小鼠颌下腺组织培养上清液影响红系造血的实验研究

为了研究颌下腺是否合成造血因子以及合成的造血因子的可能种类 ,进一步研究颌下腺对血发生的调控 ,采用造血祖细胞体外培养和流式细胞术检测细胞表面标记物。结果显示 ,小鼠颌下腺组织培养上清液(SGCM)在体外培养中 ,对早期和晚期红系造血祖细胞有促进增殖和分化的作用 ,实验组集落数远远高于阴性对照组 (P<0 .0 5 ) ;晚期红系祖细胞 (CFU- E)培养体系雄性小鼠颌下腺组织培养上清液组集落数明显高于雌性组 (P<0 .0 5 ) ,早期红系祖细胞 (BFU- E)培养体系没有明显差异 (P>0 .0 5 ) ,贫血模型小鼠颌下腺促进 BFU- E和 CFU- E增殖和分化的活性高于正常小鼠 (P<0 .0 5 ) ,IL- 3与 SGCM有协同刺激作用 ,说明小鼠颌下腺确能合成和分泌促进红系造血的细胞因子 ,雄性小鼠颌下腺促进 CFU- E增殖和分化细胞因子的活性高于雌性小鼠。本实验为进一步研究小鼠颌下腺合成造血因子和其与造血调控的关系提供了实验依据。     

不同部位的巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

目的:探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对小鼠早期红系造血祖细胞[用红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[用晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]发生的影响.方法:采用造血祖细胞体外培养技术观察3种不同部位的巨噬细胞培养上清液对BFU-E和CFU-E集落数的影响.结果与结论:3种培养上清液均能促进BFU-E和CFU-E的分化与增殖,而肺泡巨噬细胞培养上清液的上述作用更明显.     

小鼠腹腔巨噬细胞对红系祖细胞增殖的影响

应用造血祖细胞体外培养技术,观察了小鼠腹腔巨噬细胞对早期红系祖细胞(BFU-E)及晚期红系祖细胞(CFU-E)增殖的影响。结果表明,小鼠腹腔贴壁巨噬细胞对CFU-E表现为刺激作用;对BFU-E增殖依培养体系条件不同而表现为刺激和抑制双重作用。巨噬细胞培养上清液也表现相似的作用。提示巨噬细胞具有促红细胞生成素(EPO)和爆式集落促进活性(BPA)样活性。     

鸡血藤对小鼠红细胞增殖的影响

目的：观察鸡血藤对贫血动物的红系细胞的影响。方法：采用腹腔注射盐酸苯肼和用＾６０Ｃｏ照射的方法,形成小鼠骨髓抑制性贫血的模型,研究鸡血藤对小鼠的血象影响。结果和结论;鸡血藤可升高红血球,血红蛋白,红血球容积和红细胞分裂指数,并对早期红系祖细胞和晚期造血红系祖细胞的增殖有明显的刺激作用。     

小鼠颌下腺组织培养上清液影响红系造血的实验研究

为了研究颌下腺是否合成造血因子以及合成的造血因子的可能种类,进一步研究颌下腺对血发生的调控,采用造血祖细胞体外培养和流式细胞术检测细胞表面标记物。结果显示,小鼠颌下腺组织培养上清液（ＳＧＣＭ）在体外培养中,对早期和晚期红系造血祖细胞有促进增殖和分化的作用,实验组集落数远远高于阴性对照组（Ｐ〈０．０５）;晚期红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）培养体系雄性小鼠颌下腺组织培养上清液组集落数明显高于雄性组（Ｐ〈０．０５）,早期红系祖 细胞（ＢＦＵ－Ｅ）培养体系没有明显差异（Ｐ〉０．０５）,贫血模型小鼠颌下腺促进ＢＦＵ－Ｅ和ＣＰＵ－Ｅ增殖和分化的活性高于正常小鼠（Ｐ〈０．０５）,ＩＬ－３与ＳＧＣＭ有协同刺激作用,说明小鼠颌下腺确能合成和分泌促进红系造血的细胞因子,雄性小鼠颌下腺促进ＣＦＵ－Ｅ增殖和分化细胞因子的活性高于雌性小鼠。本     

腹腔巨噬细胞培养上清液对小鼠红系造血调控的研究

本文研究了未刺激和经大肠杆菌内毒素(LPS)刺激的腹腔巨噬细胞培养上清液对小鼠红系造血的调控作用。结果提示:未刺激和经LPS刺激腹腔巨噬细胞培养上清液对早期红系祖细胞(BFU-E)均呈刺激作用,对晚期红系祖细胞(CFU-E)呈双向调控,即低浓度刺激,高浓度抑制。二者比较,LPS刺激腹腔巨噬细胞培养上清液具有更高调控活性。实验还提示,腹腔巨噬细胞培养上清液具有促红细胞生成素(EPO)、BPA(Burst Promoting Activity)样活性     

内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核系造血的调控作用

目的　了解内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核系造血功能的影响 ,为进一步研究血发生及其调控提供理论依据。方法　取剖腹产术后 12小时以内的人脐静脉内皮细胞 ,按 Jaffe法进行培养 ,建立内皮细胞体外培养模型。而后收集原代培养的内皮细胞上清液 ,应用造血祖细胞体外培养方法进行体外粒 -单系祖细胞克隆形成单位 ( CFU - GM)、早期红系祖细胞克隆形成单位 ( BFU - E)、晚期红系祖细胞克隆形成单位 ( CFU - E)和巨核系祖细胞克隆形成单位 ( CFU - MK)半固体培养。结果　在有内皮细胞上清液存在的各培养体系中 ,集落形成良好。而在同样培养条件下 ,在无内皮细胞上清液存在的体系中 ,需加入外源性的 GM- CSF、EPO和 IL - 3才能表现出对粒系、红系和巨核系造血的刺激作用。结论　 1内皮细胞能够通过分泌造血生长因子 ,支持各系祖细胞的增殖与分化 ;2内皮细胞上清液可作为标准的生长因子来源 ,用于体外干细胞的扩增和某些血液病的治疗 ;3内皮细胞和造血干细胞 /祖细胞的相互作用在体内的造血调控中也可能起了重要作用 ;4在内皮细胞上清液中可能含有尚未能证明的其他造血生长因子。这些因子单独或协同地发挥作用 ,支持了各系祖细胞的增殖     

红系造血祖细胞BFU-E、CFU-E体外培养观察

造血祖细胞培养测定是研究造血干细胞增殖情况的重要方法。BFU-E 和CFU-E 是只能向红系分化的红系造血祖细胞的不同亚群,体外培养时需要添加外源性红细胞生成素(EPO)。1971年Stephenson 以血浆凝块为支持物,首次培养成功人的骨髓红系祖细胞。我们采用甲基纤维素为支持物,培养了人的骨髓红系造血祖细胞BFU-E 和CFU-E,并作了定量测定。光学和透射电子显微镜对BFU-E 和CFU-E 的形态进行了观察,此项工作目前国内尚未见报道。     

小鼠骨髓红系祖细胞体外培养细胞分化的形态学观察

用改良Iscove甲基纤维素法体外培养小鼠骨髓红系祖细胞,对形成的红系集落细胞分化进行形态学观察。结果发现:(1)在低浓度红细胞生成素培养条件下,处于较晚发育期的红系祖细胞(CFU-E)可形成数十个细胞组成的集落,但各集落间的细胞数量及发育阶段的同步性有较大差异;(2)在高浓度红细胞生成素培养条件下,处于较早发育期的红系祖细胞(BFU-E)可形成数千个甚至上万个细胞组成的大集落,且集落内细胞的发育阶段具较高的同步性;(3)在CFu-E和BFu-E培养集落中均可观察到自然出现的核固缩及排核现象。以上发现为哺乳类红细胞自然排核学说及红系终末细胞中存在不利于细胞核增殖生长的“胞质因子”工作假说提供了有利的佐证。     

关于正常人及献血员循环红系祖细胞测定的初步观察

应用体外培养方法外加商品红细胞生成素(EPO)或再生障碍性贫血病人血清(AS)对5名正常人和6名5 年以上献血员的外周血红系祖细胞进行检测,证明正常人循环中存在两类红系祖细胞,献血员的后红系祖细胞含量正常,而前红系祖细胞明显低于正常。加 EPO与加AS的培养结果比较,差别无显著性。     

解毒生血法对造血系统促进作用的实验研究

本实验报告了清热解毒中药的复方制剂对小鼠造血系统的促进作用。结果表明，无论是经胃肠道给药还是在体外培养体系中加药都能够刺激造血祖细胞增殖，使小鼠骨髓细胞形成红系造血祖细胞及粒系造血祖细胞的数量都显著增加，增加的情况与用药剂量明显相关，从而证明了清热解毒药可以生血这一新观点。     

血红素铁促进骨髓细胞体外生长和抗贫血作用

目的 观察血红素铁对小鼠的抗贫血作用。方法 分别进行小鼠骨髓红系祖细胞和粒单系祖细胞增殖试验、小鼠溶血性贫血和失血性贫血治疗试验，设立对照组和实验组，小鼠分别灌服相应剂量的血红素１０ｄ、１３ｄ和２０ｄ。结果 １．红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）和粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）的产率明显高于对照组；２．苯肼所致溶血性小鼠的血红蛋白和红细胞明显高于对照组；３．失血性小鼠的血红蛋白和红细胞也显著高于对照组。结论     

人骨髓红系、混合系造血祖细胞无EPO试剂体外培养

红系造血祖细胞(CFU-E、BFU-E)及混合造血祖细胞(CFU-Mix)培养技术对于某些血液病的发病机理的研究、造血细胞分化、增殖及调控方面的研究均有理论上和实践上的意义。红系及混合系祖细胞体外培养的集落形成依赖于红细胞生成素(EPO)的存在,在我     

解毒生血法对造血系统促进作用的实验研究

本实验报告了清热解毒呀约的复方制剂对小鼠造血系统的促进作用。结果表明无论是经胃肠道给药还是在体外培养体系中加药都能够刺激造血祖细胞增殖，使小鼠管髓细胞形成红系造血祖细胞及粒系造血祖细胞的数量都显著增加，增加的情况与用药剂量明显相关，从而证明了清热解毒可以生血这一新观点。     

内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核系造血的调控作用

目的 了解内皮细胞对小鼠粒系、红系和巨核和造血功能的影响。为进一步研究血发生及其调控提供理论依据。方法 取剖腹产术后12小时以内的人脐静脉内皮细胞,按Jaffe法进行培养,建立内皮细胞体外细胞体外培养模型。而后收集原代培养的内皮细胞上清液,应用造血祖细胞体外培养方法进行体外粒-单系祖细胞克隆形成胞克隆形成单位（CFU-MK）单固体培养。结果 在有内皮细胞上清液存在的各培养体系中,集落形成良好,而在同样培养条件下,在无内皮细胞上清液存在的体系中,需加入外源性的GM-CSF、EPO和IL-3才能表现出对粒系、红系和巨核系造血的刺激作用。结论 （1）内皮细胞能够通过分泌造血生长因子,支持各系祖细胞的增殖与分化;（2）内皮细胞上清液可作为标准的生长因子来源,用于体外干细胞的扩增和某些血液病的治疗;（3）内皮细胞和造血干细胞/祖细胞的相互作用在体内的造血调控中也可能起了重要作用;（4）在内皮细胞上清液中可能含有尚未能证明的其他造血生长因子,这些因子单独或协同地发挥作用。支持了各系祖细胞的增殖。     

白血病红系、粒系造血祖细胞集落测定及血清调控作用研究

本文报告了应用我们已建立的红系造血细胞体外培养方法,并配合粒系造血祖细胞体外培养方法,观察了慢性粒细胞白血病(简称慢粒)红系和粒系造血祖细胞集落细胞的体外增殖特性、集落产率、集落细胞染色体核型变化,以及慢粒集落细胞对刺激因子反应特性。此     

三尖杉酯碱对红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法检测三尖杉酯碱(Harringtonine,Ha)促进小鼠骨髓红系祖细胞CFU-E和BFU-E增殖的作用。结果表明,适当剂量的Ha能增强骨髓红系造血机能;如剂量过大反而起抑制作用。双盲实验也表明Ha有促进骨髓CFU-E和BFU-E增殖的作用。     

三尖杉酯碱对红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法检测三尖杉酯碱（Harringtonine,Ha)促进小鼠骨髓红系祖细胞CFU-E和BFU-E增殖的作用。结果表明。适当剂量的Ha能增强骨髓红系造血机能；如剂量过大反而起抑制作用。双盲实验也表明Ha有促进骨髓CFU-E和BFU-E增殖的作用。     

冬虫夏草对小鼠红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法探讨冬虫夏草结晶制剂(CS-Cr)对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU-E和BFU-E)增殖的影响。实验结果表明,CS-Cr明显提高骨髓CFU-E和BFU-E产率、自杀率,并能对抗三尖杉酯碱对造血机能的损害。采用液体培养技术发现CS-Cr促进骨髓成纤维祖细胞(CFU-F)增殖,其产率变化与CFU-E和BFU-E产率变化一致。     

正常人骨髓基质祖细胞体外传代培养的实验研究

研究正常人骨髓基质祖细胞在体外传代培养过程中的功能变化,方法：采用体外液体单层和半固体培养法。结果：Ｆ１传代细胞对骨髓红系祖细胞集落形成单位和粒系祖细胞集落形成单位支持能力最显著,Ｆ２代对有核细胞粘附能力最显著。