全自动免疫荧光分析仪检测苯丙氨酸的性能验证

目的：验证全自动免疫荧光分析仪（genetic screening processor,GSP）检测血苯丙氨酸的分析性能,以保证检测结果的准确可靠。方法：根据美国临床实验室标准化委员会（CLSI）系列文件及相关文献,设计验证方案,对GSP检测血苯丙氨酸的准确度、精密度、线性范围、检出限及临床可报告范围进行验证和评价,并与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较,应用百分位数联合ROC曲线确定苯丙氨酸的切值,并进行验证。结果：GSP对5份美国疾病预防控制中心（CDC）室间质控品检测结果与靶值的相对偏倚在-6.7%~19.2%之间,均小于CDC可接受偏倚（±30%）;检测质控品L（133 μmol/L）及H（641 μmol/L）的试剂批内的不精密度结果分别为7.5%和7.4%,分析批内的不精密度结果分别为7.4%和4.0%,总批间不精密度结果分别为7.5%和7.4%,与厂商提供的不精密度数据（2.6%~10.9%）基本一致;GSP检测苯丙氨酸在50~1 500 μmol/L范围内呈线性（厂商的线性范围为45~1 420 μmol/L）;检测空白限（LoB）为20.9 μmol/L,检出限（LoD）为31.7 μmol/L,定量限（LoQ）为55.5 μmol/L,均小于厂商提供的数值（44.4 μmol/L、68 μmol/L、68 μmol/L）;临床可报告范围为55.5~1 200.0 μmol/L（厂商的可报告范围范围为68~1 200 μmol/L）;确定苯丙氨酸初始切值为124.5 μmol/L。结论：GSP检测血苯丙氨酸的主要分析性能符合质量目标要求,可常规应用于临床。     

乙肝病毒前S1抗原时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒前S1抗原的检测试剂盒。方法应用双抗体夹心法建立乙肝preS1抗原TRFIA检测试剂盒,对试剂盒的各项性能指标进行评估。结果对280份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果显示自制试剂盒的特异性更好;200份正常人血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×4.5。用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为3.4%～7.8%,6.9%～8.4%;检测HBsAg及HBeAg无交叉反应。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,TRFIA法精密度和特异性有较大提高,可替代酶免法试剂盒。     

不同厂家试剂盒检测血清胱抑素C的性能比较

目的探讨免疫透射比浊法试剂盒测定血清胱抑素C的性能比较和基质效应。方法选择迈克生物科技有限公司、金斯尔、四川新成生物科技有限公司3种胱抑素C试剂盒,比较他们的批间精密度、准确度,再以迈克生物有限公司试剂的测定结果为参照系统,评估金斯尔胱抑素C、四川新成生物科技有限公司2种试剂盒的测定结果和基质效应。结果 3种试剂盒及其与校准品组成的Aa、Bb、Cc 3个检测系统,批间精密度均〈6%,厂家提供的配套质控品检测结果良好,相对偏倚最大的为-4.58%,不同厂家配套质控品相对偏倚差异显著,Bb系统对Aa系统显示出良好的相关性。回归方程为Y=0.937 7X-0.057 6,R2=0.995 5。检测结果表明3种试剂盒检测血清胱抑素C的性能均符合说明书要求,满足临床检测要求。但是不同厂家检测结果缺乏可比性。结论 3种试剂盒的性能指标均完全符合试剂盒说明书要求,但是用不同厂家的试剂盒,必须使用配套质控品否则由于基质效应均值有时会超过质控品提供范围引起假失控,并且不同厂家检测结果偏差较大缺乏可比性,建议不同厂家的血清胱抑素C应有自己的参考值范围。     

血管紧张素转移酶紫外分光光度法的方法学评价

目的初步评价血管紧张素转移酶检测试剂盒性能。方法依据临床和实验室标准协会颁布的《定量临床检验方法的初步评价,批准指南第2版(EP10-A2)》提供的方法,按特定的顺序连续测定低、中、高浓度的质控品5d,对该试剂盒检测方法的性能进行初步评价。结果血管紧张素转移酶低、中、高浓度的质控血清的靶值分别为49、89.5、130U/L时,按特定的顺序连续测定5d,没有离群值。线性回归方程为y=0.879x+8.45,相关系数为0.9964;绝对偏差分别是0.64、1.26、-9.6U/L;总不精密度(CV%)分别为4.39%、2.26%、1.39%。结论血管紧张素转移酶检测试剂盒检测方法的线性、总变异和抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件的标准,符合临床应用要求。高值的偏差提示超出可接受范围,需要进一步进行评估。     

基于自动化提取HCV RNA荧光定量检测系统的性能验证

目的　基于Stream SP96 全自动核酸提取仪、ABI7500 实时荧光定量PCR仪对丙型肝炎病毒（HCV）RNA 定量检测系统的性能指标进行验证。方法　依据《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 420-2013 性能 验证方案,采用Stream SP96 全自动核酸提取平台及ABI7500 荧光定量PCR仪检测HCV RNA,对其准确度、精密度、线性 区间、检测限、定量限和抗干扰能力等进行方法学性能验证。结果　低、高浓度标准物质的均值与靶值的误差分别为 0.20 和 0.25,均小于靶值对数值±0.4 log;低浓度样本的批内、批间不精密度变异系数值分别为 0.79%、1.01%,高浓度样本的 批内、批间不精密度变异系数值分别为 0.52%、1.22%,均<5%;线性相关系数r>0.980,线性区间可达 20~1.0×10 8 ,呈良好 线性（R 2 =0.997 3）;检出限为 20 IU/mL,最低定量限为 50 IU/mL;含胆红素（300 mg/L）、血红蛋白（300 g/L）、甘油三酯 （3 000 mg/L）的干扰物质对样本检测结果无影响。结论　HCV RNA 实时荧光PCR定量法检测系统准确度、精密度、线 性范围、检出限、定量限、抗干扰能力均符合厂家声明,能够满足临床对HCV RNA定量检测的需求。     

两种苯丙氨酸荧光检测试剂盒的比较

目的：对临床上常用的两种新生儿滤纸血斑苯丙氨酸荧光检测试剂盒进行比较。方法：以Labsystem试剂盒及Wallac试剂盒检测相同的38个新生儿足跟血滤纸血斑样本，对结果进行统计分析。结果：两种检测试剂盒的测定结果无明显差别，P=0．625。Lab试剂盒的批内变异系数为1．85％，小于Wal试剂盒的7％。结论：两种检测试剂盒均能满足对新生儿苯丙酮尿症筛查的需要，Lab试剂盒在精密度及操作简便性上略优于Wal试剂盒。     

FDP试剂在Sysmex CS5100全自动凝血分析仪上使用的性能评估

目的:验证日本积水(Sekisui)医疗株式会生产的FDP试剂盒在日本Sysmex公司CS5100全自动凝血分析仪检测FDP的分析性能。方法:参照临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standars Institute,CLSI)及其他相关文献,检测FDP检测系统的精密度、准确性、分析测量范围、可报告范围、样本针的携带污染、抗干扰能力和参考范围,并与试剂说明书的质量性能进行比较。结果:FDP批内变异系数5%;批间变异系数5%。FDP的线性方程为Y=0.9853X+1.4031,r2=0.9993,r20.975,在2.5~120μg/m L范围内,FDP结果呈线性。检测高值标本时稀释倍数不宜超过8倍,以保证结果的准确性。抗干扰实验:在游离型胆红素和结合型胆红素20.0 mg/d L,溶血血红蛋白500 mg/d L,乳糜浊度3000 CM的情况下,对FDP的检测影响均不明显,相对偏差均10%。参考区间验证:检测20个健康体检者的FDP值结果均在厂商提供的生物参考区间FDP5.0μg/m L范围内。结论:日本积水公司生产的FDP试剂盒及标准品和质控品在Sysmex CS5100全自动凝血分析仪上检测FDP系统主要分析性能验证结果与厂家提供的分析性能一致,符合质量目标的要求。     

FDP试剂在Sysmex CS5100全自动凝血分析仪上使用的性能评估

目的:验证日本积水(Sekisui)医疗株式会生产的FDP试剂盒在日本Sysmex公司CS5100全自动凝血分析仪检测FDP的分析性能。方法:参照临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standars Institute,CLSI)及其他相关文献,检测FDP检测系统的精密度、准确性、分析测量范围、可报告范围、样本针的携带污染、抗干扰能力和参考范围,并与试剂说明书的质量性能进行比较。结果:FDP批内变异系数<5%;批间变异系数<5%。FDP的线性方程为Y=0.9853X+1.4031,r2=0.9993,r2>0.975,在2.5~120μg/m L范围内,FDP结果呈线性。检测高值标本时稀释倍数不宜超过8倍,以保证结果的准确性。抗干扰实验:在游离型胆红素和结合型胆红素<20.0 mg/d L,溶血血红蛋白<500 mg/d L,乳糜浊度<3000 CM的情况下,对FDP的检测影响均不明显,相对偏差均<10%。参考区间验证:检测20个健康体检者的FDP值结果均在厂商提供的生物参考区间FDP<5.0μg/m L范围内。结论:日本积水公司生产的FDP试剂盒及标准品和质控品在Sysmex CS5100全自动凝血分析仪上检测FDP系统主要分析性能验证结果与厂家提供的分析性能一致,符合质量目标的要求。     

AD7c-NTP定量检测试剂盒的性能验证及评价

目的:验证及评价深圳市安群生物工程有限公司研发生产的AD7c-NTP(酶联免疫吸附法)定量检测试剂盒的性能.方法:依据临床实验室标准协会(CLSI)批准的EP15-A2文件方法验证精密度及准确度,EP6-A文件方法验证线性范围,C28-A3文件方法验证生物学参考区间.结果:精密度方面:高、低浓度尿液样本批内检测结果CV分别为9.50％和4.99％,批间CV分别为13.54％和10.89％,均小于15％;准确度中:AD7c-NTP阳性质控品5次检测均值为6.512 ng/mL,标准差为0.26,CV为3.94％;分析灵敏度方面:试剂盒低值校准品A重复检测20次,浓度均值C校准品A+2SD校准品A为0.086 ng/mL,光密度均值OD校准品A+ 2SD校准品A为0.013,代入标曲中对应的浓度值为0.087 ng/mL;线性范围方面:高、低浓度混合尿液样本预期值与实测值的相关系数r为0.996;生物学参考区间方面:20份健康人尿样AD7c-NTP检测值范围为0.07 ～0.92 ng/mL.结论:深圳市安群生物工程有限公司研发的AD7c-NTP定量检测试剂盒的精密度、准确度、分析灵敏度、线性范围和生物学参考范围均达到了临床应用的实验要求,各性能指标的验证方法均可为相关实验室提供参考.     

HBV-DNA检测试剂的性能评估与室内质控数据评价

参照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)文件,对临床检验使用的实时荧光定量PCR扩增检测试剂盒定量结果的精密度、正确度、定量限、线性范围及抗污染性进行评价.同时用乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)试剂盒检测2016年3月~8月两个批号的质控血清HBV-DNA,并计算质控结果、标准曲线斜率、截距和相关系数的均值()、标准差(SD)和变异系数(CV).其中批内、批间精密度CV分别为1.08%~4.41%、2.17%~2.74%,达到核酸检测试剂盒的国家标准及《医学实验室质量和能力认可准则》中基因扩增检验项目分析性能标准(CV≤5%).参加2016年卫生部室间质评结果总体平均偏倚为2.03%,准确度符合卫生部质评要求.相关系数r=0.999 9,>0.98,线性关系符合要求.定量限结果符合±0.5个对数数量级的要求(评价中至少22次为阳性).本室2016年3月~8月测定的室内质控物结果对数的累积均值(±2s)为4.34(4.20~4.44),符合参考范围要求.经验证,实时荧光定量PCR HBV-DNA检测试剂盒的各项性能指标以及室内质控结果满足《医学实验室质量和能力认可准则》要求,可以为临床提供快速、准确的报告.     

人血清补体C3、C4定时散射比浊分析检测试剂的研制

目的 建立人血清补体C3、C4定时散射比浊分析方法.方法 采用定时散射比浊分析法检测临床血清标本,并对试剂的各项性能指标进行评价.结果 补体C3试剂盒的测定范围为0.945～1.776 g/L,灵敏度为0.022 g/L,批内批间的精密度分别为2.5%～4.8%,5.4%～7.1%.样本中的游离血红蛋白、胆红素、甘油三酯等干扰物浓度达到10 g/L、600 mg/L、57 g/L时对检测结果无显著性影响,42份异常血样用自制试剂盒与进口Dade Behring试剂盒同时检测,其相关系数为0.985;补体C4试剂盒的测定范围为0.096～0.435 g/L,灵敏度为0.0014 g/L,批内批间的精密度分别为1.8%～2.2%,3.8%～5.2%.样本中的游离血红蛋白、胆红素、甘油三酯等干扰物浓度达到10 g/L、600 mg/L、24 g/L时对检测结果无显著性影响,42份异常血样用本试剂盒与进口Dade Behring试剂盒同时检测,其相关系数为0.991.结论 补体C3、C4散射比浊试剂盒各项指标均达到临床检测要求,与Dade Behring同类试剂测定结果有较好的相关性,在临床上有极大的应用前景,有望替代国外同类产品试剂盒.     

乙型肝炎病毒核心抗体IgM 时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒抗HBc-IgM的检测试剂盒.方法 采用捕获法建立抗HBc IgM TRFIA检测试剂盒.对自制试剂盒的各项性能指标进行评估.结果用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为4.8～7.2%,7.5～8.6%;与抗-HBs,抗-HBc IgG和抗-HBe无交叉反应;对584份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果 显示自制试剂盒的灵敏度更高;300份健康者血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×3.5.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代酶免法试剂盒.     

甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒行业标准的验证

目的规范和提高甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）的质量,提出本行业标准并加以验证。方法使用市场上4家试剂盒对本标准的外观、阳性和阴性参考品符合率、最低检测限、重复性和稳定性等项目进行试验验证。结果除试剂盒D（北京金豪制药股份有限公司生产）外观和重复性项目不符合外,其他试剂盒的验证结果均符合标准的规定。加速稳定性试验结果显示,试剂盒A（中山大学达安基因股份有限公司生产）检测重复性参考品R2和25℃下放置2d条件下出现较多不合格结果,其他产品均符合标准规定。结论多数试剂盒的验证结果符合行业标准的要求,说明本标准整体具有合理性。本标准的建立有利于进一步规范和提高该类产品的质量,为将来核酸检测试剂盒加速稳定性条件的探索工作提供了依据。     

全自动血凝分析仪Sysmex CS-5100的性能验证与评价

目的对全自动血凝分析仪Sysmex CS-5100的性能进行验证与评价。方法用高低浓度混合血浆验证批内精密度,用高低浓度质控品验证日间精密度,用高浓度混合血浆分别按100%、80%、60%、40%、20%、10%、5%的比例稀释后对仪器进行线性验证,用接近预期检测限的低/高浓度血浆样本来验证可报告范围,通过检测定值质控品和仪器比对来验证正确度,用正常体检血浆验证参考区间,用高低浓度血浆标本验证携带污染率。结果 Sysmex CS-5100检测PT、APTT、FIB批内CV<3.0%;TT、D-二聚体、FDP批内CV<4.0%;PT、APTT、FIB日间CV<5.0%;TT、D-二聚体、FDP日间CV<6.0%;FIB、D-二聚体、FDP的可报告范围分别是:0.21~24.6 g/L,0.06~89.6 mg/L,0.09~2001.28μg/ml;各项目相对偏差均在10.5%以内;95%以上样本处于引用参考区间内,携带污染率均<2.5%。结论 Sysmex CS-5100全自动血凝分析仪性能良好,可用于检测临床样本。     

两种尿蝶呤谱检测方法的比较及在高苯丙氨酸血症中的应用

目的 对碘(I₂)氧化法和二氧化锰(MnO₂)氧化法两种前处理方法在尿蝶呤谱检测进行方法学评价,提高尿蝶呤谱在高苯丙氨酸血症(HPA)诊断及分型准确率。方法 分别用I₂氧化法和MnO₂氧化法处理65例尿液样本,通过定量分析尿液中新蝶呤(N)和生物蝶呤(B)含量、比较两种方法的最低检测限、精密度和回收率,以及分析两种方法在HPA的诊断符合率。结果 I₂氧化法和MnO₂氧化法处理苯丙酮尿症(PKU)、四氢生物蝶呤缺乏症(BH₄D)和正常儿童尿液样本,诊断符合率均达100%。I₂氧化法检测的N和B浓度均高于MnO₂氧化法,差异有统计学意义(P<0.05)。两种方法N的检测限[I₂氧化法：(0.000 63±0.000 27)μg/L;MnO₂氧化法：(0.000 76±0.000 32)μg/L];B的检测限[I₂氧化法：(0...     

甲型肝炎病毒IgM抗体酶免试剂盒临床应用评价

目的采用酶联免疫方法对准备新引进的和实验室现使用的两种甲型肝炎病毒(HAV)IgM抗体酶免试剂盒进行临床应用准确性和精密度评价。方法采用卫生部临检中心已明确预期阴、阳结果的HAV—IgM抗体质控血清，进行HAV—IgM抗体酶免试剂盒临床应用准确性评价；用含量2NCU／ml的定值血清进行批内和批间精密度评价；并对134例患者血清同时检测．对比分析。结果待评价的和现使用的HAV—IgM抗体酶免试剂盒检测质控血清符合率均为98％，批内精密度CV为9．09％和8．27％．批间精密度CV为15．17％和16．31％。均可以接受。结论所评价的HAV—IgM抗体酶免试剂盒其灵敏度、特异性、总符合率均较高．与现使用的试剂盒基本一致。     

HBsAg酶联免疫法诊断试剂的质量评价

目的评价HBsAgELISA诊断试剂盒的质量。方法应用ELISA法对HBsAg国家标准品血清盘、临床科研血清盘、临界值质控血清等进行检测,考评HBsAg诊断试剂盒质量。结果6个厂家试剂均符合国家标准品血清盘判读标准,均能检测出1IU／ml定值质控血清,但测出S／CO值却差异较大,用临床科研血清盘检测,其试剂的灵敏度、特异性、总符合率存在差异。结论不同厂家试剂质量仍存在差异,使用前应进行抽检,综合评价,选择具有灵敏度高、特异性强、精密度好的试剂,优选两种匹配较好的试剂,从而提高HBsAg检出率,减少HBsAg漏检率,有利于控制和减少乙型肝炎的输血传播。     

肌酸激酶同工酶质量法的优势及其性能评价研究

目的 对北京九强生物技术有限公司肌酸激酶同工酶CKMB 测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）进行性能评价。方法 自2019 年5～12 月期间采用东芝2000FR 全自动生化分析仪,检测肌酸激酶同工酶的准确度、精密度、线性范围、空白检测限、最大稀释倍数、临床可报告范围、参考范围进行实验性能验证。统计学方法采用直线相关回归分析。结果 北京九强CKMB 试剂盒的准确度验证中测定值与定值的相对偏差分别为0.62%、-2.89%,批内精密度CV 分别为1.29%、0.67%,批间精密度CV 分别为1.53%、1.14%。线性范围为0.00～218.36 ng/mL,临床可报告范围为0.12～1642.56 ng/mL,随机抽取的20 例健康体检样本的测定结果95%在参考值范围（0.00～5.00 ng/mL）内。结论 该试剂盒的胶乳免疫比浊法测定肌酸激酶同工酶性能符合要求,可满足临床测试要求。     

五种不同厂家抗-HIV试剂的质量评价

目的选择一种优质、高效和实用的抗-HIVELISA血液筛选试剂。方法采用五种不同厂家的抗-HIVELISA试剂(其中三种国产试剂,两种进口试剂)分别对国家参比品、卫生部质控品和无偿献血者标本进行检测,分析比较五种试剂的符合率、阳性检出率、假阳性率、最低检测限、稳定性和前带效应。结果五种试剂盒用于检测抗-HIV国家参比品的总符合率都达到100%;常规标本的阳性检出率均达到100%;21658份无偿献血标本抗-HIV阳性率为0.01%;进口试剂C假阳性率低于进口试剂D和国产A、B、E试剂(P<0.05);C试剂的精密度和批间稳定性分别为5.985%和5.93%,明显低于A、B、D、E试剂(P<0.05);国产试剂A、B、E试剂的最低检测限降低至0.125NCU,但其假阳性率较高;C试剂也不存在前带效应。结论五种试剂的总符合率均达到国家要求,阳性率均为0.01%;国产试剂的假阳性率高于进口试剂,最低检测限低于进口试剂;C试剂的稳定性最优,也不存在前带效应。选择C试剂进行抗-HIV血液筛选效果最佳。     

直接法试剂盒测定高密度脂蛋白胆固醇的性能比较

目的:探讨直接法试剂盒测定高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)的性能比较和基质效应。方法:选择一种进口试剂盒和两种国产试剂盒,比较他们的批内和批间精密度、线性范围、准确度和抗干扰能力,再以进口试剂的测定结果为参照系统,评估两种国产试剂盒及其与进口校准品组成的检测系统的测定结果和基质效应。结果:三种试剂盒及其与校准品组成的Aa、Bb、Cc、Ba、Ca五个检测系统,批内和批间精密度均小于5%,相对偏倚小于5%,线性可达到4.0mmol/L,表明进口试剂盒和两种国产试剂盒检测HDLC的性能均完全符合试验要求。Aa系统与Bb、Cc、Ba系统相比,检测结果差异无显著性(P>0.05)。与Ca系统比较差异有较显著性(P<0.05)。Ca系统存在校准偏差和基质效应。结论:两种国产试剂盒的各项性能指标均接近进口试剂,但是,用不同厂家的校准品来校准试剂盒,有时会使检测结果有严重的校准偏差和基质效应。