测人外周血中B-淋巴细胞的微量方法

目前检测B-淋巴细胞需用泛影萄胺-聚蔗糖,密度梯度分层,分离淋巴细胞。这样,需采大量静脉血,耗去大量的试剂,在居民的检查中是不适宜     

毛细胞白血病外周血中瘤细胞的电镜样品制备

毛细胞白血病外周血中瘤细胞的电镜样品制备侯宁，纪小龙，李维华我们将４Ｎ毛细胞白血病患者的外周血制备电镜标本，进行观察，效果满意，方法简便．材料和方法１．毛细胞白血病患者４例，分别取外周静脉血２ｍｌ，立即放人含有肝素钠的离心管内（肝素钠２０Ｏ／ｍｌ全血...     

正常小儿和感染性疾病患儿外周血大颗粒淋巴细胞的观察

对５０名正常小儿和１００名感染性疾病患儿进行外周血大颗粒淋巴细胞（ＬＧＬ）的检测。５０名正常小儿的ＬＧＬ，男性为０．１３１０±０．０４８７，女性为０．１３８５±０．０７１６，性别、年龄均无显著性差异。但与１００名感染性疾病患儿的ＬＧＬ比较，感染性疾病患儿的ＬＧＬ为０．２１８７±０．０６１８，ｔ＝８．４６，有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）；在感染性疾病患儿中，白细胞数增高者ＬＧＬ明显较白细胞正常者高（ｔ＝４．６６，Ｐ＜０．０１）。     

白血病细胞与正常外周血淋巴细胞的PARP活性及本底DNA链断裂的比较研究

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]是广泛存在于有核细胞中的多功能酶。当细胞DNA发生损伤时,PARP可作为细胞内的分子感受器,识别、结合到DNA断裂处,并被激活。激活的PARP可催化组蛋白H1、拓扑异构酶Ⅰ及Ⅱ、DNA聚合酶、RNA聚合酶、DNA连接酶、Ca~(2 )/Mg~(2 )依赖的核酸内切酶及PARP自身等多种核内受体蛋白的聚ADP-核糖基化作用,传递损伤信息,引发损伤所致级联反应,最终决定细胞的命运:修复损伤或凋亡。因此,PARP对维持细胞的正常功能具有极为重要的作用,其异常可能是导致细胞死亡失控的因素之一,癌变正是这种失控的一种后果。为了探讨PARP与细胞恶性变之间的关系,采集了14例健康供血员血样和4例初诊白血病病人血样,比较研究了白血病细胞与正常人外周血淋巴细胞的PARP活性。同时,应用彗星法(comet assay)研究了细胞内本底DNA链断裂及染色质结构。研究发现,与正常人外周血淋巴细胞相比,外周血白血病细胞中含有异常高的PAPP活性,在急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病细胞中检出大量的本底DNA链断裂。这一结果表明:①外周血白血病细胞中异常高的PARP活性和大量存在的本底DNA链断裂可能为其临床诊断提供有效的辅助指标。②外周血白血病细胞中异常高的PARP活     

毛细胞的细胞化学

毛细胞白血病(白血性网状内皮细胞增生症)为罕见的慢性白血病,但其瘤细胞的真正性质和起源尚不完全清楚。本文用细胞化学的方法,研究了经骨髓活检确诊的24例毛细胞白血病患者的末梢血。全部患者末梢血涂片中均有毛细胞,占白细胞总数的2～88%。本文又用同样的细胞化学方法,对4例慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、5例白血病期的欠分化淋巴细胞性淋巴瘤(PDL),2例Sezary综合征,4例急性髓单核细胞白血病(AMMOL)和2例急性单核细胞白血病(AMOL)进行了对比研究。     

慢性淋巴细胞性白血病骨髓基质细胞和正常骨髓基质细胞的比较性分析

本研究旨在对慢性淋巴细胞性白血病原代骨髓基质细胞（CLL-human bone marrow stromal cells,CLL-hBM-SC）和正常原代骨髓基质细胞（normal hBMSC,N-hBMSC）进行比较性分析,为建立CLL-CLL-hBMSC相互作用模型,从而更好地模拟CLL体内环境提供理论依据.从CLL患者和正常供者骨髓中分离单个核细胞,进行原代骨髓基质细胞（hBMSC）培养;采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测CLL-hBMSC和N-hBMSC表面粘附分子如血管细胞粘附分子1（vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1）和细胞间粘附分子1（intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1）的mRNA水平;采用real-time PCR和Western blot法分别检测两类不同来源的hBMSC中淋巴毒素β受体（lymphotoxin beta receptor,LTβR）的mRNA和蛋白质表达水平;采用Western blot法检测NF-κB家族成员的表达并分析细胞因子LTα1β2对NF-κB家族成员表达的影响;建立hBMSC和CLL细胞共培养体系,利用碘化丙啶（PI）染色检测细胞死亡情况.结果表明：从CLL患者骨髓中能成功地培养出贴壁的成纤维样hBMSC.与N-hBMSC相似,表面粘附分子VCAM-1和ICAM-1在两类hBMSC中的mRNA表达一致;两类hBMSC中LTβR的mRNA和蛋白表达水平相似;各NF-κB家族成员在两类hBMSC中都有表达,且蛋白水平无显著性差异;细胞因子LTα1β2可诱导hBMSC中经典性和非经典性NF-κB信号通路的活化;体外实验表明,两类hBMSC都能够有效地支持CLL细胞的体外存活.结论：两类hBMSC培养效率以及细胞形态上无明显差异.LTβR-NF-κB信号分子在两类hBMSC的表达以及活化情况相似.     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血B-1a细胞的研究

目的：研究自身免疫性溶血性贫血患者外周血B-1a细胞的变化。方法：用CD5CD19双标抗体和流式细胞仪检测20例正常对照、13例自身免疫性溶血性贫血（AIHA）发病初期患者、4例脾切除术后AIHA患者以及10例外伤后脾切除患者的外周血B细胞和13-1a细胞占外周血单个核细胞的百分比。结果：正常对照外周血昏1a细胞占外周血单个核细胞的比例为（0．78±0．16）％,AIHA患者发病初期外周血B-1a细胞百分比为（2．58±0．63）％,AIHA患者脾切除术后外周血B-1a细胞百分比降至（0．58±0．37）％,外伤后脾切除患者外周血B-1a细胞百分比为（0．65±0．43）％。结论：AIHA患者外周血B-1a细胞比例明显增高,且AIHA患者接受脾切除手术溶血得到控制后,B-1a细胞比例明显下降。     

先兆子痫和正常孕妇外周血辅助性T细胞及其细胞因子的变化

目的 探讨先兆子痫、正常妊娠女性Th细胞亚群功能变化和外周血Th1、Th2细胞百分率与外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液中IFN-γ、IL-4浓度的相关性。方法 应用流式细胞仪检测外周血Th1、Th2细胞百分率，ELISA法测定PBMC体外培养上清液中细胞因子IFN-γ和IL-4浓度。结果 与正常对照组相比，先兆子痫患者Th1细胞百分率、Th1/ Th2比值明显升高，差异非常显著；正常妊娠组Th1细胞百分率、Th1/ Th2比值明显下降，差异非常显著。与正常妊娠组相比，先兆子痫患者Th1细胞百分率、Th1/ Th2比值明显升高，差异非常显著。外周血Th1细胞百分率与PBMC培养上清液中IFN-γ浓度、Th2细胞百分率与PBMC培养上清液中IL-4浓度、Th1/Th2与PBMC培养上清液中IFN-γ／IL-4的比值均呈显著性正相关。结论 先兆子痫患者Th1细胞亚群功能增强，Th1/Th2细胞亚群功能失衡，导致病理妊娠。正常妊娠女性Th1细胞亚群功能明显减弱，对妊娠具有保护作用。流式细胞仪检测外周血Th1、Th2细胞百分率和ELISA法测定PBMC体外培养上清液中细胞因子IFN-γ和IL-4浓度具有良好的相关性。     

肺癌患者外周血DNT细胞和T淋巴细胞亚群检测的临床意义

目的研究肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和双阴性T淋巴细胞(double-negative Tcell,DNT)的变化及其临床意义。方法收集我院2013年7月至2014年7月收治的120例肺癌患者作为肺癌组,选择同期健康体检者80例作为对照组。采用FC500流式细胞仪检测受检者的外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞和DNT细胞的表达水平,并对数据进行统计学分析。结果肺癌患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T淋巴细胞数量均显著低于对照组,而CD8+T淋巴细胞数量显著高于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05);肺癌患者DNT细胞数量显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论肺癌患者DNT细胞及T淋巴细胞亚群数量明显改变,提示肺癌患者存在免疫功能紊乱。     

妊娠合并HBV感染者外周血淋巴细胞亚群和NK细胞的改变

目的探讨孕妇妊娠早、中、晚期合并HBV感染者外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平的变化.方法流式细胞术检测孕妇怀孕10周、14周和27周HBV感染者外周血CD4+、CD8+T细胞和NK细胞的表达水平.结果与正常孕期比较,怀孕中期合并HBV感染者其CD4+和CD8+T细胞表达水平下降(t=29.451,t=16.183,均P＜0.05).孕晚期合并HBV感染者除上述指标外,CD4+/CD8+比例和NK细胞表达水平也下降(t=18.962,t=16.372,t=7.662,t=7.662,t=26.696,均P＜0.05).而孕早期合并HBV感染者组上述指标无明显差异(P＞0.05).早产2例(2/40),无死胎.结论妇女孕期合并HBV感染者,孕早期外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平无明显变化,而怀孕中期和晚期外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平有明显变化.     

妊娠合并HBV感染者外周血淋巴细胞亚群和NK细胞的改变

目的探讨孕妇妊娠早、中、晚期合并HBV感染者外周血淋巴细胞哑群和NK细胞表达水平的变化。方法流式细胞术检测孕妇怀孕10周、14周和27周HBV感染者外周血CD4^＋．CD8^＋T细胞和NK细胞的表达水平。结果与正常孕期比较，怀孕中期合并HBV感染者其CD4^＋和CD8T细胞表达水平下降（t=29．451。t=16．183．均P〈0．05）。孕晚期合并HBV感染者除上述指标外，CD4^＋/CD8^＋比例和NK细胞表达水平也下降（t=18．962，t=16．372．t=7．662，t=7．662，t=26．696，均P〈0．05）。而孕早期合并HBV感染者组上述指标无明显差异（P〉0．05）。早产2例（2／40），无死胎。结论妇女孕期合并HBV感染者。孕早期外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平无明显变化．而怀孕中期和晚期外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平有明显变化。     

血友病甲患者外周血中T淋巴细胞的生化和免疫异常

作者对39例血友病甲患者外周血中T淋巴细胞的亚群分布,外-5′核苷酸酶(5′NT)活性和异常特性的细胞毒T淋巴细胞的生成进行了研究。根据CD4:CD8比率和HIV血清阳性将39例病人分成3组。A组13人,HIV-和CD4:CD8>1(即Leu3及Lcu2);B组19人,HIV-和CD4:CD8<1;C组7人,HIV+。另设一健康对照组,实验结果如下。 5′NT的活性从健康对照组→A组→B组→C组逐渐减低,C组的5′NT活性最低,但C组的     

中剂量rhG-CSF对正常供者外周血CD34+细胞动员效果

本研究探讨中等剂量600μg/d粒细胞集落刺激因子(GCSF)对正常供者CD34 细胞的动员效果及动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化。对2002-2004年我科31例健康供者给予rhGCSF600μg/d,在动员的第4天开始采集外周血干细胞(PBSC),并检测动员前后白细胞总数、动员后的有核细胞(NC)数、单个核细胞(MNC)数、CD34 细胞数及粒巨噬细胞集落形成单位(CFUGM),同时观察动员及采集过程中的不良反应。对12例供者GCSF动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化进行了观察。结果显示:600μg/d组与既往使用的300μg/d组相比,rhGCSF动员后的外周血细胞中NC、MNC和CD34 细胞及CFUGM显著增加(P<0.05),受者造血重建时间缩短(P<0.05),动员和采集过程中的不良反应发生率无明显上升(P>0.05),无严重不良反应发生。动员后CD3 细胞在PBMNC中的比例较动员前下降(15.05±3.3)%,(P<0.05)。动员前后CD4 /CD8 淋巴细胞的比值无明显变化(P>0.05)。结论:600μg/d的GCSF对正常供者的动员效果好,受者造血重建快,无严重不良反应发生。动员后PBMNC中CD3 细胞的下降及CD4 /CD8 淋巴细胞比值无明显变化,从而使得移植后急性GVHD的发生率无明显上升。     

子痫前期患者及正常孕妇外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的：研究外周血T淋巴细胞亚群在子痫前期患者及正常孕妇中的变化。方法：采用流式细胞技术检测子痫前期患者及正常孕妇外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞并与未孕妇女进行对照，探讨T淋巴细胞亚群及CD4^＋／CD8^＋T细胞比值在子痫前期及正常孕妇中的变化。结果：子痫前期与正常妊娠妇女相比，子痫前期患者总T淋巴细胞无显著变化，CD^4＋T淋巴细胞升高，差异非常显著（P〈0．001）；CD8^＋T淋巴细胞下降，差异非常显著（P〈0．001）：CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值升高．差异非常显著（P〈0．001）。与未孕妇女相比差异无显著性（P〉0．05）。子痫前期患者中CD^4＋／CD^8＋T淋巴细胞比值与平均动脉压呈正相关（r=0．569，P〈0．01）。结论：T淋巴细胞亚群的数量变化及相互间的平衡失调在子痫前期发病机制中发挥重要作用：     

北京地区老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围的建立及比较

目的建立及比较北京地区不同年龄段老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围。方法将参与2018年度解放军总医院健康体检的524例北京地区健康成人按10岁为1年龄段共分为4组,采用美国Beckman流式细胞仪结合血液分析仪分别检测他们的外周血CD4~+、CD3~+及CD8~+等T淋巴亚群及CD19~+及NK细胞,采用SPSS 17.0软件来分别比较各组间各项指标的统计学差异,并采用受检人群中年龄≥60岁的老年人的检测结果来获得适用于北京地区老年人的淋巴细胞亚群正常参考范围。结果淋巴细胞百分比随年龄的增长有所降低; CD3~+、CD3~+CD8~+及CD4~+45RO~+占淋巴细胞百分比随着年龄的增长而增高;自然杀伤细胞(NK)占淋巴细胞百分比随着年龄的增长而降低。北京地区老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围(以95%CI表示)如下:淋巴细胞:759～2 783 cell/μl(12.9～47.3);CD3~+:929～1610 cell/μl(53.08～91.92); CD3~+CD8~+:202～775 cell/μl(11.53～44.25); CD3~+CD4~+:250～1248 cell/μl(14.30～71.30); CD4~+45RA~+:33～662 cell/μl(1.9～37.80); CD4~+45RO~+:199～807 cell/μl(11.34～46.07); CD19:7～403 cell/μl(0.40～22.99); NK:32～501 cell/μl(1.80～28.61)。结论年龄因素可影响人外周血淋巴细胞亚群CD3~+、CD3~+CD8~+、CD4~+45RO~+及NK占淋巴细胞百分比,有必要建立适当的、适用于北京地区老年人的上述常见淋巴细胞亚群正常参考范围。     

非小细胞肺癌外周血淋巴细胞和肿瘤细胞体外化疗药敏试验分析

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,化疗在肺癌的治疗中占有至关重要的地位。我们采用非小细胞肺癌患者外周血淋巴细胞和手术切除标本原代癌细胞对临床常用化疗药物进行MTT法药敏试验检测,探讨两者的相关性,阐明在肺癌中是否可以应用外周血淋巴细胞代替肿瘤细胞进行药敏试验来     

恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义

【目的】研究恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群、调节性T细胞水平的变化及其临床意义。【方法】采用流式细胞仪对40例恶性肿瘤患者及40例正常人外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测。【结果】病例组与正常对照组比较,CD3^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋／CD8^＋比值及CDl6^＋／56^＋-NK细胞百分比均明显降低（P〈0．05）;CD8^＋T淋巴细胞和CD19^＋B淋巴细胞百分比明显高于正常对照组（P〈0．01）。与对照组相比较,恶性肿瘤患者外周血CD4^＋、CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋曲调节性T细胞均明显升高（P〈0．05）。【结论】恶性肿瘤患者细胞免疫功能明显异常;CD4^＋CD25^＋曲调节性T细胞增多可能是肿瘤患者免疫功能受抑的重要原因之一。淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价肿瘤患者疗效及判断预后方面具有一定的临床价值。     

BC-5500血细胞分析仪定量分析外周血未成熟细胞和异常淋巴细胞的性能评价

目的评价迈瑞BC-5500血细胞分析仪定量分析外周血白细胞域未成熟细胞(LIC)和异常淋巴细胞(ALY)的性能。方法选200例BC-5500LIC报警值大于3%、200例BC-5500ALY报警值大于3%的阳性样本和100份BC-5500ALY及LIC均无报警值的阴性样本。分别采用BC-5500和镜检分析LIC%和ALY%,对BC-5500和镜检结果进行比较。各选取5份不同ALY%和LIC%水平的样本进行BC-5500批内重复性评价,分别选取8份标本在4℃和室温进行样本稳定性评价。结果 200例LIC报警的阳性标本BC-5500分析LIC%结果与镜检结果的符合率是26.5%,200例ALY报警的阳性标本BC-5500分析ALY%结果与镜检结果的符合率是69.5%;LIC%和ALY%的假阳性率分别为73.5%、30.5%。100例LIC和ALY均无报警的阴性标本,BC-5500分析LIC%和ALY%结果与镜检结果的符合率分别是96%和68%。5份不同LIC%和ALY%水平样本重复性的变异系数(CV%)分别从3.22%到6.25%和3.25%到6.12%;BC-5500分析4℃和室温保存24h内的样本结果稳定。结论 BC-5500血细胞分析仪的重复性及稳定性良好;但定量分析外周血LIC和ALY的准确性差,显示出较高的假阳性及假阴性,该仪器幼稚细胞报警功能尚需不断完善。     

125例癫痫患儿外周血B淋巴细胞、NK细胞和NKT细胞的检测与分析

目的探讨癫痫患儿CD19、CD20、CD3-CD16+CD56+(NK细胞)和CD3+CD16+CD56+(NKT细胞)的变化情况和临床意义。方法选取2013年1月至2016年3月中山市人民医院儿童神经专科确诊的125例癫痫患儿作为癫痫组,另选取125例健康儿童作为对照组,流式细胞仪检测两组研究对象外周血CD19、CD20、NK细胞和NKT细胞水平。结果癫痫组CD19、CD20、NK细胞和NKT细胞水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。ROC曲线分析,CD19最佳截断值为9.4时,曲线下面积为0.903,灵敏度为91.7%。CD20最佳截断值为7.750时,曲线下面积为0.873,灵敏度为91.7%。NK细胞最佳截断值为8.55时,曲线下面积为0.805,灵敏度为95.8%。NKT细胞最佳截断值为0.350时,曲线下面积为0.769,灵敏度为91.7%。结论 CD19、CD20、NK细胞和NKT细胞可作为癫痫患儿免疫状态监测的重要指标。