急性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流的影响

目的：研究急性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道（Kv）电流的影响。方法：雄性SD大鼠20只随机分为常氧对照组和急性缺氧组（各10只）。急性缺氧组大鼠在低氧仓中缺氧停留8h后进行实验。应用全细胞膜片钳技术记录肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流（Ik）。结果：急性缺氧显著降低大鼠肺动脉平滑肌细胞的Ik密度。在大鼠肺动脉平滑肌细胞静息膜电位-60mV至-10mV时,急性缺氧降低大鼠肺动脉平滑肌细胞的IK密度不明显（P〉0．05）。在0mV时,大鼠肺动脉平滑肌细胞的峰值Ik密度显著下降[从（38．1±5．2）pA／pF→（9．82±2．1）pA／pF,P〈0．05）],此后随着细胞静息膜电位的增加,平滑肌细胞的Ik密度下降幅度逐渐增加（P〈0．05）;从＋30mV至＋60mV时,平滑肌细胞的Ik密度下降幅度更大（P〈0．01）。在＋60mV时,IK密度峰值从（135．4±16．5）pA／pF降到（73．1±10．6）pA／pF,降幅达（46．8±3．3）％。结论：急性缺氧可降低肺动脉平滑肌细胞Kv电流,导致肺血管缺氧性收缩。     

蛋白激酶C对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道的作用

蛋白激酶C(PKC)在缺氧性肺动脉高压的发病机制中起着重要的作用。但PKC对正常和慢性缺氧肺动脉平滑肌细胞(PASMC)上电压门控钾离子通道(Kv通道)的影响尚少报道。我们的研究旨在探讨PKC对慢性缺氧PASMC膜上Kv通道的作用，以进一步阐明缺氧性肺动脉高压的发病机制。     

Survivin在慢性缺氧大鼠肺组织中的表达及意义

目的 探讨Survivin在慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及意义.方法 将18只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(N组)、缺氧4周组(H组)、缺氧4周+YM155组(小分子Survivin 拮抗剂,HY组),每组6只,观察YM155对大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心室质量(RV)和左心室+室间隔质量(LV+S)的影响;采用免疫组织化学的方法,观察Survivin在三组大鼠肺组织中的表达及分布特点;采用实时定量PCR方法分析三组大鼠肺组织中Survivin mRNA的表达水平.结果 ①经YM155处理后,缺氧组大鼠mPAP从(29.4±1.7) mm Hg降至(19.6±1.3) mm Hg(P＜0.01),RV质量从(0.29±0.02)g降至(0.19±0.02)g(P＜0.01).②N组大鼠,无论是近端肺动脉,还是远端肺动脉,Survivin均不表达.而在H组,Survivin在肺内小动脉(直径60～200 μm)呈高表达(P＜0.01),且主要位于中膜,而在近端肺动脉,即中型肺动脉(200～500 μm)和大型肺动脉(500～1 000 μm),Survivin无明显表达.H组小型肺动脉Survivin的阳性表达强度(平均吸光度值,A值)较N组A值显著增加(N组:0.001 3±0.000 5 vs H组:0.268 3±0.023 9,P＜0.01).YM155处理后,HY组大鼠肺内小肺动脉Survivin的表达强度(A值)明显减弱(H组:0.268 3±0.023 9 vs HY组:0.001 8±0.000 4).③H组大鼠肺组织Survivin mRNA表达水平明显高于N组大鼠(P＜0.01),YM155处理后,HY组大鼠肺组织Survivin mRNA表达水平明显下降(P＜0.01).结论 Survivin在慢性缺氧肺组织中高表达,且主要位于肺内小动脉的中膜,小分子Survivin拮抗剂YM155可以降低mPAP、减轻右心室肥厚,逆转肺动脉高压,从而揭示Survivin可能是肺动脉高压的治疗新靶位.     

肺动脉平滑肌细胞缺氧感受与反应

肺动脉平滑肌缺氧感受与反应是近年研究缺氧性肺血管收缩反应机制的一个热点,缺氧可减少肺动脉平滑肌细胞胞内活性氧产生,一方面可使细胞膜上钾通道关闭,膜电位降低,导致电压依赖性钙离子通道的开放,使胞浆内钙离子浓度升高、细胞收缩;另一面可激活缺氧诱导因子-1(HIF-1),使其进入核内启动低氧反应基因,引发平滑肌细胞一系列反应,如血管活性物质的生成及细胞收缩反应等。本文就近几年国外有关研究进展作一综述。     

BQ123对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞KV1.5表达的影响

内皮素1(ET-1)可浓度依赖性的抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)电压门控钾电流(IKv)，但ET-1对PASMCs电压门控钾通道(Kv)基因表达的调节目前尚少见报道，本组研究拟从mRNA和蛋白水平，阐明内皮素受体拮抗剂BQ123对PASMCs Kv1．5表达的影响。     

钾通道与肺动脉平滑肌细胞凋亡

钾通道与肺动脉平滑肌细胞的生长、增殖和凋亡密切相关.在肺动脉高压的发生、发展中起着重要作用.肺动脉平滑肌细胞膜钾通道活性降低或表达下降不仅导致细胞浆游离Ca2+浓度升高,肺动脉平滑肌细胞收缩、增殖和肺血管重构,而且也与肺动脉平滑肌细胞凋亡减少有关.凋亡性容积减少是细胞凋亡的必要前提和早期标志.钾通道参与凋亡性容积减少调节、细胞色素C释放、Caspase激活和DNA降解等凋亡事件以及抗凋亡蛋白Bcl-2、survivin的调节.因此.钾通道有望成为诱导肺动脉平滑肌细胞凋亡药物的靶点,为未来攻克肺动脉高压带来新希望.     

绞股蓝皂甙对慢性缺氧大鼠肺动脉高压影响的研究

绞股蓝皂甙 (Ｇｐｓ)对急性缺氧犬肺血管收缩有抑制作用[1] 。但Ｇｐｓ对慢性缺氧肺循环的影响目前尚少报道。我们旨在研究Ｇｐｓ对慢性缺氧大鼠肺动脉高压的影响 ,并探讨其作用机制。材料与方法　成年雄性ＳＤ大鼠 3 0只 (东南大学医学院实验动物中心 )分笼饲养 ,自由饮水和摄食。体重 2 0 025 0ｇ。随机分成 3组 ,每组 10只。 (1)缺氧组 :将大鼠置于自制常压低氧舱内 ,向舱内充入氮气 ,调控舱内氧浓度维持在(10± 0 .5 ) % ,进行间断低氧 ,每天 8ｈ ,每周 6天 ,共 2 1天 ;(2 )治疗组 :每天缺氧前 1ｈ灌食Ｇｐｓ 2 0ｍｇ/ｋｇ(陕西安康中药…     

加强对低氧性肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞钾通道活性的研究

加强对低氧性肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞钾通道活性的研究陈文彬低氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）的发病机制主要为低氧引起的肺血管收缩和肺小动脉结构的重建。在上述机制中各种影响血管舒缩的体液因子和肺动脉平滑肌细胞（ＳＭＣｓ）膜离子通道活性的改变，在ＨＰＨ形成中发...     

肺动脉平滑肌细胞缺氧感受与反应

肺动脉平滑肌缺氧感觉与反应是近年研究缺氧性肺血管收缩反应机制的一个热点，缺氧可减少肺动脉平滑肌细胞胞内活性氧产生，一方面可使细胞膜上刈通道关闭，膜电位降低，导致电压依赖性钙离子通道的开放，使胞浆内钙离子浓度升高、细胞收缩；另一面可激活垲氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１），使其进入核内妄动低氧反应基因，引发平滑肌细胞一系列反应，如血管活性物质的生成及细胞收缩反应等。本就近几年国外有关研究进展作一综述。     

长期应用左旋精氨酸对慢性低氧肺动脉平滑肌细胞钾通道的作用

目的　探讨长期应用左旋精氨酸 (L Arg)对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)膜钾通道的作用 ,为慢性低氧性肺动脉高压的防治手段提供理论依据。方法　雄性Wistar大鼠 18只 ,每组 6只 ,随机分为三组 :生理盐水对照组 (A组 )、慢性低氧组 (B组 )和慢性低氧 +L Arg组 (C组 )。单个大鼠的PASMC获得采用急性酶分离法 (胶原酶Ⅰ型和木瓜蛋白酶 )。用全细胞膜片钳技术测定三组PASMC的静息膜电位 (Em)、电压门控钾通道 (Kv通道 )电流和钙激活钾通道 (KCa通道 )电流。结果　 (1)B组大鼠PASMC的静息膜电位为 (- 31± 8)mV ,A组为 (- 4 2± 5 )mV ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。C组大鼠PASMC的静息膜电位为 (- 39± 4 )mV ,与B组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。(2 )对Kv通道 (在 +5 0mV电压刺激时峰值电流 ) :B组大鼠PASMC的峰值电流为 (6 2± 5 )pA/pF ,A组为 (12 1± 9)pA/pF ,两组比较差异也有显著性 (P <0 0 1)。C组大鼠PASMC的峰值电流为 (95± 3)pA/pF ,与B组比较差异也有显著性 (P <0 0 0 1)。 (3)对KCa通道 (+5 0mV电压刺激时的峰值电流 ) :B组大鼠PASMC的峰值电流为 (74 7± 4 1)pA/pF ,A组为 (5 3 6± 5 9)pA/pF ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。应用L Arg后 ,C组大鼠PASMC的峰值电     

二氯醋酸钠对大鼠低氧肺动脉高压的预防作用

目的研究二氯醋酸钠（DCA）对大鼠在高原环境下形成高原低氧性肺动脉高压的预防作用,以及对高原低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）上电压门控性钾通道亚型Kv2.1基因表达的影响和抑制肺动脉重构的作用方法24只雄性SD大鼠随机平均分为正常对照组（N组）、高原组（HA组）及DCA干预组（DCA＋HA组）。N组置于平原处室内喂养,HA组和DCA＋HA组均同时置于模拟的海拔5000 m高原环境,DCA＋HA组大鼠以DCA按70 mg/（k.gd）灌胃。21 d后测量3组大鼠平均肺动脉压（mPAP）,图像分析技术分析肺动脉（50~150μm）形态改变,用实时荧光定量PCR法检测3组大鼠PASMCs Kv2.1 mRNA,免疫组织化学法观察大鼠PASMCsKv2.1蛋白的表达。结果 HA组大鼠mPAP明显高于N组（P〈0.01）,其肺动脉管壁增厚,管腔狭窄,表现为管壁厚度占外径的百分比（WT%）和管壁面积占总面积的百分比（WA%）明显升高（P〈0.01）,HA组大鼠右心室肥厚指数（右心室/左心室＋室间隔,RV/LV＋S）较N组明显升高（P〈0.01）,而DCA＋HA组mPAP则明显比HA组低（P〈0.01）,并表现血管重构减弱,WT%和WA%明显低于HA组（P〈0.01）,RV/LV＋S下降（P〈0.01）。HA组Kv2.1 mRNA明显低于N组（P〈0.01）,DCA＋HA组Kv2.1 mRNA则明显恢复表达（P〈0.01）。HA组肺动脉壁Kv2.1平均光密度低于N组（P〈0.01）,DCA＋HA组则明显高于HA组（P〈0.01）,蛋白表达呈现相似结果。结论 DCA对于大鼠在高原条件下形成的肺动脉高压具有预防作用,同时能够上调大鼠PASMCs上Kv2.1表达,阻止肺动脉和右心室重构的作用。     

洛沙坦对蛋白激酶C在慢性缺氧大鼠模型肺动脉胶原表达作用的影响

目的　观察洛沙坦对蛋白激酶C(PKC)在慢性缺氧大鼠模型肺动脉胶原表达作用的影响。方法　将二级SD大鼠分为 3组 :A组 (正常对照组 )大鼠室内常规饲养。B组 (单纯缺氧 4周组 )大鼠置于常压低氧舱中 ,舱内充入氮气 ,使氧浓度维持在 (1 0 0± 0 5) % ,每天 8h ,每周 6d ,连续 4周 ;大鼠每天缺氧前用 2ml蒸馏水灌胃。C组 (洛沙坦干预组 )缺氧条件同B组 ,大鼠每天缺氧前用洛沙坦 (洛沙坦 50mg/kg溶于 2ml蒸馏水 )灌胃。采用透射电镜、放射活性测定法、免疫组化、原位杂交等方法观察 3组大鼠肺细小动脉超微结构、肺组织PKC活性、肺动脉管壁PKC免疫组化及Ⅰ、Ⅲ型胶原和Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达的变化。结果　 (1 )B组大鼠平均肺动脉压、右心室重量比显著高于A组(P <0 0 1 ) ,C组显著低于B组 (P <0 0 1 )。 (2 )光镜下可见B组大鼠肺血管管壁厚度占血管外经的百分比、管壁面积占管总面积的百分比显著高于A组 (P <0 0 1 ) ,C组显著低于B组 (P <0 0 1 )。电镜下可见B组大鼠肺动脉胶原纤维较A组明显为多 ,C组较B组明显为少。 (3)B组大鼠肺组织细胞PKC总活性、胞膜PKC活性、胞质PKC活性及胞膜PKC活性占PKC总活性的百分比显著高于A组(P <0 0 1 ) ,C组上述指标均显著低于B组 (P <0 0 1 )。 (4)免疫组化显示 ,B     

钾通道活性降低促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

低氧性肺动脉高压 (ＨＰＨ)的病理基础是肺小动脉收缩反应增强和结构重建。研究发现 ,缺氧通过抑制电压依赖钾通道使肺动脉平滑肌细胞 (ＰＡＳＭＣｓ)收缩。ＰＡＳＭＣｓ增殖是ＨＰＨ血管重建的重要组成部分 ,目前还不清楚钾通道在其中所起的作用。我们的研究旨在明确钾通道活性降低对培养大鼠ＰＡＳＭＣｓ增殖的作用。材料与方法　细胞培养 :采用酶消化法培养大鼠ＰＡＳＭＣｓ,经免疫组化法鉴定细胞纯度为 98%。膜片钳试验 :各种钾通道阻断剂对ＰＡＳＭＣｓ钾电流 (ＩＫ)的影响采用标准膜片钳全细胞记录法[1] 进行。细胞增殖 :5～ 10代ＰＡ…     

缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞活性氧与缺氧诱导因子1α在细胞增殖中的作用

活性氧可介导基因转录激活的启动和转录因子活性的调节。缺氧诱导因子1α（HIF-1α）是一种核转录因子，在缺氧性肺动脉高压（HPH）形成中起关键作用。我们观察缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）的活性氧变化，探讨其与HIF-1α和细胞增殖的关系。     

电压依赖性钾通道与肺动脉高压的研究进展

肺动脉高压是一种肺血流受限引起肺血管阻力和压力持续性增高,最终导致右心衰竭甚至死亡的综合征,病理生理学的改变主要为肺血管收缩、重塑及原位血栓的形成。近年研究表明,钾离子通道决定着肺动脉平滑肌细胞膜上的膜静息电位形成、调节血管紧张性及参与肺动脉平滑肌细胞的生长、增殖和凋亡。因此,钾通道调节血管收缩和调控肺动脉平滑肌细胞（Pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs）凋亡等方面发挥重要作用,具有抗肺动脉高压的作用,有望成为治疗肺动脉高压的新靶点。     

肺动脉平滑肌细胞膜钾通道的细胞内高控

肺动脉平滑肌细胞上主要有3种钾通道（K^ 通道）,分别是电压依赖性K^ 通道（KV通道）、Ca^2 激活的K^ 通道（KCa通道）和ATP激活的K^ 通道（KATP通道）。一些细胞内的信息物质（如cAMP、cGMP、PKA、PKG、PKC、NO等）调节着K^ 通道的活性,对肺动脉产生收缩或舒张作用,从而在低氧性肺动脉高压的发病机制中发挥着重要的作用。本文对近年来肺动脉平滑肌细胞膜K^ 通道细胞内调控因素的研究动态作一总结。     

K~＋通道开放剂和阻滞剂对持续缺氧大鼠肺血管收缩效应的影响

模拟５０００ｍ高原持续缺氧引起大鼠肺动脉高压模型，研究缺氧性肺血管收缩反应（ＨＰＶ）。结果表明缺氧１０，２０ｄ大鼠肺动脉收缩压、舒张压升高。缺氧２０ｄ后，离体肺动脉灌注压（ＰＡＰＰ）和肺血管阻力（ＰＶＲ）增加。缺氧组对ＫＣｌ１０，１５ｍｍｏｌ／Ｌ引起ＰＡＰＰ和ＰＶＲ升高的反应增强。与正常组比较，缺氧２０ｄ后大鼠离体肺动脉环对ＫＣｌ１０，１５ｍｍｏｌ／Ｌ引起的收缩反应增强，对去甲肾上腺素的反应无改变。Ｋ＋通道阻滞剂ＣｓＣｌ２０ｍｍｏｌ／Ｌ可使正常大鼠肺动脉环对ＫＣｌ１０，１５ｍｍｏｌ／Ｌ引起的收缩反应加强，而缺氧大鼠则不受影响。Ｋ＋通道开放剂克罗卡林、尼可地尔可抑制ＫＣｌ引起ＰＭＰ和ＰＶＲ升高，并可抑制ＫＣｌ引起的肺动豚环收缩。提示持续缺氧会影响Ｋ＋通道，可能引起Ｋ＋通道部分阻滞，参与肺动脉高压的形成。此外，Ｋ＋通过开放剂可抑制ＨＰＶ，可能在治疗肺动脉高压中有意义。     

脱氢表雄甾酮对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活性钾通道的作用

目的　研究钾通道开放剂脱氢表雄甾酮 (DHEA)对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活性钾通道 (KCa)的作用和缺氧性肺动脉高压的降压作用。方法　 50只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 ,10只 )和慢性缺氧组 (B组 ) ,B组又随机分为B1、B2 、B3 、B4 组 (每组各 10只 ) ,B组大鼠均以常压缺氧 3周建立大鼠慢性缺氧肺动脉高压模型。采用急性酶分离法分离得到大鼠肺动脉平滑肌细胞(SMCs)。应用膜片钳技术 ,在对称性高钾溶液中 ,于急性分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞的内面向外式膜片 (inside outpatch)上 ,分离出KCa电流。比较A组和B1组KCa电流活性 ;观察DHEA对B1组KCa通道电流的激活作用。应用右心插管技术 ,测定给药前后B2 、B3 、B4 组大鼠平均肺动脉压 (mPAP)和平均体动脉压 (mSAP)等血流动力学指标。结果　B组大鼠肺动脉平滑肌细胞KCa活性比A组大鼠显著降低 (P <0 0 1)。DHEA可明显激活慢性缺氧所抑制的B1组大鼠肺动脉平滑肌细胞的KCa电流。给缺氧大鼠静脉注射DHEA可明显降低其mPAP(P <0 0 1) ,而对mSAP无明显作用 (P >0 0 5)。结论　缺氧对KCa通道的抑制作用在缺氧 3周大鼠缺氧性肺动脉高压发病中起着重要作用 ;DHEA可直接激活KCa活性而拮抗慢性缺氧对KCa的抑制作用 ;DHEA对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压可产     

慢性缺氧对大鼠肺动脉舒张反应的影响

目的：探讨大鼠缺氧性肺动脉高压发生过程中肺动脉舒张反应的改变。方法：本实验比较了正常（ｎ＝１１）与慢性缺氧４天（ｎ＝１１）、间断缺氧３周（ｎ＝１１）大鼠离体肺动脉环对几种作用机制不同的血管舒张药物的反应。结果：慢性缺氧显著抑制了大鼠肺动脉环对乙酰胆碱的舒张反应（Ｐ＜０．０５），而对硝普钠（１０－７～１０－１１ｍｏｌ／Ｌ）和硝苯地平（１０－４～１０－８ｍｏｌ／Ｌ）诱发的舒张反应无明显影响；克罗卡林（１０－７～１０－１１ｍｏｌ／Ｌ）在缺氧４天大鼠肺动脉环的舒张作用显著增强（Ｐ＜０．０５）。结论：慢性缺氧显著抑制大鼠肺动脉内皮依赖性舒张反应，而对非内皮依赖性及钙通道依赖性舒张反应无明显影响；钾通道依赖性舒张反应在缺氧早期是增强的