鼻内类固醇激素对变应性鼻炎动物模型鼻腔黏膜的影响

目的:通过变应性鼻炎(AR)动物模型观察鼻内类固醇激素对鼻腔黏膜的影响。方法:36只SD大鼠随机分为3组:鼻内类固醇激素组(A组),AR模型组(B组)和正常对照组(C组)。A、B组以卵清蛋白建立大鼠AR模型,C组用生理盐水代替卵清蛋白。然后A组以鼻内类固醇激素喷鼻,B、C组以生理盐水代替。末次激发后观察动物鼻部症状和体征,并取鼻黏膜行苏木精-伊红染色计数鼻黏膜内嗜酸粒细胞(EOS)数,阿辛蓝-过碘酸-希夫染色观察杯状细胞变化,扫描电镜下观察各组鼻黏膜超微结构的改变。结果:鼻内类固醇激素能明显减轻AR鼻部症状,其评分与B组差异有统计学意义(P<0.01);其鼻腔黏膜内EOS数和杯状细胞数明显降低,与B组相比差异有统计学意义(P<0.01),而与C组差异无统计学意义(P>0.05);扫描电镜检查结果显示A组鼻黏膜纤毛结构与C组相似,而B组纤毛倒伏、排列紊乱、缠绕集结、大量分泌物附着等。结论:鼻内类固醇激素能明显缓解AR症状及鼻黏膜炎性反应状态,并对受损纤毛有明显修复作用。     

高脂饮食对过敏性鼻炎小鼠致敏影响和肠道菌群改变的研究

目的 探讨高脂饮食(high-fat diet, HFD)对过敏性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠致敏程度的影响和肠道菌群的改变及调节机制。方法 设置小鼠对照组(CN组),鸡卵白蛋白(ovalbumin, OVA)诱导的过敏性鼻炎小鼠模型组(AR组)和高脂饮食干预的过敏性鼻炎小鼠模型组(HFD-AR组),每组7只。记录每只小鼠打喷嚏和挠鼻的次数,ELISA检测小鼠血清抗OVA的IgE浓度、鼻腔盥洗液的IL-4浓度。对鼻腔黏膜、肺进行组织切片并HE染色。粪便样本总DNA进行抽提,测定纯度及基因组的完整性,用于16S rRNA测序和数据分析。结果 AR组小鼠在OVA刺激后发生挠鼻和打喷嚏的频率高于CN组。与AR组相比,HFD-AR组提高了小鼠挠鼻和打喷嚏的次数。与CN组相比,HFD-AR组和AR组的小鼠血清中抗OVA的特异性IgE水平上升。与CN组比较,HFD-AR组和AR组的小鼠鼻腔盥洗液中IL-4的水平有提高。HFD干预加重了AR组小鼠的鼻黏膜的嗜酸性粒细胞浸润与肺组织的炎细胞浸润。HFD-AR组比AR组的菌群多样性降低,HFD-AR组的菌群数量相较于AR组降低。...     

γ干扰素对变应性鼻炎大鼠鼻腔灌洗液中嗜酸粒细胞凋亡及Eotaxin水平的影响

目的 建立大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型,探讨鼻腔滴入γ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)对AR大鼠鼻腔灌洗液中嗜酸粒细胞(eosinophil,EOS)凋亡及嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)水平的影响.方法 将40只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组(A组)、AR组(B组)、布地奈德组(C组)和IFN-γ组(D组),每组10只.B、C和D组大鼠采用卵清蛋白(OVA)、氢氧化铝建立AR大鼠模型,分别于模型建立后第31 ～ 38天,每只每日每侧鼻腔滴入磷酸盐缓冲液50 μL、布地奈德50 μL(1.28 μg/μL),IFN-γ 50 μL(0.02 μg/μL).A组以生理盐水代替OVA.各组大鼠于第39天取鼻腔灌洗液,检测其EOS百分比,流式细胞术检测EOS凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Eotaxin水平.结果 C、D组大鼠鼻腔灌洗液中EOS百分比明显低于B组(P均＜0.01);C、D组鼻腔灌洗液中EOS凋亡率明显高于B组(P均＜0.01);C、D组鼻腔灌洗液中Eotaxins明显低于B组.D组大鼠鼻腔灌洗液中EOS百分比与其凋亡率呈显著负相关(r=-0.769,P＜0.05);D组大鼠鼻腔灌洗液中EOS百分比与Eotaxin水平呈显著正相关(r=0.750,P＜0.05).结论 IFN-γ可显著增加AR大鼠鼻腔灌洗液中EOS的凋亡,降低Eotaxins水平,明显减少了鼻腔内EOS的浸润,从而减轻了AR的炎症反应,对AR有一定的治疗作用.     

布地奈德对大鼠变应性鼻炎最轻持续炎症反应模型IL-12表达的影响

目的:研究布地奈德对大鼠变应性鼻炎(AR)最轻持续炎症反应(MPI)模型的影响并观察IL-12的表达变化。方法:60只健康SD大鼠随机分为A、B、C、D共4组,每组15只。A组为阳性对照组即AR组,B组为实验组即MPI给药组,C组为阴性对照组即MPI不给药组,D组为空白对照组。首先以含卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝凝胶的生理盐水混合液对A、B、C 3组行基础致敏和强化致敏,再分别用1%和0.01%的OVA溶液或生理盐水长期鼻腔激发,D组始终以生理盐水进行致敏和激发。第36天起每次激发前30min B组给予布地奈德喷鼻,其余各组给予生理盐水代替。观察豚鼠鼻腔激发后症状(喷嚏)变化并检测鼻黏膜中嗜酸粒细胞(EOS)浸润程度、上皮细胞内细胞间黏附分子1(ICAM-1)及IL-12的表达情况。结果:B组在以1%OVA溶液激发时,喷嚏平均次数明显多于D组(P<0.05),而与A、C组相比差异均无统计学意义(P>0.05);改用0.01%OVA溶液鼻腔激发并给药后,AR症状基本消失,与D组相比差异无统计学意义(P>0.05),鼻黏膜内仍有少量EOS浸润,并可见上皮细胞ICAM-1轻度表达,但与D组相比差异无统计学意义(P>0.05),B组IL-12阳性表达明显,与D组相比差异无统计学意义。结论:布地奈德可显著抑制AR模型迟发相炎症反应,提高大鼠AR MPI模型IL-12的表达。     

鼻腔吸入IFN-r治疗变应性鼻炎的实验研究

目的：探讨鼻腔吸入r干扰素（IFN-r）对变应性鼻炎（allergic rhinitis, AR）的防治作用。方法: 采用卵清蛋白（OVA）、氢氧化铝建立大鼠AR模型。IFN-r鼻腔吸入组（C组）与模型建立第23～30天,每日1次鼻腔吸入IFN-r 12μg,第31天取鼻腔灌洗液测定细胞成分,白介素（IL）-4,IL-5浓度,取血测定血浆IgE水平。设正常对照组（A组）,AR模型磷酸盐缓冲液（PBS）处理组（B组）和丙酸倍氯米松吸入组（D组）,每组5只大鼠。结果：C组鼻腔灌洗液中的嗜酸性粒细胞（EOS）为（0.005±0.003）×104/ml,明显低于B组的（0.223±0.068）×104/ml (P<0.01);C组鼻腔灌洗液中的IL-4为(7.8±3.2)pg/mL,IL-5为(12.5±4.6)pg/mL,均明显低于B组（P<0.01）;C组血浆中总IgE为(38.5±9.6)μg/ml,OVA特异性IgE为(19.6±5.2)U/mL,明显低于B组（P<0.01）。结论： 鼻腔吸入IFN-r可以抑制AR鼠IL-4和IL-5的合成,抑制EOS在鼻腔内的炎性浸润及血浆中总IgE和OVA 特异性IgE水平,因而,对AR具有一定的防治作用。     

调节性T细胞与IgE、IL-4、IL-5在变应性鼻炎小鼠和鼻用激素抗炎中的实验研究

目的 探讨CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)与IgE、IL-4、IL-5在变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠及鼻用激素抗炎中的表达及作用。方法 5～6周龄雌性Balb/c小鼠30只,随机分为正常组、AR组和鼻用激素组。正常组无干预;AR组采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)全身致敏并雾化和滴鼻激发;鼻用激素组在成功致敏后,每次激发完30min后雾化吸入丙酸氟替卡松10min。小鼠于末次激发24h后处死,鼻黏膜行苏木素-伊红染色;流式检测气管旁引流淋巴结和脾脏中CD4+CD25+FOXP3+Tregs表达; ELISA检测血清中OVA 特异性IgE及鼻腔灌洗液中IL-4、IL-5含量。结果 与正常组小鼠相比,AR组小鼠鼻黏膜出现大量的嗜酸性粒细胞(EOS),CD4+CD25+FOXP3+Tregs表达在气管旁引流淋巴结中上调,脾脏中无差别;IgE、IL-4、IL-5含量明显升高,而鼻用激素组小鼠CD4+CD25+FOXP3+Tregs在气管旁引流淋巴结和脾脏中表达继续明显上调;EOS数目与IgE、 IL-4、IL-5含量均被明显抑制。结论 CD4+CD25+FOXP3+Tregs不仅在AR中,而且在鼻用激素对AR的干预中都发挥着重要的免疫调节作用,同时IgE、IL-4、IL-5介导变应性炎症反应,在AR的发生发展中发挥重要作用。     

氢氧化铝佐剂对变应性鼻炎小鼠模型的影响

目的：研究氢氧化铝佐剂对变应性鼻炎（AR）小鼠模型的影响,探讨AR小鼠建模的恰当方法。方法：采用卵清蛋白（0VA）鼻内致敏、鼻内激惹（局部干预组）和腹腔内OVA加用氢氧化铝Al（OH）3佐剂注射致敏、OVA鼻内激惹（系统干预组）2种方法建立BALB／c小鼠AR模型,动态观察2种模型小鼠打喷嚏数和挠鼻次数;应用苏木精-伊红染色形态学观察小鼠鼻黏膜上皮内杯状细胞和黏膜下腺体增生情况;Luna染色形态学观察2种模型小鼠鼻黏膜内嗜酸粒细胞的浸润并对其计数。以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测2种模型小鼠鼻腔冲洗液和血清中IL-4、IL-5、OVA特异性IgE（sIgE）和IFN-γ的浓度。结果：局部干预组小鼠打喷嚏数和挠鼻次数显著高于系统干预组。苏木精-伊红染色观察前者小鼠鼻黏膜上皮内杯状细胞和黏膜下腺体增生较后者显著;Luna染色前者鼻黏膜内嗜酸粒细胞计数也显著高于后者。局部干预组鼻腔冲洗液和血清中IL-4、IL-5和sIgE的浓度明显高于系统干预组,而其IFN—γ的浓度明显低于系统干预组。结论：OVA和AI（OH）。佐剂联合经腹腔注射致敏可以同时促进Th1和Th2型细胞免疫反应,OVA局部鼻内致敏、鼻内激惹是建立AR小鼠模型的恰当方法。     

鼻用激素预防治疗变应性鼻炎临床研究

目的观察症状发作前4周使用布地奈德鼻喷剂预防治疗蒿属花粉过敏变应性鼻炎（AR）的效果。方法选择变应原为蒿属花粉的中重度持续性AR患者40例,随机分为2组,预防治疗组按照患者既往发作时间提前4周予以布地奈德喷鼻,对照组不予任何处理,定期随访。症状发作患者均予以布地奈德喷鼻和氯雷他定口服治疗。所有患者用药坚持至发作期后2个月,采用日记卡形式记录每天鼻部、眼部症状分数,并定期采用鼻结膜炎相关生活质量问卷（rhinoconjunctivitis quality of life questionnaire,RQLQ）评价对生活质量影响。结果预防治疗组发作7例,对照组全部发作,预防治疗组发作患者中发作时间向后推迟的现象较对照组明显,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.001）。预防治疗组发作时鼻部、眼部症状及生活质量影响明显轻,较对照组差异有统计学意义（P均〈0.01）。结论症状发作前4周鼻腔局部使用布地奈德预防治疗蒿属花粉过敏AR,能够减少发作例数,推迟发作时间,减轻发作时鼻部及眼部症状,改善生活质量。     

SEB/OVA变应性鼻炎模型中调节性T细胞的作用研究

目的建立变应性鼻炎（AR）小鼠模型,研究金黄色葡萄球菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxin B,SEB）和卵清蛋白（ovalbumin,OVA）在建立AR模型中的作用,并探讨小鼠鼻黏膜中调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）的变化。方法将40只6～8周Balb/c小鼠,随机分为4组：OVA组（A组）、SEB组（B组）、OVA＋SEB组（C组）、生理盐水组（D组）,建立小鼠AR模型。采用析因设计分析各组小鼠临床症状评分及Foxp3阳性细胞数。结果 A、B、C、D组症状评分分别为0.90±0.99、0.70±0.82、6.80±1.03、0.60±0.70,C组造模成功,OVA与SEB交互效应,P〈0.01;与其他三组相比,C组Foxp3阳性细胞数显著下降,OVA、SEB交互效应,P〈0.01。结论只有SEB和OVA协同作用后可致小鼠AR,即SEB可以提高机体对OVA的易感性,发挥免疫佐剂的作用;小鼠鼻黏膜中Treg水平下降,不能有效抑制鼻Th2细胞反应,可能是AR发生的原因之一。     

短期布地奈德混悬液经鼻雾化治疗慢性鼻窦炎伴鼻息肉的疗效和安全性研究

目的:评价布地奈德混悬液短疗程经鼻雾化吸入治疗鼻息肉的疗效和安全性。方法:将30例嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者随机分为雾化吸入组(n=15)和喷鼻对照组(n=15)。雾化吸入组接受吸入用布地奈德混悬液1mg/2ml经鼻雾化吸入,每日2次;喷鼻对照组使用布地奈德鼻喷剂256μg喷鼻,每日2次,疗程为1周。治疗前后评价鼻塞、流涕、嗅觉损失、头/面痛4个症状的视觉模拟评分,内镜Kennedy评分和晨起血清皮质醇测定。结果:经过1周治疗,雾化吸入组的4个鼻部症状评分均明显减少,其中以鼻塞的改善最为明显(用药前:8.4±0.7,用药后:4.0±0.8,P<0.01);内镜下息肉评分亦有明显减少(用药前:4.9±0.7,用药后:4.1±0.4,P<0.01);雾化吸入组鼻部症状评分和息肉评分均低于喷鼻对照组。雾化吸入组的晨起血清皮质醇浓度在治疗后降低[用药前:(17.6±2.4)μg/dl,用药后:(14.8±2.6)μg/dl,P<0.01],均在正常值范围内(5～25μg/dl)。结论:短疗程使用布地奈德混悬液经鼻雾化吸入治疗鼻息肉,可迅速改善鼻部症状、减小息肉体积,且对肾上腺皮质功能无明显影响。可作为嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者内镜术前的治疗手段。     

变应性鼻炎对小鼠鼻黏膜核因子-кB p65和糖皮质激素受体表达的影响

目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠鼻黏膜核因子-кB(nuclear factor kappa B,NF-кB)p65和糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的表达,进一步了解NF-кB p65和GR在AR发病机制中的作用.方法清洁级C57BL6/J小鼠20只,随机分为AR组和对照组,每组10只.AR组用10%卵清蛋白(ovalbumin,OVA)200μl腹腔注射,6%OVA鼻腔局部激发建立AR模型.取鼻面骨,石蜡包埋,连续切片,行HE染色.分别运用免疫组化SABC法和SP法染色,观察鼻黏膜中NF-кB p65和GR的表达情况.结果 AR组中10只动物均建模成功,鼻部AR典型症状明显;对照组无明显变化.①形态学改变:对照组鼻黏膜无明显炎症改变;AR组黏膜则显示不同程度水肿,黏膜下嗜酸粒细胞(eosinophils,Eos)、淋巴细胞和单核细胞浸润.②黏膜NF-кB p65表达:NF-кB p65主要表达于上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆,偶见胞核.AR组中上皮细胞染色平均光密度值(0.40+0.12)强于对照组(0.23±0.05;P<0.05).③GR表达:2组中均有GR表达,主要表达于鼻黏膜上皮、腺上皮及血管内皮细胞的胞核或胞质.AR组中GR的平均光密度值(0.20±0.04)低于对照组(0.36±0.11;P<0.05).结论 NF-кBp65在AR黏膜中表达增强,而GR的表达下降,提示两者的失衡在AR的发病中发挥重要作用.     

人胎盘间充质干细胞治疗小鼠变应性鼻炎的有效性研究

目的 探讨人胎盘间充质干细胞（human placenta derived mesenchymal stem cells,HP-MSCs）对变应性鼻炎（AR小鼠的治疗效果。方法 将32只BALB/c小鼠随机平均分为4组（表示为：致敏/激发/治疗）：对照组（PBS/PBS/PBS）,对照+HP-MSCs组（PBS/PBS/HP-MSCs）,AR+PBS组（OVA/OVA/PBS）,AR+HP-MSCs组（OVA/OVA/HP-MSCs）。建立卵清蛋白（OVA）联合氢氧化铝诱导的小鼠AR模型,在造模的第20天尾静脉注射0.2 ml PBS或HP-MSCs。评估各组小鼠AR鼻部症状变化;血涂片瑞氏染色观察外周血中嗜酸性粒细胞比例;酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定外周血Ig E、Ig G1水平及鼻黏膜白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13水平。结果 AR+HP-MSCs治疗组AR组小鼠AR行为症状学评分显著减轻（6.25±0.89vs. 3.38±0.74,P<0.001）;外周血嗜酸性粒细胞比例明显降低[（1.63±1.03）%vs.(4.13±2.57)%,P<0....     

鼻用糖皮质激素对变应性鼻炎患者口鼻呼出气NO浓度的影响

目的:评估鼻用糖皮质激素对变应性鼻炎(AR)患者口鼻呼出气NO浓度的影响,探讨相关的影响因素。方法:测量27例中重度持续性AR患者口、鼻腔呼出气NO浓度及鼻部症状(鼻塞、鼻痒、打喷嚏、流清涕)视觉模拟评分(VAS),同时使用鼻-结膜炎相关生活质量问卷(RQLQ)评估患者生活质量。经鼻用糖皮质激素(糠酸莫米松鼻喷雾剂,200μg/d,每日1次)治疗2周后重复测量,对比测量指标的变化情况。结果:治疗前,患者口和鼻呼出气NO浓度分别为20(18~44)×10-9和(960±298)×10-9;治疗后,口呼出气NO浓度为24(17~35)×10-9,与治疗前相比无明显改变;鼻呼出气NO浓度降至(817±188)×10-9,较治疗前显著下降(P<0.01)。治疗后患者各项鼻部症状VAS评分以及RQLQ评分均较治疗前显著下降。治疗前后患者口、鼻呼出气NO浓度与各项鼻部症状VAS评分、RQLQ各项评分间均无显著相关性。结论:鼻用糖皮质激素短期治疗中重度持续性AR患者,在显著降低患者鼻腔炎症的同时,能够明显改善各项鼻部症状,提高患者生活质量。     

布地奈德对不伴鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎术后鼻黏膜细胞外基质的影响

目的　观察布地奈德对不伴鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎（CRS without nasal polyps,CRSsNP）鼻内镜术后鼻黏膜细胞外基质（extracellular matrix,ECM）及基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）表达的影响。方法　30例行鼻内镜手术的CRSsNP患者术后随机分为两组,布地奈德组20例（术后布地奈德喷鼻3个月）,对照组10例（术后未使用糖皮质激素）,术后3个月随访时留取筛区黏膜标本,并对患者行视觉模拟量表主观症状评分及Lund-Kennedy法鼻内镜评分,所有标本行Masson三色（MT）胶原染色及苦味酸-天狼星红染色,观察鼻黏膜基底膜区及黏膜内固有层ECM胶原沉积及成分等情况,免疫组化检测MMP-9的表达。结果　①与对照组相比,布地奈德组的VAS评分及鼻内镜评分均明显降低（t =-2.489,P =0.019;t =-3.318,P =0.003）。②布地奈德组鼻黏膜在基底膜区及黏膜内固有层ECM胶原沉积较对照组均明显减少（t =15.242,P =0.000;t =7.179,P =0.000）。③两组ECM沉积的胶原均以Ⅰ型胶原纤维为主,Ⅲ型、Ⅳ型胶原较少。④布地奈德组鼻黏膜内MMP-9的表达较对照组明显减少（t =9.173,P =0.000）。结论　布地奈德能减少CRSsNP鼻内镜术后鼻黏膜ECM胶原的沉积,改善鼻内镜术后疗效,降低MMP-9的表达可能是其中机制之一。     

鼻腔冲洗治疗变应性鼻炎的疗效观察

目的：比较鼻腔冲洗及鼻用激素治疗对变应性鼻炎（AR）患者鼻部症状及气道炎症相关指标的影响,探讨鼻腔冲洗在AR治疗中的意义。方法：将61例经变应原皮肤点刺试验诊断为AR的患者随机分为3组：A组17例（单纯鼻用激素治疗）,B组21例（单纯鼻腔冲洗）,C组23例（鼻腔冲洗联合鼻用激素）。观察各组治疗前、治疗3个月后鼻部症状视觉模拟量表（VAS）评分和鼻炎结膜炎生活质量（RQLQ）评分及下气道呼出气一氧化氮（FENO）值。结果：3组患者治疗前VAS、RQLQ评分及FENO值比较差异无统计学意义（P〉0.05）,具有可比性。治疗3个月后3组患者VAS、RQLQ评分及FENO值均明显降低（P〈0.05）。治疗3个月后3项指标减少差值比较,VAS、RQLQ评分3组间差异无统计学意义,FENO值A、C组与B组比较均差异有统计学意义（均P〈0.05）。结论：鼻腔冲洗能改善AR患者的鼻部症状,提高患者的生活质量,降低下气道炎症。鼻腔冲洗治疗AR有效,与鼻用激素联合使用能取得更明显的效果。     

Toll样受体9配体CpG寡脱氧核苷酸鼻内预免疫对豚鼠鼻变态反应抑制作用的研究

目的 探讨Toll样受体9(toll like receptor 9,TLR9)配体CpG寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotides)鼻内预免疫对豚鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的抑制作用.方法 50只实验豚鼠采用随机数宁表法分为5组,每组10只,分别为:空白对照组(简称对照组)、AR模型组(AR组)、CpG组、CpG+卵清蛋白组(ovalbumin,OVA,CpG+OVA组)、CpG模拟序列+OVA组(CpG-M+OVA组).AR组及对照组给予生理盐水预免疫;CpG组给予5.2 μg CpG826;CpG+OVA组给予5.2μg CpG+4.8μg OVA;CpG-M+OVA组给予不具免疫活性的CpG1982加OVA滴鼻.4个实验组动物依次进行腹腔OVA和氢氧化铝凝胶基础致敏,2次鼻腔激发,对照组则给予生理盐水.观察鼻黏膜组织损伤情况及嗜酸粒细胞计数.酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清及鼻黏膜组织匀浆中白细胞介素(IL)5及γ干扰素(interferon γ,IFN-γ)的水平.免疫荧光(immunofluorescence,IF)观察细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM)1在鼻黏膜上皮组织的表达.采用SPSS 11.0软件对数据进行分析.结果 CpG组动物的喷嚏,抓鼻症状要轻于AR组(Z值分别为3.412、3.523,P值均<0.05),CpG+OVA组症状轻于CpG-M+OVA组(Z值分别为3.984、4.452,P值均<0.05).CpG组豚鼠鼻黏膜组织嗜酸粒细胞平均((x)±s,下同)计数为(20.0±9.6)个,低于模型组的(53.5±19.8)个,CpG+OVA组豚鼠鼻黏膜组织嗜酸粒细胞计数为(9.5±5.7)个,低于CpG-M+OVA组的(49.2±18.9)个,差异有统计学意义(q值分别为3.785、4.576,P值均<0.05).ELISA结果显爪CpG组血清及鼻黏膜组织匀浆中IL-5水平低于AR组(q值分别为3.890、4.019,P值均<0.05),而CpG+OVA组低于CpG-M+OVA组(q值分别为4.128、4.245,P值均<0.05),而各组IFN-γ的水平差异尢统计学意义(F值分别为2.078、2.102,P值均>0.05).免疫荧光结果赤示CpG组鼻黏膜组织ICAM-1的表达水平要低于AR组,CpG+OVA组低于CpG-M+OVA组(Z值分别为3.697、3.765,P值均<0.05).结论 CpG寡脱氧核苷酸鼻内预免疫是一种行之有效的抑制鼻变态反应发生的方法.     

大鼠变应性鼻炎鼻黏膜AMCase mRNA的表达

目的:研究变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜AMCase mRNA表达,探讨其与AR的关系。方法:30只SD大鼠,随机分为实验组和对照组。实验组20只,卵清白蛋白(OVA)隔日腹腔注射基础致敏2周,继之每日鼻腔局部激发1周,建立大鼠AR模型;对照组10只,生理盐水代替OVA进行实验。末次激发后根据鼻部症状累积评分评判AR造模是否成功,并取所有大鼠双侧鼻腔及中隔黏膜,常规苏木精-伊红染色病理明确AR诊断。提取鼻黏膜RNA,应用反转录合成cDNA,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测AMCase mRNA在大鼠AR鼻黏膜中的表达。结果:RT-PCR检测AMCase mRNA表达,显示实验组与对照组差异有统计学意义(P<0.05);2AR组AMCase mRNA表达同鼻部症状评分正相关(r=0.411,P<0.05)。结论:大鼠AR鼻黏膜AMCase mRNA表达量增多,提示AMCase表达上调在变应性鼻炎的发病机制中起作用,抑制该酶活性可以成为AR治疗新的靶点。     

黄花蒿花粉致敏的变应性鼻炎小鼠模型的建立

目的通过建立稳定的实验性变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)BALB/C 小鼠模型,成功建立黄花蒿花粉变应原致敏的AR小鼠模型。方法选取BALB/C雌性小鼠约20 g,共20只,随机分为AR组和溶媒组,每组各10只。第1、2周,每只AR组小鼠足底皮下注射 20 μl黄花蒿花粉抗原溶液,对小鼠进行初次致敏,溶媒组小鼠用等量抗原溶媒溶液处理,每周1次,连续2周;第3周,致敏方法同前2周,但剂量减半,同时AR组小鼠双侧鼻腔各滴入 10 μl黄花蒿花粉抗原溶液,溶媒组小鼠双侧鼻腔滴入等量抗原溶媒溶液,隔天1次;第4周,AR组小鼠双侧鼻腔各滴入 10 μl黄花蒿花粉抗原溶液,溶媒组小鼠双侧鼻腔滴入等量抗原溶媒溶液,每天1次。建立模型：模型建立时间不少于35 d。观察小鼠的临床症状,采用叠加量化积分法计分,行为学积分>5分者表示造模成功,随后通过小鼠鼻黏膜HE染色观察病理学改变。结果AR组小鼠经过鼻腔局部激发致敏后均出现AR的临床症状如鼻痒、流涕、打喷嚏等,而溶媒组小鼠均无上述症状。结论本实验建立的AR小鼠模型是成功的,操作简单、重复性好,为AR的免疫学研究提供了有效的方法及组织形态学依据,值得推广。     

姜黄素对卵清蛋白致小鼠变应性鼻炎的治疗作用

目的研究姜黄素对卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致变应性鼻炎（AR）小鼠的防治作用,探讨作用机制。方法 40只BAL-B/C小鼠随机分为正常对照组,AR模型组,地塞米松组和姜黄素组,共4组,每组10只。除正常对照组外,其余3组均使用OVA致敏并激发制备AR模型,模型建立后地塞米松组腹腔注射地塞米松（5 mg/kg）,姜黄素组腹腔注射姜黄素（0.6 mg/kg）,均为1次/d,持续7 d。AR模型组给予等量磷酸盐缓冲液（PBS）替代。评估小鼠鼻部症状,HE染色和免疫组化观察鼻黏膜炎症情况,ELISA检测血清白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）、干扰素γ（interferon-gamma,IFN-γ）和OVA特异性IgE（specific IgE,sIgE）水平。结果与正常对照组相比,AR模型组小鼠鼻部症状明显,鼻黏膜可见大量嗜酸性粒细胞（eosinophils,Eos）浸润,组织间质水肿严重,IL-4表达增多。地塞米松组和姜黄素组小鼠鼻部症状均减轻,鼻黏膜组织中Eos局部浸润及鼻黏膜下组织间质水肿减少,鼻黏膜IL-4表达下调,血清IL-4浓度降低。此外,血清slgE浓度在姜黄素组小鼠中降低而地塞米松组小鼠未见下降,且地塞米松组小鼠血清IFN-γ降低。结论姜黄素可减少鼻黏膜Eos浸润,抑制IgE释放,其机制可能是通过抑制Th2细胞因子反应,从而达到治疗AR的作用。     

变应性鼻炎对小鼠鼻黏膜核因子-κB p65和糖皮质激素受体表达的影响

目的探讨变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）小鼠鼻黏膜核因子-κB（nuclear factor kappat B,NF-κB）p65和糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的表达,进一步了解NF—κB p65和GR在AR发病机制中的作用。方法清洁级C57BL6／J小鼠20只,随机分为AR组和对照组,每组10只。AR组用10％卵清蛋白（ovalbumin,OVA）200μl腹腔注射,6％OVA鼻腔局部激发建立AR模型。取鼻面骨,石蜡包埋,连续切片,行HE染色。分别运用免疫组化SABC法和SP法染色,观察鼻黏膜中NF-κB p65和GR的表达情况。结果AR组中10只动物均建模成功,鼻部AR典型症状明显;对照组无明显变化。①形态学改变：对照组鼻黏膜无明显炎症改变;AR组黏膜则显示不同程度水肿,黏膜下嗜酸粒细胞（eosinophils,Eos）、淋巴细胞和单核细胞浸润。②黏膜NF—κB p65表达：NF-κB p65主要表达于上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆,偶见胞核。AR组中上皮细胞染色平均光密度值（0．40±0．12）强于对照组（0．23±0．05;P〈0．05）。③GR表达：2组中均有GR表达,主要表达于鼻黏膜上皮、腺上皮及血管内皮细胞的胞核或胞质。AR组中GR的平均光密度值（0．20±0．04）低于对照组（0．36±0．11;P〈0．05）。结论 NF-±κB p65在AR黏膜中表达增强,而GR的表达下降,提示两者的失衡在AR的发病中发挥重要作用。