HPLC-MS法测定关附甲素及其在Caco-2细胞上的摄取特性

目的建立关附甲素的LC-MS测定法,研究其在Ca-co-2细胞上的摄取特性。方法采用ShimadzuVP–ODS,C8柱,(250mm×2.1 mm,5μm),流动相:乙腈∶水=30∶70(V/V),用0.2%冰乙酸溶液,加入二乙胺适量调pH至4.0左右,流速:0.2 ml.min-1,电喷雾离子化(ES1)方式,采用选择性离子检测法,检测离子为正离子,关附甲素的选择性离子:[M+H],m/z 430。考察温度、药物浓度、时间和pH值对关附甲素在Caco-2细胞上摄取的影响。结果关附甲素在0.2～50.0μmol.L-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9988),最低定量限0.2μmol.L-1。关附甲素在Caeo-2细胞上的摄取具有一定的浓度、时间和pH值依赖性,其摄取表现为被动扩散。结论该法灵敏、简单,专属性强,关附甲素在Caco-2细胞上具有良好的摄取。     

HPLC法同时测定苦豆子乳膏中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定苦豆子乳膏中槐定碱、苦参碱和槐果碱含量的方法。方法:色谱柱为VP-ODS C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.02mol·L-1醋酸铵缓冲溶液(含0.05%三乙胺)=5∶16∶79,检测波长为220nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为40℃。结果:槐定碱、苦参碱、槐果碱的检测浓度分别在7.16~114.52、2.90~46.36、0.56~8.90μg·mL-1范围内与各自的峰面积积分值呈良好线性关系;平均回收率分别为99.41%、100.63%、98.02%,RSD分别为2.58%、2.94%、2.49%。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于苦豆子乳膏的质量控制。     

HPLC／MS测定人血浆中盐酸班布特罗及其代谢物特布他林的浓度

目的 :用高效液相 /质谱联用法测定人血浆中盐酸班布特罗及其代谢物特布他林的浓度。方法 :液相 :采用SupelcodiscoveryC18色谱柱 (5 μm ,2 5 0mm× 4 6mm) ;柱温 40℃ ;流动相为甲醇 -醋酸铵溶液 (0 0 0 7mol·L-1) (2 0∶80 ) (并用冰醋酸调 pH =4 8) ,流速 0 6mL·min-1,进样量 6 0 μL ;质谱 :大气压化学电离源 (APCI) ,选择性监测 (SIR)质荷比 (m/z)分别为 2 2 6 (特布他林 ) ,2 6 0 (内标 ) ,36 8(班布特罗 )带正电荷的分子离子峰定量。样品用固相萃取小柱提取处理。结果 :班布特罗线性范围 0 12 5～ 16 μg·L-1,最低检测浓度为 0 0 5 μg·L-1。特布他林线性范围 0 312 5～ 40 μg·L-1,最低检测浓度为 0 0 5 μg·L-1。班布特罗和特布他林的萃取回收率均在 90 %以上 ,日内、日间的RSD皆小于 15 %。结论 :适用于临床上测定血浆中盐酸班布特罗及其代谢物特布他林的浓度及药动学的研究     

反相高效液相色谱法测定槐定碱原料及注射液的含量*

目的建立槐定碱原料及注射液有关物质和含量测定的RP-HPLC方法.方法色谱柱为Waters XTerraTM RP C18(150 mm×3.9 mm,5 μm),流动相为0.01 mol·L-1磷酸盐缓冲溶液(pH8.5)-甲醇(78∶22),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为220 nm,以2.0%自身稀释溶液计算杂质总量.结果本方法可以分离槐定碱的杂质,最低检出限为0.024 ng,进样量在0.2～2.0 μg有良好的线性关系.结论本法简便、准确、专属性强,可以用于槐定碱原料及制剂中的有关物质和含量测定.     

HPLC-DAD法同时测定中药苦参中七种生物碱成分的含量

摘 要 目的：建立HPLC DAD法同时测定中药苦参中氧化槐醇碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、槐醇、苦参碱及槐果碱七种生物碱的含量。 方法: Agilent Zorbax C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为10 mmol·L^-1醋酸铵水溶液(0.05%氨水,pH=9.0) (A) 20 mmol·L^-1醋酸铵的甲醇 乙腈(1∶2)混合溶液(B),梯度洗脱,流速：1.0 ml·min^-1,检测波长：220 nm,柱温：30℃。结果: 氧化槐醇碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、槐醇、苦参碱及槐果碱的质量浓度分别在0.093~1.860 μg(r=0.999 6) 、0.530~10.600 μg (r=0.999 7)、0.062~1.240 μg (r=0.999 8)、0.281~5.620 μg (r=0.999 9)、0.026~0.520 μg (r=0.999 8) 、0.036~0.720 μg (r=0.999 7) 及0.032~0.640 μg (r=0.999 6)内与峰面积呈良好的线性关系。氧化槐醇碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、槐醇、苦参碱及槐果碱的平均加样回收率分别为97.5%、98.2%、99.0%、99.4%、99.2%、98.2%和98.7%,RSD分别为1.18%、0.92%、1.43%、1.04%、0.81%、0.43%和0.88%(n =6)。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于苦参药材多成分的质量控制研究。     

HPLC测定伤科活血酊中次乌头碱的含量

目的　测定伤科活血酊中次乌头碱的含量。方法　采用HPLC法 ,以ZorbaxExtend -C18色谱柱 (5 μm ,4 .6mm× 2 5 0mm) ,流动相为甲醇 - 0 0 2 5mol·L-1磷酸二氢钾溶液 -乙腈 (6 0∶4 0∶2 2 ) (用三乙胺调pH 9 4 ) ,检测波长 2 32nm。结果　次乌头碱的浓度在 2 4 8～ 12 4 0 0 μg·ml-1范围内线性关系良好 (r =0 .9998) ,平均回收率 96 5 % ,方法精密度RSD =2 84 % (n =5 )。结论　所建方法准确、可靠 ,可用于该药品的质量控制。     

HPCE同时测定黄强软膏中盐酸小檗碱和泼尼松的含量

目的建立简便、快速的同时测定黄强软膏中盐酸小檗碱和泼尼松含量的高效毛细管电泳。方法以未涂层弹性石英毛细管(41 cm×50 μm,有效分离长度33 cm)为分离通道,30 mmol·L-1四硼酸钠(pH 11. 0)-甲醇(7∶3)为运行缓冲溶液,进样时间10 s,运行电压15 kV。紫外检测波长为238 nm。结果盐酸小檗碱在32.0～512 μg·mL-1内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99. 4%,RSD为1. 2%;泼尼松在16.0～256 μg·mL-1内线性关系良好(r=0.999 0),平均回收率为99. 8%,RSD为1. 4%。结论本法简便、快速,准确,为黄强软膏的质量控制提供了新的检测手段。     

反相高效液相色谱法测定骆驼蓬总碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量

目的 :建立RP HPLC法测定骆驼蓬总生物碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱含量的方法。方法 :以甲醇 0 .0 1mol·L-1硫酸铵溶液 二乙铵 (6 0∶40∶0 .4,用磷酸调 pH至 (3.8± 0 .1)为流动相 ,进样量 2 0 μl,分别在 32 0 ,372nm处用RP HPLC法测定去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量。结果 :去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱分别在浓度为 2～ 2 5 μg·ml-1的范围内与峰面积成良好的线性关系。方法的回收率分别为 (10 1.8± 1.8) %和 (10 1.3± 1.4) %。结论 :该法简便 ,准确 ,可靠     

反相高效液相色谱-质谱法测定人血浆中阿坎酸钙浓度

目的反相高效液相色谱-质谱法测定人血浆中阿坎酸钙浓度.方法采用API 3 000 LC-MS/MS液质联用系统.Phenomenex Gemini C18分析柱(50 mm×3.0 mm,3 μm),流动相为10 mmol·L-1乙酸铵-甲醇(95∶5,氨水调pH至7.4),流速为0.2 mL·min-1.样品用乙腈沉淀蛋白,离心,定量取上清液挥干,二氯甲烷洗后进样,按外标法定量.结果标准曲线在2～2 048 μg·L-1范围内有良好线性,最低定量限为2.0 μg·L-1,阿坎酸钙的保留时间为2.4 min,日内RSD＜4.0%,日间RSD＜11.6%,方法回收率为80%～104%,预处理回收率为83.6%～94.4%.结论本法具有快速简便、灵敏准确等特点,适用于阿坎酸钙血药浓度测定及药动学、生物利用度研究.     

LC-MS/MS测定人血浆中阿米舒必利的浓度

目的 建立测定人血浆中阿米舒必利浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法(LC-MS/MS)。方法 以Welch Materials XB-C18(2.1 mm×150 mm,3 μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水(95∶5,含5 mmol·L-1甲酸铵),流速为0.3 mL·min-1,柱温：40 ℃,以乙酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取溶剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对阿米舒必利(m/z370.3→242.1)和内标舒必利(m/z324.2→112.1)进行测定。结果 阿米舒必利高(400 μg·L-1)、中(250 μg·L-1)、低(1.25 μg·L-1)3个浓度的平均方法回收率分别为104.44%、104.74%和95.65%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为0.52 μg·L-1。线性范围为：0.5～500 μg·L-1。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于阿米舒必利临床血浓监测和药动学研究。