大鼠急性心肌缺血再灌注损伤诱导细胞凋亡的实验研究

目的:观察心肌缺血再灌注(IR)损伤与心肌细胞凋亡关系及凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达情况。方法:选用健康雄性SD大鼠29只,随机分为:假手术组(n=8),缺血组(n=12),缺血再灌注组(n=9),分别取上述大鼠心肌组织。(1)观察心肌组织及线粒体的形态结构,并进行体视学分析。(2)采用缺口末端标记法(TUNEL)原位检测凋亡细胞。(3)用免疫组化SP法检测心肌细胞Bcl-2、Bax表达。结果:(1)假手术组心肌纤维排列整齐,细胞间质血管未见明显异常,细胞核膜完整,缺血组及缺血再灌注组可见心肌嗜酸性变、空泡变性、心肌纤维紊乱及收缩带形成,心肌纤维间出血及灶性心肌坏死。心肌细胞线粒体体视学分析,与假手术组比较,心肌缺血组形状因子显著降低(P<0.05),面密度显著增加(P<0.05),缺血再灌注组形状因子显著降低(P<0.01),面密度及周密度均显著增加(均P<0.05)。(2)与假手术组比较,缺血组细胞凋亡率明显升高(P<0.001),缺血再灌注组细胞凋亡率明显升高(P<0.001)。缺血再灌注组与缺血组比较细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。(3)与假手术组比较,缺血再灌注组凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达明显升高(P<0.01,P<0.001)。缺血再灌注组与缺血组比较凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达明显升高(均P<0.01)。结论:心肌缺血及再灌注在导致细胞形态、线粒体超微结构改变的同时,诱导心肌细胞的凋亡,Bcl-2、Bax蛋白表达在心肌细胞凋亡的发生中起重要作用,细胞凋亡加重了缺血再灌注损伤。     

黄芪甲苷对缺血再灌注诱导的大鼠心肌损伤及细胞自噬的调节作用

目的观察黄芪甲苷对缺血再灌注模型损伤大鼠心肌组织的保护作用及与心肌组织细胞自噬的关系。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立心肌缺血再灌注损伤模型,采用细胞生物学及免疫组织化学法,观察心肌组织在缺血再灌注损伤模型及黄芪甲苷处理后的心肌组织损伤、细胞自噬的变化。结果缺血再灌注损伤使大鼠心肌组织中心肌灶性病变严重,兼有波浪改变及大片炎症细胞浸润,与假手术组相比损伤面积明显增多(P<0.05),而黄芪甲苷低、高剂量组均可使心肌灶性病变和炎症细胞浸润的面积明显减少(P<0.05)。Western blot结果显示,缺血再灌注损伤可激活心肌组织细胞中Beclin1的表达(P<0.05),而黄芪甲苷低、高剂量组均可降低缺血再灌注损伤诱导的心肌组织细胞Beclin1表达(P<0.05)。结论黄芪甲苷可在一定程度上减少缺血再灌注损伤的心肌面积,其机制可能是通过调节与自噬相关的Beclin1细胞信号转导通路而发挥作用。     

维拉帕米对缺血再灌注损伤心肌保护机制的探讨

目的 :探讨维拉帕米对缺血再灌注损伤心肌的保护作用及其机制。方法 :①建立家兔心肌缺血再灌注模型。将 2 4只家兔按再灌注时限的不同及是否给予维拉帕米 (0 .2mg/kg静脉注射 )干预分为 4组 (A1、A2、B1、B2 ) ,测定各组的心肌梗死范围 ,并在电镜下对缺血再灌注心肌进行超微结构观察。②根据心肌缺血再灌注不同时限对 33只家兔进行分组 ,采用免疫组化法检测同一剂量维拉帕米 (0 .2mg/kg静脉注射 )对缺血再灌注不同时限心肌组织bcl 2蛋白的表达情况。结果 :①与 0 .85 %氯化钠组比较 ,维拉帕米组可明显减小心肌梗死范围(P <0 .0 1) ,改善其超微结构的变化。②与假手术对照组和 0 .85 %氯化钠组比较 ,维拉帕米组能显著上调缺血再灌注心肌bcl 2蛋白的表达 (P <0 .0 1)。结论 :维拉帕米可明显减轻心肌缺血再灌注损伤 ,其心肌保护机制可能是通过其促进缺血再灌注心肌组织bcl 2蛋白的表达来实现的     

促红细胞生成素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨促红细胞生成素(促红素)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制.方法:40只SD大鼠随机分为5组(每组8只):假手术组、模型组、促红素组、锌原卟啉组、促红素 锌原卟啉组,建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,缺血45 min,再灌注180 min,采用免疫组织化学及逆转录-聚合酶链反应分别测定大鼠心肌组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血红素氧合酶-1(HO-1)和mRNA的表达,电镜观察心肌超微结构的病理学改变.结果:与假手术组比,其余4组缺血再灌注心肌中MCP-1、HO-1免疫组化平均光密度值和逆转录-聚合酶链反应mRNA表达增多(P均＜0.01),差异有统计学意义;与模型组比,促红素预处理能明显上调HO-1 mRNA表达,并降低缺血再灌注心肌MCP-1 mRNA表达(P均＜0.05～0.01),差异有统计学意义,同时改善心肌超微结构的损伤,使用锌原卟啉后,促红素预处理的保护作用消失(P＞0.05);与促红素组比较,锌原卟啉组和促红素 锌原卟啉组大鼠心肌中HO-1mRNA表达均降低,MCP-1 mRNA表达均增高(P＜0.05～0.01),差异有统计学意义,且心肌超微结构损伤加重.结论:促红素预处理可能通过增强HO-1表达并降低MCP-1表达,改善心肌超微结构的损伤,对大鼠心肌缺血再灌注损伤产生保护作用.     

腺苷介导大鼠心脏缺血后适应的保护效应

目的观察大鼠心肌缺血再灌注时NFκ-B mRNA表达和炎性细胞因子的变化及腺苷后适应对其影响,初步探讨腺苷后适应对缺血再灌注损伤心肌的保护机制。方法健康雄性SD大鼠48只随机分为4组:假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组及腺苷后适应组,每组12只,建立大鼠心肌缺血再灌注模型。光镜下观察心肌组织形态学改变;TTC染色计算各组大鼠心肌梗死面积;RT-PCR检测心肌NF-κB mRNA表达水平,ELISA测定组织中TNF-α及白细胞介素6(IL-6)含量。结果假手术组心肌组织无改变,缺血再灌注组心肌损伤较重,腺苷后适应组及缺血后处理组心肌组织病理学改变明显减轻。与缺血再灌注组比较,腺苷后适应组NF-κB mRNA的表达水平、心肌梗死面积及TNF-α与IL-6的含量明显降低(P<0.01);与缺血后处理组比较,腺苷后适应组NFκ-B mRNA表达及TNF-α、IL-6的分泌均下降(P<0.05)。NFκ-B mRNA的表达与心肌中TNF-α、IL-6浓度呈正相关(P<0.01)。结论腺苷后适应可抑制再灌注后心肌NF-κB的表达活化,从而通过促使炎性细胞因子TNFα-、IL-6分泌减少来减轻缺血再灌注损伤。     

硒与丹参酮IIA磺酸钠对兔心肌缺血再灌注损伤心肌组织脂质过氧化的影响

目的观察硒与丹参酮ⅡA磺酸钠合用对家兔心肌缺血再灌注损伤心肌组织脂质过氧化的影响。方法将26只家兔随机分成4组,即假手术组、缺血再灌注组、丹参酮ⅡA磺酸钠组(DS-201)和硒 DS-201组。分别检测血浆CK、LDH含量和心肌组织的SOD、GSH-Px活力、MDA含量。结果DS-201组、硒 DS-201组血浆中CK、LDH含量和心肌组织MDA含量与缺血再灌注组相比均显著降低(P<0.01);硒 DS-201组与DS-201组相比。血浆CK、LDH含量和心肌组织MDA含量显著降低(P<0.01)。DS-201组、硒 DS-201组心肌组织匀浆中T-SOD活力与缺血再灌注组相比均显著升高(P<0.05),但硒 DS-201组与DS-201组相比,心肌组织匀浆中T-SOD活力没有显著性差异。DS-201组与缺血再灌注组相比心肌组织中GSH-Px活力无显著性差异。但硒 DS-201组心肌组织中GSH-Px活力与缺血再灌注组(P<0.01)、DS-201组(P<0.01)及假手术组(P<0.05)相比,均显著升高。结论硒与丹参酮ⅡA磺酸钠合用对家兔心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,并且优于丹参酮ⅡA磺酸钠。其作用机制与提高SOD、GSH-Px活性,清除自由基,抑制脂质过氧化反应有关。     

NDRG2在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的表达

目的:观察大鼠心肌缺血或心肌缺血再灌注损伤(RMMI)时,心肌组织中N-Mcy下游调节基因(NDRG2)表达的变化。方法:将60只健康成年SD大鼠随机分为对照组、单纯缺血组和缺血/再灌注(I/R)组,每组5~6只。单纯缺血组:套扎冠脉,选取缺血3、6、12、24 h 4个时间点。再灌注组分别选择再灌注后6、12、24和48 h后获取心脏。结果:单纯缺血组各时间点NDRG2的表达与对照组相比无显著差异,NDRG2 mRNA和其蛋白表达的变化一致。再灌注组与对照组比较,随着时间的延长,NDRG2 mRNA的表达逐渐降低,在缺血12 h达到最低(P0.01),NDRG2蛋白的表达在缺血24 h达到最低(P0.01)。结论:单纯心肌缺血不引起NDRG2基因及其蛋白表达水平的变化,但再灌注损伤可下调心肌细胞中NDRG2的表达。     

葛根素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的干预作用

目的 观察葛根素对大鼠心肌缺血再灌注损伤后炎症反应的抑制作用并探讨其作用机制.方法 36只SD大鼠随机分成假手术组、模型组和葛根素处理组;采用左冠状动脉结扎法复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,于缺血开始及再灌注即刻由尾静脉注射葛根素20 mg/kg,缺血1 h,再灌注6 h后取血检测缺血再灌注后心肌髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和血清磷酸肌酸激酶(CK)含量,RT-PCR测定缺血再灌注后心肌胞间黏附分子-1(ICAM-1) mRNA含量.结果 葛根素组血清CK明显低于模型组(P<0.01),MPO和MDA的活性明显低于模型组(P<0.01),ICAM-1 mRNA含量较模型组低(P<0.01).结论 葛根素可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤后炎症反应,这可能是其发挥心肌保护机制之一.     

龙血竭总黄酮对新西兰兔心肌缺血/再灌注损伤作用的研究

目的研究龙血竭总黄酮对新西兰兔心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法将30只新西兰兔随机分为三组,每组10只。采用结扎新西兰兔左冠状动脉前降支法,建立心肌缺血/再灌注损伤模型。观察心肌组织HE染色的结构变化,测量左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax),检测心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)。结果龙血竭处理组心肌组织结构明显好于缺血/再灌注组;缺血/再灌注组和龙血竭处理组+dp/dtmax均明显低于假手术组(P0.01),龙血竭处理组+dp/dtmax高于缺血/再灌注组(P0.01);缺血/再灌注组CK-MB水平明显高于假手术组(P0.01),龙血竭处理组CK-MB水平高于假手术组(P0.05),并低于缺血/再灌注组(P0.01)。结论龙血竭总黄酮能够改善心肌缺血/再灌注损伤,保护心肌组织结构,稳定细胞膜结构,减少心肌CK-MB漏出,提高缺血/再灌注损伤模型心肌的收缩功能。     

三羟异黄酮对家兔缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的研究三羟异黄酮(genistein,GST)对家兔缺血/再灌注损伤(I/R)心肌细胞凋亡的影响.方法阻断家兔心脏左冠状动脉前降支45 min,再灌注180 min引起心肌I/R损伤,在心肌缺血后5 min耳缘静脉注射GST(1.0 mg/kg),应用DNA片段原位末端标记法(TUNEL染色),DNA凝胶电泳和流式细胞仪(FCM)观测心肌细胞凋亡.结果琼脂糖凝胶电泳显示I/R组心肌DNA呈云梯状改变,而GST I/R组无此改变.与I/R组比较,GST I/R组缺血心肌凋亡细胞明显减少(TUNEL染色).流式细胞仪测定I/R组及GST I/R组缺血心肌凋亡率分别为(19.36±1.85)%和(5.46±1.12)%.I/R组的缺血心肌Fas和Bax蛋白表达较非缺血心肌高(P＜0.01),Bcl-2/Bax比例较非缺血心肌低(P＜0.01);而在GST I/R组,Fas和Bax蛋白表达较I/R组的低(P＜0.01),Bcl-2/Bax比例较I/R组高(P＜0.01).结论 GST可减少家兔心肌细胞凋亡,其机制与调控凋亡相关基因Fas、Bax和Bcl-2的蛋白表达有关.     

Effects of Quercetin on Gene and Protein Expression of NOX and NOS after Myocardial Ischemia and Reperfusion in Rabbit

Previous studies have suggested that reactive oxygen species (ROS), endothelial nitricoxide synthase (eNOS), and inducible nitric oxide synthase (iNOS) are involved in the pathophysiology of myocardial ischemia‐reperfusion injury (MIRI). The NOX family of NADPH oxidases share the capacity to generate superoxide and ROS. Several studies have demonstrated that quercetin possesses a protective effect against MIRI. Our aim is to investigate the effects of quercetin on NOX2, eNOS, and iNOS after MIRI in rabbits. New Zealand rabbits were subjected to 30 min of myocardial ischemia followed by 12 h of reperfusion. They were then randomly assigned to four experimental groups: control, I/R (ischemia/reperfusion), quercetin (Que), I/R + Que. Gene and protein expression of NOX2, eNOS, and iNOS were compared. Both in real‐time PCR and in the Western blotting studies, myocardial ischemia‐reperfusion‐induced NOX2 and iNOS expression were enhanced (P < 0.01) but eNOS mRNA and protein expression in I/R hearts were not significantly different from those in control (P < 0.01). Administration of quercetin reduced NOX2, eNOS, and iNOS mRNA and protein expression both in control and in I/R heart (P < 0.01). Gene and protein expression of NOX2 and iNOS were increased after MIRI. Quercetin not only inhibited myocardial ischemia‐reperfusion‐induced NOX2 and iNOS mRNA and protein expression but also inhibited eNOS mRNA and protein expression.     

缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤过程中内质网应激的影响研究

目的 探讨缺血后处理(IPostC)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中细胞凋亡的影响,以及特异性内质网应激(ERS)损伤相关蛋白Grp78(葡萄糖调节蛋白78)和Caspase 12(半胱氨酸蛋白酶12)的蛋白表达水平的变化和意义。方法 Wistar 大鼠24只随机分为假手术组、I/R组(缺血再灌注组)、IPostC组(缺血后处理组)3组,每组8只。分别测定各组心肌缺血和梗死面积、细胞凋亡指数和Caspase12、 Grp78蛋白表达检测。结果 假手术组未见梗死心肌和缺血心肌,IPostC组心肌缺血区面积(46.46±2.13)%和梗死区面积(41.02±2.93)%均明显小于I/R组(53.31±3.87, 52.19±3.44)%,P值均<0.01。假手术组心肌细胞凋亡指数(6.70±2.25)%明显低于I/R组(26.92±1.91)% 、IPostC组(20.54±3.05)%,P值均<0.001。心肌组织Caspase12蛋白表达水平在假手术组(0.11±0.01)明显低于I/R组(0.41±0.06)和IPostC组(0.35±0.06),并且IPostC组低于I/R组,P值均<0.01;心肌组织Grp78蛋白水平在假手术组(0.13±0.03)亦明显低于I/R组(1.04±0.16)和IPostC组(1.17±0.14),并且IPostC组高于I/R组,P值均<0.01。结论 本研究从动物实验证实IPostC能减轻心肌细胞凋亡,而ERS激活参与了大鼠MIRI过程,推测IPostC在大鼠MIRI过程中可能通过调节ERS途径抑制细胞凋亡,改善MIRI。     

潜阳合剂对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞MYH7、ACTA1、BNP mRNA及蛋白表达的影响

目的观察潜阳合剂对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞β-肌球蛋白重链(MYH7)、骨骼肌肌动蛋白α1(ACTA1)、脑钠肽(BNP)mRNA及蛋白表达的影响,探讨潜阳合剂改善心肌纤维化的机制。方法建立AngⅡ诱导的心肌细胞异常增殖的细胞模型,并采用潜阳合剂干预。用CCK-8法测定潜阳合剂对心肌细胞的细胞毒性和拮抗AngⅡ作用的最佳浓度,并分成空白组、AngⅡ组(800 nmol/L)、AngⅡ+潜阳合剂组(稀释4000倍),应用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测MYH7、ACTA1及BNP蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(q-PCR)检测加入潜阳合剂后MYH7、ACTA1、BNP mRNA表达。结果与空白组比较,AngⅡ组MYH7、ACTA1及BNP mRNA及蛋白表达明显上升(P<0.05或P<0.01);与AngⅡ组比较,AngⅡ+潜阳合剂组MYH7、ACTA1、BNP mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论潜阳合剂可以通过降低MYH7、ACTA1、BNP mRNA及蛋白的表达起到改善心肌纤维化的作用。     

地塞米松对大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡及金属硫蛋白表达的影响

目的观察地塞米松预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响并探讨其作用机制。方法32只SD大鼠随机分成地塞米松组(16只)和对照组(16只),分别给予地塞米松(0.8mg/kg)和蒸馏水腹腔注射。预处理24h后,构建体外心脏缺血再灌注动物模型,动态观测缺血前期及再灌注期左心室发展压(LVDP)、左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、冠状动脉流出量(CF);测定冠状动脉流出液肌酸激酶同工酶(CK-MB)的漏出率;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Westernblot法检测金属硫蛋白(MT)、Bcl-2及Bcl-xl蛋白的表达;免疫组织化学法测定半胱天冬酶-3(caspase-3)的水平。结果与对照组比较,地塞米松组大鼠再灌注期LVDP、±dp/dtmax及CF得到改善(P<0.05);CK-MB的漏出率明显降低[(8.69±4.16)U/gvs(18.15±5.59)U/g,P<0.01];心肌细胞凋亡指数(10.18±1.99)%vs(14.66±2.97)%和caspase-3水平明显减少[(18.66±5.15)%vs(27.93±6.23)%,P<0.01],Bcl-xl(4.74±0.66)vs(1.69±0.73)和MT的表达明显增加[(3.09±1.07)vs(1.03±0.02),P<0.05],Bcl-2无明显变化(P>0.05)。结论地塞米松预处理对大鼠缺血再灌注的心肌具有保护作用,上调MT表达及抑制细胞凋亡可能是其机制之一。     

脑心相互作用对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探究下丘脑腹内侧核团腹外侧亚区(VMHvl)在脑心轴中的作用及其对心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 将18只大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=6,心肌缺血假手术),心肌缺血再灌注组(I/R组,n=6,心肌I/R)和化学遗传组(Pharm组,n=6,化学遗传+心肌I/R).利用化学遗传学技术激活Pharm组大鼠V...     

丹参酮ⅡA对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及对JAK2/STAT3通路的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(TA)对心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)的影响及其对Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响。方法建立老年大鼠MIRI模型和心肌细胞缺氧/复氧损伤(HRI)模型,分别从体内和体外水平进行研究。采用超声心动图测定心功能,应用全自动生化检测仪检测大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)含量,全自动生化检测仪检测细胞上清液丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫印迹法(Western Blotting)检测相关蛋白表达水平。应用JAK2/STAT3抑制剂AG490干预心肌细胞,观察各项指标变化。结果TA可改善MIRI大鼠心肌梗死面积、心脏射血分数和缩短分数、血清CK和LDH水平(P<0.05),改善HRI心肌细胞活力和凋亡水平(P<0.05),提高HRI心肌细胞抗氧化能力,改善ROS、MDA和SOD水平(P<0.05)。Western Blotting检测结果显示,TA可改善p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2/Bax比值、cleaved Caspase-3水平(P<0.05),AG490干预可逆转上述指标变化(P<0.05)。结论TA对MIRI具有一定保护作用,可能通过激活JAK2/STAT3通路减少心肌细胞凋亡从而改善MIRI。     

Evidence for a protective role of metallothionein-1 in focal cerebral ischemia

Metallothioneins (MTs) are a family of metal binding proteins that have been proposed to participate in a cellular defense against zinc toxicity and free radicals. In the present study, we investigated whether increased expression of MT in MT-1 isoform-overexpressing transgenic mice (MT-TG) affords protection against mild focal cerebral ischemia and reperfusion. Transient focal ischemia was induced in control (wild type) and MT-TG mice by occluding the right middle cerebral artery for 45 min. Upon reperfusion, cerebral edema slowly developed and peaked at 24 hr as shown by T2-weighted MRI. The volume of affected tissue was on the average 42% smaller in MT-TG mice compared with control mice at 6, 9, 24, and 72 hr and 14 days postreperfusion (P < 0.01). In addition, functional studies showed that 3 weeks after reperfusion MT-TG mice showed a significantly better motor performance compared with control mice (P = 0.011). Although cortical baseline levels of MT-1 mRNA were similar in control and MT-TG mice, there was an increase in MT-1 mRNA levels in the ischemic cortex of MT-TG mice to 7.5 times baseline levels compared with an increase to 2.3 times baseline levels in control mice 24 hr after reperfusion. In addition, MT-TG mice showed an increased MT immunoreactivity in astrocytes, vascular endothelial cells, and neurons 24 hr after reperfusion whereas in control mice MT immunoreactivity was restricted mainly to astrocytes and decreased in the infarcted tissue. These results provide evidence that increased expression of MT-1 protects against focal cerebral ischemia and reperfusion.     

碱性成纤维细胞生长因子对柯萨奇病毒B3性心肌炎小鼠心肌氧化应激的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对柯萨奇病毒B_3(CVB_3)所致病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌氧化应激的影响。方法雄性Balb/c小鼠通过腹腔接种CVB_3复制VMC模型。75只雄性Balb/c小鼠随机分为5组(每组15只):正常对照组、VMC组及bFGF低、中、高剂量干预组(bFGF给药采用肌肉注射,bFGF低、中、高剂量干预组的bFGF剂量分别为1 000.0、2 000.0、4 000.0 IU·kg~(-1),1次/d,共6次;bFGF的首次给药为腹腔接种CVB_3的同时肌肉注射bFGF)。于腹腔接种CVB_3后第7天处死小鼠。用光镜观察心肌组织的病理变化;用分光光度法测定心肌组织的超氧阴离子(O_2~-)、过氧化氢(H_2O_2)、羟自由基(·OH)、丙二醛(MDA)含量;用酶联免疫吸附法测定心肌组织的金属硫蛋白(MT)含量及血清的心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量;用逆转录-实时荧光定量聚合酶链反应方法检测心肌组织的MT-ⅠmRNA、MT-ⅡmRNA表达。结果 VMC组心肌组织的O_2~-、H_2O_2、·OH、MDA含量及病理积分、血清cTnI含量明显高于正常对照组(P0.01),心肌组织MT-ⅠmRNA、MT-ⅡmRNA表达水平及MT含量明显低于正常对照组(P0.01);bFGF低、中、高剂量3个干预组心肌组织的O_2~-、H_2O_2、·OH、MDA含量及病理积分、血清cTnI含量明显低于VMC组(P0.01),心肌组织MT-I mRNA、MT-ⅡmRNA表达水平及MT含量明显高于VMC组(P0.01),且与bFGF的剂量呈量效关系。结论 bFGF抑制CVB_3导致心肌氧化应激而减轻CVB_3对心肌的损伤,与其拮抗CVB_3抑制心肌合成MT而增加心肌清除O_2~-、H_2O_2、·OH的能力有关。     

电针对心肌缺血大鼠心肌泛素连接酶Fbxo32的影响

目的观察电针内关穴对心肌缺血大鼠心脏功能及心肌组织中Fbxo32 mRNA表达的影响。方法SD大鼠随机分成生理盐水对照组、模型组和电针组。24 h内大鼠四肢背部皮下2次注射异丙肾上腺素(ISO),造成心肌缺血模型。电针组造模24 h后电针内关穴20 min,连续5 d。生理盐水对照组和模型组予以同等抓取处理。通过心肌酶肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、病理苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠心脏功能变化;基因芯片检测心肌泛素连接酶E3;实时荧光定量PCR(q-PCR)检测心肌组织Fbxo32 mRNA表达。结果电针组与模型组比较,心肌泛素连接酶E3基因有显著差异表达;模型组心肌酶CK-MB、LDH活性、Fbxo32 mRNA表达量均显著高于生理盐水对照组(P<0.01);电针组心肌酶CK-MB、LDH活性、Fbxo32 mRNA表达量均显著低于模型组(P<0.05)。结论电针可改善心肌缺血大鼠心脏功能,其机制可能与下调心肌组织中Fbxo32表达有关。     

ATP敏感性钾通道:介导心肌缺血再灌注损伤的新靶点

缺血心肌在恢复灌注后,病情反而加重,引起心肌超微结构的不可逆性改变,造成心肌功能、代谢及电生理方面的进一步损伤的现象,称为心肌缺血再灌注损伤(MIRI)。细胞凋亡与大部分心血管疾病的发生发展密切相关,在众多心脏疾病如心力衰竭、心肌梗死、心律失常、心肌病等中都存在细胞凋亡。细胞凋亡在MIRI进展中发挥着重要作用。ATP敏感性钾通道(KATP)参与细胞的多种活动和功能调节,具有扩张血管和心肌保护的作用,日益成为关注的热点,但该通道调控细胞凋亡的详尽机制尚未明确。本文综述了KATP介导MIRI作用及可能机制的近期研究进展。