中药益气解毒颗粒下调端粒酶活性抑制鼻咽癌细胞的生长

目的研究益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞端粒酶(Telomerase)活性的影响。方法先用MTT法检测益气解毒颗粒杀伤鼻咽癌细胞系(HNE1)的半抑制浓度(IC50),再用10×IC50,1×IC50,0.5×IC50作用HNE1 12,24,48,72和96 h,然后检测HNE1端粒酶活性;将HNE1接种至BABL/C裸鼠,制备鼻咽癌细胞系裸鼠移植瘤,灌喂中药益气解毒颗粒药液,观察其在体内对鼻咽癌细胞端粒酶活性的影响。结果益气解毒颗粒体外杀伤鼻咽癌细胞的IC50为6.625 mg/mL,10×IC50作用HNE1端粒酶活性下降为阴性(<0.20);1×IC50作用后,端粒酶活性(0.47±0.11)稍有下调,0.1×IC50作用后,端粒酶活性(0.78±0.17),低于空白对照组(1.20±0.23)。灌喂益气解毒颗粒组移植瘤生长受到明显的抑制,抑瘤率为(83.20±7.56)%,端粒酶活性为(0.37±0.10),明显低于对照组(0.89±0.27)。结论益气解毒颗粒在体外和体内均能抑制端粒酶的活性,可能是通过对鼻咽癌细胞端粒酶的活性抑制而发挥抑瘤效应。     

中药益气解毒颗粒对鼻咽癌裸鼠移植瘤蛋白质表达的影响

目的：探讨中药复方益气解毒颗粒抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的分子机制。方法：将鼻咽癌细胞系HNE1接种至BABL/c裸小鼠,20只,每只0.5×107个,待移植瘤生长至一定大小（约1 cm×1 cm×1 cm）,随机分为两组。中药组灌喂益气解毒颗粒药液,对照组灌喂生理盐水,30 d后处死裸鼠,解剖获取肿瘤组织,测量瘤体体积大小,称量瘤体重量。取100 mg瘤体组织,常规提取总蛋白质,用固相pH梯度双向凝胶电泳分离移植瘤组织的总蛋白质,银染显色,ImageMaster 2D Elite 4.01软件分析差异蛋白质点。随机选取表达差异点共19个,4个点为只在中药组表达,4个点仅在对照中表达,余下11个为表达相差5倍以上的点,进行质谱鉴定和生物信息学分析。结果：益气解毒颗粒药液能明显抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长,灌喂中药组瘤体积和重量分别为（0.207±0.023）cm3和（0.132±0.021）g,对照组为（1.342±0.298）cm3和（1.017±0.015）g（P<0.05）;制率为84.58%。双向电泳图像分析蛋白质表达,益气解毒颗粒药物处理组平均蛋白质数为567±49,未处理组的平均蛋白质数为679±59;差异蛋白质有243个,其中有112个表达增强,有131蛋白质表达下降;差异蛋白质的质谱鉴定和生物信息分析,发现在中药组HKR2 protein,Phosphoribosyl pyrophosphate synthetase TNFR superfamily member和Apoptosis regulator BAX组特异表达,另外Mucin 5B precursor GTP--RNA guanylyltransferase等6个蛋白质高表达;而 Fibulin-3,Zinc finger protein 266 Carboxy terminus of HSP70-interacting protein等9个蛋白质不表达或表达下调。结论：益气解毒颗粒抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植的生长与这些差异表达蛋白质有关,为中药作用的分子机制究提供了新的思路。     

扩增活化的自体淋巴细胞对肾母细胞瘤的影响

目的 初步探讨扩增活化的自体淋巴细胞(EAAL)对肾母细胞瘤移植瘤生长的影响.方法 15只裸鼠随机分为低、高剂量组和阴性对照组,皮下种植人肾母细胞瘤组织.小鼠瘤体模型建立后,分别经尾静脉输注低剂量EAAL(1.7×105,0.3 mL)、高剂量EAAL(15×105,0.3 mL)、阴性对照组(注射生理盐水0.3 mL),对比观察肿瘤生长变化及裸鼠生存状况.结果 动物实验结果表明:注射EAAL细胞后,各组间裸鼠肿瘤直径变化有差异,低、高剂量组较阴性对照组裸鼠肿瘤直径缩小[(0.97±0.10)cm、(0.64±0.07)cm vs (1.33±0.09) cm;P<0.05].瘤体质量方面,低、高剂量组亦较阴性对照组裸鼠减轻[(0.96±0.09)g、(0.62±0.05)g vs (1.20±0.11)g;P<0.05],且EAAL剂量越高对肿瘤的抑制作用越明显.结论 EAAL细胞治疗对裸鼠肾母细胞瘤移植瘤的生长可能有抑制作用.     

125I放射性粒子植入联合CIK细胞对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的：观察125I放射性粒子组织间植入联合细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制效应。方法：取健康人外周血单个核细胞,加入不同的细胞因子促进CIK细胞成熟,流式细胞仪检测CIK细胞表型,CD3+CD56+双阳性细胞达20%以上为达标;用人肝癌细胞株SMMC-7721建立裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为125I放射性粒子组（A组）、CIK细胞组（B组）、125I粒子+CIK细胞组（C组）,空白对照组（D组）,分别加处理因素,每4 d测量各组移植瘤体积,观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。HE染色检测各组移植瘤病理变化,免疫组织化学技术检测各组Ki-67蛋白表达,TUNEL试剂盒检测各组移植瘤原位凋亡。结果：125I粒子放射性粒子植入联合CIK细胞静脉输入可明显抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,C组瘤体积为（0.42±0.17） cm3,显著小于A组（1.23±0.83） cm3、B组（3.77±1.42） cm3和D组（6.62±0.53） cm3,各组瘤体积有显著性差异（F=155.706,P<0.001）;C组抑瘤率为93.71%,显著高于A组（81.33%）和B组（43.06%）。免疫组化染色发现各组移植瘤Ki-67蛋白表达的平均吸光度值分别为：C组（0.481±0.063）、A组（0.592±0.104）、B组（0.669±0.120）、D组（0.797±0.113）,差异有统计学意义（F=24.334,P<0.001）。TUNEL法发现：C组凋亡的平均光吸光度值（0.859±0.067）,显著高于A组（0.756±0.055）和B组（0.517±0.051）,差异有显著统计学意义（F=318.373,P<0.001）,联合治疗明显抑制细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡。结论：125I放射性粒子永久植入联合CIK细胞免疫治疗在体内可显著抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,抑制癌细胞增殖,诱导其凋亡,其疗效优于单一治疗方式,局部内放疗联合细胞免疫治疗可能有协同增效作用,有可能成为肝癌综合治疗的方法之一。     

重组人血管抑素对荷人CNE-1鼻咽癌裸鼠抑制作用的初步研究

目的:观察重组人血管抑素(recombinant human angiostatin, rhAGN)对荷人CNE-1鼻咽癌皮下移植瘤生长的抑制作用。方法:建立CNE-1鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤模型,皮下注射不同剂量rhAGN,治疗30d后,观察肿瘤体积和重量变化,计算其抑瘤率。结果:rhAGN处理剂量为50mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)和200mg/(kg·d)时,肿瘤体积分别为(4961±384)mm~3、(2449±276)mm~3和(488±52)mm~3,与对照组相比,治疗组的体积和重量明显减小(P<0.01,P<0.001);其抑瘤率分别为32.3％、64.0％和83.2％。结论:rhAGN能显著抑制CNE-1鼻咽癌移植瘤的生长,且作用呈剂量依赖性。     

茶多酚对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的：通过观察茶多酚在体内对人鼻咽癌细胞的抑制作用,探讨其可能的抗癌机制。方法以人鼻咽癌细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型,以茶多酚腹腔注射干预,在观察抑瘤率基础上,以实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测裸鼠移植瘤VEGF在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果茶多酚具有显著抑制鼻咽癌细胞 HONE1移植瘤生长的作用,与模型对照组相比,低、高剂量茶多酚组体内抑瘤率分别为18．82％、47．66％,呈浓度相关性（P＜0．05）;荧光定量 PCR及Western blot结果示,茶多酚可下调VEGF的mRNA和蛋白表达水平,且呈浓度依赖性,其中高剂量组变化明显,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论茶多酚对人鼻咽癌HONE1细胞裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,机制可能与调节VEGF表达,从而抑制肿瘤血管生成等作用有关。     

金黄色葡萄球菌感染对鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖活性的影响

目的探讨金黄色葡萄球菌感染对鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞增殖活性的影响及其可能机制。方法 24只BALB/c雌性裸鼠接种人鼻咽癌细胞HNE2,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型。随机分成移植瘤模型对照组、移植瘤感染组和移植瘤治疗组,再从感染组裸鼠尾静脉注射金黄色葡萄球菌,制备鼻咽癌裸鼠移植瘤感染模型。造模后,每3天测量肿瘤大小,绘制生长曲线,15天后处死裸鼠,处死后称量瘤体重量,并对瘤体进行HE染色、增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞凋亡检测。结果感染组裸鼠感染金黄色葡萄球菌后,瘤体迅速增大,重量明显增加,瘤体内增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数明显增多,增殖指数(PI)升高。同时发现金黄色葡萄球菌感染鼠的瘤体内细胞凋亡指数明显下降。结论金黄色葡萄球菌感染能增强鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖活性。     

DcR3基因对胰腺癌裸鼠移植瘤化疗敏感性的影响

目的探讨RNA 干扰沉默诱骗受体-3（DcR3）对人胰腺癌细胞裸鼠移植瘤化疗敏感性的影响及其可能机制。方法取对数生长期的AsPC-1 细胞1×106个/ml,接种于5 周龄裸鼠右后肢腹股沟,当皮下肿瘤直径为8 mm 左右,随机分为4 组（ n=10）：对照组、化疗组、阴性质粒+ 化疗组、DcR3 siRNA+ 化疗组。观察DcR3 siRNA联合化疗药物对人胰腺癌AsPC-1细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。应用ELISA和Western blot检测DcR3 蛋白的变化;TUNEL 分析肿瘤细胞凋亡;Western blot 和RT-PCR 检测FasL、Caspase-8 和Caspase-3 等凋亡因子的表达。结果化疗组、阴性质粒+ 化疗及DcR3 siRNA+ 化疗组均可抑制移植瘤的生长,与对照组比较,3 组抑瘤率平均值分别为（35.87±4.58）%、（40.68±4.16）%和（90.25±2.53）%,4 组间差异有统计学意义（F =47.736,P =0.000）,DcR3 siRNA+ 化疗组抑瘤率较化疗组增加;对照组、化疗组、阴性质粒+ 化疗以及DcR3 siRNA+ 化疗组移植瘤重量平均值分别为（0.95±0.03）、（0.63±0.04）、（0.67±0.02）和（0.17±0.06）g,4 组间差异有统计学意义（F =85.531,P =0.000）,DcR3 siRNA+ 化疗组瘤重较化疗组减轻;对照组、化疗组、阴性质粒+化疗组、DcR3 siRNA+化疗组凋亡率平均值分别为（6.3±2.21）%、（14.8±2.65）%、（14.5±3.06）%和（54.6±3.23）%,4 组间差异有统计学意义（F =104.225,P =0.000）,DcR3 siRNA+ 化疗组凋亡率较化疗组增加;DcR3siRNA+化疗组的FasL、Caspase-8 和Caspase-3 蛋白表达较其他各组上升（P =0.000）。结论沉默DcR3 可激活FasL/Caspase 凋亡途径,促进细胞凋亡,增加胰腺癌细胞移植瘤对化疗的敏感性。     

丙戊酸对人卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：探讨丙戊酸（valproic acid,VPA）对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法：建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组,每组6只： (1) 治疗组：包括①VPA组;② 顺铂（diamminedichloroplatinum,DDP）组;③VPA+ DDP组;(2) 对照组。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,采用流式细胞术（flowcytometry,FCM）检测肿瘤细胞凋亡率、细胞周期时相、裸鼠肝、脑组织细胞的凋亡率和肿瘤细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的蛋白含量。结果：治疗组皮下移植瘤抑瘤率分别为40.7%、45.3%、58.0%,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组的凋亡率分别为（27.05±1.63）％、（35.93±3.89）％、（42.59±2.55）％,高于对照组（16.73±2.82）％;肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,S期细胞显著减少;各组肝脏和脑组织细胞凋亡率均较低,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗组中VEGF蛋白含量明显低于对照组。结论：VPA对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,其作用的实现可能与其诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成有关。VPA与顺铂联合应用其抑瘤作用增强,而对肝细胞和脑细胞毒性较低。     

人鼻咽癌肝转移灶裸小鼠移植瘤模型（CNT—1）的建立及特性研究

从１例鼻咽癌肝转移患尸检时取出肝组织接种于裸小鼠，成功地建立了１株鼻咽移植瘤动物模型，命名为中国鼻咽移植瘤株１号，简称ＣＮＴ－１，该移植瘤株选用鼠均为Ｔ淋巴细胞免疫缺陷型的黑皮（ＮＣ）品系及白皮（ＮＭＲＩ）品系裸小鼠，雌雄兼用，具有潜伏期短，生长稳定，传递成功率为１００％之特点。至今已保存３年余，传递２３代，病理检查，原代为典型的低分化鳞状细胞癌，经裸鼠传代１～１８代后部分癌细胞向未分化癌类型转     

化疗联合中药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSG-1表达的影响

目的 探讨磷酰胺（CTX）与破壁灵芝孢子粉联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSG-1蛋白表达的影响,为转移性乳腺癌的分子诊断和临床用药治疗提供实验理论依据.方法 将乳腺癌细胞株MCF-7注入裸鼠体内,建立移植瘤模型.将24只移植瘤接种成功的裸鼠分为CTX模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组和生理盐水对照组,每组6只.观察各组裸鼠的一般情况、体重及移植瘤体积、重量,用免疫组化检测各组移植瘤细胞TMSG-1蛋白的表达水平,用流式细胞仪检测各组移植瘤癌细胞凋亡情况.结果 CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组能有效抑制裸鼠皮下移植瘤体积及重量,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的抑瘤率高于模型组（P〈0.01）;CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组移植瘤的TMSG-1蛋白表达明显高于对照组和模型组（P〈0.05）;流式细胞仪定量分析显示模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的细胞凋亡率明显高于对照组（P〈0.05）.结论 破壁灵芝孢子粉与CTX联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长有显著抑制增殖和促凋亡作用,同时还可以上调TMSG-1蛋白的表达起到抗肿瘤转移作用.     

C-Myc／Fas基因转染对人颊癌细胞移植瘤的影响

 【目的】探讨C-Myc／Fas基因BcaCD885细胞裸鼠移植瘤内转染的抑瘤效果，了解分子机制。【方法】构建人颊癌BcaCD885细胞裸鼠移植瘤模型，实验动物分3组，每组16只。分别瘤内注射脂质体、脂质体，pBK-fas、以及脂质体／pBK-Fas／pcDNA3-C-Myc共聚物，观测移植瘤增殖，绘制生长曲线。转染72h后每组处死6只动物，RT-PCR检测移植瘤细胞FasmRNA表达。流式细胞术（Flowcytometry，FCM）检测Fas蛋白表达和移植瘤细胞凋亡、增殖水平。【结果】Fas转染、C-Myc／Fas共转染抑制肿瘤增殖，生长抑制率分别为47．33％±2．29％和49．93％±5．15％，差异无显著性（P〉0．05）。Fas转染、C-Myc／Fas共转染增强移植瘤细胞FasmRNA表达，提高Fas蛋白阳性表达率、阳性表达强度和凋亡指数。共转染组增殖指数为65．45％±7．11％。高于对照组和Fas组（53．26％±6，37％和51．93％±7．51％），差异有显著性（P〈0．01）。对照组和Fas组差异无显著性（P〉0．05）。【结论】Fas、C-Myc／Fas转染抑制人颊癌细胞裸鼠移植瘤增殖与增强Fas表达、促进细胞凋亡有关。     

鼻咽清毒颗粒防治鼻咽癌急性放射性口咽炎疗效观察

目的　观察鼻咽清毒颗粒对鼻咽癌急性放射性口咽炎的防治效果。方法　将 13 2例鼻咽癌患者随机分为观察组 67例 (放疗 +生理盐水 +鼻咽清毒颗粒 )和对照组 65例 (放疗 +生理盐水 ) ,作前瞻性临床对照实验观察。结果　观察组和对照组在口咽放射反应症状、口咽黏膜反应及疗效三方面进行比较 ,差异有非常显著性 (P <0 0 1)。结论　鼻咽清毒颗粒能有效地防治鼻咽癌急性放射性口咽炎 ,是鼻咽癌放疗的良好辅助药物。     

DcR 3 基因对胰腺癌裸鼠移植瘤化疗敏感性的影响

目的 探讨RNA 干扰沉默诱骗受体-3（DcR3）对人胰腺癌细胞裸鼠移植瘤化疗敏感性的影响 及其可能机制。方法 取对数生长期的AsPC-1 细胞1×106 个/ml,接种于5 周龄裸鼠右后肢腹股沟,当皮下肿瘤 直径为8 mm,随机分为4 组（n =10）：对照组、化疗组、阴性质粒+ 化疗组、DcR3-siRNA+ 化疗组。观察 DcR3-siRNA 联合化疗药物对人胰腺癌AsPC-1 细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。应用ELISA 和Western blot 检测DcR3 蛋白的变化;TUNEL 分析肿瘤细胞凋亡;Western blot 和RT-PCR 检测FasL、Caspase-8 和 Caspase-3 等凋亡因子的表达。结果 化疗组、阴性质粒+ 化疗及DcR3-siRNA+ 化疗组3 组均可抑制移植瘤的生 长,与对照组比较,3 组抑瘤率平均值分别为（35.87±4.58）%、（40.68±4.16）% 和（90.25±2.53）%,4 组比较 差异有统计学意义（F =47.736,P =0.000）,DcR3 siRNA+ 化疗组抑瘤率较化疗组升高;对照组、化疗组、阴 性质粒+ 化疗以及DcR3-siRNA+ 化疗组移植瘤重量平均值分别为（0.95±0.03）、（0.63±0.04）、（0.67±0.02） 和（0.17±0.06）g,4 组比较差异有统计学意义（F =85.531,P =0.000）,DcR3-siRNA+ 化疗组瘤重较化疗组减轻; 对照组、化疗组、阴性质粒+ 化疗组、DcR3-siRNA+ 化疗组凋亡率平均值分别为（6.3±2.21）%、（14.8±2.65） %、（14.5±3.06）% 和（54.6±3.23）%,4 组比较差异有统计学意义（F =104.225,P =0.000）,DcR3-siRNA+ 化疗组凋亡率较化疗组提高;DcR3-siRNA+ 化疗组的FasL、Caspase-8 和Caspase-3 蛋白表达较其他各组上 升（P =0.000）。结论 沉默DcR3 可激活FasL/Caspase 凋亡途径,促进细胞凋亡,增加胰腺癌细胞移植瘤对化 疗的敏感性。     

慢病毒介导lncRNA-AK058003过表达对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探究上调SK-Hep1肝癌细胞中lncRNA-AK058003的表达对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法 采用慢病毒转染的方法将lncRNA-AK058003的重组质粒和空质粒分别转入SK-Hep1肝癌细胞株中,经新霉素筛选出lncRNA-AK058003稳定过表达的细胞株,用定量PCR的方法检测lncRNA-AK058003在SK-Hep1肝癌细胞中的过表达,并且将稳定过表达lncRNA-AK058003的SK-Hep1肝癌细胞和含有空质粒的SK-Hep1肝癌细胞分别注射入裸鼠腋下皮下,定期测量裸鼠移植瘤的长径和短径,从而计算出移植瘤的体积,饲养35天后测量移植瘤的重量。结果 构建稳定过表达lncRNA-AK058003的肝癌细胞株,裸鼠皮下荷瘤实验结果显示,过表达组裸鼠移植瘤的体积（308.4±439.4mm³）、重量（0.464±0.518g）和生长速度均低于空质粒组（1410.0±973.0mm³ ,1.363±0.856g,P < 0.05）。结论 lncRNA-AK058003对肝癌裸鼠移植瘤的增殖具有抑制作用。     

益气解毒颗粒对二亚硝基哌嗪诱导人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒对人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用。方法 :二亚硝基哌 (DNP)诱导人胚鼻咽上皮细胞转化 ,同时用益气解毒颗粒作用于DNP诱导的鼻咽上皮细胞 ,共同培养 ,然后收集不同代数细胞 ,酶连免疫聚合酶链反应 (PCR -ELISA)和巢式聚合酶链反应 (Nested -RT -PCR)法检测实验细胞端粒酶活性和端粒酶RNA的表达。结果 :加益气解毒颗粒药液组鼻咽细胞形态明显好于盐水对照组 ,其端粒酶活性 (0 34± 0 19)也明显低于对照组 (0 73± 0 2 7) (P <0 0 5 )。结论 :益气解毒颗粒能够抑制鼻咽上皮细胞端粒酶的激活 ,进而阻断DNP诱导的细胞转化。     

CD44v6、E-Cadherin表达与CNE-2Z-F1裸鼠移植瘤转移的关系

目的　探讨CD44v6、E -Cadherin表达与人鼻咽癌裸鼠移植瘤转移的关系。方法　分别将人鼻咽癌细胞克隆株F1在体外与鼠肺块共同孵育及胸内移植 ,然后将带瘤细胞肺块 (Ⅰ组 )和胸内瘤组织块 (Ⅱ组 )各行裸鼠皮下移植 ,并与瘤细胞悬液皮下移植瘤 (Ⅲ组 )比较 ,观察各组移植瘤转移特点。采用免疫组织化学技术检测各组移植瘤回复培养细胞CD44v6和E -Cadherin表达。结果　Ⅰ组和Ⅱ组皮下移植瘤的总转移率和淋巴结转移率均高于Ⅲ组 (其中ⅠvsⅢ ,P <0 .0 5) ;肺转移仅发生在Ⅰ组。这两组移植瘤细胞CD44v6表达水平明显增高 ,其阳性细胞数分别为 (79.7± 5.7) %、(74.1± 3.1 ) % ,第 3组为 (65.6± 4.31 ) %移植瘤转移率与CD44v6高表达密切相关 ;E -Cadherin阳性细胞分别为 (41 .7± 4.9) %、(43.8± 6.4) %和 (2 7.4± 4.9) % ,Ⅰ组、Ⅱ组与Ⅲ组之间比较 ,有显著差异 (P <0 .0 5)。结论　CD44v6的过表达和E -Cadherin功能障碍 ,可能在鼻咽癌侵袭转移中起一定作用。     

重组人血管内皮抑素联合放疗对CNE1鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤生长及其VEGF、MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响

目的探讨重组人血管内皮抑素（恩度）联合放疗对人鼻咽癌细胞株1（CNE1）鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA表达的影响。方法建立人鼻咽癌细胞裸鼠模型,成瘤后随机分为4组,对照组、恩度组、放疗组和恩度＋放疗联合组,分别进行恩度与放疗干预,观察各组移植瘤的生长速度和瘤体大小的变化。4周后处死裸鼠摘取瘤体,应用RT-PCR检测各组瘤体组织中的VECF、MMP-2和MMP-9 mRNA的表达变化。结果联合组对鼻咽癌移植瘤的生长有显著抑制作用,且明显强于其他三组（均P〈0.05）;联合组中VECF、MMP-2和MMP-9的表达与另外三组相比均显著下调（均P〈0.05）;VEGF与MMP-2及MMP-9的表达呈正相关（均P〈0.01）。结论恩度联合放疗能明显抑制CNE1鼻咽癌移植瘤的生长,恩度对鼻咽癌裸鼠抑制瘤具有放疗增敏作用,这种作用可能与VEGF、MMP-2和MMP-9表达下调有关。     

肺积汤对Lewis肺癌裸鼠移植瘤中新生血管的影响

目的 观察肺积汤对Lewis肺癌移植瘤中新生血管的影响，并探讨其机制，为中医中药在抑制肺癌生长及转移的临床应用提供实验基础和理论依据。方法 BALB/c雄性裸鼠30只，制作Lewis肺癌模型，随机数字表法随机分为3组，对照组（NS组：0.9%NS 0.4ml/只，灌胃，qd）；中药组（生药含量1g/ml： 22.2mg/kg，调整至0.4ml/只，灌胃，qd）；贝伐单抗组（贝伐单抗15mg/kg，调整至0.2ml/只，腹腔注射，biw），给药21天后处死，收集血清、皮下瘤。HE染色观察皮下瘤血管情况，免疫组化法检测皮下瘤微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子-A（VEGF-A）的水平；ELISA法测定血清中VEGF-A水平。结果（1）一般情况：相对于对照组，中药组及贝伐单抗组瘤重小[(6.15±1.49)g，(4.32±0.77)g比（7.92±1.09）g，P均<0.05]，瘤体积小[(3.73±1.06) cm3，(2.36±1.99）cm3比(6.15±1.49) cm3, P均<0.05]；且中药组裸鼠较贝伐单抗组未出现明显恶病质表现。（2）HE染色：中药组及贝伐单抗组皮下瘤细胞变性坏死较少，散在红细胞少。（3）免疫组化：中药组及贝伐单抗组MVD小[(18.39±1.21), (17.40±0.8)比( 27.40±10.12) , P<0.05]；VEGF-A表达低[(3.35±1.151), (3.22±1.10)比(6.98±1.74), P<0.05]，但中药组与贝伐单抗组组间差异小，无统计学意义（P>0.05）。（4）ELISA：中药及贝伐单抗可下调血清VEGF-A表达[(115.38±9.15)，(106.21±3.15)比(130.63±4.51), P均<0.01]。结论 （1）肺积汤能抑制皮下瘤生长，延缓恶病质发生；（2）肺积汤能下调组织及血清VEGF-A的阳性表达，降低微血管密度，维持血管稳态。（3）肺积汤抑制肿瘤生长及转移，可能与下调促血管生长因子表达，抑制肿瘤血管新生有关。     

ADAM17-shRNA 对MCF-7 乳腺癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用研究

目的 观察转染解聚素- 金属蛋白酶17- 短发夹RNA（ADAM17-shRNA）的MCF-7 乳腺癌 细胞在裸鼠体内的生长效果并探索其作用机制。方法 将30 只裸鼠随机分为转染组（接种转染ADAM17- shRNA 的MCF-7 乳腺癌细胞）、空载体组（接种转染shNC 的MCF-7 乳腺癌细胞）及对照组（接种正常 MCF-7 细胞）。分别在各组裸鼠右侧鼷部皮下种植细胞悬液0.2 ml/ 只,观察各组荷瘤裸鼠的生长状态、饮 食及体重变化。第28 天处死裸鼠并取出移植瘤。采用HE 染色观察组织学形态;Western blot 检测肿瘤局 部ADAM17、磷酸化表皮细胞生长因子受体(p-EGFR)、表皮细胞生长因子受体(EGFR)、磷酸化的蛋白激 酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(p-ERK) 及细胞外调节蛋白激酶(ERK) 的 表达。结果 对照组、空载体组及转染组移植瘤最终体积分别为（639.821±15.429）、（643.350±15.543） 和（240.233±10.536）mm3,3 组不同时间点瘤体体积比较有差异（P <0.05）;不同组别瘤体体积比较有差 异（P <0.05）。HE 染色结果显示,移植瘤组织呈乳腺浸润性导管癌特征,对照组与空载体组无明显差异,转 染组较对照组、空载体组坏死多。转染组肿瘤组织中ADAM17、EGFR、p-EGFR、Akt、p-Akt、ERK 及 p-ERK 的蛋白表达水平低于对照组和空载体组（P <0.05）。结论 ADAM17-shRNA 可有效抑制MCF-7 乳 腺癌细胞裸鼠移植瘤的生长。EGFR-PI3K-Akt 和EGFR-MEK-ERK 信号传导通路参与ADAM17-shRNA 的抑制作用。