5α—还原酶Ⅱ型同功酶基因在人睾丸,附睾和输精管组织中的表达

我们对人５α－还原酶Ⅱ型同功酶基因在正常人睾丸、附睾及输精管组织细胞内的定位表达进行了初步的研究。采用非同位素地高辛标记ｃＲＮＡ探针对人睾丸、附睾和输精管组织冰冻切片进行原位杂交。结果：人睾丸Ｓｅｒｔｏｌｉ和Ｌｅｙｄｉｇ细胞胞浆、队睾和输精管上皮的主主假复层柱状上皮细胞的胞浆中均有较强的杂交信号；细胞核中未要交信号；睾丸生精细胞及基底膜、附睾和输精管上皮的基底膜、间持和肌层也未见杂交信号。证明人与     

5α-还原酶活性在人与大鼠附睾不同部位的分布

为进一步了解５α－还原酶对附睾功能和精子成熟过程的作用，将大鼠及人附睾按头、体、尾分段分别制备匀浆，用已建立的５α－还原酶（５α－Ｒ）活性测定方法，测定胞浆、微粒体及核内５α－Ｒ．Ｉ、Ｉ型同功酶的活性分布。结果：（１）大鼠附睾５α－Ｒ活性分布与人附睾细胞核中５α－Ｒ活性分布一致，呈头高、尾低梯度递减（Ｐ＜０．０１），而微粒体及胞浆中不完全一致，体部较高、尾部最低（Ｐ＜０．０５）。（２）人与大鼠附睾５α－Ｒ活性在核及微粒体中高于胞浆，且微粒体与胞浆之间有相关性（ｒ＝０．８７５９）。（３）大鼠Ｉ、Ｉ型同功酶之间活性无明显差异（Ｐ＞０．０５），而人微粒体中５α－Ｒ．Ｉ型同功酶占优势。５α－Ｒ活性的这种分布特点与精子在附睾中逐步成熟过程相一致，提示５α－Ｒ可能是调节附睾精子成熟的重要核因子之一。     

恒河猴两种节育术后睾丸附睾的组织学及超微结构观察

本文介绍了12只恒河猴输精管结扎术及输精管内过滤装置节育术术后睾丸、附睾和输精管的组织学及超微结构观察结果。术后两年内,两组动物睾丸的组织学及超微结构均无异常改变。术后9月,结扎猴的尾部附睾管及近睾端输精管管腔显著扩张、上皮变薄、腔内充满大量变性、坏死精子,出现附睾郁积。附睾主细胞出现微绒毛疏短、排列紊乱等超微结构变化;而行过滤装置节育的动物附睾管及输精管的组织学及超微结构均未见异常改变。提示两种节育术对睾丸形态结构均无影响;但输精管结扎木可导致附睾郁积及其上皮的萎缩性变化,而过滤装置节育术后无此改变,值得进一步探讨。     

附睾分泌蛋白2β1在青春期雄性大鼠睾丸和附睾中的表达

目的:探讨附睾分泌蛋白2(HE2/EP2)的一种异构体———HE2β1在青春期雄性大鼠睾丸和附睾中的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测15只青春期SD大鼠睾丸和附睾组织中HE2β1的定位及其表达情况。结果:HE2β1在青春期大鼠睾丸和附睾组织中均有表达。在附睾中,HE2β1主要表达于附睾管上皮主细胞胞质内,而在亮细胞、晕细胞及基细胞内未见阳性表达;其表达水平在附睾头部远段较弱,在体部近、中段及尾部较强,而在附睾始段未见阳性表达。在睾丸生精小管中,部分精原细胞核及支持细胞核均可见明显的棕褐色的阳性颗粒,其他生精细胞以及间质细胞均为阴性。结论:HE2β1在青春期雄性大鼠的睾丸和附睾上皮中均有表达,其定位及表达水平具有区域特异性和细胞特异性,提示其在大鼠精子发生、成熟及附睾上皮天然抗感染机制中发挥重要的作用。     

精子发生相关CG14片段的组织特异性表达及其与杂交不育的关系

目的 :确定精子发生相关 CG1 4片段的组织特异性表达及其与杂交不育的初步关系。方法 :采用 CG1 4片段的放射性同位素标记探针对心、肝、肾、脑、睾丸及附睾组织的 m RNA进行 Northern杂交。将 CG1 4片段转录为 RNA作探针 ,对成年雄性 SD大鼠、牦牛、犏牛一代 (杂交不育 )、犏牛三代 (回交生育功能恢复 )睾丸组织进行原位杂交。结果 :在睾丸组织有一条约 1 2 58bp的 m RNA特异杂交带 ;在附睾组织有一条约 1 3 51 bp的 m RNA特异杂交带 ,而在心、肝、肾及脑无杂交带。在 SD大鼠、牦牛及犏牛三代的睾丸组织冰冻切片存在明显的 CG1 4正义探针阳性杂交信号 ;在犏牛一代睾丸组织未见特异性阳性杂交信号 ;在各个组织切片中反义探针均未出现阳性杂交信号。结论 :精子发生相关 CG1 4片段在睾丸及附睾组织中特异性表达。在 SD大鼠、具有生育能力的牦牛以及生育机能恢复的犏牛三代初级精母细胞中表达 CG1 4片段的 m RNA,而在杂种不育的犏牛一代初级精母细胞中未见 CG1 4片段的 m RNA。     

Mahoganoid蛋白及其mRNA在大鼠睾丸和附睾中的表达

目的:探讨M ahoganoid(Md)蛋白及其mRNA在成熟大鼠睾丸和附睾组织中的表达。方法:健康成年SD大鼠20只,取睾丸和附睾组织4%多聚甲醛固定,石蜡切片,用免疫组化SP法和原位杂交方法分别检测Md蛋白及其mRNA在睾丸和附睾组织中的表达。结果:免疫组化SP法显示:睾丸组织间质细胞、睾丸生精小管管周肌样细胞和各级生精细胞(精原细胞、初级精母细胞和精子细胞)、支持细胞呈阳性反应,Md蛋白主要表达于胞膜及胞质。在附睾组织,棕色免疫阳性反应物质可见于输出管的高柱状细胞、低柱状细胞的胞膜及胞质,以及附睾管的高柱状细胞、主细胞、基细胞的胞膜及胞质。其中,在附睾尾部的上皮细胞中仅见微弱的棕色免疫阳性反应物质。原位杂交方法显示:睾丸组织间质细胞、睾丸生精小管管周肌样细胞和各级生精细胞(精原细胞、初级精母细胞和精子细胞)、支持细胞上也均有Md mRNA阳性棕色颗粒杂交信号,主要表达于胞膜及胞质。在附睾组织,Md mRNA阳性棕色颗粒杂交信号也均可见于高柱状细胞、主细胞、基细胞的胞膜及胞质。结论:Md蛋白及其mRNA在成熟大鼠睾丸和附睾组织中均有表达,其生理功能尚有待阐明。     

血管内皮生长因子和其受体Flt-1在青春期大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上的表达研究

目的:通过对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1在大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上表达的研究,探讨其在雄性生殖系统中的作用。方法:免疫组化SP法和免疫荧光法检测20只青春期SD大鼠睾丸、附睾及精子上VEGF和Flt-1蛋白的表达情况。结果:VEGF和Flt-1在大鼠睾丸和附睾组织及精子上均有特征性表达。睾丸内VEGF蛋白表达于生精细胞、精子细胞发育中的顶体、Sertoli和Leydig细胞胞质内;Flt-1只见于精子细胞发育中的顶体及Leydig细胞胞质中。附睾中VEGF表达于各段上皮主细胞胞质内,而Flt-1表达于头、尾段上皮主细胞胞质内,体部免疫染色阴性;两者在附睾上皮亮细胞、晕细胞和基细胞中均为阴性表达。免疫荧光染色显示,VEGF和Flt-1共同定位于附睾内精子头部的顶体,尾部的颈、中和主段。结论:VEGF和Flt-1蛋白在大鼠睾丸、附睾及精子中的特异性表达提示,他们可由不同生精上皮细胞、间质细胞和附睾主细胞产生,可能以自分泌或旁分泌的形式单独或共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞或Leydig细胞,直接或间接地影响精子的发生、发育和成熟过程,并与精子的活动和受精能力有关。     

抽取附睾精子作人工授精治疗梗阻性无精子症初步报告

本文从５例梗阻性无精子症不育患者输精管收集附睾精子。其中除１例为附睾先天性梗阻，作附睾－输精管吻合术外，余均为远端输精管不通畅或缺如。第二性症发育良好、性激素、睾丸容积等均正常。抽吸附睾液放入术前精浆和精子保养液中冷冻保存，解冻复苏后４例行人工授精。该法对输精管发育不全或炎症、损伤等因素造成的不能手术修复的远端输精管广泛损害梗阻的病人是一种较好的治疗选择     

年龄相关分子c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾中的表达

目的:检查c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中的表达差异,研究睾丸和附睾在成熟和衰老过程中特征性分子表达的规律性改变,为研究男性生殖系统衰老提供实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检查6、12、24月龄SD大鼠睾丸和附睾组织中c-kit、HIWI和波形蛋白抗体免疫反应强度,并对其进行比较分析。结果:c-kit特异性免疫反应阳性主要表达于精原细胞,其他细胞表达水平甚弱,不同月龄差异不显著。附睾上皮、附睾管腔内成分亦有c-kit阳性表达。HIWI在大鼠睾丸和附睾组织中表达也很丰富,6月龄和12月龄大鼠中各级生精细胞,尤其是精原细胞和初级精母细胞为免疫反应强阳性细胞;支持细胞、间质细胞、类肌细胞和血管内皮细胞亦为HIWI阳性细胞。附睾上皮有HIWI阳性表达。但是24月龄大鼠睾丸和附睾组织中HIWI表达下调。波形蛋白在睾丸和附睾组织中表达模式为6月龄大鼠睾丸和附睾组织中低表达,24月龄大鼠睾丸和附睾组织表达明显上调(P<0.01)。结论:c-kit、HIWI在24月龄动物睾丸和附睾组织中表达下调,波形蛋白表达随增龄而明显增强。结果提示,睾丸和附睾组织的衰老与细胞和细胞信号转导异常密切相关。     

Attractin蛋白和mRNA在不同日龄大鼠睾丸中的表达

目的:已知成熟大鼠睾丸组织中有Attractin蛋白的广泛表达,本文旨在进一步探讨Attractin蛋白和AttractinmRNA在各年龄段大鼠睾丸组织中的分布。方法:取出生第1d(新生鼠)、第5d(青春前期)、第20d(青春中期)、第50d(青春后期)及第70d(成年期)大鼠睾丸和附睾组织固定,采用酶免疫组织化学和原位杂交方法检测Attractin和AttractinmRNA在大鼠睾丸组织中的表达。结果:免疫组化显示各年龄段大鼠睾丸生精小管和间质细胞、管周肌样细胞上均有Attractin蛋白的表达,分布于胞膜和胞质,精子和附睾上未见表达。随着日龄的增加,间质细胞的表达逐渐增强。原位杂交显示各年龄段大鼠睾丸生精小管和间质细胞、管周肌样细胞、支持细胞上也均有AttractinmRNA阳性棕色颗粒杂交信号,主要表达于胞核及胞质。且随着日龄的增加,睾丸生精细胞表达略强于间质细胞。精子和附睾上未见表达。结论:AttractinmRNA和Attractin蛋白在各日龄大鼠睾丸组织中均有广泛的分布,且分布一致。提示各日龄大鼠睾丸组织都具有合成Attractin蛋白的能力。其生理功能和机制尚有待进一步探讨。     

人输精管结扎后睪丸病理学变化

输精管结扎术系目前世界上男性最常用的避孕措施之一。随着输精管复通技术的进展及再婚率增高,每年要求做输精管复通的人越来越多。输精管复通术后生育调查表明其生育力低下,怀孕率为40-70％不等,其原因目前认为与精子抗体产生、神经损伤及附睾功能受损有关,但动物实验显示输精管结扎术后也会产生各种睾丸损害。有关人类输精管结扎对睾丸组织的长期影响报道甚少,本文就有关这方面的研究作一简单复习。一、输精管结扎后睾丸病理改变(一)曲细精管和Sertoli细胞:在人类已经观察到输精管结扎后睾丸曲细精管具有明显改变,其特征如下:1.生精细胞排列紊乱,精子生成停滞:Fletcher(1974)等对13例输精管结扎男性     

年龄相关分子c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾中的表达

目的：检查c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中的表达差异,研究睾丸和附睾在成熟和衰老过程中特征性分子表达的规律性改变,为研究男性生殖系统衰老提供实验依据。方法：运用免疫组织化学方法检查6、12、24月龄SD大鼠睾丸和附睾组织中c-kit、HIWI和波形蛋白抗体免疫反应强度,并对其进行比较分析。结果：c-kit特异性免疫反应阳性主要表达于精原细胞,其他细胞表达水平甚弱,不同月龄差异不显著。附睾上皮、附睾管腔内成分亦有c-kit阳性表达。HIWI在大鼠睾丸和附睾组织中表达也很丰富,6月龄和12月龄大鼠中各级生精细胞,尤其是精原细胞和初级精母细胞为免疫反应强阳性细胞;支持细胞、间质细胞、类肌细胞和血管内皮细胞亦为HIWI阳性细胞。附睾上皮有HIWI阳性表达。但是24月龄大鼠睾丸和附睾组织中HIWI表达下调。波形蛋白在睾丸和附睾组织中表达模式为6月龄大鼠睾丸和附睾组织中低表达,24月龄大鼠睾丸和附睾组织表达明显上调（P〈0.01）。结论：c-kit、HIWI在24月龄动物睾丸和附睾组织中表达下调,波形蛋白表达随增龄而明显增强。结果提示,睾丸和附睾组织的衰老与细胞和细胞信号转导异常密切相关。     

输精管结扎术后中远期对附睾、睾丸影响的超声观察

目的探讨输精管结扎术后中远期对睾丸、附睾的形态学的影响。方法随访结扎术后无发生附睾淤积症状的男性89例,并同期选择无结扎史男性59例为对照组,采用多普勒超声观察2组对象附睾形态及内部回声,测量头、体、尾长度;同时测量睾丸的大小情况。结果与正常组对比,结扎组术后附睾头、体、尾的厚度改变有显著性差异(P0.01);结扎组术后睾丸大小的改变无显著性差异(P0.05)。结论输精管结扎术后中远期仍然会出现附睾淤积增厚的超声表现,但附睾淤积症状的发生可能与附睾上皮增厚无直接相关;术后中远期对睾丸大小无影响。     

抽取附睾精子作人工受精治疗梗阻性无精子症初步报告

本文从５例梗阻性无精子症不育患者输精和收集附睾精子。其中除１例为附睾先天性梗阻，作附睾－输精管吻俣术外，余均为远端输精管不通畅或缺如。第二性症发育良好，性激素，睾丸容积等均正常。抽吸附睾液放入术前精浆和精子保养液中冷冻保存，解决复苏后４例行人工授精。     

Attractin蛋白在大鼠睾丸和附睾中的免疫组织化学定位

目的 :探讨Attractin蛋白在成熟大鼠睾丸和附睾组织中的分布。　方法 :健康成年雄性SD大鼠 2 0只 ,灌流取睾丸和附睾组织固定 ,石蜡包埋和冰冻切片。用免疫组化法和间接免疫荧光方法检测Attractin蛋白在成熟大鼠睾丸和附睾组织中的表达。　结果 :睾丸组织间质细胞、睾丸精曲小管管周肌样细胞和各级生精细胞 (精原细胞、初级精母细胞和精子细胞 )、支持细胞呈阳性反应 ,主要表达于胞膜及胞质。睾丸间质细胞表达略强于生精细胞。附睾头、体、尾均未见表达。　结论 :Attractin蛋白在成熟大鼠睾丸组织间质细胞和生精细胞中有较强的表达 ,其生理功能尚有待进一步探讨。     

急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70表达的影响

目的:探讨急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)表达的影响。方法:将32只8周龄雄性小白鼠随机均分为4组,饲养7d后,进行热应激处理,温度控制在(39±0.5)℃,时间分别为0.5、1和3h。应激后立即采血,分离血清测定谷草转氨酶(GOT)含量。一侧附睾制备精子悬液,用于计算精子密度和顶体畸形率;另一侧附睾、睾丸、输精管用于免疫组化研究。结果:应激后,小鼠体重、睾丸系数、顶体畸形率变化不显著(P>0.05),附睾系数和精子密度有不同程度的下降,GOT含量急剧升高(P<0.01)。随着应激时间的延长,小鼠精子密度呈递减趋势,顶体畸形率呈上升趋势。应激时间最短的0.5h组小鼠体重、睾丸系数、附睾系数的降幅反而最大。免疫组化法观察发现,HSP70在性成熟小鼠睾丸、附睾、输精管中均有表达。正常状态下,HSP70在睾丸组织间质细胞中少量表达,应激后分布于间质细胞核,此外在精母细胞核与精子细胞核中也有大量分布;附睾中HSP70主要分布于主细胞质,基细胞和亮细胞中没有表达,应激后附睾体的纤毛细胞中也发现大量棕色颗粒;输精管中HSP70主要定位在基细胞质,主细胞中不表达。随着应激时间的延长,HSP70在睾丸、附睾中的表达量明显升高,而在输精管中的增幅不明显。结论:急性热应激对性成熟雄性小鼠的生殖系统造成了损伤;HSP70在睾丸、附睾、输精管中的表达与定位具有区域特异性和细胞特异性,提示其可能参与精子的发生与成熟;HSP70在应激状态下表达量大幅上升的作用可能在于保护细胞免受高热损伤。     

46,Y,t(19;X)伴无精子症两兄弟

患者为两同胞兄弟 ,兄 ,2 8岁 ,结婚 4年 ,弟 2 6岁 ,结婚 3年 ,妻子均未怀孕。查体 :兄弟俩表型、智力正常 ,第二性征及外生殖器发育良好。兄 :触诊睾丸大小质地正常 ,双侧性睾丸与附睾头不连接 ,双侧输精管存在 ;弟 :触诊睾丸大小质地正常 ,双侧睾丸与附睾头连接 ,双侧输精管存在。兄弟俩精液常规检查未见精子 ,果糖阳性。细胞遗传学检查 :兄弟俩的核型均为 :4 6 ,Ｙ ,ｔ(19,Ｘ) (Ｐ13;Ｐ2 2 )。讨　　论性染色体与常染色体的平衡易位导致男性无精子症屡有报道 ,而性染色体与常染色体平衡易位引起双侧睾丸与附睾头不连接现象则未见报道。…     

输精管结扎术对附睾及睾丸大小近期影响的超声观察

目的探讨输精管结扎术后近期对附睾及睾丸大小的影响。方法选择54例自愿接受输精管结扎术的对象;应用高频彩色多普勒超声于术前及术后1、2、3个月检查附睾及睾丸的大小。结果术后54例受术者双侧附睾均出现增厚,术后1个月与术前比较、术后2个月与术后1个月比较、术后3个月与术后2个月比较,差异均有统计学意义(P0.01);术前及术后睾丸体积比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论输精管结扎术后3个月内附睾超声表现为附睾增厚,且呈进行性增厚;输精管结扎术对睾丸大小无明显影响。     

先天性双侧输精管缺如患者睾丸组织中CFTR蛋白的表达及意义

目的通过观察中国CBAVD患者CFTR蛋白在睾丸组织中的表达水平,探讨其与睾丸生精功能之间的关系。方法免疫组化检测66例中国先天性双侧输精管缺如患者睾丸组织CFTR蛋白表达水平并对睾丸生精功能进行评分,探讨先天性双侧输精管缺如患者CFTR蛋白的表达情况以及其与睾丸生精功能的关系。结果免疫组化结果显示CFTR蛋白可表达于睾丸内支持细胞及生精上皮细胞,以细胞膜和细胞浆为主;CFTR蛋白在CBAVD患者睾丸生精上皮及支持细胞的表达以阳性和弱阳性为主,比例分别为50%(33/66)和37.87%(25/66),部分患者可见阴性表达,比例为4.54%(3/66);睾丸生精Johnsen评分7~10分的比例分别为4.45%(3/66)、40.9%(27/66)、42.42%(28/66)和12.23%(8/66)。部分患者存在生精功能障碍。CFTR蛋白在睾丸组织中的表达与生精功能强正相关性,相关系数为0.785(P<0.01)。结论BAVD患者睾丸内的CFTR蛋白表达以阳性和弱阳性为主;部分CBAVD患者存在生精功能障碍,CFTR蛋白在睾丸组织中的表达水平与生精功能存在强正相关性。     

青春期糖尿病大鼠附睾中5α—还原酶[Ⅱ型]基因表达的变化

应用Northem Blot和Dot Blot杂交技术研究了青春期糖尿病时大鼠附睾5α-还原酶基因表达的变化。实验分对照（C）组、糖尿病（D）组和胰岛素治疗糖尿病（ID）组。结果：Northem Blot方法显示附睾头部5α-还原酶表达强度,D组较C组显著降低（P＜0．01）,ID组较D组显著升高（P＜0．001）,体、尾部各组间变化不显著（P＞0．05）;Dot Blot,除头部ID组未见恢复和体部D组显著高于C组外,其余结果与Northern blot基本一致。结果提示：青春期糖尿病时可能由于糖尿病状态引起附睾5α-还原酶表达降低,胰岛素治疗后随糖尿病状态改善,附睾头部5α-还原酶表达升高。