单克隆抗体Dot-ELISA检测血吸虫病循环抗原的研究.Ⅰ.

将血吸虫肠相关阴极抗原的单克隆抗体3D8A联结过氧化物酶后用于直接法Dot-ELISA检测急性、慢性与晚期血吸虫病人血清中循环抗原,阳性率分别为90.6、83.2及30.7％。正常人血清及非寄生虫感染病人血清均未见阳性反应。EPG>100组血清阳性率及抗原水平高于EPG<100。慢性血吸虫病人经吡喹酮治疗后一年,粪检阴性者大部分血清抗原转为阴性;粪检阳性者血清检查仍为阳性。结果表明,肠相关阴极抗原单克隆抗体3D8A能用于Dot-ELISA检测各期病人血清中循环抗原,并能反映病人感染度与药物治疗效果。     

血吸虫病人治疗前后循环抗原水平的观察

检测血吸虫循环抗原,具有反映病人活动性感染的病原诊断意义,近年来随着单克隆抗体(McAb)的应用,已使该法成为血吸虫病血清学诊断的发展方向.为此,我们应用以日本血吸虫肠相关趋阴极抗原(CCA)的单克隆抗体建立的Dot-ELISA法对低感染度的慢性血吸虫病人进行了治疗前后血清CCA水平的检测,观察病人治疗前后循环抗原水平的变化,了解其反映感染度和疗效的意义.     

检测血吸虫循环抗原的多价单克隆抗体诊断试剂盒的研制和应用

用杂交瘤技术生产抗血吸虫肠相关循环阳极抗原单克隆抗体与血吸虫卵糖蛋白单克隆抗体经混合后标记辣根过氧化物酶，制成Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒，检测轻、中、重不同疫区粪检阳性的血吸虫闰人血清中循环抗原，阳性率分别为８４．３％、８７．２％和９１．５％。     

检测血吸虫循环抗原的多价单克隆抗体诊断试剂盒的研制和应用

用杂交瘤技术生产抗血吸虫肠相关循环阳极抗原（ＣＡＡ）单克隆抗体与血吸虫卵糖蛋白单克隆抗体经混合后标记辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），制成Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒，检测轻、中、重不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清中循环抗原，阳性率分别为８４．３％、８７．２％和９１．５％。累计阳性率为８９．２％（６１９／６９４）。对健康人、肝吸虫、肺吸虫病人血清均未出现阳性反应，显示有较高的敏感性和特异性。ＥＰＧ＞８０的病人循环抗原检出率高干ＥＰＧ／８０的病人。说明循环抗原检出率与感染度有关。血吸虫病人经吡喹酮治疗后半年和１年循环抗原转阴率分别为７１．４％和８８．６％。结果表明．该试剂盒可用于确诊病人和考核疗效。试剂盒质量稳定，操作简便快速，整个试验可在１小时内完成，且不需特殊仪器，适于现场大规模查病应用。     

单克隆抗体JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验用于血吸虫病疗效考核的探讨

以单克隆抗体(MAb)为探针，用ELISA检测血吸虫病人血清中的肠相关趋阴极抗原(CCA)，阳性率可达84．6％。有一定的疗效考核价值。傅奇等采用Sandwich-ELISA方法，检测日本血吸虫病患者血清中Sj70抗原，阳性率可达90％，吡喹酮治疗后6-12个月，94％病例转阴。1996年由卫生部地病司和血吸虫病专家咨询委员会主持的CAg检     

血吸虫病多价单克隆抗体诊断试剂盒的应用

单克隆抗体技术的发展为检测血吸虫循环抗原提供了特异的探针工具,展示了良好的应用前景。我们用杂交瘤技术制备了2株抗日本血吸虫肠相关循环阳极抗原(CAA)的单抗和1株抗虫卵糖蛋白的单抗。经混合后标记HRP,制成Dot-ELISA诊断试剂盒,经检测轻、中、重不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清694份,循环抗原阳性率分别为84.3％(86/102)、87.2％(177/203)和91.5％(365/389)。对照Kato-Katz粪便虫卵计数结果,EPG>80的病人组检     

抗曼氏血吸虫肠相关抗原的单克隆抗体的分析

曼氏血吸虫肠相关抗原在宿主的早期体液免疫反应中起着重要的作用。迄今为止肠相关抗原主要被分为两类:(1)寄生虫的蛋白水解酶,例如组织蛋白酶B;(2)含多糖的趋阳极循环抗原和趋阴极的循环抗原(CAA和CCA)。本文通过实验室中筛选出来的一组识别肠相关抗原的单克隆抗体的分析试图找到除上面两类以外的肠相关抗原。 所筛选出来的71株单克隆抗体(McAb)通过下列方法进行分析:(1)IFA(应     

血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅰ

将血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体用于Dot—ELISA,共检测2175份血清,其中急性血吸虫病血清210份,阳性率为91.9％;慢性血吸虫病血清798份,阳性率为86.7％;正常人血清752份,假阳性率为1.1％;除肺吸虫病外,对其他寄生虫病或非寄生虫感染疾病血清无明显交叉反应。用单盲法Dot—ELISA检测3批血清,结果敏感性为86.5％～95.1％;特异性为96.9％～100.0％。检测流行区居民547份血清,Dot—ELISA阳性反应130份;粪检阳性72例。两者均为阳性者55例,相符率为76.4％。上述结果表明,Dot—ELISA检测循环抗原确实具有较好的敏感性与特异性,适于大规模应用及流行病学调查。     

DOt-ELISA用于急性血吸虫病的临床诊断

血吸虫循环抗原的检测可反映宿主体内活性感染、虫负荷量以及评价药物的治疗效果。严自助等将日本血吸虫肠相关阴极抗原的单克隆抗体用于D0t－ELISA检测各期血吸虫病患者,取得满意效果［‘j。我们用此法对gi例急性血吸虫病患者做了检测,同时做了粪孵、COPT、嗜酸性细胞计数等项检查,结果如下。卫材料和方法1．l材料①单克隆抗体D。t－ELISA试剂盒由中国预防医学科学院寄生虫病研究所提供润急性血吸虫病患者血清来自本院门诊及住院病人;③肝吸虫病人血清由本院血防科提供;④正常人血清由本市兄弟医院提供。1．2操作方法用取样环…     

McAb-RIHA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的效果

本文报告了用抗日本血吸虫肠相关趋阴极抗原单克隆抗体致敏血球建立反向间接血凝试验,对66例急性血吸虫病,123例慢性血吸虫病,57例肝吸虫病,54例钩虫病和82例非疫区健康人血清的检测效果。结果显示,该方法检测急、慢性血吸虫病血清的敏感性分别达到98.5％和81.3％,与肝吸虫病血清交叉反应率为10.5％,与钩虫病血清未见交叉反应,与非疫区健康人血清仅有1.2％的假阳性反应。与平行对照的McAb-Dot-ELISA反应结果相比,两者在检测敏感性和特异性上差别均无显著意义,具有较高符合率,表明McAb-RIHA试验是一种诊断效率和可靠性较高的检测日本血吸虫病血清循环抗原的方法,尤其适宜基层和现场应用。     

McAb—RIHA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的效果

本文报告了用抗日本血吸虫肠相关趋阴极抗原单克隆抗体致敏血球建立反向间接血凝试验，对６６例急性血吸虫病，１２３例慢性血吸虫病，５７例肝吸虫病，５４例钩虫病和８２例非疫区健康人血清的检测效果，结果显示，该方法检测急、慢性血吸虫病轿清的生分别达到９８．５％和８１．３％，与肝吸虫病血清交叉反应率为１０．５％，与钩病血清未交叉反应，与非疫区健康人血清仅有１．２％的假阳性反应。与平行对照的ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ     

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本血吸虫病家兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用McAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA平行对比检测浓缩5倍的重感染家兔尿样61份和正常空兔尿样30份。两法的阳性率分别为81.97％和78.69％;假阳性率分别为13.33％和O％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。     

Dot-ELISA检测血吸虫病人循环抗原的应用

日本血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体,用于斑点酶联免疫试验(Dot-ELISA)检测循环抗原,是近几年应用的新方法,在实验研究方面获得十分满意的结果,并研制出检测循环抗原的试剂盒,使用更为方便.本文应用中国预防医学科学院寄生虫病研究所提供的单克隆抗体检测血吸虫循环抗原Dot-ELISA试剂盒,对其检测血吸虫病的应用价值进行了观察,结果如下.     

血吸虫病患者血清中循环25kD表膜抗原的检测

采用细胞杂交瘤技术获得一株血吸虫成虫抗原的单克隆抗体SM 38-3。其靶抗原为成虫表膜,免疫球蛋白型为1gG 2a,能识别血吸虫分子量为25k D的表膜蛋白抗原表位。该单克隆抗体纯化后标记过氧化物酶,用于Dot-ELISA测定慢性血吸虫病人血清115份,阳性反应103份,阳性率为89.6％;测定急性病人血清89份,阳性反应85份,阳性率为95.5％;测定141份正常人血清,阳性反应2份,假阳性率为1.4％。与血吸虫肠相关抗原的检测比较,结果阳性率与抗原滴度均无明显差别。     

多价单克隆抗体Dot—ELISA对人和家兔血吸虫病治疗前后的追踪观察

采用自制的多价单抗酶结合物和Dot-ELISA法检测血吸虫病人和感染家兔治疗前后血清循环抗原。报告如下: 1 材料和方法 1.1 单克隆抗体的制备感染血吸虫尾蚴或SEA免疫的BALB/c小鼠脾细胞分别与SP2/O骨髓瘤细胞融合,经克隆化后,用IFA筛选出2株分泌抗血吸虫成虫肠相关阳极抗原(CAA)单克隆抗体杂交瘤细胞株3B_(11)E_3、3B_(10)G_8和1株抗血吸虫卵糖蛋白抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株3G_4A_4。将细胞株分别注入小鼠腹腔,诱生的腹水置低温保存。 1.2 多价单克隆抗体酶结合物的制备三种单抗腹水经PEG法提纯后,按相同比例混合成多价单抗,用戊二醛二步法交联辣根过氧化物酶。Dot-ELISA测定酶结合物最适工作浓度为1:1000用于     

血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅱ

制备血吸虫病单克隆抗体诊断试剂盒,将其用于Dot—ELISA,分别检测江苏、安徽流行区急性血吸虫病患者及四川、江西、安徽流行区慢性血吸虫病患者血清中循环抗原。结果不同流行区Dot—ELISA反应的平均“+”值、阳性率和抗原滴度的几何均数不同,循环抗原水平可以反映流行区的疫情。另将Dot—ELISA、ELISA检测四川慢性血吸虫病人治前及治后半年、1年的血清循环抗原及抗体,结果循环抗原在病人治疗后很快下降,治后1年77.8％(35/45)病人的循环抗原转为阴性。循环抗体在病人治疗后也逐渐下降,但速度甚为缓慢。治疗后1年,仅21.7％(10/46)病人转为阴性。上述结果表明,循环抗原能更直接、更真实地反映防治效果。     

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本日本血吸虫病兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ和ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ平行对比检测浓缩５倍的重感染家兔尿样６１份和正常家兔尿样３０份。两法的阳性率分别为８１．９７％和７８．６９％；假阳性率分别为１３．３３％和０％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。     

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本血吸虫病兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ和ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ平行对比检测浓缩５倍的重感染家兔尿样６１份和正常家兔尿样３０份。两法的阳性率分别为８１．９７％和７８．６９％；假阳性率分别为１３．３３％和０％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。     

McAb-JPG3采用R-IHA检测血吸虫循环抗原的实验研究

自80年代后期Feldmeier用单克隆抗体放射免疫法检测血吸虫循环抗原以来, 国内外学者对单克隆抗体用于血吸虫病诊断进行了大量研究,先后报道了双抗体夹心ELISA、斑点ELISA、竞争性ELISA等各种方法.本文试将我们自制的抗日本血吸虫肠相关抗原的单克隆抗体JPG3(McAb-JPG3),采用反向间接血凝(R-IHA)方法检测日本血吸虫病人循环抗原,以期寻找一种简便、经济适用于现场的查病方法.     

日本血吸虫三类循环抗原和循环抗体对感染家兔疗效考核价值的研究

采用三株分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体A6,SJ31／32和SE9作为捕获抗体建立检测三类循环抗原的斑点酶联免疫吸附实验（DOT－ELISA）方法,并利用该方法和普通ELISA分别观察了日本血吸虫感染家兔血清中三类循环抗原和IgG抗体的动态变化情况。结果表明：感染日本血吸虫家免在经砒喹酮治疗之后的第8周,睦相关抗原,可溶性虫卵抗原和肠相关抗原的转阴率分别为80％,70％和20％,而减后第18周全部转阴;IgG抗体一直维持较高水平。因此,MAA和SEA具有改好的疗效考核价值,GAA的疗效考核效果较差,IgG抗体不具有疗效考核作用。