静脉注射用免疫球蛋白与丙型肝炎病毒感染

静脉注射用免疫球蛋白(intravenous immunogloblin,IVIG)是临床上应用较广的血浆制品,可用于预防原发性和继发性免疫低下或缺陷(与抗体产生障碍有关)患者的感染,治疗自身免疫性疾病等.2007年1月,在北京市使用广东佰易药业有限公司生产的IVIG(20060620批号)(pH4)的患者中,有46例在用药前后接受丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测,其中43例抗-HCV阳转.     

丙型肝炎患者血清抗-HCV与HCV-RNA定量检测的临床意义

丙型肝炎病毒（HCV）与肝细胞癌的发生密切相关,2005年5月～2006年6月,我们检测了37例丙型肝炎（丙肝）患者血清HCV—RNA及抗-HCV水平,现报告如下。     

丙型肝炎病毒核酸定量检测的临床意义

目的　研究丙型肝炎患者血清中的丙型肝炎病毒核糖核酸 (HCVRNA)载量与抗丙型肝炎病毒抗体 (抗 HCV)之间的相关性。方法　用荧光定量 (FQ PCR)法检测 2 0 8例疑诊丙型肝炎患者血清中的HCVRNA ,酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗 HCV。结果　 2 0 8例血清样本中HCVRNA阳性率为 81.3 %。HCVRNA平均载量为 4.63× 10 5Copies/ml。结论　FQ PCR法检测HCVRNA是判定HCV感染的直接证据 ,是反映病毒复制与传染性的直接指标 ,有确诊价值与抗病毒治疗疗效评估价值。HCVRNA与抗 HCV具有高度正相关。HCVRNA较抗 HCV检出率有显著性差异     

丙型肝炎

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A与干扰素的应答耐受；HCVNS5A-B片段的表达及在酶活性研究中的应用；稳定表达丙型肝炎病毒复合多表位基因P815细胞克隆的建立；稳定表达丙型肝炎病毒单链丝氨酸蛋白酶的HepG2细胞克隆的建立；蛋白对HCV／HBVDNA疫苗的免疫增强作用；慢性丙型肝炎干扰素治疗后复发患的干扰素再治疗；     

Establishment of a cell-based assay system for hepatitis C virus serine protease and its primary applications

AIM: To establish an efficient, sensitive, cell-based assay system for NS3 serine protease in an effort to study further the property of hepatitis C virus (HCV) and develop new antiviral agents. METHODS: We constructed pCI-neo-NS3/4A-SEAP chimeric plasmid, in which the secreted alkaline phosphatase (SEAP) was fused in-frame to the downstream of NS4A/4B cleavage site. The protease activity of NS3 was reflected by the activity of SEAP in the culture media of transient or stable expression cells. Stably expressing cell lines were obtained by G418 selection. Pefabloc SC, a potent irreversible serine protease inhibitor, was used to treat the stably expressing cell lines to assess the system for screening NS3 inhibitors. To compare the activity of serine proteases from 1b and 1a, two chimeric clones were constructed and introduced into both transient and stable expression systems. RESULTS: The SEAP activity in the culture media could be detected in both transient and stable expression systems, and was apparently decreased after Pefabloc SC treatment. In both transient and stable systems, NS3/4A-SEAP chimeric gene from HCV genotype 1b produced higher SEAP activity in the culture media than that from 1a. CONCLUSION: The cell-based system is efficient and sensitive enough for detection and comparison of NS3 protease activity, and screening of anti-NS3 inhibitors. The functional difference between NS3/4A from 1a and 1b subtypes revealed by this system provides a clue for further investigations.     

丙型肝炎

原卟啉钠抑制丙型肝炎病毒的体外实验研究，干扰素刺激基因ISG20真核表达载体的构建及其抗丙型肝炎病毒复制作用的研究，抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检测分析，聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的病毒学应答，丙型肝炎病毒F反式调节靶基因反式激活基因的筛选和生物信息学分析。     

丙型肝炎病毒5′端非编码区和NS3蛋白酶共调控外分泌性碱性磷酸酶表达细胞模型的建立及意义

目的构建丙型肝炎病毒5′端非编码区(HCV 5′NCR)和NS3丝氨酸蛋白酶共调控外分泌性碱性磷酸酶(SEAP)表达细胞模型,并分析其用于抗HCV药物筛选和评价的可行性.方法用聚合酶链反应技术扩增HCV 5′NCR和NS3/4A片段,定向克隆至表达质粒pSEAP2-Control的SEAP基因上游,构建含HCV 5′NCR-NS3/4A-SEAP嵌合基因的重组表达质粒pNCR-NS3/4A-SEAP.将重组质粒转染至肝细胞株QSG7701,用化学发光法检测SEAP的表达,并观察HCV 5′NCR区对应的反义寡聚核苷酸(ASODN)和丝氨酸蛋白酶抑制剂TPCK对SEAP表达的影响.结果重组质粒pNCR-NS3/4A-SEAP有高强度SEAP表达,5 μmol/L、10 μmol/L ASODN和100μmol/L TPCK对SEAP表达有显著抑制作用(f值分别为4.315、6.985、6.949,P值均＜0.01).结论重组质粒pNCR-NS3/4A-SEAP的SEAP表达受HCV 5′NCR和NS 3蛋白酶共调控,建立的细胞模型可用于以H CV 5′NCR和NS 3蛋白酶为靶位点的药物筛选和评价.     

丙型肝炎抗病毒治疗疗效的影响因素及其机制

丙型肝炎病毒(hepatitis Cvirus,HCV)是引起输血后肝炎及散发性非甲非乙型肝炎的主要病原,目前丙型肝炎抗病毒治疗主要是α干扰素联合利巴韦林,其它抗病毒新药如NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂(BILN2061)、NS5B多聚酶抑制剂(JTK-003、JTK-109、NM-283)、利巴韦林类似物(Levovirin,Viramidine)以及一些免疫调节剂等正处于Ⅰ-Ⅲ期临床试验阶段。干扰素是天然存在的细胞蛋白,其功能包括诱导靶细胞的抗病毒状态及细胞因子的分泌、招募免疫细胞、诱导细胞分化等。α干扰素抗病毒作用主要通过二种不同而又互补的机制,一是诱导靶细胞非病毒特异性…     

丙型肝炎

丙型肝炎病毒不同基因型NS3蛋白的抗原异质性分析——乔伟振等(江苏无锡市第一人民医院中心实验室214001)《中华微生物学和免疫学杂志》2005，25(1)：10-14（探讨不同基因型丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白的抗原特性及其用于抗．HCV检测的意义。方法：分别构建和表达含有HCVl型和6型NS3基因片段的重组质粒和重组蛋白，以ELISA法和Westernblot分析不同基因型重组蛋白与已知抗．HCV阳性血清的抗原反应性。结果：HCV1型和6型NS3重组蛋白氨基酸序列的同源性为83．2％；85份抗-HCV阳性血清以此不同基因型HCVNS3单片段抗原检测，     

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A基因酵母表达载体的构建及表达

丙型肝炎病毒（HCV）是一种单股正链RNA病毒，在HCV丝氨酸蛋白酶和宿主细胞信号肽酶的联合作用下，裂解成为10余种结构和非结构蛋白。其中，HCV NS4A蛋白作为一种非结构蛋白形式，是NS3丝氨酸蛋白酶裂解活性的辅因子，并参与NSSA蛋白磷酸化修饰和免疫应答的调节。为了进一步研究NS4A蛋白在肝细胞内的功能，我们在酵母细胞中表达了NS4A蛋白。     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV RNA检测及其与机体免疫功能的相关性研究

目的观察慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)HCVRNA含量及其对T淋巴细胞亚群的影响,以探讨HCV感染者PBMC中HCVRNA水平及其与机体免疫功能的关系。方法采用荧光定量PCR(FQPCR)技术对128例丙型肝炎患者血清、外周血单个核细胞的HCVRNA含量进行了检测,同时检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。结果PBMC内HCVRNA阳性组与HCVRNA阴性组比较,前者CD3+、CD4+水平降低、CD8+水平增高,CD4+/CD8+比值下降大于后者,差异有显著性(P<0.05)。结论丙型肝炎病毒侵染PBMC后可加重患者的细胞免疫功能紊乱。