丙型肝炎临床检验技术发展现状与展望

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的一种重要的世界性传染病[1] ,这种病毒主要经由血液传播,也可能存在其他传播途径如母婴传播、性传播和家庭内接触传播.约有近半数的HCV感染传播途径不明确.丙型肝炎的流行呈全球性,是欧美及日本等国家终末期肝病的最主要原因.     

化学发光法检测丙型肝炎核心抗原滴度与丙型肝炎RNA含量的相关性研究

目的 探究丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)滴度与丙型肝炎RNA(HCVRNA)含量经化学发光法检测的情况.方法 方便选取2013年2月—2017年2月该院进行HCV-cAg检测的HCVRNA阳性标本80例进行回顾性分析,并对丙型肝炎RNA含量、HCV-cAg滴度之间的相关性进行分析.结果 该组80例HCV RNA阳性标本中,有76例HCV-cAg阳性标本,其检出率在95.0%(76/80),两者之间的相关性系数为0.812,男性阳性检出率98.0%,与女性阳性检出率90.3%接近(P>0.05);化学发光法筛查阳性S/CO值与丙型肝炎RNA阳性率呈正相关.结论 丙型肝炎核心抗原的阳性检出率同丙型肝炎RNA检测表现为正相关,HCV-cAg通过化学发光法检测特异性与敏感性均较高,可使丙型肝炎患者的疾病尽早发现及治疗,值得作为有效的检测方式加大推广.     

丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体联合检测的临床意义

目的探讨丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体检测联合应用的意义。方法抗-HCV和HCV-cAg用ELISA法检测,HCV-RNA用RT-PCR法检测。结果1761例病人共测得阳性标本57例,其中抗-HCV阳性54例,HCV-cAg阳性22例,同时阳性为19例。3例HCV-RNA而抗-HCV阴性样本中检出HCV-cAg。22例HCV-cAg阳性标本经HCV-RNA检测均为阳性。结论HCV-RNA、抗-HCV和HCV-cAg联合检测可起到互补作用,提高检出阳性率,有利于早期诊断。     

丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体联合检测的临床意义

目的探讨丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体检测联合应用的意义。方法抗-HCV和HCV-cAg用ELISA法检测,HCV-RNA用RT-PCR法检测。结果1761例病人共测得阳性标本57例,其中抗-HCV阳性54例,HCV-cAg阳性22例,同时阳性为19例。3例HCV-RNA而抗-HCV阴性样本中检出HCV-cAg。22例HCV-cAg阳性标本经HCV-RNA检测均为阳性。结论HCV-RNA、抗-HCV和HCV-cAg联合检测可起到互补作用,提高检出阳性率,有利于早期诊断。     

153例丙型肝炎患者病毒核心抗原检测及其临床意义

目的探讨丙型肝炎患者血清病毒核心抗原与丙氨酸转氨酶检测值的关系及临床意义。方法收集丙型肝炎病毒抗一HCV阳性血清，进行丙型肝炎病毒核心抗原、丙型肝炎病毒核酸RNA和肝功能检测（ALT、GGT检测）。结果153例丙型肝炎中HCV—cAg阳性65例（42．50％），65例HCV—cAg阳性的患者血清中ALT、GGT均不同程度增高，53例肝功能异常占81．54％、HCV—RNA阳性49例占75．38％。结论HCV—cAg检测可以作为丙型肝炎患者病情判断的指标。     

丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测在丙型肝炎诊断中的应用

目的对丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测在丙型肝炎诊断中的应用进行分析。方法选取我院2017年1月至2018年1月入治的共100例患者的血清样本,根据丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)将其分为2组,阴性患者共96例、阳性患者共4例,所有患者均依次进行丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)及丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)检测,对最终的检测结果进行分析。结果所有患者其HCV-cAg与HCV-Ab呈现同为阳性与HCV-RNA检测所得阳性对比可见,通过HCV-cAg与HCV-Ab检测阳性共4例、HCV-RNA检测所得阳性共2例,符合率为50%,其中核心抗原和抗体均阳性及抗体阳性而核心抗原阴性分别2例,HCV-cAg与HCV-Ab联合,阳性预测结果符合率为100%。结论在对丙型肝炎患者进行诊断时,通过丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测,其检测效果较好,有较高的特异性及灵敏度水平,对外界环境要求相对较低,能够大规模广泛应用,推广价值较高。     

血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测在100例丙型肝炎患者诊断中的应用价值

[目的]探讨血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测在丙型肝炎患者诊断中的临床意义.[方法]选择2017年1月至2019年2月间接受检测的100例丙型肝炎患者作为研究对象,所有患者均接受单独血清丙型肝炎病毒核酸含量检测、肝功能检测及血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测,比较不同检测方法的阳性率并分析血清丙型肝炎病毒核酸含量与肝功能指标的相关性.[结果]血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测的阳性检出率显著高于单独血清丙型肝炎病毒核酸含量检测和肝功能检测(χ~2=19.151,P<0.01);胆碱酯酶正常组的前白蛋白及白蛋白水平均显著高于胆碱酯酶轻度异常组和胆碱酯酶异常组,相关性分析结果显示,血清胆碱酯酶与前白蛋白、白蛋白呈正相关(r=0.725,0.806,P<0.05).[结论]血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测在丙型肝炎的诊断中有较高的阳性检出率.     

慢性丙型肝炎的治疗药物研究进展

近年,丙型肝炎病毒（HCV）慢性感染的发病率呈上升趋势,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌（HCC）,对患者的健康和生命危害极大。目前国内外治疗慢性丙型肝炎的新药物,在干扰素、利巴韦林替代物、HCV抑制剂、治疗性疫苗等方面取得不小的进步,其药物作用机制主要是抑制病毒复制减少传染性;改善肝功能;减轻肝组织病变;提高生活质量;减少或延缓肝硬化和HCC的发生。本文对慢性丙型肝炎的治疗药物研究进展作一综述。     

丙型肝炎患者的临床检验分析

目的：根据临床经验,分析丙型肝炎患者的临床检验方法。方法选择2012年～2013年在我院进行治疗的丙型肝炎患者120例,应用试验研究的方法,常规采取静脉血,离心取血清,作为备用。应用酶联免疫法以及胶体金法,对研究对象实行双向检查,探究试验方法的有效性。结果本次研究结果表明,应用酶联免疫法,阳性为4例,阳性率为3.3%;应用胶体金法,阳性为5例,阳性率为4.2%,阳性率差异不具有统计学意义,显示对于丙型肝炎的临床检验,两种方法均可在临床应用,具有有效性。结论应用胶体金法,操作较为简便,时间较短,观察较为直观,不需要采用特殊的设备,可靠性高,可以进行单份测定,在急诊和临床应用方面,优势较为明显。     

丙型肝炎病毒核心抗原的检测及其临床意义

目的 探讨HCV 核心抗原在HCV 感染诊断和治疗中的作用.方法 丙肝核心总抗原检测采用酶联免疫法;丙型肝炎抗体检测采用第三代酶联免疫法.所有血清标本均进行HCV-RNA 和肝功能检测.丙肝核酸定量采用PCR- 荧光探针法;肝功能检测采用紫外连读检测法.结果 90 例中,HCV-cAg 检测阳性率为42.22%(38/90).HCV-cAg 阳性组HCV-RNA 阳性率100%(38/38),显著高于HCV-cAg 阴性组的71.15%(37/52).阳性组丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)异常率63.16%(24/38),显著高于HCV-cAg 阴性组的40.38%(21/52),两组间比较(P<0.05).HCV-cAg 阴性组中59.62% (31/52)的患者ALT 在正常范围内(ALT<40U/L),显著高于HCV-cAg 阳性组的36.84%(14/38) ;而HCV-cAg 阳性组中36.84%(14/38)ALT 值均>100U/L,明显高于HCV-cAg 阴性组的9.62%(5/52).两组间比较(P<0.05).丙肝核心抗原HCV-cAg 和HCVRNA有很好的正相关性,HCV-cAg 与ALT 水平也有一定相关性,可以反映肝功损害程度.结论 丙肝核心抗原HCV-cAg是慢性丙肝感染良好的监测指标.     

丙型肝炎病毒核心抗原在肝细胞癌及癌旁组织中的表达

应用ＳＰ法（链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶连结法）对肝细胞癌（４６例）癌组织及癌旁组织（３８例）中丙型肝炎病毒核心抗原进行免疫组织化学染色，发现两者的检出率分别为２１．７％和３６．８％。阳性染色细胞呈弥漫、灶状和散在分布。抗原定位于肝细胞和肝癌细胞的胞浆内，少数有围核分布的特点。阳性染色多呈细颗粒状，少数呈均质状。癌旁组织抗原表达区域中有淋巴细胞浸润聚集。结果提示丙型肝炎病毒感染在肝细胞癌的发生中可能有一定的关联。     

丙肝病毒核心抗原检测在丙肝病毒感染诊断中的作用研究

目的探讨丙肝核心抗原检测在丙肝感染诊断中的作用。方法收集175例丙肝抗体检测标本同时检测HCVAb、HCV游离抗原、HCV总抗原、HCVRNA。结果 75例HCVAb阳性反应标本,检出HCV游离抗原阳性17例,HCV总抗原阳性54例,HCVRNA阳性50例;100例HCVAb阴性反应标本,检出HCV游离抗原阳性1例,HCV总抗原阳性2例,HCVRNA阳性1例。结论 HCV核心抗原是HCV早期感染的标志之一,检测HCV核心抗原有利于HCV感染的早期诊断。     

检测丙型肝炎核心抗体的合成肽酶联免疫试验

为建立一种以酶联免疫试验检测丙型肝炎病毒的核心抗体,按病毒氨基酸序列C区合成一个36-寡肽,将其作为试剂抗原包被固相,以捅获待检血清的相应抗体,以酶标抗入IgG将其检出。输血后非甲非乙肝炎32例检出抗体20例(62.5％),其中发病1个月内的13例中检出8例。特异性由抑制试验确定。17例阳性血清可用聚合酶链反应检出病毒。结果表明,完善这一系统可能发展为试剂盒。     

丙型肝炎的临床特点

丙型肝炎（ＨＣ）８６例，经临床观察发现其临床特点是：①潜伏期长短不一，长者１２０ｄ短者２６ｄ，平均４０．５±１４．５ｄ。②起病缓慢而隐匿。③病状轻，体征不明显，病程长。④肝功能损害程度与症状、体征不一致，往往不能及时诊治。⑤肝功能恢复慢，ＡＬＴ、ＡＳＴ有持续升高或反复异常。⑥治疗：用治疗肝炎的常用药物仅对改善症状有一定作用，对缩短病程及肝功能恢复无效。     

Clinical application and analysis of hepatitis C virus NS3 antigen detection by ELISA in human serum

Background Hepatitis C virus （HCV） core antigen assays have been produced to exclude infectious donations collected during the preseroconversion window phase （PWP）. For the same purpose, we evaluated the specificity and sensitivity of a novel hepatitis C virus NS3 antigen detection immunoassay and the application of this assay in clinical diagnosis. Methods Samples from 77 healthy subjects, 173 anti-HCV positive patients and 3708 hepatitis patients other than HCV positive were tested with the HCV NS3 antigen assay. Some HCV NS3 antigen positive samples were further validated with HCV-RNA, neutralization and immunodot assays. Twenty-five sequential samples from 11 HCV NS3 antigen positive patients were subjected to kinetic study. Results Only 48 （1.3%） of 3708 anti-HCV negative samples were positive for HCV NS3 antigen. Among them, 44 of 3030 samples from patients only infected with HBV were HCV NS3 antigen positive, 4 of the 445 samples from patients infected with other type hepatitis were HCV NS3 antigen positive. In addition, 42 （24.3%） of 173 anti-HCV positive samples were HCV NS3 antigen positive and all 77 samples from healthy subjects were negative to HCV NS3 antigen assay. Of the 15 HCV NS3 antigen positive samples, 9 （60%） were HCV-RNA positive. The neutralization and positive percentage of immunodot assay for 23 HCV NS3 antigen positive sera were 87.0% （20/23） and 69.6% （16/23） respectively. Of the 25 sequential samples from 11 HCV NS3 antigen positive patients, there was a negative correlation between the OD values and the duration of test （r=-0.989, P〈0.05）, and there were correlations among their HCV NS3 antigen, HCV-RNA and anti-HCV Utres. The anti-HCV antibodies of two sera were detected while their OD values of HCV NS3 antigen decreased gradually. Conclusions The HCV NS3 antigen detection assay showed perfect specificity and high sensitivity. Thus, it would be useful and economical as a routine test in laboratories for early diagnosis of HCV infection and prevention.     

乙型肝炎病毒X基因-丙型肝炎病毒C基因融合表达蛋白对肝癌细胞端粒酶活性的影响

目的建立HBV X-HCV C融合蛋白细胞表达模型,并探讨其对细胞端粒酶活性的影响.方法双酶切质粒pXT1-X,得到完整的HBV X基因片段后,将其插入到质粒PBK-CMV和PBK-HCV C的相应酶切位点,得到重组质粒PBK-X和PBK-X-C;再将质粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C分别导入肝癌细胞株HepG2中,G418筛选,RT-PCR、蛋白印迹鉴定HBV X和HCV C蛋白表达.PCR-ELISA法检测端粒酶活性.结果质粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C在HepG2细胞中有稳定表达.表达融合蛋白的细胞的端粒酶活性较转染空载体的细胞及单独表达HBV X、HCV C蛋白的细胞明显升高.结论HBV X-HCV C融合蛋白能显著上调端粒酶活性,提示HBV、HCV可能具有协同致癌作用.     

丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV和Fas抗原检测

目的：探讨丙型肝炎（丙型）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）内丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＶＡｇ）及Ｆａｓ抗原（ＦａｓＡｇ）表达状况及意义。方法：采用ＨＣＶ核心区及ＮＳ３区单克隆抗体,对２８例慢性丙肝患者ＰＢＭＣｓ进行免疫组化检测,并同步检测ＦａｓＡｇ。结果：ＨＣＶＡｇ及ＦａｓＡｇ阳性率分别为８５．７％（２４／２８）和８２．２（２３／２８）,经相关分析显示。两者表达呈显著正相关（ｒ＝０．５４６,Ｐ〈０．     

乙型肝炎病毒X基因-丙型肝炎病毒C基因融合表达蛋白对肝癌细胞胰岛素样生长因子1受体表达的影响

目的 建立HBV X-HCV C融合蛋白细胞表达模型,并探讨其对细胞胰岛素样生长因子-1的影响.方法 双酶切质粒pXT1 -X,得到完整的HBV X基因片段后,将其插入到质粒PBK-CMV和PBK-HCV C的相应酶切位点,得到重组质粒PBK-X和PBK-X-C;再将质粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C分别导入肝癌细胞株HepG2中,G418筛选,RT-PCR、蛋白印迹鉴定HBV X和HCV C蛋白表达.流式细胞仪、蛋白印迹检测IGF-1受体蛋白表达.结果 质粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C在HepG2细胞中有稳定表达.表达融合蛋白的细胞的胰岛素样生长因子-1受体活性较转染空载体的细胞及单独表达HBV X、HCV C蛋白的细胞明显升高.结论 HBV X-HCV C融合蛋白能显著上调胰岛素样生长因子-1受体活性,提示HBV、HCV可能具有协同致癌作用.     

Distribution and significance of hepatitis C virus C33c antigen, core antigen and HBxAg in human primary intrahepato-cholangiocarcinoma tissues

ThereisacloserelationshipbetweenhepatitisCvirus(HCV)infectionandhepatocellularcarcinoma.InastudyoftherelationshipbetweenHCVandlivercirrhosisandhepatocellularcarcinomall'Zj,HCVC33cantigenwasdetectedinproliferatingepithelialcellsofthesmallbileduct.TheresultssuggestthatHCVmayinvadesmallbileductepithelialcells.Therefore,thedistributionsofHCVC33cantigenandcoreantigenwerestudiedin35casesofhumanprimaryintrahepato--cholangiocarcinoma(PIC)andtheirperlcanceroustissuesusingimmunohistochemistry.I…