、中量硒（0.25 mg/kg,正常水平）和高量硒（3.00 mg/kg）饲料喂养,对照组以中量硒（正常水平）饲料喂养。饲养8周后致敏组采用1-氯2 ,4二硝基苯（1-Chloro 2,4-dinitrobenzene,DNCB）激发特应性皮炎样症状。激发期间监测皮炎症状。激发3周后采样进行皮肤组织病理观察,血浆总IgE检测,组织硒含量测定,TSLPmRNA丰度和TSLP蛋白表达分析。 结果 激发小鼠均出现典型的皮炎症状和皮炎病理改变,皮炎症状评分、挠痒计数和血浆总IgE显著高于对照组（P<0.05）。与对照组（标化为1）相比,除缺硒组（2.51±0.43）皮肤组织外（P<0.05）,激发小鼠皮肤（中、高硒组：1.83±0.79,2.26±0.75）、脾脏（低、中、高硒组：1.33±0.17,1.06±0.13,0.99±0.45）、肾脏（低、中、高硒组：1.16±0.42,1.10±0.40,1.53±0.40）和肝脏（低、中、高硒组：0.95±0.30,0.90±0.31,1.11±0.43）组织TSLP mRNA相对表达量与对照组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）,激发小鼠4种组织中TSLPmRNA的相对表达量在三个硒水平组之间差异无统计学意义（P>0.05）;线性回归分析发现,3个硒水平组激发小鼠皮肤组织中TSLP mRNA相对表达量与皮肤组织中硒水平无相关性（R²=0.006,P>0.05）。蛋白分析发现,致敏组TSLP蛋白在低中高三个硒水平致敏组小鼠皮肤组织中的表达差异无统计学意义;在致敏组小鼠肝脏、脾脏和肾脏中均未见明显表达条带。 结论 DNCB激发特应性皮炎样皮炎小鼠皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中TSLP的表达不受膳食硒水平的影响,这可能与TSLP的亚型和表达时机有关。