GeneXpert Mtb/RIF检测技术在结核病诊断中的应用探讨

目的分析Gene Xpert Mtb/RIF检测技术快速诊断肺结核及利福平耐药的可靠性。方法对2014年7月~2015年12月某院门诊纳入的92例肺结核可疑患者送检的痰标本进行涂片镜检,同时开展固体培养和Gene Xpert Mtb/RIF检测。对比3种检测方法的符合性和一致性。结果对92份涂片检测标本涂片和培养,Gene Xpert Mtb/RIF检测结果敏感度、特异度分别为88.24%、69.33%和78.95%、85.18%。与临床诊断比较,Gene Xpert Mtb/RIF检测结核病敏感度、特异度分别为48.05%、93.33%。在进行传统利福平药敏试验的31份标本中,Gene Xpert Mtb/RIF检测结核病利福平耐药敏感度、特异度分别为100.00%、96.55%。结论 Gene Xpert Mtb/RIF法能够快速初步检出结核分枝杆菌,对发现结核病患者和耐药结核病患者具有重要价值。     

GeneXpert MTB/RIF在检测系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用

目的 评价GeneXpert MTB/RIF系统在诊断系统性自身免疫病（SAD）合并肺结核（MTB）患者中的应用价值。方法 对临床诊断和影像学检查确诊的350例系统性自身免疫病合并肺结核患者和50例系统性自身免疫病非结核对照组患者的痰标本进行GeneXpert MTB/RIF检测,评价GeneXpert MTB/RIF诊断性能,并与结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法等比较,判断优劣以及半定量检测结核菌的效能。以结核菌液体药敏法为标准,分析GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果 GeneXpert MTB/RIF、结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法4种方法检测的灵敏度分别为95.14%、84.00%、89.71%和56.86%,特异度分别为100.00%,92.00%,84.00%,100.00%。GeneXpert MTB/RIF系统灵敏度与T-SPOT比较差异无统计学意义（χ² =4.21,P>0.05）,高于抗酸涂片染色法（χ² =36.60,P<0.05）。GeneXpert MTB/RIF检测利福平(RIF)耐药性的灵敏度为86.00%,特异度为90.56%。结论 GeneXpert MTB/RIF与传统的MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸涂片染色法等联合,可显著提高合并肺结核系统性自身免疫病结核病的检出率。     

GeneXpert Mtb/RIF检测技术在临床耐药结核病诊断中的应用价值

目的 评估GeneXpert Mtb/RIF检测技术在临床耐药结核病诊断中的应用效果。方法 收取240例结核病住院患者的晨痰样本分别进行痰涂片镜检、MGIT960液体培养及GeneXpert Mtb/RIF快速检测,对于MGIT960液体培养与GeneXpert同为阳性的样本进一步进行MGIT960药敏检测。以MGIT960液体法作为金标准,评估GeneXpert Mtb/RIF检测技术的敏感性和特异性以及Kappa值。结果 224例有效样本中涂片镜检阳性检测率为26.8%,MGIT960液体培养阳性检出率为45.1%,GeneXpert检测阳性检出率为46.9%;以MGIT960液体培养作为金标准,涂片镜检法的敏感度为59.4%,特异度为75.0%,GeneXpert检测法敏感度为91.1%,特异度为92.4%;以MGIT960药敏检测为金标准,GeneXpert检测法与之相比两种方法的一致性为96.7%,敏感度为92.3%,特异度为98.5%。结论 GeneXpert Mtb/RIF检测技术是一个敏感、特异和快速有效方法,有利于结核病的早期诊断。     

Xpert MTB/RIF对初治涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液检测的研究

目的 探讨Xpert MTB/RIF检测支气管肺泡灌洗液对初治涂阴肺结核的早期快速诊断价值。方法 对南通市第六人民医院2015年6月—2018年1月连续三次痰涂片阴性的疑似初治肺结核住院患者332例,在抗结核治疗前行支气管镜检查,收集支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid,BALF）,行结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF检测,比较三种方法的阳性率,并分别以培养阳性及临床诊断为标准,计算Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果 共有279例初治涂阴肺结核和53例非肺结核患者入组,279例初治涂阴肺结核的BALF检测结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF阳性率分别为2.51%、25.81%及50.90%,Xpert MTB/RIF阳性率明显高于涂片法及培养法,差异有统计学意义。以MGIT960培养阳性为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为98.61%（71/72),特异度为100%（53/53）;阳性预测值为100.00%（71/71）,阴性预测值98.15%（53/54)。以临床诊断为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为50.9%（142/279),特异度为100%（53/53）。阳性预测值为100%（142/142）,阴性预测值27.89%（53/190)。以DST 结果为金标准,Xpert MTB/RIF 检测利福平耐药的敏感度、特异度分别为 87.5％,98.44％,Xpert MTB/RIF与 DST两种方法检测利福平耐药的一致率达到 97.22％。且检测完成时间仅需2 h。结论 BALF中Xpert MTB/RIF检测敏感度、特异度均较高且能判断是否对利福平耐药,对初治涂阴肺结核有较大的早期快速诊断价值。     

结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测技术在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的 评价结核分枝杆菌rpoB基因和突变(GeneXpertMTB/RIF)检测技术对结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的诊断价值。方法 回顾性分析2019年1月至2020年6月陕西省结核病防治院收治的同时采用抗酸杆菌(AFB)涂片镜检(简称“AFB涂片”)、BECTECMGIT960液体培养(简称“MGIT960培养”)和GeneXpertMTB/RIF(简称“GeneXpert”)检测的142例疑似TBM患者,其中确诊TBM患者82例、非TBM患者60例。以临床确诊TBM患者为参考标准评价AFB涂片、MGIT960培养和GeneXpert检测对TBM的诊断效能。结果 AFB涂片、MGIT960培养和GeneXpert检测的敏感度分别为3.7%(3/82),24.4%(20/82)和40.2%(33/82);特异度均为100.0%(60/60);符合率分别为44.4%(63/142),56.3%(80/142)和65.5%(93/142)。结论 AFB涂片技术在诊断TBM时的敏感度很低,MGIT960培养检测技术在诊断TBM时的敏感度较高,而GeneXpert检测技术在诊断TBM时的敏感度更高。     

利福平耐药结核分枝杆菌实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺结核中的诊断探讨

目的研究分析在肺结核以及利福平耐药的诊断中采用利福平耐药结核分枝杆菌实时荧光定量核算扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)的临床诊断价值。方法选取2017年1月至2018年1月我院收治的130例疑似肺结核及可疑耐药结核的病患,收集病患的痰液标本,采用液体培养、抗酸染色涂片、Xpert MTB/RIF进行检测,将临床最终诊断结果作为金标准,分析对比三种检验方法检测结核分枝杆菌的特异度以及敏感度;以液体培养结果作为金标准,分析Xpert MTB/RIF对利福平耐药的检测特异度及敏感度。结果以临床最终诊断结果作为金标准,XpertMTB/RIF检验结核分枝杆菌的敏感度与液体培养相比,差异无统计学意义(P0.05),而Xpert MTB/RIF检验结核分枝杆菌的敏感度明显高于抗酸染色涂片(P0.05);以液体培养结果作为金标准,Xpert MTB/RIF诊断利福平耐药的敏感度为92.3%,特异度为98.6%。结论在肺结核以及利福平耐药的诊断中采用Xpert MTB/RIF,可对结核分枝杆菌以及利福平耐药性进行准确、快速的检测,且有着较高的诊断敏感度,临床应用价值较高,值得推广。     

GeneXpert MTb/RIF在尘肺病合并疑似肺结核病例的应用评价

目的探索GeneXpert MTB/RIF检查在尘肺病合并疑似肺结核患者支气管肺泡灌洗液中的临床应用价值。方法收集2017年1月至2017年12月就诊于本院的尘肺病合并拟诊肺结核患者50例,经痰涂片检查3次均阴性,行支气管肺泡灌洗,将每例支气管肺泡灌洗液标本分为一式三份,分别进行GeneXpert MTb/RIF、涂片抗酸染色和结核菌培养检测,统计和分析三种实验室检测方法的诊断价值。结果 50例标本中,GeneXpert MTb/RIF检测17例阳性,阳性率34%(17/50);抗酸杆菌涂片检测6例阳性,阳性率12%(6/50),该6例GeneXpert MTb/RIF检测均阳性;结核菌培养15例阳性,阳性率30%(15/50),其中1例行药敏试验提示对利福平耐药,该例行GeneXpert MTb/RIF检查提示利福平常见耐药基因检测阳性。结论支气管肺泡洗液GeneXpert MTB/RIF检查可提高尘肺病合并肺结核患者结核分枝杆菌的检出率。     

XpertMTB/RIF技术在肾结核的早期诊断和利福平耐药检测中的价值

目的 评估利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)在肾结核的早期诊断及利福平耐药检测中的价值.方法 选取该院79例(2014年1月—2015年9月)确诊为肾结核患者的尿液标本,分别进行尿沉渣涂片抗酸染色、XpertMTB/RIF检测、罗氏固体培养、传统比例法药敏试验.分析XpertMTB/RIF检测尿中的Mtb及利福平耐药性的敏感度和特异度.结果 以罗氏固体培养为金标准,XpertMTB/RIF检测Mtb的敏感度和特异度为88.7%(47/53)和88.5%(23/26),以传统比例法药敏试验为金标准,XpertMTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度为71.4%(5/7)和100.0%(40/40).结论 XpertMTB/RIF技术检测尿液中的Mtb和RIF耐药具有较高的敏感度和特异度,对肾结核早期诊断和利福平耐药检测有较高的应用价值.     

Xpert MTB/RIF和LPA对肺结核病诊断价值的比较

目的 评价Xpert MTB/RIF和线性探针技术（line probe assay, LPA）对肺结核病的诊断价值。方法 选取2016年1月—2018年3月陕西省结核病防治研究所和汉中市第二人民医院就诊的258例肺结核可疑症状者作为研究对象,应用痰涂片镜检法、固体培养法、Xpert MTB/RIF、LPA对所有研究对象的同一份痰样本进行检测,结合受试者工作特征 (receiver operation characteristic, ROC)曲线进行分析比较。分别以临床诊断和痰涂片镜检+固体培养结果为标准,比较Xpert MTB/RIF和LPA对肺结核病的诊断效能;以固体比例法药敏试验结果标准,比较Xpert MTB/RIF和LPA检测利福平耐药性的效能。结果 在涂阴培阴组中,Xpert MTB/RIF对结核分枝杆菌阳性检出率（20.00%）显著高于LPA阳性检出率（11.03%）,差异有统计学意义（P=0.04）。以临床诊断结果为金标准,Xpert MTB/RIF和LPA的ROC曲线下的面积（area under curve, AUC）分别为0.874、0.846,AUC差异无统计学意义。以痰涂片镜检法、固体培养法结果为标准,Xpert MTB/RIF和LPA的AUC分别为0.882、0.927,AUC差异有统计学意义（P=0.02）。以固体比例法药敏试验结果为标准,Xpert MTB/RIF和LPA检测利福平耐药性的AUC分别为0.889、0.909,AUC差异无统计学意义。结论 Xpert MTB/RIF和LPA对于肺结核病均具有较好的辅助诊断价值,Xpert MTB/RIF对于菌阴肺结核有更高的阳性检出率。     

Xpert MTB/RIF与传统方法在肺结核病诊断中的对比

目的 评价Xpert MTB/RIF在肺结核病诊断中的应用价值。方法 选取2016年1月—2018年5月陕西省结核病防治研究所和汉中市第二人民医院就诊的300例肺结核可疑症状者作为研究对象,同时应用痰涂片镜检、固体培养、比例法固体药敏试验、Xpert MTB/RIF对所有研究对象的同一份痰样本进行检测。计算并比较3种方法的阳性检出率。以临床诊断结果为标准,比较痰涂片镜检法、固体培养法和Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）的效能;以固体比例法药敏试验结果为标准,评价Xpert MTB/RIF检测利福平耐药性的效能。结果 在唾液痰标本中,Xpert MTB/RIF的阳性检出率为43.87%（43/98）,显著高于痰涂片镜检法的11.22%（11/98）和固体培养法的29.59%（29/98）,差异均有统计学意义（χ²=26.17,P<0.001;χ²=4.30,P=0.04）;在涂阴肺结核病患者中,Xpert MTB/RIF的阳性检出率为61.00%（61/100）,显著高于固体培养法的37.00%（37/100）,差异有统计学意义（χ²=11.53,P=0.001）。以临床诊断为标准,Xpert MTB/RIF的灵敏度和特异度分别为78.57%（154/196）、96.15%（100/104）,Kappa值为0.69。Xpert MTB/RIF的灵敏度显著高于痰涂片镜检法的48.97%（96/196）和固体培养法的63.27%（124/196）,差异均有统计学意义（χ²=37.15,P<0.001;χ²=11.13,P=0.001）。以固体比例法药敏试验结果为标准,Xpert MTB/RIF的灵敏度和特异度分别为78.26%（18/23）、98.12%（99/101）,Kappa值为0.80。结论 与传统方法相比Xpert MTB/RIF具有较高的灵敏度、特异度和阳性检出率,可用于肺结核病的早期快速诊断。     

不同类型标本中GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性的分析

目的 分析比较不同类型标本中GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性的效能,评价GeneXpert MTB/RIF在肺及肺外结核诊断中的应用价值.方法 以2019年1月1日—2020年12月31日西安市胸科医院7 687例BACTECMGIT960培养(简称"960液体培养")阳性的标本为研究...     

Xpert 技术对痰液和纤支镜洗液标本中结核分枝杆菌检测价值

目的 评价GeneXpert MTB/RIF（Xpert）技术在肺结核病实验室诊断中的应用价值。方法 收集2018年1月—12月苏州市第五人民医院收治的疑似肺结核患者标本566份,其中痰标本421份,纤支镜洗液145份,分别采用Xpert 法、荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法、结核培养法进行检测,收集数据,分析比较Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时的敏感度和特异度,并与结核培养结果做比较,评价Xpert技术的检测效能。结果 对痰标本的检测,Xpert 技术、荧光定量PCR法、痰涂片法、结核培养法检测的阳性率分别为36.8%、24.0%、19.0%、32.1%;对纤支镜洗液标本的检测,四种检测方法的阳性率分别为54.5%、33.1%、12.4%、41.4%,可见Xpert 技术的阳性检出率明显高于其他三种检测方法。以培养法作为金标准,Xpert 方法检测痰标本的敏感性和特异性分别为77.0%和82.2%,阳性预测值和阴性预测值分别为67.1%和88.3%,符合率为80.5%,Kappa值为0.57。Xpert 方法检测纤支镜洗液标本的敏感性和特异性分别为93.3%和72.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为70.9%和93.9%,符合率为81.4%,Kappa值为0.633。结论 Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时具有较高的敏感性和特异性,能显著提高结核病的诊断效率,在肺结核的早期诊断、早期治疗等方面具有较高的临床应用价值。     

荧光定量PCR在结核分枝杆菌快速诊断中的研究

目的 在痰液标本中,探讨荧光定量PCR技术快速检测结核分枝杆菌应用的诊断价值。方法 选取210例初诊的疑似结核病患者的痰液标本,分别进行痰涂片、MGIT960液体培养以及荧光定量PCR的检测,其中103例标本还进行了Xpert MTB/RIF检测,通过比较来分析荧光定量PCR在检测结核分枝杆菌方面的敏感度和特异性。结果 荧光定量PCR方法从痰液中检出结核分枝杆菌的阳性率高达28%,显著高于痰涂片15.2%的检出率,并且与结核培养的30.9%检出率相接近。以MGIT960液体培养为金标准,荧光定量PCR方法检测痰液标本中的结核分枝杆菌的敏感度和特异度分别为67.7%、 89.7%,阳性预测值和阴性预测值分别为74.6%和86.1%,两者之间差异没有统计学意义。将荧光定量PCR方法与Xpert MTB/RIF诊断方法相比较,分析发现荧光定量PCR方法的敏感度和特异度分别为85.9%、94.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为96.5%和80.4%,两者之间差异没有统计学意义。结论 荧光定量PCR方法在检测结核分枝杆菌时具有较好的敏感度和特异度,效果优于传统的痰涂片方法,并且与Xpert MTB/RIF方法具有较好的一致性。荧光定量PCR检测成本较低,且结果准确,在快速检测结核菌方面具有比较好的应用前景。     

线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中临床应用。方法 分别采用结核菌涂片、罗氏培养法、比例法药敏及线性探针技术对海南省疑似结核病患者痰液标本进行检测,并对检测结核分枝杆菌、耐药性及耐药突变特点进行分析。结果 线性探针技术检测结核分枝杆菌阳性率（58.7%）明显高于结核菌涂片（40.2%）和罗氏培养（53.8%）,线性探针法与两种传统方法比较差异有统计学意义（P<0.05）;以比例法药敏为金标准,线性探针法对结核分枝杆菌耐利福平、异烟肼和耐多药结核分枝杆菌检测的特异性为89.27%、94.95%和91.45%,敏感性为94.38%、75.00%和75.68%,阴性预测值为94.62%、80.34%和5.60%,阳性预测值为85.71%、93.32%和84.85%,符合率为90.05%、85.34%和85.34%,线性探针技术与比例法药敏检测结核分枝杆菌利福平耐药性效果比较差异无统计学意义,且具有较好一致性,检测异烟肼耐药性差异有统计学意义,且两种方法之间一致性一般,检测耐多药结核分枝杆菌两种方法差异无统计学意义,但两种方法之间一致性一般;利福平耐药基因突变类型主要是 rpoB H531L,占57.14%,异烟肼耐药基因突变类型主要是katG S315T1,占91.89%,耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变类型主要为rpoB S531L+KatG S315T1,占56.06%。结论 线性探针技术可快速准确地从海南省疑似肺结核临床标本鉴定出结核分枝杆菌及耐多药结核分枝杆菌,并可直接快速检测临床标本耐药性从而指导临床用药。     

骨关节结核不同类型标本进行Xpert MTB/RIF技术检测的研究

目的 比较利福平耐药荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)技术在骨关节结核病灶不同类型标本检测中的差异。 方法 选取骨关节结核患者245例,通过手术获取病灶中的脓液（199份）、干酪组织（161份）、肉芽组织（178份）、骨组织（87份）,分别进行结核分枝杆菌培养、Xpert MTB/RIF检测,比较4种组织标本阳性率。计算2种检测方法的联合阳性率;以结核分枝杆菌培养和药物敏感试验作为金标准,计算Xpert MTB/RIF技术在骨关节结核标本及利福平耐药基因检测中的敏感度和特异度。 结果 245例患者中结核分枝杆菌培养阳性112例(45.71%),625份标本中结核分枝杆菌培养阳性213份,结核分枝杆菌培养阳性率比较脓液＞干酪组织＞肉芽坏死组织＞骨组织(P＜0.01)。245例患者中Xpert MTB/RIF检测阳性128例(52.24%),625份标本中Xpert MTB/RIF检测阳性255份,Xpert MTB/RIF检测阳性率比较脓液＞干酪组织＞肉芽组织＞骨组织(P＜0.01)。2种方法联合检测阳性率为185例（75.51%）。Xpert MTB/RIF检测技术检验脓液、肉芽组织、干酪组织、骨组织阳性率均高于结核分枝杆菌培养(P＜0.05或P＜0.01)。Xpert MTB/RIF技术检测诊断骨关节结核的敏感度为96.43%,特异度为84.96%,诊断利福平耐药的敏感度为97.92%,特异度为93.75%。 结论 为了准确诊断骨关节结核及利福平耐药性应尽量收集多种标本,特别是病灶中的脓液,Xpert MTB/RIF技术可简便、快速、准确地诊断结核分枝杆菌感染及其耐药性。